飼糧n-6/n-3多不飽和脂肪酸比值對冬毛期北極狐生長性能及肝臟脂肪酸代謝相關(guān)蛋白基因表達(dá)的影響

鐘 偉 張 婷 羅 靖 岳志剛 劉學(xué)慶 樊燕燕 孫皓然 孫旭陽 李光玉

(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林省特種經(jīng)濟(jì)動物分子生物學(xué)省部共建實(shí)驗(yàn)室，長春130112)

飼糧n-6/n-3多不飽和脂肪酸比值對冬毛期北極狐生長性能及肝臟脂肪酸代謝相關(guān)蛋白基因表達(dá)的影響

鐘 偉 張 婷 羅 靖 岳志剛 劉學(xué)慶 樊燕燕 孫皓然 孫旭陽 李光玉*

(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林省特種經(jīng)濟(jì)動物分子生物學(xué)省部共建實(shí)驗(yàn)室，長春130112)

本試驗(yàn)旨在研究飼糧n-6/n-3多不飽和脂肪酸(PUFA)比值對冬毛期北極狐生長性能、肝臟脂肪酸組成及肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FATP)基因表達(dá)的影響。試驗(yàn)選取48只157日齡、平均體重為(5 658±47) g的健康雄性北極狐，隨機(jī)分成4組，每組12個重復(fù)，每個重復(fù)1只。Ⅰ組飼糧中添加12.00%魚油和2.00%豆油，n-6/n-3 PUFA比值為3.00；Ⅱ組飼糧中添加9.38%玉米油和4.62%豆油，n-6/n-3 PUFA比值為18.03；Ⅲ組飼糧中添加12.00%玉米油和2.00%豆油，n-6/n-3 PUFA比值為40.83；Ⅳ組飼糧中添加1.50%魚油和12.50%玉米油，n-6/n-3 PUFA比值為136.36。各組飼糧除油脂組成和配比不同外，其他原料一致。預(yù)試期7 d，正試期40 d。結(jié)果表明：1)飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)有極顯著影響(P<0.01)。Ⅰ和Ⅳ組的ADG極顯著高于Ⅱ和Ⅲ組(P<0.01)，Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ組的ADFI極顯著高于Ⅲ組(P<0.01)，Ⅳ組的F/G極顯著低于Ⅱ和Ⅲ組(P<0.01)。2)飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐肝臟單不飽和脂肪酸(MUFA)、PUFA、n-3 PUFA和n-6 PUFA的含量有顯著或極顯著影響(P<0.05或P<0.01)，對肝臟飽和脂肪酸(SFA)含量無顯著影響(P>0.05)。Ⅰ和Ⅳ組肝臟n-3 PUFA含量極顯著高于Ⅱ和Ⅲ組(P<0.01)，Ⅱ和Ⅲ組肝臟n-6 PUFA含量極顯著高于Ⅰ和Ⅳ組(P<0.01)。3)飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐肝臟L-FABPmRNA相對表達(dá)量無顯著影響(P>0.05)，但極顯著影響肝臟FATPmRNA相對表達(dá)量(P<0.01)。Ⅰ和Ⅳ組肝臟FATPmRNA相對表達(dá)量極顯著高于Ⅱ和Ⅲ組(P<0.01)。由此可見，飼糧添加1.50%魚油與12.50%玉米油的混合油脂，即飼糧n-6/n-3 PUFA比值為136.36時，上調(diào)了肝臟中FATP基因的表達(dá)，增加了肝臟長鏈脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn)及利用效率，促進(jìn)了冬毛期北極狐的生長。

n-6/n-3多不飽和脂肪酸比值；北極狐；肝臟；脂肪酸；肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白；脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白

