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    Stathmin蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義

    2017-04-21 03:05:44艾冬梅張?jiān)萍t俞宏偉劉成軍王小玲河北省衡水市第二人民醫(yī)院腫瘤科河北衡水05000河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科河北石家莊0500河北省衡水市第二人民醫(yī)院病理科河北衡水05000河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院病理科河北石家莊0500
    關(guān)鍵詞:衡水市腺瘤切片

    艾冬梅,劉 浩,張?jiān)萍t,俞宏偉,張 建,劉成軍,王小玲(.河北省衡水市第二人民醫(yī)院腫瘤科,河北 衡水 05000;.河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科,河北 石家莊 0500;.河北省衡水市第二人民醫(yī)院病理科,河北 衡水05000;.河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院病理科,河北 石家莊 0500)

    ·論 著·

    Stathmin蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)及臨床意義

    艾冬梅1,劉 浩2,張?jiān)萍t3,俞宏偉1,張 建1,劉成軍1,王小玲4
    (1.河北省衡水市第二人民醫(yī)院腫瘤科,河北 衡水 053000;2.河北醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科,河北 石家莊 050031;3.河北省衡水市第二人民醫(yī)院病理科,河北 衡水053000;4.河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院病理科,河北 石家莊 050011)

    目的探討Stathmin蛋白在乳腺癌中的表達(dá)及其與腫瘤病理特征的關(guān)系。方法采用免疫組織化學(xué)鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連接法檢測61例乳腺癌組織中Stathmin蛋白的表達(dá),并選取10例癌旁正常組織、10例乳腺纖維腺瘤作為對照。結(jié)果Stathmin蛋白在乳腺癌組織、癌旁組織、纖維腺瘤之間的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),乳腺癌組織表達(dá)高于纖維腺瘤(P<0.05)。Stathmin蛋白表達(dá)在不同組織學(xué)分級中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。乳腺組織中Statmin蛋白表達(dá)與Ki-67蛋白表達(dá)具有相關(guān)性(P<0.05),與雌激素受體、孕激素受體表達(dá)無相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論Stathmin蛋白過表達(dá)在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中起了重要作用,可能成為預(yù)測乳腺癌新的生物學(xué)及個(gè)體化治療的敏感指標(biāo)。

    乳腺腫瘤;癌蛋白18;免疫組織化學(xué)

    乳腺癌是目前女性最常見的惡性腫瘤,其發(fā)病率在我國呈逐年增高,且發(fā)病年齡有年輕化的趨勢,嚴(yán)重威脅著廣大婦女的健康和生命[1]。Stathmin是近來研究較多的微管不穩(wěn)定蛋白,它是一種細(xì)胞胞質(zhì)蛋白,與細(xì)胞微管的形成有關(guān)[2]。在人類多種惡性腫瘤中,都存在Stathmin蛋白高表達(dá)[3]。本研究采用免疫組織化學(xué)法檢測Stathmin蛋白在乳腺癌中的表達(dá),探討其與乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系,旨在為判斷乳腺癌的生物學(xué)行為及預(yù)后提供參考指標(biāo)。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 全部標(biāo)本來自于2011年1—12月河北省衡水市第二人民醫(yī)院病理科乳腺癌石蠟標(biāo)本61例,男性1例,女性60例,年齡37~66歲,平均(57.80±4.65)歲。所有患者均為浸潤性導(dǎo)管癌。癌旁正常組織(距癌組織旁2 cm處)10例,乳腺纖維腺瘤10例。乳腺癌患者術(shù)前未接受過化療或者放療。對乳腺癌病理分級的判斷主要是根據(jù)Notttingham聯(lián)合組織學(xué)分級,按照美國癌癥聯(lián)合會腫瘤TNM分期原則分期。標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林固定,常規(guī)石蠟包埋,切片全部經(jīng)高年資病理醫(yī)師復(fù)驗(yàn)。

    1.2 主要試劑 兔抗人Stathmin 多克隆抗體(濃縮型)、鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連接法免疫組織化學(xué)試劑盒均購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法 組織切片的制備:①將蠟塊4 μm連續(xù)切片,黏附于防脫載玻片上;②低溫烤干,切片保存于4 ℃冰箱中備用。染色:①將4 ℃冰箱中保存的切片取出,置于58~60 ℃烤箱中烤片3 h;②切片脫蠟至水95%乙醇5 min,二甲苯脫蠟10 min 2次,無水乙醇Ⅰ、Ⅱ各5 min,95%乙醇5 min,80%乙醇5 min,70%乙醇5 min,蒸餾水搖洗,PBS洗5 min 1次;③3%H2O2去離子水室溫下孵育10 min,以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶的活性,PBS浸泡5 min;④滴加封閉用正常山羊血清工作液,室溫下孵育10 min,封閉非特異性抗原位點(diǎn);⑤傾去多余血清,切片上滴加50 μL-抗,放置于濕盒中,4 ℃冰箱中過夜;⑥恢復(fù)至室溫后,PBS浸泡5 min;⑦滴加生物素化二抗工作液(IgG/Bio),37 ℃孵育30 min,PBS浸泡5 min;⑧DAB顯色,顯微鏡下觀察3~10 min,充分水洗終止;⑨蘇木精復(fù)染30 s,鹽酸乙醇分化3 s,氨水反藍(lán)15 s,脫水、透明,中性樹膠封片;⑩顯微鏡下觀察,拍照。

