茶皂素對奶牛免疫功能的影響

常肖肖 張議夫 趙士萍 蔣琦輝 王 炳 方洛云 熊本海 蔣林樹*

(1.北京農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，奶牛營養(yǎng)學(xué)北京市重點實驗室，北京102206；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京100193)

茶皂素對奶牛免疫功能的影響

常肖肖1張議夫1趙士萍1蔣琦輝1王 炳1方洛云1熊本海2*蔣林樹1*

(1.北京農(nóng)學(xué)院動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，奶牛營養(yǎng)學(xué)北京市重點實驗室，北京102206；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所，北京100193)

本試驗旨在研究茶皂素對荷斯坦奶牛的血清免疫相關(guān)細(xì)胞因子含量及其mRNA表達(dá)量的影響。試驗采用4×4拉丁方設(shè)計，選取4頭瘤胃瘺管奶牛，每頭奶牛分別灌注0(對照)、15、30、45 g/d的茶皂素，預(yù)試期14 d，正試期21 d，共4期。采用酶聯(lián)免疫吸附劑測定(ELISA)法試劑盒測定血清中免疫球蛋白(Ig)、白細(xì)胞介素(IL)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的含量，采用實時熒光定量PCR方法測定淋巴細(xì)胞IL-1、IL-6、IL-10和TNF-α mRNA表達(dá)量。結(jié)果顯示：1)30 g/d茶皂素組奶牛血清IgM含量顯著高于對照組(P<0.05)。2)15 g/d茶皂素組奶牛血清IL-1含量顯著高于對照組和45 g/d茶皂素組(P<0.05)。3)與對照組相比，15、30、45 g/d茶皂素組奶牛血清IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)量均無顯著差異(P>0.05)，但45 g/d茶皂素組可提高以上細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量。由此可見，茶皂素可提高奶牛血清中Ig及免疫相關(guān)細(xì)胞因子含量，并提高細(xì)胞因子IL-6 mRNA表達(dá)量，表明茶皂素可提高奶牛免疫功能。

茶皂素；免疫；細(xì)胞因子；奶牛

隨著我國奶牛產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展和全世界奶業(yè)的競爭越發(fā)激烈化，提高飼養(yǎng)管理水平和奶牛自身健康就顯得尤為重要。由于化學(xué)藥物和抗生素殘留問題一直困擾著奶牛養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，因此在研究奶牛飼糧中應(yīng)用植物源性添加劑調(diào)節(jié)增強奶牛自身免疫機能迫在眉睫，開發(fā)綠色植物源性飼料添加劑代替化學(xué)添加劑成為了一種必然趨勢。

茶皂素(tea saponin)作為一種植物源性提取物，具有無公害、純天然、殘留少等特點，并在生物活性方面有提高免疫機能、消炎、抑菌、抗腫瘤等作用[1]，已成為畜牧養(yǎng)殖和科研機構(gòu)研究的常用原料。茶皂素也稱之為茶皂甙，屬于五環(huán)三萜類結(jié)構(gòu)化合物[2]，基本結(jié)構(gòu)由甙元、糖體和有機酸3部分組成，是從山茶科(茶、山茶、油茶)植物種子中提取的一種糖式化合物[3]。彭春雨等[4]研究表明，茶皂素可以提高湖羊的采食量和生長性能，在每頭產(chǎn)奶牛飼糧中添加8 g茶皂素可顯著提高產(chǎn)奶量。Sagesaka等[5]、童勇等[6]研究證明，茶皂素可以有效抑制由角叉膠誘發(fā)的大鼠足浮腫及由二甲苯導(dǎo)致的小鼠耳廓腫脹，提高小鼠熱刺激體表的痛閾，其抗炎特性主要表現(xiàn)在改善炎癥初始階段受障礙毛細(xì)血管的通透性。韓志紅等[7]研究了油茶皂素對荷瘤小鼠的腫瘤抑制性試驗，結(jié)果表明油茶皂素對動物腫瘤具有明顯的抑制作用。李靜姬等[8]研究發(fā)現(xiàn)，茶皂素能夠明顯促進雛雞免疫器官成熟，進而提高其免疫功能。陳瑋等[9]報道，飼糧中添加茶皂素對肉雞的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)沒有顯著影響，但均有提高的趨勢。因此，本試驗旨在通過研究茶皂素對奶牛血清中細(xì)胞因子含量及其基因表達(dá)量的影響，探究其對奶牛免疫功能的調(diào)節(jié)作用。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與動物

