枸杞多糖提取純化和生物活性研究進展

劉娜

摘要：在查閱、收集國內(nèi)枸杞多糖提取純化工藝、生物活性文獻的基礎上，綜述近幾年枸杞多糖的提取純化工藝、生物活性研究進展，旨在為進一步開展枸杞相關研究提供參考。

關鍵詞：枸杞多糖；提取純化；生物活性；工藝

中圖分類號：R932 文獻標識碼：A 文章編號：1674-1161（2016）11-0063-02

枸杞（Lycium barbarum）是茄科屬的多分支灌木植物，為藥食同源的傳統(tǒng)中藥。枸杞多糖作為枸杞子的主要活性成分之一，具有增強免疫力、抗癌、抗衰老、保護視神經(jīng)、防止細胞凋亡等作用。國內(nèi)對枸杞多糖提取純化和生物活性進行了大量研究，在查閱收集大量文獻的基礎上，綜述近幾年枸杞多糖的提取純化工藝和生物活性等研究進展，旨在為進一步研究提供參考。

1 枸杞多糖的提取方法

1.1 傳統(tǒng)提取法

枸杞多糖的傳統(tǒng)提取方法主要有熱水浸提法、水提醇沉提取法、超聲波輔助提取法、微波輔助提取法和酶解輔助提取法等。

李丹丹等采用熱水提取法提取枸杞多糖，確定最佳工藝條件為：料液比1︰27，提取溫度81 ℃，提取時間2.5 h，得率可達5.03%。汪琢等優(yōu)化的最佳水提醇沉提取枸杞多糖工藝為：料液比1︰35，溫度90 ℃，pH 11，浸提3 h，提取2次，合并提取液，加3倍體積95%乙醇沉淀6 h時，提取率為18.56%。

劉騰子等的研究結果表明：影響枸杞多糖提取因素的主次順序為超聲時間>超聲溫度>料液比；最佳工藝為超聲溫度70℃、超聲時間50 min、料液比1︰30，多糖提取率5.02%。

王月囡等優(yōu)化的微波提取最佳條件為：微波功率480 W，微波時間20 min，料液比1：30，提取2次，微波法提取多糖提取率提高近40%。王杉杉等以枸杞多糖得率為評價指標，采用（脂肪酶/蛋白酶/纖維素酶/果膠酶=1︰1︰1︰1）通過正交試驗確定最佳提取條件為：料液比1︰40，提取溫度50 ℃，超聲時間50 min，復合酶添加量0.5%，枸杞多糖平均得率58.910%。

1.2 現(xiàn)代提取方法

除以上常用的提取枸杞多糖方法外，還相繼出現(xiàn)了其它提取技術，例如超聲強化亞臨界水、高壓脈沖電場、微波-纖維素酶、微波復合酶、超聲微波協(xié)同萃取、超聲波輔助復合酶等輔助提取技術，均獲得了較好的提取率。

趙超的研究結果顯示：提取溫度、提取時間、提取壓力與液料比對亞臨界水提取法（SWE）和超聲強化亞臨界水提取法（USWE）提取枸杞多糖的提取得率都有影響，且在相同的條件下，USWE提取法的得率明顯高于SWE法。USWE法的最佳工藝條件為：提取溫度100 ℃，提取時間53 min，壓力5 MPa，超聲功率160 W，液料比26︰1 mL/g，枸杞多糖的提取得率5.73%；4種提取方法在類似條件下提取枸杞多糖的結果為：USWE>SWE>UE>HWE。

蔡光華等采用高壓脈沖電場破壁法，對影響枸杞多糖提取率（Y）的pH值（X1）、電場強度（X2）、脈沖頻率（X3）、溫度（X4）、液料比（X5）5個主要因素進行單因素和多因素分析，用SAS 9.1統(tǒng)計軟件對星點設計方案進行完全二次響應曲面的回歸模型擬合與模型嶺嵴分析，結果表明：X1=8.98，X2=20.49 kV/c，X3=

10 520 Hz，X4=61.76 ℃，X5=9.43︰1（mL/g）時，枸杞多糖提取率最高，為13.26%。

王啟為等通過試驗獲得的最佳工藝條件為：微波功率450 W、微波處理時間6 min、物料80目、液料比25︰1（mL/g）、纖維素酶用量1.5%、酶解溫度50 ℃、酶解時間60 min、酶解體系pH值4.8，枸杞多糖得率為13.2%。

2 枸杞多糖的純化方法

枸杞多糖里面往往含大量的糖蛋白雜質(zhì)、色素、溶劑殘留雜質(zhì)，故需要對其進行除蛋白和脫色，然后再進行初純化處理。

常用的脫蛋白方法有Sevage法、十六烷基三甲基溴化銨法、三氯乙酸法、胰蛋白酶法等。目前很多研究都采用酶法脫蛋白，此法脫蛋白耗時短，操作簡單，利于保持多糖的活性，無毒性物質(zhì)殘留。如張一芳等采用酶法去除枸杞多糖的蛋白，以pH值、溫度、酶解時間、酶用量為影響因素，以脫蛋白率為考察指標，優(yōu)化枸杞多糖酶法脫蛋白工藝條件為pH 6，溫度45 ℃，酶解時間0.5 h，酶用量3.5%；該法與Sevag法比較，多糖損失率最低為10.53%，脫蛋白率為78.56%，優(yōu)于Sevag法。