    1.4 結(jié)果判斷 Stathmin蛋白免疫組織化學(xué)的信號位于細(xì)胞漿,呈棕色或咖啡色,著色為陽性信號,陰性對照片無著色。所有切片由2名資深病理醫(yī)師仔細(xì)閱片,以保證結(jié)果的可重復(fù)性。

    1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn);等級資料比較采用Kruskal-Wallis秩和檢驗(yàn);相關(guān)性采用Pearson直線相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié) 果

    2.1 Stathmin蛋白在不同乳腺病變中的表達(dá) Stathmin蛋白在乳腺癌組織、癌旁組織、纖維腺瘤之間的表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),乳腺癌組織表達(dá)高于纖維腺瘤(P<0.05),見表1。

    2.2 Stathmin蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 Stathmin蛋白表達(dá)在不同組織學(xué)分級中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);在不同年齡、不同病灶直徑、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移,不同TNM分期、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEFG)和原癌基因人類表皮生長因子受體2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER-2)陽性與否差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

    表1 Stathmin蛋白在不同乳腺病變中的表達(dá)

    *P<0.05與乳腺癌組織比較(秩和檢驗(yàn))

    2.3 Statmin蛋白的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析結(jié)果顯示,乳腺組織中的Statmin蛋白表達(dá)與Ki-67蛋白表達(dá)呈正相關(guān)(P<0.05),而與雌激素受體(estrogen receptor,ER)和孕激素受體(progesteronereceptor,PR)表達(dá)不相關(guān)(P>0.05),見表3。

    表2 Statmin蛋白在乳腺癌組織中的表達(dá)與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系

    表3 乳腺組織中Stathmin與Ki-67、ER、PR的相關(guān)性

    3 討 論

    乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤,在我國乳腺癌的發(fā)病率明顯年輕化,45~50歲發(fā)病率最高,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國外的60歲發(fā)病的高峰期。乳腺癌的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,且發(fā)生發(fā)展機(jī)制尚未完全闡明[4]。因此,臨床上需要進(jìn)一步了解惡性腫瘤細(xì)胞的特性,掌握腫瘤細(xì)胞發(fā)生發(fā)展及浸潤轉(zhuǎn)移之間的規(guī)律,深入研究腫瘤細(xì)胞各種基因蛋白的特性及相互關(guān)系[5]。

    近年來人們開始重點(diǎn)關(guān)注微絲微管在腫瘤細(xì)胞增殖轉(zhuǎn)移中的作用,而調(diào)控微管不穩(wěn)定蛋白的主要代表則是Stathmin、驅(qū)動蛋白Kin I家族。人Stathmin蛋白也稱原癌基因蛋白p18,含有149個(gè)氨基酸,相對分子質(zhì)量為19 000,是一種高度保守的脊椎動脈細(xì)胞胞質(zhì)磷蛋白[4]。Stathmin作為一種調(diào)控微管運(yùn)動的細(xì)胞質(zhì)磷蛋白,在人類多種惡性腫瘤高表達(dá)[5]。

    對于Stahmin在乳腺癌組織中的表達(dá),國內(nèi)外相關(guān)報(bào)道并不多,而且各研究報(bào)告結(jié)果并不完全一致,但一致認(rèn)可的是Stathmin在乳腺癌組織中高表達(dá)[6-7],與疾病的進(jìn)展有關(guān)[8-10]。Baquero等[11]研究Stathmin高表達(dá)10年總生存為53.1%,而低表達(dá)者為67%(P=0.03)。提示高表達(dá)者預(yù)后差。何宇等[12]報(bào)道Stahtmin在三陰乳腺癌的表達(dá)為98.9%(82/83)。Wang等[13]也提出Stathmin在轉(zhuǎn)移性乳腺癌中具有極為重要的研究價(jià)值。提示Stathmin蛋白可能在乳腺癌的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮作用,可能與乳腺癌預(yù)后有關(guān)。