茶皂素(皂甙含量≥65%)購自浙江東方茶葉有限公司常山分公司，深棕色細(xì)小粉末狀。選用裝有永久性瘤胃瘺管的荷斯坦奶牛為作為試驗動物，由北京誠遠(yuǎn)勝隆養(yǎng)殖有限公司提供。

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理

試驗采用4×4拉丁方試驗設(shè)計，選擇胎次(2～3胎)、泌乳天數(shù)[(153±28) d]、產(chǎn)奶量[(24.5±3) kg/d]相近，身體健康、體態(tài)相似且體重在500 kg左右的4頭永久性瘤胃瘺管荷斯坦奶牛，每頭奶牛分別灌注0(對照)、15、30、45 g/d的茶皂素，預(yù)試期14 d，正試期21 d，共4期。試驗?zāi)膛ｏ曃谷旌先占Z(TMR)，自由采食，自由飲水，每日擠奶2次。基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3 樣品采集與保存

試驗期每期第20天，使用真空促凝采血管進行尾靜脈無菌采血，血樣于3 000 r/min離心15 min后靜置2 h，制取血清，于-80 ℃保存?zhèn)溆?。同時用抗凝真空采血管采集15 mL血液，提取淋巴細(xì)胞，用于細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量的測定。

1.4 指標(biāo)測定與方法

1.4.1 生產(chǎn)性能測定

喂料時,記錄每頭牛喂料量、剩料量，計算平均日采食量。

記錄試驗期每頭奶牛早、晚產(chǎn)奶量，計算產(chǎn)奶量。每期第18天并連續(xù)3 d按早∶晚=6∶4的比例采集50 mL鮮乳，加3滴重鉻酸鉀防腐劑，送至北京市奶牛中心用LACTOSCAN型全自動超聲波乳成分分析儀測定干物質(zhì)、乳糖、乳蛋白和乳脂含量，計算乳糖率、乳蛋白率和乳脂率。

1.4.2 血清免疫指標(biāo)測定

血清免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量均用森貝伽(南京)生物科技有限公司的酶聯(lián)免疫吸附劑測定(ELISA)法試劑盒測定，試劑配制和操作步驟按說明書進行。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))

1)預(yù)混料為每千克飼糧提供 The premix provided the following per kg of the diet:Cu 800 mg,Mn 1 200 mg,Zn 3 300 mg,Se 30 mg,Co 20 mg,Fe 1 400 mg,I 70 mg,VA 1 100 000 IU,VD 330 000 IU,VE 3 000 IU。

2)產(chǎn)奶凈能為計算值，其他營養(yǎng)水平為實測值。NELwas a calculated value, while the other nutrient levels were measured values.

1.4.3 免疫相關(guān)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量的測定

淋巴細(xì)胞分離及總RNA提?。和庵苎cD-Hank’s液以1∶1稀釋，加淋巴細(xì)胞分離液以1 200×g離心20 min，吸取單個核細(xì)胞層，加D-Hank’s液以900×g離心10 min，2次。收集淋巴細(xì)胞沉淀，加入1 mLTrizol，4 ℃靜置5 min，加200 μL氯仿，混勻，靜置5 min，10 000×g離心15 min，取上層水相加同體積異丙醇，冰上孵育10 min，10 000×g離心10 min，棄上清，加1 mL 75%乙醇洗滌，10 000×g離心5 min，得到RNA沉淀。

表2 實時熒光定量PCR引物序列及參數(shù)

