大棗多糖提取純化工藝及其生物活性研究進(jìn)展

劉澤華

摘要：大棗多糖是大棗中含量最多、生物活性物質(zhì)較明顯的成分。在收集、查閱國(guó)內(nèi)大棗多糖提取純化工藝及其生物活性研究文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，綜述近幾年大棗多糖的提取純化工藝及其生物活性研究進(jìn)展，旨在為進(jìn)一步開展大棗相關(guān)研究提供參考。

關(guān)鍵詞：大棗多糖；提取純化；生物活性

中圖分類號(hào)：R932 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-1161（2016）10-0062-02

大棗為鼠李科植物棗（Zizyphus Jujuba Mill.）的干燥成熟果實(shí)，其性甘、溫，歸脾、胃經(jīng)，為藥食同源植物，具有補(bǔ)中益氣、養(yǎng)血安神和緩和藥性的功效。研究表明，大棗多糖是大棗中含量最多、生物活性物質(zhì)較明顯的成分，具有免疫調(diào)節(jié)、抗衰老、抗癌等多種生理活性，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健食品。國(guó)內(nèi)對(duì)大棗多糖的提取純化、生物活性等進(jìn)行了大量的研究，本課題在收集、查閱大量相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，綜述近幾年大棗多糖提取純化及其生物活性等方面的研究情況，旨在為相關(guān)研究提供參考。

1 提取方法

大棗多糖的提取方法主要有熱水浸提法、超聲波輔助提取法、微波輔助提取法和酶解輔助提取法等。

1） 熱水浸提大棗多糖是目前最為常用的傳統(tǒng)方法之一，此法成本低、不破壞生物活性、方便實(shí)用且安全性高，但耗時(shí)、提取率低。魏然通過(guò)研究?jī)?yōu)化得到熱水法提取圓鈴大棗多糖條件為：液料比20∶1、提取溫度90 ℃、時(shí)間5.3 h，得率為5.27%±0.03%；各因素對(duì)多糖得率的影響順序?yàn)椋禾崛囟取⑻崛r(shí)間、液料比、提取溫度。

2） 超聲波輔助提取是在水浸提的同時(shí)加超聲波輔助，此法可以縮短提取時(shí)間、提高提取率，同時(shí)避免高溫對(duì)有效成分的影響。魏然優(yōu)化得到超聲波法提取圓鈴大棗多糖條件為：液料比12∶1、超聲功率360 W、提取溫度55 ℃、超聲時(shí)間40 min，多糖得率為4.93%±0.03%；各因素對(duì)多糖得率的影響順序?yàn)椋撼暪β省⒊晻r(shí)間、提取溫度、液料比。

3） 微波輔助提取是在水浸提的同時(shí)加入微波，此法具有高效、快速、節(jié)能的優(yōu)點(diǎn)。韓秋菊等人采用微波浸提法提取大棗多糖，得到最佳工藝條件為：料液比（g/mL）1∶50、微波功率420 W、微波處理時(shí)間8 min，大棗多糖提取率為7.99%。

4） 酶解輔助提取目前使用的酶有纖維素酶、淀粉酶、中性蛋白復(fù)合酶法、木瓜蛋白酶、果膠酶、復(fù)合酶和酸性蛋白酶，均有較好的效果。陳晉芳等人采用果膠酶提取大棗多糖，最佳工藝條件為：pH 4.5、溫度40 ℃、時(shí)間3 h、加酶量0.2%，多糖得率為3.84%。

2 純化方法

要得到較純的多糖，需對(duì)粗多糖進(jìn)行脫色和脫蛋白處理，然后再進(jìn)行純化。目前，大棗多糖脫蛋白的方法有Sevag法、鹽酸法、三氟三氯乙烷、酶解和殼聚糖絮凝等；脫色方法有雙氧水脫色、樹脂脫色、活性炭脫色、聚酰氨脫色、“填料型”冷電弧脫色，其中大孔樹脂和聚酰氨層析較為常用；純化方法有分級(jí)沉淀法、季銨鹽沉淀法、離子交換層析法、凝膠柱層析法等，其中離子交換層析法和凝膠層析法較為常用。姚文華比較了Sevag法、三氯乙酸法、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和國(guó)產(chǎn)中性蛋白酶對(duì)大棗多糖的脫蛋白試驗(yàn)，量終確定木瓜蛋白酶的脫蛋白效果最佳，其工藝條件為溫度60 ℃、pH 5.0、濃度10 g/L木瓜蛋白酶酶液與多糖液的體積比為0.4∶1.0、酶解時(shí)間90 min，蛋白除去率為91.8%。魯小靜、劉海霞、馮艷波等人采用大孔樹脂對(duì)大棗多糖提取液脫色，均取得了較好的效果，提取液中色素的吸附率分別為91.74%，91.20%，86.59%。阿力木江·穆提拉將聚酰胺與其他脫色劑比較，結(jié)果表明，聚酰胺脫色效果比較好，駿棗粗多糖的回收率比較高。魏然等人將圓鈴大棗粗多糖經(jīng)DEAE-52纖維素柱和Sephadex G-200柱分離純化后得到4種多糖。

