豬胸膜肺炎放線桿菌感染和血清型分布

朱秀高，李艷青

(1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，北京 100000；2.武漢回盛生物科技股份有限公司，湖北武漢 430042；3.濰坊科技學(xué)院生物研發(fā)中心，山東壽光 262700)

豬胸膜肺炎放線桿菌感染和血清型分布

朱秀高1,2，李艷青3

(1.中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，北京 100000；2.武漢回盛生物科技股份有限公司，湖北武漢 430042；3.濰坊科技學(xué)院生物研發(fā)中心，山東壽光 262700)

豬場豬只感染胸膜肺炎放線桿菌(APP)后根據(jù)病情不同可造成程度不等的損失，對某一區(qū)域內(nèi)感染率和流行血清型的調(diào)查是進(jìn)行針對性防控的基礎(chǔ)工作。目前國內(nèi)外系統(tǒng)性進(jìn)行上述研究的報(bào)道較少，國外主要通過屠宰場和豬場，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和臨床診斷發(fā)現(xiàn)在養(yǎng)豬密集區(qū)均存在感染，且種豬群和育肥豬的陽性率最高；國內(nèi)應(yīng)用間接血凝試驗(yàn)對豬場進(jìn)行的調(diào)查發(fā)現(xiàn)不同省份的陽性率差異較大，從豬群來看種豬群的感染率最高，其次為肥豬和保育豬。血清型分布方面，國外以2型最多，國內(nèi)出現(xiàn)較多的是7型、3型和1型。對國內(nèi)外關(guān)于APP感染率和血清型的文獻(xiàn)資料進(jìn)行綜合分析發(fā)現(xiàn)，APP感染率普遍較高，流行優(yōu)勢血清型會隨著時(shí)間的推移發(fā)生變化，新的血清型會不斷出現(xiàn)。

傳染性胸膜肺炎放線桿菌；感染率；血清型

胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacilluspleuropneumoniae, APP)是引起豬傳染性胸膜肺炎(Porcine contagious pleuropneumonia,PCP)的病原菌，是一種革蘭陰性桿菌，屬于巴氏桿菌科嗜血桿菌屬。APP是一種機(jī)會性致病菌，在豬群中感染率較高，但發(fā)病率受環(huán)境、豬體健康程度及其他病原共同感染的影響較大。根據(jù)培養(yǎng)過程中對輔酶Ⅰ(nicotinamide adenine dinucleotide，NAD)的依賴性差異，APP可以分為生物Ⅰ型(依賴NAD)和生物Ⅱ型(不依賴NAD)，根據(jù)菌體莢膜多糖等的抗原性差異，APP可分為16個(gè)血清型，血清型1～12、15和16[1]屬于生物Ⅰ型，13和14屬于生物Ⅱ型，不同血清型菌株的致病性強(qiáng)弱主要與分泌的毒素有關(guān)， APP可分泌4種毒素，分別是ApxⅠ、ApxⅡ、ApxⅢ和ApxⅣ，每種毒素的致病性不同，除ApxⅣ是所有血清型都分泌的毒素外，每種血清型菌株分泌的其他3種毒素種類有差異。

近年來，PCP在豬場的發(fā)病率呈上升趨勢，特別是急性突然死亡給發(fā)病豬場造成極大經(jīng)濟(jì)損失。對豬場APP的潛伏感染狀況進(jìn)行調(diào)查，可以及早采取針對性預(yù)防措施。由于血清型間抗原性等存在差異，不同血清型間的交叉保護(hù)力低。不同國家及地區(qū)流行的優(yōu)勢血清型不同，同一地區(qū)不同時(shí)間內(nèi)的優(yōu)勢血清型也會發(fā)生變化，將區(qū)域一定時(shí)間內(nèi)APP血清型的流行分布情況調(diào)查清楚，對APP的有效防控非常重要。本文對近年來國內(nèi)外有關(guān)APP血清學(xué)感染情況和血清型分布的研究結(jié)果進(jìn)行綜述。

1 豬群感染情況

在APP處于潛伏感染或亞臨床感染時(shí)，對豬群的感染狀態(tài)進(jìn)行檢測，可以根據(jù)檢測結(jié)果采取及時(shí)有效的預(yù)防性措施，以降低發(fā)病帶來的經(jīng)濟(jì)損失。