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

使用Excel 2007整理試驗數(shù)據(jù)，采用相對定量2-ΔΔCt法對試驗數(shù)據(jù)進行計算。采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件中的one-way ANOVA程序進行單因素方差分析，當(dāng)單因素方差分析差異顯著時，采用Duncan氏法進行平均值的多重比較，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 茶皂素對奶牛生產(chǎn)性能的影響

從表3中可以看出，與對照組相比，15、30、45 g/d茶皂素組奶牛平均日采食量、產(chǎn)奶量及各乳成分含量等指標(biāo)均無顯著差異(P>0.05)，這說明茶皂素對奶牛機體在生產(chǎn)性能上無不良影響，為后期試驗數(shù)據(jù)的可靠性提供了依據(jù)。

表3 茶皂素對奶牛平均日采食量、產(chǎn)奶量和乳成分的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with the same or no letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

2.2 茶皂素對奶牛血清免疫指標(biāo)的影響

從表4中可以看出，與對照組相比，15、30、45 g/d茶皂素組血清IgM含量均有所提高，30 g/d茶皂素組血清IgM含量顯著提高(P<0.05)，但各組血清IgA、IgG含量均無顯著差異(P>0.05)。與對照組相比，15、30、45 g/d茶皂素組血清IgG含量均有一定程度的提高，并隨著茶皂素灌注水平提高而逐漸降低。

表4 茶皂素對奶牛血清中免疫球蛋白含量的影響

從表5中可以看出，15 g/d茶皂素組血清IL-1含量顯著高于對照組和45 g/d茶皂素組(P<0.05)，并隨著茶皂素灌注水平提高而逐漸降低。隨著茶皂素灌注水平的提高，血清TNF-α含量呈先增加后降低的趨勢，且30 g/d茶皂素組血清TNF-α含量最高，與對照組差異顯著(P<0.05)。

表5 茶皂素對奶牛血清中免疫相關(guān)細(xì)胞因子含量的影響

2.3 茶皂素對奶牛免疫相關(guān)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量的影響

從表6中可以看出，與對照組相比，15、30、45 g/d茶皂素組IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)量均無顯著差異(P>0.05)，但45 g/d茶皂素組可提高以上細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量，IL-6 mRNA表達(dá)量是對照組5.95倍，IL-1、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)量也都是對照組2倍以上。與對照組相比，15、30、45 g/d茶皂素組均可提高IL-6 mRNA表達(dá)量。

3 討 論

3.1 茶皂素對奶牛血清免疫指標(biāo)的影響

本試驗通過測定血清中免疫球蛋白、白細(xì)胞介素及TNF-α的含量，研究茶皂素對奶牛免疫指標(biāo)的影響，結(jié)果顯示30 g/d茶皂素組與對照組相比，可顯著提高血清中IgM的含量，并隨著茶皂素灌注水平的增加，血清中IgM的含量呈現(xiàn)先增加后減小的趨勢。而茶皂素對血清中IgA、IgG含量均無顯著差異。血清總蛋白指的是體內(nèi)血清蛋白質(zhì)含量的總稱，主要包含了白蛋白和球蛋白。球蛋白是由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的，具有免疫調(diào)節(jié)作用。在肉雞飲用水中添加不同含量茶皂素，發(fā)現(xiàn)400 mg/L劑量組對十二指腸防御素和IgA含量有顯著提高作用[12]。另有研究顯示，一定劑量的茶皂素可以促進固始雞免疫器官發(fā)育，促進肉雞腸絨毛生長，增加腸道對營養(yǎng)的吸收面積，提高T淋巴細(xì)胞亞群的水平[13-14]。同時，研究發(fā)現(xiàn)，與外周免疫器官脾臟相比，茶皂素對法氏囊和胸腺的作用更強[7]。給長沙黃雞喂含有茶皂素的飼糧，試驗組血清淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率、IgG含量、IL-2含量均有提高效果[15]。本試驗與前人研究有所差異，分析原因可能是由于試驗動物的種屬差異性。有研究報道，茶皂素對雛雞免疫器官的成熟具有明顯的促進作用，使雛雞的生產(chǎn)性能明顯提高，因此在飼糧添加茶皂素類添加劑能促進雞免疫器官發(fā)育[16]。