3 生物活性

3.1 抗氧化活性

羅莉研究發(fā)現(xiàn)，在抗氧化活性方面，超聲輔助提取較熱水提取的多糖高；同時(shí)，在一定的溫度儲(chǔ)存下，大棗多糖的抗氧化活性隨著時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)降低趨勢(shì)；羧甲基化和硫酸化修飾對(duì)羥基自由基和ABTS自由基的清除能力有增強(qiáng)作用；羧甲基化使大棗多糖對(duì)DPPH自由基清除能力有減弱作用，但硫酸化大棗多糖對(duì)DPPH自由基清除能力卻有增強(qiáng)作用；羧甲基化和硫酸化修飾對(duì)大棗多糖的還原力有減弱作用。

3.2 機(jī)體免疫調(diào)節(jié)活性

魏然的研究結(jié)果表明，制得的大棗多糖具有促進(jìn)小鼠淋巴細(xì)胞增殖的作用，其中4種多糖均對(duì)小鼠的脾淋巴細(xì)胞有促進(jìn)增殖的作用，并呈現(xiàn)量效關(guān)系，但各多糖之間的促增殖活性各不相同；ConA與YP1a，YP2兩者之間具有協(xié)同作用；YP1a，YP2促淋巴細(xì)胞增殖作用強(qiáng)于YP3，YP4a。黃海英等人研究大棗多糖對(duì)氣血雙虛模型小鼠免疫功能的影響，結(jié)果表明，與空白對(duì)照組相比，大棗多糖能夠顯著提高腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力，促進(jìn)淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)換，以及增加血細(xì)胞、血小板等的數(shù)量，同時(shí)增加紅細(xì)胞ATP酶活性。

3.3 抗腫瘤活性

劉曉連等人研究發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)得到的6種長(zhǎng)棗多糖中的LJU-3的濃度為400 mg/L時(shí)，對(duì)人肝癌細(xì)胞株Bel7402、人胃癌細(xì)胞株BGC823、人鼻咽癌細(xì)胞株KB有一定的增殖抑制率，其IC50值分別為198，178，167 mg/L。張仙土等人研究發(fā)現(xiàn)，大棗多糖對(duì)S-180瘤細(xì)胞具有一定的殺傷作用，濃度越高，抑瘤率越高，腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)周期時(shí)間越短，裸鼠生存時(shí)間越長(zhǎng)，病理組織觀察可見明顯改變，為多糖治療骨髓瘤提供了理論依據(jù)。

3.4 抗凝血活性

王娜等人研究發(fā)現(xiàn)：大棗粗多糖能夠顯著延長(zhǎng)人體血漿的活化部分凝血活酶時(shí)間，而對(duì)凝血酶原時(shí)間和凝血酶時(shí)間無(wú)明顯影響；不同品種大棗的抗凝血活性存在顯著差異，其中靈寶大棗的抗凝血活性相對(duì)較好；不同提取方法和大棗干制方式下大棗粗多糖體外抗凝血活性也有很大差異，其中熱風(fēng)、真空冷凍干制大棗及堿提粗多糖能較好地保持粗多糖的抗凝血活性。

3.5 其他生物活性

大棗多糖還具有肝損傷保護(hù)、神經(jīng)保護(hù)、影響動(dòng)物生長(zhǎng)性能和免疫功能、煙草保潤(rùn)等活性。

4 結(jié)語(yǔ)

大棗是藥食兼用植物，具有極高的藥用功效及保健功能，而大棗多糖是大棗中的有效成分，所以開展大棗多糖的提取純化及其生物活性等方面的研究，對(duì)于大棗資源的進(jìn)一步開發(fā)利用具有重要的意義。

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