桔梗多糖提取純化和生物活性研究進(jìn)展

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摘要：在查閱、收集國(guó)內(nèi)桔梗多糖提取純化工藝、生物活性文獻(xiàn)基礎(chǔ)上，綜述近幾年桔梗多糖的提取純化工藝及生物活性研究進(jìn)展，旨在為進(jìn)一步開展桔梗相關(guān)研究提供參考。

關(guān)鍵詞：桔梗多糖；提??；分離純化；生物活性

中圖分類號(hào)：R932 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-1161（2016）11-0067-02

桔梗為桔梗科植物桔梗（Platycodon grandiflorum A. DC）的干燥根，是一種藥食同源的傳統(tǒng)中藥。研究表明，桔梗多糖是桔梗中重要的生物活性物質(zhì)之一，具有較好的抗氧化、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫和抗腫瘤等作用，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健食品行業(yè)。國(guó)內(nèi)對(duì)桔梗多糖的提取純化和生物活性等進(jìn)行了大量研究，在查閱收集大量文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，綜述近幾年桔梗多糖的提取純化工藝和生物活性研究進(jìn)展，旨在為開展進(jìn)一步研究提供參考。

1 桔梗多糖的提取方法

1.1 傳統(tǒng)提取法

桔梗多糖的提取方法主要有熱水浸提法、水提醇沉提取法、超聲波輔助提取法、微波輔助提取法等。

張晶等分析不同提取溫度對(duì)桔梗多糖提取率及抗氧化性的影響，結(jié)果表明：50 ℃時(shí)桔梗多糖的提取率最高，為35.82%；提取率大小依次為50 ℃﹥40 ℃﹥60 ℃﹥30 ℃﹥20 ℃。韓美艷采用傳統(tǒng)的水煮醇沉法提取桔梗多糖，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上采用4因素3水平正交試驗(yàn)優(yōu)化桔梗多糖的提取工藝，獲得的最佳條件為：提取溫度80 ℃，提取時(shí)間2 h，提取次數(shù)2次，料液比為1︰25，桔梗多糖的提取率42.51%。于侃超等比較桔梗多糖的3種提取方法，結(jié)果表明：超聲波提取法、微波提取法和水提取法的提取率分別為34.16%，31.30%和25.57%；超聲波提取法和微波提取法優(yōu)于傳統(tǒng)的水提取方法。劉暢采用單因素分組試驗(yàn)法對(duì)桔梗多糖提取工藝（熱水法、微波輔助提取法及超聲輔助提取法）進(jìn)行初步研究，結(jié)果表明，微波輔助提取時(shí)間最短且多糖提取率最高，其最佳工藝條件為：微波功率250 W，微波時(shí)間4 min，粒度60目，料液比1︰40。

1.2 現(xiàn)代提取方法

除采用上述提取方法外，很多研究也嘗試采用超聲波輔助熱水浸提法和微波協(xié)同酶解提取法和超臨界二氧化碳提取法等，均取得了較好的提取率。劉暢的試驗(yàn)結(jié)果表明，微波輔助熱水浸提桔梗多糖的最佳工藝條件：料液比1︰20，微波處理時(shí)間2 min，微波功率400 W，熱水浸提溫度80 ℃，粒度80目，熱水浸提時(shí)間240 min，多糖提取率32.85%，高于傳統(tǒng)熱水浸提和微波提取。遲宗磊等在提取過(guò)程中加入纖維素酶酶、無(wú)花果蛋白酶、菠蘿蛋白酶，在微波條件下酶解獲取桔梗多糖。

2 桔梗多糖的分離純化方法

常用的桔梗多糖脫蛋白方法有Sevag法、鹽酸法、三氟三氯乙烷、酶解等；常用的桔梗多糖脫色方法有雙氧水脫色、樹脂脫色、活性炭脫色、聚酰氨脫色等；純化桔梗多糖的方法有分級(jí)沉淀法、季銨鹽沉淀法、離子交換層析法、凝膠柱層析法等，但較為常用的是離子交換層析法和凝膠層析法。