表6 茶皂素對奶牛免疫相關(guān)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量的影響

本試驗結(jié)果中，15 g/d茶皂素組血清IL-1含量與對照組和45 g/d茶皂素組相比差異顯著，與對照組相比，15、30、45 g/d茶皂素組均提高了血清IL-1含量。30 g/d皂素組血清TNF-α含量最高，與對照組差異顯著，并隨著茶皂素灌注水平的增加，血清TNF-α含量呈先增加后減小的趨勢。從本試驗結(jié)果可以看出，與對照組相比，15、30、45 g/d茶皂素組血清中IgM、IL-1、TNF-α均有所提高。本試驗探究與分析了茶皂素對奶牛血清中免疫球蛋白及細(xì)胞因子含量的變化規(guī)律，可為進一步研究茶皂素對奶牛免疫功能的影響提供試驗依據(jù)。

3.2 茶皂素對奶牛免疫相關(guān)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量的影響

細(xì)胞因子是由多種細(xì)胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì)，具有免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞生長以及修復(fù)損傷組織等多種生物學(xué)功能[17]。其類型包括白細(xì)胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族等。TNF-α是機體組織細(xì)胞發(fā)生免疫應(yīng)答時分泌的一種具有免疫作用的炎性細(xì)胞因子，與白細(xì)胞介素、干擾素等其他細(xì)胞因子共同參與到炎癥免疫反應(yīng)中。目前，關(guān)于茶皂素對細(xì)胞因子作用的國內(nèi)外研究較少，免疫系統(tǒng)可通過細(xì)胞因子如TNF-α、IL-6傳遞信息給其他生理系統(tǒng)提高免疫水平。本試驗結(jié)果也發(fā)現(xiàn)，灌注不同水平茶皂素均可提高IL-6 mRNA表達(dá)量，具有一定促進作用。IL-6是Kshimoto等[18]從T細(xì)胞中首先獲得的一種糖蛋白，它是機體發(fā)生免疫應(yīng)答時分泌的一種細(xì)胞因子，已在B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞以及纖維母細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)[19]。TNF-α是通過用靈桿菌脂多糖注射小鼠后，發(fā)現(xiàn)小鼠血清中出現(xiàn)一種能夠誘導(dǎo)腫瘤組織發(fā)生出血，并引起腫瘤壞死的物質(zhì)[20]，故被后人命名為腫瘤壞死因子。本試驗發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，45 g/d茶皂素組均可提高細(xì)胞因子IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)量，且45 g/d茶皂素組IL-6 mRNA表達(dá)量是對照組5.95倍，IL-1、IL-10、TNF-α mRNA表達(dá)量也都是對照組2倍以上。

從20世紀(jì)80年代，我國開始對茶皂素進行工業(yè)化生產(chǎn)。到目前為止，已在紡織、建筑、化妝品和材料加工等領(lǐng)域有了較為廣泛的應(yīng)用[21-23]，但在畜牧生產(chǎn)中尚未得到充分利用。有研究報道[24]，茶皂素可以顯著提高肉牛血清中超氧化物歧化酶、脂肪酶活性和總蛋白含量，降低血清膽固醇含量，提高牛的免疫機能和抗氧化水平。有研究報道，飼糧中添加茶皂素對肉雞的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)沒有顯著影響，但有提高的趨勢[25]。本試驗研究發(fā)現(xiàn)，茶皂素能在一定程度上提高血清免疫球蛋白及免疫相關(guān)細(xì)胞因子的含量，并對IL-6 mRNA表達(dá)量有促進作用，為提高奶牛機體免疫功能問題提供了新的解決思路，同時為進一步研究茶皂素作為調(diào)控奶牛天然飼料添加劑提供了研究基礎(chǔ)。

4 結(jié) 論

茶皂素可提高奶牛血清中免疫球蛋白及免疫相關(guān)細(xì)胞因子含量，并提高細(xì)胞因子IL-6 mRNA表達(dá)量，表明茶皂素可提高奶牛免疫功能。

[1] LAI Z F,SHAO Z Q,CHEN Y Z,et al.Effects of sasanquasaponin on ischemia and reperfusion injury in mouse hearts[J].Journal of Pharmacological Sciences,2004,94(3):313-324.