1.1 國外研究進(jìn)展

國外針對APP的感染情況檢測主要從屠宰場和豬場兩個(gè)方面進(jìn)行，其中屠宰場以肺臟和血清為檢測對象，通過病變程度和血清陽性率來判斷豬群感染狀態(tài)，采用的方法為肉眼觀察法和ELISA；豬場主要以血清為檢測對象，采用ELISA，也有少量報(bào)道以鼻腔拭子為檢測對象，采用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)。從2008年—2014年有資料報(bào)道的一些國家豬群感染率數(shù)據(jù)看，俄羅斯被調(diào)查豬群的整體感染率為93.3%，其中公豬、母豬和肥豬的感染率最高[2]；加拿大的被調(diào)查保育豬和育肥豬的感染率分別為78%和70%[3]；韓國被調(diào)查豬場的感染率為49.3%[4]；塞爾維亞被調(diào)查豬群的感染率為12.58%[5]。上述文章中作者指出數(shù)據(jù)主要來源于這些國家的養(yǎng)豬密集區(qū)域，因此具有代表性。其中針對俄羅斯的調(diào)查發(fā)現(xiàn)不同階段豬群感染率有差異，種豬群和肥豬的陽性率最高，這一點(diǎn)與國內(nèi)學(xué)者的研究基本一致。

1.2 國內(nèi)研究進(jìn)展

國內(nèi)對APP感染狀況的調(diào)查主要針對豬場，以IHA檢測血清為主，使用ELISA和PCR的報(bào)道很少。根據(jù)2001年—2016年間15個(gè)地區(qū)報(bào)道的APP感染率數(shù)據(jù)，甘肅、海南的感染率超過80%，西藏、廣東50%以上，河南、貴州、湖南、江西30%以上，其他地區(qū)7%～20%左右[6-12]。由于這些結(jié)果大部分都是采用以不同血清型菌體為抗原的IHA測定，因此在使用APP疫苗的地區(qū)無法準(zhǔn)確區(qū)分野毒感染抗體，會影響結(jié)果準(zhǔn)確性。目前ELISA在臨床檢測中的應(yīng)用非常普遍，且Apx Ⅳ ELISA能夠區(qū)分野毒感染抗體，進(jìn)行豬群感染狀態(tài)的調(diào)查應(yīng)以Apx Ⅳ ELISA為主。從目前結(jié)果來看，國內(nèi)豬群中種豬的感染率最高，其次為肥豬與保育豬，種豬群高感染率一方面可以通過母源抗體給仔豬以保護(hù)，另一方面也會通過排毒造成豬場的持續(xù)感染，需要對這種情況加以重視。

2 血清型分布情況

由于血清型間的低交叉保護(hù)力，對某一地區(qū)某一階段內(nèi)APP流行血清型的調(diào)查是進(jìn)行APP防控特別是有效免疫的基礎(chǔ)性工作。

2.1 國外研究進(jìn)展

APP血清型在國外的調(diào)查主要是通過PCR進(jìn)行鑒定。根據(jù)調(diào)查，2型、1型、7型、5型和8型在國外不同國家的出現(xiàn)頻率較高，排名第一位在不同國家發(fā)生率最高的是2型[4,13-19]。此外，同一地區(qū)不同時(shí)間段內(nèi)血清型變化的趨勢也應(yīng)重視。Kamimura S等[13]對日本從2006年—2011年分離到的臨床APP進(jìn)行血清型鑒定后發(fā)現(xiàn)與1989年—2005年的分離株相比，血清型15的分離率已經(jīng)上升至8.5%。Lee K E等[14]對韓國2012—年2013年臨床分離株的血清型鑒定顯示，與1995年—1998年2型為主、2000年2型和5型為主相比，所分離到到的54株APP以1型和5型為主。這種變化提示對一個(gè)地區(qū)APP血清型應(yīng)定期進(jìn)行追蹤監(jiān)測，以及時(shí)根據(jù)監(jiān)測結(jié)果更新疫苗等針對性應(yīng)對措施，提高方案的有效性。