多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids，PUFA)，尤其是n-3和n-6 PUFA，在機(jī)體脂類代謝、基因表達(dá)調(diào)控、免疫機(jī)能及畜禽產(chǎn)品脂肪酸組成等方面發(fā)揮著重要作用[1-2]。由于n-6和n-3 PUFA在機(jī)體內(nèi)不能相互轉(zhuǎn)化，必須通過飼糧攝取，因此n-6/n-3 PUFA比值平衡成為目前最受關(guān)注的問題。n-6和n-3 PUFA是動物必需脂肪酸，研究表明飼糧中添加n-6和n-3 PUFA既能滿足必需脂肪酸的需要，適宜n-6/n-3 PUFA比值能維持機(jī)體的生理機(jī)能，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，促進(jìn)畜禽健康生長[3-7]。毛皮動物體脂肪酸組成與飼糧脂肪酸組成存在一定的對應(yīng)關(guān)系[8-10]，且不同組織中脂肪酸組成有差異[11]。肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)和脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FATP)是具有脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)作用的2種蛋白，L-FABP是脂肪酸結(jié)合蛋白家族(FABPs)的重要成員，F(xiàn)ATP是跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白超家族(FATPs)中的一員，2種蛋白均對長鏈脂肪酸具有高度親和力，在脂質(zhì)代謝過程中，對脂肪酸的攝取與轉(zhuǎn)運(yùn)起著重要作用[12-13]。北極狐(Alopexlagopus)屬于食肉目犬科動物，原產(chǎn)于亞洲、歐洲、北美洲北部和接近北冰洋地帶，屬于世界珍貴的毛皮動物之一。北極狐在耐受脂肪方面與畜禽存在不同[14]，其在脂肪酸利用、轉(zhuǎn)運(yùn)及沉積方式方面的研究尚未見研究報道。因此，本文旨在通過研究飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐生長性能、肝臟脂肪酸組成、L-FABP和FATP基因表達(dá)的影響，以期為北極狐的生產(chǎn)及脂肪代謝研究提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動物

試驗(yàn)選用的北極狐是地產(chǎn)芬系北極狐，即引進(jìn)的芬蘭種狐經(jīng)過多年繁育所形成的地方品種。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)飼糧

選取157日齡48只平均體重為(5 658±47) g的健康雄性北極狐，隨機(jī)分成4組，每組設(shè)12個重復(fù)，每個重復(fù)1只北極狐。以膨化玉米、豆粕、玉米蛋白粉、干酒糟及其可溶物(DDGS)、魚粉、肉粉、油等為主要原料，同時添加由礦物質(zhì)元素、維生素等組成的營養(yǎng)性添加劑配制成試驗(yàn)飼糧，飼糧中脂肪酸需求量參照FEDIAF(European Pet Food Industry Federation，2011)[15]，通過改變飼糧中的油脂配比來調(diào)配脂肪酸的比例，各組飼糧除油脂組成和配比不同外，其他原料一致。其中，Ⅰ組飼糧中添加12.00%魚油和2.00%豆油，n-6/n-3 PUFA比值為3.00；Ⅱ組飼糧中添加9.38%玉米油和4.62%豆油，n-6/n-3 PUFA比值為18.03；Ⅲ組飼糧中添加12.00%玉米油和2.00%豆油，n-6/n-3 PUFA比值為40.83；Ⅳ組飼糧中添加1.50%魚油和12.50%玉米油，n-6/n-3 PUFA比值為136.36。試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平、脂肪酸組成分別見表1和表2。

1.3 飼養(yǎng)管理

本試驗(yàn)在中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所毛皮動物試驗(yàn)基地完成。試驗(yàn)從2014年10月13日開始至2014年12月1日結(jié)束，預(yù)試期7 d，正試期40 d。試驗(yàn)動物單籠飼養(yǎng)，每天08：00和15：00各飼喂1次，自由飲水。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

續(xù)表1項(xiàng)目Items組別GroupsⅠⅡⅢⅣ食鹽NaCl0．500．500．500．50合計(jì)Total100．00100．00100．00100．00營養(yǎng)水平Nutrientlevels2)代謝能ME/(MJ/kg)19．0419．0319．1419．05粗蛋白質(zhì)CP29．7629．3929．8229．76粗脂肪EE15．5015．1315．7715．09粗灰分Ash9．318．829．058．71碳水化合物Carbohydrate41．4342．6641．3642．44賴氨酸Lys1．411．411．411．41蛋氨酸+半胱氨酸Met+Cys1．051．051．051．05鈣Ca1．6131．5441．5041．397磷P1．1391．0341．1030．977