[2] MURAKAMI T,NAKAMURA J,MATSUDA H,et al.Bioactive saponins and glycosides.ⅩⅤ.Saponin constituents with gastroprotective effect from the seeds of tea plant,CamelliasinensisL. var.assamicaPIERRE,cultivated in Sri Lanka:structures of assamsaponins A,B,C,D,and E[J].Chemical and Pharmaceutical Bulletin,1999,47(12):1759-1764.

[3] 柳榮祥.幾種山茶屬植物皂素的化學(xué)及活性研究綜述[J].茶葉,1997,23(1):22-25,35.

[4] 彭春雨,孟慶翔,任麗萍,等.植物提取物對奶牛產(chǎn)奶性能和血液指標(biāo)的影響[J].飼料研究,2011(7):8-10.

[5] SAGESAKA M Y,SUGIURA T,MIWA Y,et al.Effect of tea-leaf saponin on blood pressure of spontaneously hypertensive rats[J].Yakugaku Zasshi,1996,116(5):388-395.

[6] 童勇,李玉山.茶皂素耐缺氧及抗氧化作用的實驗研究[J].中外健康文摘,2009,6(22):19-21.

[7] 韓志紅,劉義慶,庹新蘭,等.茶皂素對荷瘤小鼠腫瘤抑制作用研究[J].武漢職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1998,26(1):5-6.

[8] 李靜姬,李國江.糖萜素對雛雞生產(chǎn)性能和免疫器官的影響[J].中國畜牧獸醫(yī),2005,32(1):20-22.

[9] 陳瑋,周裔彬,宛曉春,等.茶皂素對肉仔雞生長性能、屠宰性能和肉質(zhì)的影響[J].糧食與飼料工業(yè),2010(9):49-51.

[10] 馮仰廉,周建民,張曉明,等.我國奶牛飼料產(chǎn)奶凈能值測算方法的研究[J].中國畜牧雜志,1987(1):8-11.

[11] WU T Y,WANG C,DING L Y,et al.Arginine relieves the inflammatory response and enhances the casein expression in bovine mammary epithelial cells induced by lipopolysaccharide[J].Mediators of Inflammation,2016,2016:9618795.

[12] 沈維武,徐銳,詹勇,等.水溶性糖萜素對肉雞生長性能和小腸黏膜免疫功能的影響[J].中國畜牧雜志,2012,48(1):59-62.

[13] 黃鵬,趙珊珊,張學(xué)武,等.糖萜素對固始雞免疫器官發(fā)育及T淋巴細(xì)胞亞群的影響[J].中國畜牧獸醫(yī),2011,38(12):64-67.

[14] 黃鵬,趙珊珊,張學(xué)武,等.糖萜素對固始雞小腸黏膜結(jié)構(gòu)的影響[J].動物營養(yǎng)學(xué)報,2011,23(11):2016-2023.

[15] 曾一鳴,周紅麗.糖萜素對長沙黃雞生長性能和免疫力的影響研究[J].當(dāng)代畜牧,2005(4):19-20.

[16] 陳寶江,趙學(xué)軍,谷子林,等.糖萜素對綠殼蛋雞生產(chǎn)性能的影響[J].獸藥與飼料添加劑,2001,6(5):8-10.

[17] 巴德年.微生物學(xué)[M].北京市:北京醫(yī)科大學(xué),中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社,1998:1034.

[18] KISHIMOTO T,HIRANO T,KIKUTANI H,et al.Regulation of growth and differentiation of human B cells[M]//FELDMANN M,LAMB J R,WOODY J N.Human T Cell Clones.Clifton:Humana Press,1985,9:349-359.

