東北地區(qū)圈養(yǎng)狍脫毛癥的病因分析

李長(zhǎng)生 ， 宋百軍 ， 竇鳳鳴 ， 何玉華

(吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院 ， 吉林吉林132109)

東北地區(qū)圈養(yǎng)狍脫毛癥的病因分析

李長(zhǎng)生 ， 宋百軍 ， 竇鳳鳴 ， 何玉華

(吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院 ， 吉林吉林132109)

為探索我國(guó)東北地區(qū)人工養(yǎng)狍脫毛癥的發(fā)病原因，對(duì)發(fā)病地區(qū)養(yǎng)狍場(chǎng)出現(xiàn)脫毛癥進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，對(duì)發(fā)病場(chǎng)(戶)周邊土壤、飼草和狍體內(nèi)部分礦物質(zhì)元素和一些生化指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)與分析，結(jié)果表明：經(jīng)實(shí)驗(yàn)室病原體檢驗(yàn)，病狍患處未分離出寄生蟲和皮膚真菌；調(diào)查地區(qū)屬于礦物質(zhì)元素Se、Cu、Zn和S含量水平較低自然環(huán)境，Mg、Mn元素含量水平屬正常范圍。本病與礦物質(zhì)元素代謝紊亂相關(guān)，其土壤、飼料和狍體內(nèi)的Se、Cu、Zn、S元素含量水平低是導(dǎo)致狍發(fā)生脫毛癥主要原因。

東北地區(qū) ； 圈養(yǎng)狍 ； 脫毛癥 ； 礦物質(zhì)元素 ； 病因分析

狍(Capreoluscapreolus)是一種經(jīng)過馴化人工飼養(yǎng)的鹿科動(dòng)物，其產(chǎn)品有廣泛市場(chǎng)前景，同時(shí)也具有觀賞價(jià)值，但狍人工馴化時(shí)間短，仍具有很強(qiáng)的野性，易在外界因素刺激發(fā)生應(yīng)激反應(yīng)，甚至死亡[1]。近年來，我國(guó)養(yǎng)狍發(fā)展很快，已初步形成新興產(chǎn)業(yè)[2]。隨著養(yǎng)狍產(chǎn)業(yè)發(fā)展，在我國(guó)東北地區(qū)一些養(yǎng)狍場(chǎng)陸續(xù)出現(xiàn)狍脫毛癥，發(fā)病范圍及數(shù)量逐步擴(kuò)大，一般發(fā)病率為15%～33%，2012年遼源某狍場(chǎng)發(fā)病率達(dá)65%，嚴(yán)重威脅到狍種群的健康和數(shù)量的發(fā)展。人工圈養(yǎng)條件狍脫毛癥在每年10月末開始出現(xiàn)，第二年春季3～4月份最為明顯，嚴(yán)重者出現(xiàn)個(gè)體死亡，在青綠飼料豐富季節(jié)可自愈一些個(gè)體。為查找狍脫毛癥發(fā)病原因，進(jìn)行以下的研究探索。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 吉林省遼源市某狍場(chǎng)患狍9只，敦化市某狍場(chǎng)患狍5只，內(nèi)蒙古呼倫貝爾盟某養(yǎng)狍場(chǎng)患狍7只，遼寧省遼陽市某養(yǎng)狍戶患狍3只。

1.1.2 試驗(yàn)采樣 在確定上述用于試驗(yàn)動(dòng)物同時(shí)，獲取各自實(shí)驗(yàn)基地采集患狍的血樣、毛樣和飼養(yǎng)場(chǎng)及其周邊區(qū)域的土樣、飼草。

1.1.3 主要儀器設(shè)備 TAS-986原子吸收分光光度計(jì)、TU-1901紫外可見分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)； RF-5301熒光分光光度計(jì)(日本島津)； SCR20BC低溫高速離心機(jī)(日本日立)； Sartorius精密電子分析天平(德國(guó))。

1.1.4 主要藥品與試劑 2-3-二氨基萘)(上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司)；環(huán)己烷、TP試劑盒、ALB試劑盒、AKP試劑盒、T-SOD試劑盒、Cu-Zn-SOD試劑盒、GSH-Px試劑盒(上海鼓臣生物技術(shù)有限公司)。