2.2 國內(nèi)研究進(jìn)展

凝集試驗(yàn)是目前國內(nèi)學(xué)者研究鑒定APP主要采用的方法。逯忠新等[20]進(jìn)行的調(diào)查較為全面，在其2001年公布的對7省份1996年—2000年的調(diào)查數(shù)據(jù)中，1、3、7型是出現(xiàn)最多的血清型。結(jié)合刁有祥等[21]和葉潤全等[22]的研究可以發(fā)現(xiàn)，國內(nèi)豬場中7、1、3型出現(xiàn)的頻率最高，其他血清型出現(xiàn)的較少，個(gè)別地區(qū)也有自己的優(yōu)勢血清型流行。2015年夏新萌等[23]用瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)對6個(gè)省份1 187份血清樣品檢測后發(fā)現(xiàn)，感染率最高為血清7型(14.81%)，1型、5型、10型、11型和13型的感染率均在10%以上。上述數(shù)據(jù)說明雖然近年來7型依然為國內(nèi)的流行優(yōu)勢血清型，但其他血清型的感染率在發(fā)生變化，如5、10、11、15型在增加，3型在下降，這一優(yōu)勢血清型變化趨勢與國外一致。

3 小結(jié)

在APP的控制中應(yīng)認(rèn)識到在某一地區(qū)內(nèi)感染率和血清型的分布是一個(gè)動態(tài)變化過程，因此應(yīng)定期對這兩個(gè)指標(biāo)進(jìn)行監(jiān)測，以采取針對性措施。這兩個(gè)指標(biāo)的變化也是控制措施有效性評價(jià)的重要標(biāo)準(zhǔn)。

隨著規(guī)模化養(yǎng)豬程度的不斷加大，雖然人們在管理方面采取了嚴(yán)格的生物安全等措施，但新的疾病還是在不斷出現(xiàn)，老的疾病依舊在不斷進(jìn)化。PCP的感染率在不同國家和地區(qū)內(nèi)維持在高位水平，世界范圍內(nèi)新的血清型持續(xù)被發(fā)現(xiàn)、某一區(qū)域內(nèi)流行優(yōu)勢血清型也在發(fā)生著變化。這些疾病流行的特點(diǎn)提示，對PCP的控制不能停留在某一階段停滯不前，要及時(shí)系統(tǒng)對PCP的流行情況進(jìn)行準(zhǔn)確的調(diào)查，以及時(shí)采取有效的應(yīng)對措施。

[1] Srkzi R,Makrai L,Fodor L.Identification of a proposed new serovar ofActinobacilluspleuropneumoniae:Serovar 16 [J].Acta Veterinaria Hungarica,2015,63(4):444-450.

[2] Shabunin S V,Stepanov A V,Efanova L I,et al.Serological profile ofActinobacilluspleuropneumoniaein pigs [J].Rus Agricult Sci,2012,38(5-6):406-408.

[3] Macinnes J I,Gottschalk M,Lone A G,et al.Prevalence ofActinobacilluspleuropneumoniae,Actinobacillussuis,Haemophilusparasuis,Pasteurellamultocida,andStreptococcussuisin representative Ontario swine herds [J].Canad J Vet Res,2008,72(3):242-248.

[4] Kim K E,Ku K N,Ko J H,et al.Isolation,identification and serological investigation ofActinobacilluspleuropneumoniaein slaughtered pigs [J].Kor J Vet Serv,2013,36(3):181-186.

[5] ?utic J,Vojinovic D,Radosavljevic V.Seroprevalence ofActinobacilluspleuropneumoniaein swine originated from commercial farms in Serbia [J].Biotechnol Anim Husb,2014,30(2):295-302.

[6] Shi X C,Zhang N Z,Zhou D H,et al.First report ofActinobacilluspleuropneumoniaeprevalence in Tibetan pigs in Tibet,China [J].J Anim Vet Adv,2012,11(22):4167-4170.

[7] 張 俊,張 飛,文心田,等.四川地區(qū)豬傳染性胸膜肺炎流行病學(xué)調(diào)查 [J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2015,37(8):608-610.

[8] 逯忠新,賀 英,高鵬程,等.青海省部分地區(qū)豬傳染性胸膜肺炎的流行病學(xué)調(diào)查研究 [J].湖北農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,50(1):112-114.

[9] 徐振娜,洪偉彬,殷三鴻,等.廣東東莞地區(qū)豬傳染性胸膜肺炎的血清學(xué)調(diào)查 [J].廣東畜牧獸醫(yī)科技,2014,39(4):49-50.

[10] 桑旦歐珠,德 吉,達(dá) 珍.墨竹工卡和工布江達(dá)兩縣川藏公路沿線藏豬傳染性胸膜肺炎流行病學(xué)調(diào)查 [J].養(yǎng)豬,2016(1):117-118.