[19] 劉顯東,毛海峰.白細(xì)胞介素-6的生物學(xué)功能及與運動的關(guān)系探討[J].宜春學(xué)院學(xué)報,2009,31(6):166-168.

[20] CARSWELL E A,OLD L J,KASSEL R L,et al.An endotoxin-indncted serum factor that causes necrosis of tumors[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America,1975,72(9):3666-3670.

[21] 曹江絨.茶皂素的提取、純化及在洗發(fā)液中的應(yīng)用研究[D].碩士學(xué)位論文.西安:陜西科技大學(xué),2014.

[22] 楊強,張石蕊.茶皂素在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].中國飼料,2007(8):8-10.

[23] 趙娟.茶皂素的精制[D].碩士學(xué)位論文.無錫:江南大學(xué),2011.

[24] 王雅靜.糖萜素、牛至油對育肥后期肉牛作用效果的研究[D].碩士學(xué)位論文.重慶:西南大學(xué),2007.

[25] 袁鐘宇,張石蕊,賀喜,等.茶籽多糖及茶皂素對肉雞生長性能和腸道微生物的影響[J].中國畜牧雜志,2010,46(7):28-31.

*Corresponding authors: XIONG Benhai, professor, E-mail： xiongbenhai@caas.cn; JIANG Linshu, professor, E-mail： kjxnb@vip.sina.com

(責(zé)任編輯 武海龍)

Effects of Tea Saponin on Immune Function of Dairy Cows

CHANG Xiaoxiao1ZHANG Yifu1ZHAO Shiping1JIANG Qihui1WANG Bing1FANG Luoyun1XIONG Benhai2*JIANG Linshu1*

(1.KeyLaboratoryforDairyCowNutrition,CollegeofAnimalScienceandTechnology,BeijingUniversityofAgriculture,Beijing102206,China; 2.InstituteofAnimalScienceandVeterinary,ChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100193,China)

This experiment was conducted to study the effects of tea saponin on serum immune related cytokines contents and their mRNA expression levels of Holstein cows. Four rumen fistulated cows were used following a 4×4 Latin square design with different infusion concentrations of tea saponin [0 (control), 15, 30, 45 g/d]. The experiment had 4 periods, and each period consisted of 14 d per feeding period and 7 d sampling period. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method kit was used to measure the contents of immunoglobulins, interleukin and tumor necrosis factor alpha (TNF-α) in serum. Quantitative real-time PCR was used to measure the mRNA expression levels of interleukin-1 (IL-1), interleukin-6 (IL-6), interleukin-10 (IL-10) andTNF-α. The results showed as follows: 1) the serum immunoglobulin M (IgM) content of dairy cow in 30 g/d tea saponin group was significantly higher than that in control group (P<0.05). 2) The serum IL-1 content in 15 g/d tea saponin group was significantly higher than that in control group and 45 g/d tea saponin group (P<0.05). 3) Compared with the control group, the mRNA expression levels ofIL-1,IL-10,IL-6 andTNF-α in 15, 30 and 45 g/d tea saponin groups were not significantly different (P>0.05), but the mRNA expression levels of above cytokines in 45 g/d tea saponin group was increased. In conclusion, tea saponin can improve the contents of immunoglobulins and immune related cytokines in serum, as well as the mRNA expression level of cytokineIL-6, which indicate that tea saponin can improve the immune function of dairy cows.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(3)：1039-1045]

tea saponin; immunity; cytokines; dairy cows

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.03.038

2016-09-09

“十二五”國家科技支撐項目(25012BAD14B09)；“十三五”國家重大科技專項(2016YFDO70020，2016YFDO700205)；北京市農(nóng)業(yè)局北京市現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系奶牛創(chuàng)新團隊項目

常肖肖(1993—)，女，山東泰安人，碩士研究生，研究方向為奶牛營養(yǎng)與免疫。E-mail： c-x-x2@163.com

*通信作者:熊本海，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail： xiongbenhai@caas.cn；蔣林樹，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail： kjxnb@vip.sina.com

S823

A

1006-267X(2017)03-1039-07