1.2 方法

1.2.1 患狍皮表寄生蟲病原體檢查 用鹿眠寶按0.02～0.025 mL/kg體重標(biāo)準(zhǔn)用吹管針注射麻醉患狍采樣，用蔣忠學(xué)等皮屑溶解法進(jìn)行檢查[3-4]。

1.2.2 患狍皮膚真菌的檢查 用鹿眠寶按0.02～0.025 mL/kg體重標(biāo)準(zhǔn)用吹管針注射麻醉患狍，用手術(shù)刀刮取皮膚的患部與健康交界處的鱗屑，用小包裝袋密封后標(biāo)號(hào)，放置樣品采集瓶，到實(shí)驗(yàn)室統(tǒng)一檢驗(yàn)。將采集每個(gè)樣本包裝于載玻片上，在載玻片上加10% NaOH 1滴，之后用蓋玻片覆蓋，用低倍和高倍鏡下觀察，重復(fù)3次[5]。

1.2.3 樣品的采集與處理 (1)土壤的采集處理：按劉彩琴介紹的方法進(jìn)行處理[6]；(2)飼料、牧草的采集處理：采集養(yǎng)狍場(chǎng)日常食用的玉米、豆粕、秸稈及豆莢各3份；牧草采集用人工模擬采樣法，采集后挑凈其中物，再用自來水、去離子水各沖洗3次，置于烘箱70 ℃干燥，粉碎備用[7-9]；(3)血樣、毛樣的采集處理：早晨空腹按0.02～0.025 mL/kg體重，用鹿眠寶和吹管針注射麻醉狍，頸靜脈采血，經(jīng)3 500 r/min 離心10 min，分離血清，-20 ℃保存?zhèn)溆肹7-8]；取頸側(cè)毛樣10 g，去除毛雜物，用中性洗潔劑浸泡10 min，再用蒸餾水、去離子水各沖洗3次，將潔凈的毛樣置濾紙筒中，60 ℃～65 ℃下烘干備用。

1.2.4 樣品S的測(cè)定方法 (1)土壤有效S的測(cè)定：采用磷酸鹽-醋酸浸提-硫酸鋇比濁法[9]；(2)牧草、飼料、血清、被毛中S的測(cè)定：采用許貴善等比濁法[8-11]。

1.2.5 血清主要生化指標(biāo)測(cè)定方法 TP含量測(cè)定-雙縮脲法， ALB含量測(cè)定-溴甲酚綠比色法， T-SOD活性測(cè)定-黃嘌呤氧化酶法， Cu-Zn-SOD活性測(cè)定-嘌呤氧化酶法， GSH-Px活性測(cè)定-DTNB顯色法。血清生化指標(biāo)測(cè)定嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作進(jìn)行[12-6]。

1.2.6 樣品中Mg、Cu、Zn、Mn含量的測(cè)定 原子吸收分光光度法[13-16]。

1.2.7 樣品中Se的測(cè)定 按照GB 5009.93—2010進(jìn)行[15-16]。

1.2.8 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析 數(shù)據(jù)用SPSS17.0單因素方差分析，差異顯著時(shí)用LSD法多重比較,結(jié)果用LSD表示。

2 結(jié)果

2.1 寄生蟲和真菌病原體檢查結(jié)果 狍患處寄生蟲病原體的檢查未見寄生蟲蟲體及蟲卵；對(duì)皮膚真菌檢查未見有無分枝的菌絲和真菌孢子。

2.2 土壤、飼草料、血清和被毛中硫元素含量 土壤、血清、被毛和飼草料中硫元素的含量測(cè)定結(jié)果見表1，參照“長(zhǎng)白山野狍馴化與飼養(yǎng)配套技術(shù)研究”項(xiàng)目組[17]，健康狍血清中S含量水平為1.59～1.62 mmol/L，牧草、玉米、豆莢、苜蓿及秸稈中S含量均顯著低于上述參考值。

表1 土壤、血清、被毛和飼草料中硫元素含量(DM 基礎(chǔ))

2.3 土壤、飼草料、血清和被毛中Mg、Cu、Zn、Mn、Se含量 土壤、飼草料、血清和被毛中硒、銅、鋅、錳、鎂元素含量結(jié)果見表2。參照“長(zhǎng)白山野狍馴化與飼養(yǎng)配套技術(shù)研究”[17]，健康狍血清中Mg 為0.91～0.93 mmol/L，Mn為 0.14～0.17 mmol/L，Zn為 50.14～53.84 μmol/L，Cu為10.98～11.09 μmol/L，Se為1.03～1.12 μmol/L。采樣地區(qū)土壤、牧草、玉米、苜蓿、豆莢及血清和被毛中Mg含量屬于正常范圍，Zn含量屬于正常范圍，Cu含量也略低狀態(tài)、 Se處于缺乏水平。