1)每千克預(yù)混料含有One kilogram of premix contained the following：VA 300 000 IU，VD 3 200 000 IU，VE 4 000 mg，VK 350 mg，VB1400 mg，VB2500 mg，VB6200 mg，VB124.2 mg，葉酸 folic acid 50 mg，泛酸 pantothenic acid 2 200 mg，生物素 biotin 1 600 mg，氯化膽堿 choline chloride 120 mg，VC 12 000 mg，F(xiàn)e 4 000 mg，Zn 3 200 mg，Mn 1 600 mg，I 80 mg，Se 12 mg，Cu 500 mg。

2)粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、賴氨酸、蛋氨酸、鈣、磷均為測定值，其他為計(jì)算值。CP, EE, Ash, Lys, Met, Ca and P were calculated values, while the others were measured values.

表2 試驗(yàn)飼糧脂肪酸組成

續(xù)表2脂肪酸Fattyacids組別GroupsⅠⅡⅢⅣC22∶00．020．050．020．00C22∶1n?90．000．000．000．00C20∶3n?30．000．000．000．00C23∶00．000．000．000．00C20∶4n?60．090．000．000．01C22∶2n?60．000．000．000．00C24∶00．010．010．010．00C20∶5n?31．920．000．000．24C24∶10．020．000．000．00C22∶6n?30．630．000．000．08SFA11．905．434．304．38MUFA35．1422．9521．8922．73PUFA17．9277．2878．2371．41n?6PUFA13．4473．2276．3670．90n?3PUFA4．484．061．870．52n?6/n?3PUFA3．0018．0340．83136．36

SFA為飽和脂肪酸，MUFA為單不飽和脂肪酸，PUFA為多不飽和脂肪酸。表5同。

SFA was saturated fatty acids, MUFA was monounsaturated fatty acids, and PUFA was polyunsaturated fatty acids. The same as Table 5.

1.4 樣品采集

正試期結(jié)束后，每組隨機(jī)選取7只北極狐，心臟注射5 mL的琥珀乙酰膽堿處死，之后迅速解剖，取肝小葉相同部位約2 g，用生理鹽水沖洗掉血跡，放入凍存管后立即投入液氮中10 min以上，之后轉(zhuǎn)入-80 ℃冰箱保存。另取肝臟約50 g，用生理鹽水沖洗掉血跡，放入自封袋，-20 ℃冰箱冷藏待測脂肪酸組成。

1.5 測定指標(biāo)及方法

1.5.1 飼糧養(yǎng)分的測定

測定飼糧中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、鈣、磷含量。干物質(zhì)含量采用105 ℃烘干法測定，參照GB/T 6435—2006；粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法測定，參照GB/T 6432—1994；粗脂肪含量采用索氏抽提法測定，參照GB/T 6433—1994；粗灰分含量采用550 ℃灼燒法測定，參照GB/T 6438—1992；鈣含量采用乙二胺四乙酸(EDTA)絡(luò)合滴定法測定，參照GB/T 6436—1992；磷含量采用釩鉬酸銨比色法測定，參照GB/T 6437—1992；氨基酸含量采用全自動氨基酸分析儀(HITACHI，L-8900，日本)進(jìn)行測定。