韓美艷采用Sevag法、鹽酸法、三氯乙酸法、酶法、Sevag結(jié)合法等5種方法對(duì)桔梗粗多糖脫蛋白，以蛋白清除率和多糖損失率為指標(biāo)得到的最佳方法為：三氯乙酸脫蛋白、H2O2脫色、Sephadex G-25柱層析法脫鹽及小分子物質(zhì)、DEAE-52分離。華芳等的研究結(jié)果表明：桔梗多糖的最佳分離純化工藝為：Sevag法脫蛋白、2%活性炭脫色、DEAE-52和SephadexG-200分離純化。廖春燕等的研究結(jié)果表明：AB-8大孔吸附樹脂脫蛋白的效果最好，蛋白去除率為90.1%，多糖損失率為17.4%；活性炭脫色的最佳條件為在60 ℃下，調(diào)節(jié)pH為6.0，加入體積分?jǐn)?shù)為0.5%的活性炭脫色20 min，脫色率為80.47%，多糖保留率為83.51%。

3 桔梗多糖的生物活性

3.1 抗氧化活性

張晶等分析不同提取溫度對(duì)桔梗多糖提取率及抗氧化性的影響，結(jié)果表明：總還原能力由強(qiáng)到弱依次為30 ℃>40 ℃>50 ℃>60 ℃>20 ℃；羥自由基清除能力由強(qiáng)到弱依次為50 ℃>30 ℃>40 ℃>20 ℃>60 ℃，以40 ℃為提取溫度較為適宜。楊曉杰等的研究發(fā)現(xiàn)，5個(gè)多糖組分的抗氧化性結(jié)果為：多糖濃度10 mg/mL時(shí)，對(duì)O2-·的清除力大小依次是PPI>PPII>PPIIb>PPIIc>PPIIa；多糖濃度2.5 mg/mL時(shí)，對(duì)·OH的清除力大小依次為PPI>PPII>PPIIc>PPIIa>PPIIb；多糖各組分清除·OH的能力大于對(duì)O2-·的清除能力，且未脫蛋白的多糖PPI對(duì)·OH的清除率高于其它組分。

3.2 調(diào)節(jié)機(jī)體免疫活性

呂夢(mèng)等的研究發(fā)現(xiàn)，桔梗多糖具有較好的刺激淋巴細(xì)胞增殖功能，以及較強(qiáng)的體外免疫活性。賈林等的研究發(fā)現(xiàn)，桔梗多糖能明顯增加環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠的胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)，顯著提高血清中IL-2和TNF-α的含量并呈劑量依賴性；桔梗多糖對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠具有免疫增強(qiáng)調(diào)節(jié)作用。

3.3 抑菌與抗腫瘤活性

楊曉杰等的研究發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)制得的桔梗多糖5個(gè)組分對(duì)細(xì)菌無(wú)抑制作用；其中PPI和PPII對(duì)3種真菌的抑制效果為青霉>黃曲霉>黑根霉，多糖濃度在200 mg/m L時(shí)抑菌圈直徑最大。付佳對(duì)桔梗多糖抑菌譜的測(cè)定活性進(jìn)行研究，桔梗多糖對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的MIC為6.25%，對(duì)沙門氏菌的MIC為12.5%，對(duì)枯草芽孢桿菌、黑曲菌和啤酒酵母的MIC為25%。

陸文總等的研究發(fā)現(xiàn)，桔梗多糖對(duì)HeLa癌細(xì)胞具有顯著的生長(zhǎng)抑制作用。桔梗多糖體內(nèi)有顯著抑制小鼠宮頸癌U14實(shí)體瘤生長(zhǎng)的作用，上調(diào)p19ARF和Bax蛋白表達(dá)量，使誘導(dǎo)突變型p53蛋白表達(dá)顯著下降，其機(jī)制可能是通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡而發(fā)揮其抗腫瘤作用。

3.4 其它生物活性

桔梗多糖除具有以上生物活性外，還具有降血糖、抗哮喘、抗疲勞等活性。

4 結(jié)語(yǔ)

桔梗是藥食兼用植物，具有極高的保健功效及生物活性，而桔梗多糖是桔梗的有效成分之一。開展桔梗多糖的提取純化和生物活性等方面的研究，對(duì)桔梗資源的進(jìn)一步開發(fā)利用具有重要意義。

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Abstract： This article summarized the research progress on the extraction and purification technology and biological activity of polysaccharide in recent years on the basis of looking up and collecting a large number of domestic documents of the extraction and purfication technology and biological activity of polysaccharide. The purpose is to provide reference for carrying out further correlation study of polysaccharide.

Key words： polysaccharide； extraction； separation and purification； biological activity