常用的脫色方法主要有雙氧水脫色、離子交換脫色、吸附脫色（纖維素、活性炭等）。大量的研究表明，DATE-纖維素是目前最常用的脫色方法。如許程劍等采用單因素試驗，確定大孔樹脂型號為AB-8；溫度是影響多糖溶液脫色的主要因素，其次為料液比和脫色時間；最佳脫色條件為溫度60 ℃，料液比1：7，脫色時間3 h。

常用的純化方法主要有化學試劑法、色譜層析法、透析和膜分離法等。如茍春林、田麗梅等采用DEAE纖維素分離和葡聚糖凝膠柱色譜；江磊等采用D101大孔樹脂和DEAE-52陰離子交換柱對枸杞葉粗多糖進行純化，純化后的精多糖中多糖含量為92.5%。李丹丹采用超濾膜法將枸杞多糖的水解物依據(jù)分子量大小進行分離，得到四個分子量段的水解物，然后再采用DEAE-52陰離子柱對Mw<3KDa部分水解物進行純化。

3 生物活性

枸杞多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、抗衰老、降血壓、降血脂、降血糖、護肝、抗疲勞、耐缺氧及保護生精細胞等生物活性。

3.1 免疫調(diào)節(jié)

胡妮的研究結果表明，LBP及LBP+CXCL10可通過提升荷瘤小鼠的脾臟、胸腺等免疫器官指數(shù)，提高機體整體的免疫功能；LBP及LBP+CXCL10可以促進Th1型細胞因子分泌及恢復Th1/Th2平衡，提高DC細胞數(shù)量及其功能，干預荷瘤機體免疫抑制狀態(tài)，提高機體抗瘤免疫功能。

單鐵英等研究枸杞多糖對C6腦膠質(zhì)瘤細胞株誘導的腦膠質(zhì)瘤大鼠免疫功能影響，發(fā)現(xiàn)枸杞多糖可使腦膠質(zhì)瘤大鼠免疫功能降低，而LBP可增強實驗性腦膠質(zhì)瘤大鼠免疫功能，從而達到抗腫瘤的目的。

3.2 抗腫瘤活性

彭天元等研究發(fā)現(xiàn)乙酰化修飾可顯著提高LBP的抗氧化及抗腫瘤活性。LBPa可顯著抑制H22腫瘤細胞增殖，提高免疫器官指數(shù)，提高血清IL-2及TNF-α含量；除IL-2含量外，對其他指標的影響均有劑量依賴性；LBPa抗腫瘤活性明顯優(yōu)于LBP。

3.3 抗氧化活性

于寧等的研究發(fā)現(xiàn)，枸杞多糖可以通過調(diào)控PI3K/Akt/eNOS通路改善去卵巢大鼠心臟變化防治絕經(jīng)后的心血管病變。彭天元等的研究結果表明，LBPa可以顯著提高正常小鼠肝組織CAT活力及T-AOC，降低小鼠血清及肝臟MDA含量，其抗氧化效果優(yōu)于維生素C及LBP，LBPa及LBP抗氧化活性均與劑量具有正相關性。

4 結語

枸杞是傳統(tǒng)的藥食兩用天然植物，具有極高的營養(yǎng)價值和保健作用，而枸杞多糖是枸杞中的有效成分。因此，開展枸杞多糖的提取純化及生物活性研究，對枸杞資源的進一步開發(fā)利用具有重要意義。

參考文獻

[1] 趙超.超聲強化亞臨界水提取枸杞多糖的研究[J].廣州：華南理工大學，2014.

[2] 李丹丹.枸杞多糖的提取及其水解物的研究[D].山東：齊魯工業(yè)大學，2014.

[3] 王杉杉，馬韻升，姚剛.超聲波輔助復合酶法提取枸杞多糖工藝研究[J].中國釀造，2015，34（7）：134-137.

[4] 單鐵英，潘秀蘭，董靜.枸杞多糖對實驗性腦膠質(zhì)瘤大鼠免疫功能的影響[J].廣東醫(yī)學，2015，36（23）：3 601-3 603.

[5] 于寧，楊芳，冷雪.枸杞多糖通過調(diào)控PI3K/Akt/eNOS信號通路對去卵巢大鼠心肌產(chǎn)生抗氧化作用[J].中國病理生理雜志，2016，32（8）：1370-1375.

Abstract： This article summarized the research progress on the extraction and purification technology and biological activity of lycium barbarum polysaccharide in recent years on the basis of looking up and collecting a large number of domestic documents of the extraction， purification technology and biological activity of lycium barbarum polysaccharide. The purpose is to provide reference for carrying out further correlation study of lycium barbarum.

Key words： lycium barbarum polysaccharide； extraction and purification； biological activity； technology