[11] 施 雷,李 郁,魏建忠,等.安徽地區(qū)豬傳染性胸膜肺炎流行病學(xué)調(diào)查 [J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2015,37(12):922-925.

[12] 張 艷,劉海隆,林哲敏,等.海南省規(guī)模豬場豬傳染性胸膜肺炎的血清學(xué)調(diào)查 [J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2016,37(1):129-132.

[13] Kamimura S,Sameshima T,Ito H.Serovar and antimicrobial resistance profiles ofActinobacilluspleuropneumoniaeisolated in Japan from 2006 to 2011 [J].Jpn Agr Res Quart,2016,50(1):73-77.

[14] Lee K E,Choi H W,Kim H H,et al.Prevalence and characterization ofActinobacilluspleuropneumoniaeisolated from Korean pigs [J].J Bacteriol Virol,2015,45(1):19-25.

[15] Rossi C C,Vicente A M,Guimares W V,et al.Face to face withActinobacilluspleuropneumoniae:landscape of the distribution of clinical isolates in southeastern Brazil [J].Afr J Microbiol Res,2013(7):2916-2924.

[16] Hiroyait O,Katsuragi K,Akama S,et al.Isolation of atypical genotypeActinobacilluspleuropneumoniaeserotype 6 in Japan [J].J Vet Med Sci,2014,76(4):601.

[17] Gottschalk M,Lacouture S.Canada:distribution ofStreptococcussuis(from 2012 to 2014) andActinobacilluspleuropneumoniae(from 2011 to 2014) serotypes isolated from diseased pigs [J].Can Vet J,2015,56(10):1093-1094.

[18] Kim B,Hur J,Lee J Y,et al.Molecular serotyping and antimicrobial resistance profiles ofActinobacilluspleuropneumoniaeisolated from pigs in South Korea [J].Vet Q,2016,36(3):137-144.

[19] Li Y,Bosse J T,Williamson S M,et al.Actinobacilluspleuropneumoniaeserovar 8 predominates in England and Wales [J].Vet Rec,2016,179(11):276-277.

[20] 逯忠新,柳紀(jì)省.豬傳染性胸膜肺炎血清抗體檢測 [J].中國獸醫(yī)科技,2001,31(5):16-17.

[21] 刁有祥,丁家波,姜世金,等.豬胸膜肺炎放線桿菌山東分離株的血清型與Apx毒素型研究 [J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2005,38(11):206-211.

[22] 葉潤全,冼瓊珍,顧萬軍.廣東豬群傳染性胸膜肺炎的血清學(xué)調(diào)查及血清抗體分型試驗(yàn) [J].廣東畜牧獸醫(yī)科技,2007,32(1):30-32.

[23] 夏新萌,連偉民,李成蒙.我國部分地區(qū)豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的血清型流行病學(xué)調(diào)查 [J].中國豬業(yè),2015(12):50-53.

ReviewofPrevalenceandSerotypeDistributionforActinobacillusPleuropneumoniae

ZHU Xiu-gao1，2,LI Yan-qing3

(1.CollegeofVeterinaryMedicine,ChinaAgriculturalUniversity,Beijing,100000,China;2.WuhanHvsenBiotechnologyCompanyLtd.Wuhan,Hubei,430042,China;3.CentreofBiologicalResearch,WeifangUniversityofScience&Technology,Shouguang,Shandong,262700,China)

The losses of pigs infected withActinobacilluspleuropneumoniae(APP) are different due to variable prevalences.A survey for prevalence and serotype distribution in a certain area is basis for specific control measures.But,the report is infrequent both at home and abroad.In foreign contries,when both use of ELISA and clinical diagnoses in slaughterhouses and farms,the result indicates that the farm dense region has relatively high prevalence,especially breeding herds and hog herds.In China,when use of IHA in farms,the result indicates that the prevalence is variable owing to different provinces,and the ranking of prevalence is breed>hog and nursery herds.The primary serotypes are 2 in foreign countries and 7-3-1 in China.Comprehensive analysis showed that the prevalence of APP is higher,and the major serotype is changed over time,the new serotype may be present.

Actinobacilluspleuropneumoniae; prevalence; serotype

2017-02-15

朱秀高(1984-)，男，山東濰坊人，獸醫(yī)師，博士，主要從事動物疾病防治工作。

S852.612

A

1007-5038(2017)10-0111-03