鈣離子系統(tǒng)性負誤差原因的探究及排除

摘要：目的 探究鈣離子結(jié)果出現(xiàn)系統(tǒng)性負誤差的原因并加以解決。方法 使用同種校準物、質(zhì)控物及同廠家試劑，A1、A2組為奧林帕斯AU640全自動生化分析儀，B組為貝克曼5800全自動生化分析儀，B1、B2分別為系統(tǒng)性負誤差之前、之后的結(jié)果。結(jié)果 A1組與B1組結(jié)果相差顯著（P<0.05），A2與B2組結(jié)果無顯著性差異（P>0.05）。結(jié)論 鈣離子結(jié)果出現(xiàn)系統(tǒng)性負誤差的原因不是由常見的水質(zhì)問題引起，而是由于雙波長中參比波長設(shè)置的缺失造成，參數(shù)設(shè)置的查對、驗證不能是思維的死角。

關(guān)鍵詞：雙波長 ；參比波長 ；水質(zhì) ；系統(tǒng)性負誤差 ；鈣離子

生化檢測中鈣離子受水質(zhì)影響較大，常常因去離子交換樹脂和反滲膜等原因造成結(jié)果的誤差[1]。因此在發(fā)現(xiàn)鈣離子質(zhì)控結(jié)果及檢測結(jié)果出現(xiàn)系統(tǒng)性負誤差時，我們在排除試劑原因，通過重復定標、更換質(zhì)控物等方法不能找到原因時，首先懷疑由水質(zhì)的干擾和影響引起，因此更換離子交換樹脂和反滲膜，故障卻仍未消除，確定并非由水質(zhì)引起。后在重新檢查參數(shù)設(shè)置時方發(fā)現(xiàn)是由參數(shù)的改動，導致雙波長中參比波長設(shè)置的缺失造成，現(xiàn)與各位檢驗同仁交流。

1 資料與方法

1.1一般資料 我院2016年1月5日發(fā)現(xiàn)貝克曼5800全自動生化分析儀（B組）鈣離子質(zhì)控結(jié)果結(jié)果及檢測結(jié)果偏低，將34份標本在奧林帕斯AU640全自動生化分析儀（A1組）比對，結(jié)果相差較大。2月17日故障原因排除后的41份標本，貝克曼5800結(jié)果B2組與奧林帕斯AU640的A2組比對。

1.2 標本及試劑 將我院住院及門診病人血清，分別在倆臺全自動生化分析儀檢測。均使用北京利德曼的單試劑鈣離子檢測試劑盒，以及廠家配備的校準品及質(zhì)控品。

1.3判斷標準 質(zhì)控品（2.25±0.27）檢測結(jié)果是否良好在控為判斷標準。

1.4統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計學軟件進行處理，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示，計量資料采用配對t檢驗，以P<0.05為差異有顯著性。

2 結(jié)果

2.1 故障排除前：A1組2.21.1±0.19，B1組1.79±0.23，結(jié)果相差顯著（P<0.05），A1組質(zhì)控結(jié)果2.26，良好在控；B1質(zhì)控結(jié)果1.88，失控。

2.2 故障排除后：A1組2.36±0.24，B1組2.31±0.21，結(jié)果無顯著性差異（P>0.05），A1組質(zhì)控結(jié)果2.29，良好在控；B1質(zhì)控結(jié)果2.21，良好在控。

3 討論

生化檢驗結(jié)果的準確性很大程度上依靠質(zhì)控品的監(jiān)測，從溯源性上講，應盡量使用同廠家的基質(zhì)相近的校準品及質(zhì)控品，即AAA模式 [2-4]。而事實上，多數(shù)實驗室采用AAB甚至ABC模式。因多種因素，有些檢驗部門往往不注重質(zhì)控品結(jié)果的即時查看，總在部分項目檢驗結(jié)果明顯出現(xiàn)異常時，才回過來看質(zhì)控結(jié)果，這是絕對不可取的。當首次發(fā)現(xiàn)質(zhì)控結(jié)果出現(xiàn)異常時，因AU640質(zhì)控結(jié)果的良好在控，考慮到鈣離子檢測原理及堿性試劑的特點，我們首先更換同批號試劑，誤差仍然存在，重新定標結(jié)果仍未改善。在同試劑、同校準品及同質(zhì)控品的情況下，AU640結(jié)果的良好在控。倆臺生化儀唯一不同的是并未使用同臺水機，這讓我們懷疑結(jié)果的誤差由水質(zhì)引起。因此更換離子交換樹脂和反滲膜，故障卻仍未消除，找不到故障原因，無奈中再次查看參數(shù)設(shè)置，才發(fā)現(xiàn)參數(shù)已有改動，只設(shè)了分析波長600nm，而參比波長700nm設(shè)置缺失。

雙波長分光光度法能消除干擾或共處組分的干擾以及背景吸收的影響。在單位時間內(nèi)使兩條波長不同的光束λ1和λ2交替照射同一個溶液，由檢測器測出的吸收度是這兩個波長下吸收度的差值△A，△A與被測定物質(zhì)的濃度成正比。雙波長分光光度法的關(guān)鍵是正確選擇兩波長λ1、λ2，要求被測組分D在兩波長處的△A足夠大，而干擾組分G和背景在兩波長應有相同的吸光度（△A=0）。為滿足上述要求，一般是將λ2選在待測組分的最大吸收波長，λ1是選在干擾組分等吸收波長?；诖嗽?，參比波長的設(shè)置缺失造成了待測組分的最大吸收波長的缺失，不能消除干擾組分及背景的影響，造成了結(jié)果的誤差。鈣試劑為紫色的耦合試劑，更需要雙波長分光光度法來消除修正這種背景影響，參比波長的設(shè)置缺失就造成了誤差的存在。

因離子測定受水質(zhì)影響和干擾巨大，但結(jié)果出現(xiàn)問題時，很容易忽略其他因素。盲目的更換制水設(shè)施，不僅增加了科室的支出，加大檢驗成本，而且不能解決誤差的原因。而當檢驗結(jié)果出現(xiàn)異常時，我們通常最不會考慮的就是參數(shù)設(shè)置的因素。但工作人員無意的點擊和疏忽使得這一現(xiàn)象并不可避免，我們也并不是首次遇到。剛開始使用貝克曼5800分析儀時，所做項目LDH結(jié)果總是偏低，廠家周末過來調(diào)試，結(jié)果周一所有LDH全是負值，更換試劑重新定標未果，最后發(fā)現(xiàn)工程師本意將K值9964改為11025誤改成1025，改后理所當然的認為結(jié)果變好，甚至沒做質(zhì)控品監(jiān)控，也未做標本驗證。由于疏忽、經(jīng)驗之談及責任心不夠等問題是檢驗分析中誤差的主要原因[5]。因此參數(shù)設(shè)置問題不應該是我們思維的死角，當生化結(jié)果發(fā)生異常時，參數(shù)的查看、驗證是很有必要的。

參考文獻：

[1]謝祖榮，等.20人份鈣磷鎂系統(tǒng)性負誤差的分析及消除[J].當代醫(yī)學，2012，18（5）：68-69.

[2]張瑞，李金明.如何正確使用臨床檢驗校準物質(zhì)[J].中華檢驗醫(yī)學雜志.2009，32（1）：10-14

[3]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版，南京：東南大學出版社，2006：75-85，552-555

[4]謝祖榮.408次腦脊液氯離子結(jié)果及校準物的探討[J].中國實用醫(yī)藥，2013，8（3）：125-126

[5]熊立凡，劉成玉.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].第4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2007：1-4