    本研究結(jié)果顯示,10例乳腺纖維腺瘤Stathmin陽性表達(dá)是0%(0/10),而癌旁組織中弱陽性表達(dá)為20.0%(2/10),乳腺癌組織陽性率為62.3%(38/61),三者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。表明在乳腺組織中,良性病變或者癌旁組織Stathmin表達(dá)水平低下,而惡性細(xì)胞隨著惡性程度增加呈明顯高表達(dá),提示Stathmin的表達(dá)在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用,Stathmin基因及其編碼的蛋白產(chǎn)物是重要的腫瘤標(biāo)志物,可能成為臨床檢驗(yàn)乳腺癌的分子靶點(diǎn)。通過分析Stathmin與乳腺癌臨床病理指標(biāo)特征之間的關(guān)系,結(jié)果顯示Stathmin蛋白表達(dá)在不同組織學(xué)分級中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);在不同年齡、不同病灶直徑、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移、不同TNM分期、VEFG和HER-2陽性與否差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);與病理分級及Ki-67蛋白具有相關(guān)性(P<0.05),病理分級級別越高,Stathmin陽性率越高。上述結(jié)果與部分文獻(xiàn)報(bào)道并不一致,可能與組織來源、入組病例數(shù)量、檢測方法不完全一致等有關(guān),需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本數(shù)量,規(guī)范檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。

    總之,Stathmin蛋白與乳腺癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān),還與乳腺癌的分化程度及增殖有關(guān)。提示Stathmin是乳腺癌發(fā)生的重要因子,可能成為乳腺癌早期診斷、判斷預(yù)后及基因治療的新靶點(diǎn)。

    [1] 王芳,付占昭.缺氧誘導(dǎo)因子1α和P糖蛋白在乳腺癌中的表達(dá)及意義[J].臨床薈萃,2014,29(7):744-746.

    [2] 方來福,顧昕,叢玲華.胃癌組織中Stathmin蛋白的表達(dá)意義及與幽門螺桿菌感染的關(guān)系[J].中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥,2015,22(5):64-65.

    [3] 孔守芳,戴淑真,孫選,等.Stathmin-1、P27及ki-67在宮頸上皮內(nèi)瘤變的表達(dá)與殘留、復(fù)發(fā)相關(guān)性的研究[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志,2015,10(1):19-21.

    [4] 王秀麗,段惠潔.β-tubulinⅢ和Stathmin聯(lián)合檢測在評價(jià)多西他賽治療晚期肺鱗癌療效中的應(yīng)用[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2014,18(24):33-36.

    [5] 荀建軍,李艷芳.BMP-2和p21WAF1的表達(dá)與乳腺癌臨床病理特征及其發(fā)生骨轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2012,33(1):31-33.

    [6] 何宇,羅靜,周蕾蕾.雄激素受體、Stathmin與三陰性乳腺癌臨床病理因素相關(guān)性的初步探討[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2013,20(8):846-850.

    [7] 湯紅平,黃犁,黃新翼.Stathmin基因在乳腺癌組織中的表達(dá)及意義[J].蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2013,38(7):821-823.

    [8] 劉建兵,李曼.鼻咽癌組織中Stathmin的表達(dá)及其臨床意義[J].國外醫(yī)學(xué):醫(yī)學(xué)地理分冊,2014,35(4):312-315.

    [9] 龔舒,陶忠樺,劉曉燕.Stathmin蛋白促進(jìn)人SMMC-7721肝癌細(xì)胞增殖侵襲能力[J].重慶醫(yī)學(xué),2014,43(10):1168-1170.

    [10] Werner HM,Trovik J,Halle MK. Stathmin protein level,a potential predictive marker for taxane treatment response in endometrial cancer[J]. PLoS One,2014,9(2):e90141.

    [11] Baquero MT,Hanna JA,Neumeister V,et al. Stathmin expression and its relationship to microtubule-associated protein Tau and outcome in breast cancer [J]. Cancer,2012,118(19):4660-4669.

    [12] 何宇,羅靜,周蕾,等.雄激素受體、Stathmin與三陰性乳腺癌臨床病理因素相關(guān)性的初步探討[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2013,20(8):846-850.

    [13] Wang X,Qian H,Zhang S. Discovery of significant pathways in breast cancer metastasis via module extraction and comparison[J]. IET Syst Biol,2014,8(2):47-55.

    (本文編輯:劉斯靜)

    2016-03-09;

    2016-08-29

    艾冬梅(1973-),女,河北衡水人,河北省衡水市第二人民醫(yī)院副主任醫(yī)師,從事惡性腫瘤內(nèi)科治療研究。

    R737.9

    B

    1007-3205(2017)04-0479-03

    10.3969/j.issn.1007-3205.2017.04.027

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