表2 土壤、飼草料、血清和被毛中硒、銅、鋅、錳、鎂元素元素含量(DM 基礎(chǔ))

2.4 血清中某些生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果 血清中某些生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果見表3。患狍體內(nèi) GSH-Px 活性處于臨界值，血清TP和ALB均處于臨界值下， T-SOD、Cu、Zn、SOD 含量均低于參考值。

表3 脫毛狍血清中某些生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

3 討論

依據(jù)土壤有效硫含量小于12 μg/g視為缺S，采樣土壤有效S含量為11.26 μg/g，屬于缺S土壤。健康狍血清S含量為1.59～1.62 mmol/L，患狍血清硫含量均顯著低于參考值。

參照“長(zhǎng)白山野狍馴化與飼養(yǎng)配套技術(shù)研究”[17]，采樣地區(qū)土壤、牧草、玉米、苜蓿、豆莢及血清和被毛中Mg含量屬于正常范圍，Zn含量屬于正常范圍，Cu含量也略低狀態(tài)、Se含量處于缺乏狀態(tài)。

患狍血清TP和ALB均處于臨界值下狀態(tài)與患狍日糧蛋白質(zhì)量有關(guān)，狍在圈養(yǎng)條件的飼料主要為秸稈或青貯，精料為玉米和少量豆粕，飼料品種單一?；坚篌w內(nèi) T-SOD、Cu、Zn-SOD 含量均低于參考值，間接反應(yīng)患狍缺乏Cu、Zn。Se構(gòu)成GSH-Px活性中心，GSH-Px 的活性與血硒水平呈正相關(guān)，患狍體內(nèi) GSH-Px 活性處于臨界值，表明患狍的抗氧化能力較健康狍低。

綜上，我國(guó)東北部分地區(qū)土壤和飼草處于Se、Cu、S、Zn缺乏的自然環(huán)境，患狍血清中Se、Cu、S、Zn低于正常值，Mg、Mn正常，其中血清中Se、Cu含量低于正常值；被毛Se、Cu處于臨界值，Mg、Mn在正常范圍?；坚?TP、 ALB、 GSH-Px 的含量均在參考值的下限，而 T-SOD、 Cu、Zn-SOD 活性均低于參考值。試驗(yàn)結(jié)果初步表明，土壤、飼草料、患狍體內(nèi)礦物質(zhì)元素Se、Cu、S、Zn缺乏是東北部分地區(qū)人工養(yǎng)狍發(fā)生脫毛癥的主要原因。

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Etiological Analysis Of Rod Deer Alopecia In Northeast Region Of China

LI Chang-sheng , SONG Bai-jun , DOU Feng-ming， HE Yu-hua

(College of animal science and technology, Jilin Agriculture Science And Technology College, Jilin 132109,China)

In order to find the main reason of roe deer alopecia in northeast region of china， the epidemiology of roe deer alopecia was investigated. Also, the level of partial mineral elements in soil, forage grass and feed (from the epidemic area of the disease) and biochemical indexes(from roe deer in northeast region of china) were analyzed．The results showed that: the mineral elements including Se，Cu，Zn，and S were relatively low in the environment where the disease were distributed in. However, the Mg and Mn were in a normal level． Thus, we conclude that the occurrence of roe deer alopecia has a high relevance to metabolic disorder of mineral elements and the main reason might be the lack of Se ,Cu，Zn and S．

Roe deer; alopecia; mineral elements; etiology analysis

2016-09-23

吉林省教育廳十二·五重點(diǎn)科研項(xiàng)目[吉教科合字(2012)第307號(hào)]；吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院種子基金項(xiàng)目[吉農(nóng)院合字(2014)第Z10號(hào)]

李長(zhǎng)生(1964-)，男，副教授，碩士，研究方向?yàn)樘胤N經(jīng)濟(jì)動(dòng)物養(yǎng)殖，E-mail csli-64@163.com

S864.7

A

0529-6005(2017)03-0018-03