1.5.2 生長性能指標(biāo)的計(jì)算

平均日采食量(ADFI，g/d)=

試驗(yàn)期采食量/試驗(yàn)天數(shù)；

平均日增重(ADG，g/d)=(末重-

初重)/試驗(yàn)天數(shù)；

料重比(F/G)=ADFI/ADG。

1.5.3 飼糧和肝臟脂肪酸組成的測定

脂肪酸前處理采用甲酯化方法，參照GB/T 21514—2008，測試采用外標(biāo)法。脂肪酸測定采用氣質(zhì)聯(lián)用儀(Agilent7890A-7000B)，色譜條件：色譜柱為DB-5MS(30 m×250 μm×0.25 μm)；柱溫初始為55 ℃，保持2 min，然后以5 ℃/min速率升至200 ℃，保持1 min，再以2 ℃/min速率升至230 ℃，保持3 min，再以5 ℃/min速率升至270 ℃，保持10 min；進(jìn)樣口溫度為250 ℃；載氣為氦氣(99.999%)1.0 mL/min；進(jìn)樣量為1 μL；分流比為10∶1。質(zhì)譜條件：電子轟擊離子(EI)源；離子源溫度為230 ℃；電子能量為70 eV；接口溫度為250 ℃；掃描質(zhì)量范圍為50～500 m/z。

1.5.4 肝臟L-FABP和FATPmRNA相對表達(dá)量的測定

1.5.4.1 總RNA提取和cDNA的合成

取肝臟樣品于液氮中研磨成粉，收集于1.5 mL無RNA酶Eppendorf管中?？俁NA的提取采用RNAiso Reagent試劑盒(TaKaRa公司)，提取過程參照試劑盒說明書。提取的總RNA通過凝膠電泳檢測其完整性，并測定總RNA在260和280 nm處的吸光度(OD)值，以檢測其純度。反轉(zhuǎn)錄依據(jù)試劑盒(TaKaRa公司)進(jìn)行，反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物于-20 ℃凍存?zhèn)溆谩?/p>

1.5.4.2L-FABP和FATPmRNA相對表達(dá)量的測定

L-FABP和FATPmRNA相對表達(dá)量的測定采用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)(SYBR Green染料法，Trans-Start試劑盒)，以β-肌動蛋白(β-actin)作為內(nèi)參基因，引物信息見表3，引物由上海生工生物工程有限公司合成。采用20 μL PCR反應(yīng)體系：2×Trans Start Top Green qPCR SuperMix 10 μL，上游引物(10 μmol/L) 0.4 μL，下游引物(10 μmol/L)0.4 μL，Passive Reference Dye (50×) 0.4 μL，Rnase Free dH2O 7.8 μL，cDNA 1 μL。反應(yīng)程序:預(yù)變性，95 ℃ 1 min，1個循環(huán)；PCR反應(yīng)95 ℃，5 s，退火25 s(具體退火溫度見表3)，共40個循環(huán)。熔解曲線用于確定擴(kuò)增產(chǎn)物的特異性，反應(yīng)程序?yàn)?65～95 ℃，每升高0.5 ℃分析1次，95 ℃結(jié)束，61個循環(huán)。

表3 實(shí)時熒光定量PCR引物序列及參數(shù)

1.6 數(shù)據(jù)整理與統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2003進(jìn)行整理，采用SPSS 9.13軟件中的GLM程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多重比較采用Duncan氏法進(jìn)行，其中P<0.01為差異極顯著，P<0.05為差異顯著，P>0.05為差異不顯著，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐生長性能的影響

由表4可知，飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐ADG、ADFI和F/G有極顯著影響(P<0.01)。Ⅰ和Ⅳ組ADG極顯著高于Ⅱ和Ⅲ組(P<0.01)，Ⅰ和Ⅳ組間差異不顯著(P>0.05)，Ⅱ和Ⅲ組間差異不顯著(P>0.05)。Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ組的ADFI極顯著高于Ⅲ組(P<0.01)，而Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ組間差異不顯著(P>0.05)。Ⅳ組的F/G極顯著低于Ⅱ和Ⅲ組(P<0.01)，Ⅰ與Ⅳ組間差異不顯著(P>0.05)，Ⅱ與Ⅲ組間差異不顯著(P>0.05)。

2.2 飼糧n-6/n-3 PUFA比值對北極狐肝臟脂肪酸組成的影響

由表5可知，飼糧n-6/n-3 PUFA比值對肝臟單不飽和脂肪酸(MUFA)、多不飽和脂肪酸(PUFA)、n-3 PUFA和n-6 PUFA的含量有顯著或極顯著影響(P<0.05或P<0.01)，對飽和脂肪酸(SFA)含量無顯著影響(P>0.05)。Ⅰ和Ⅳ組肝臟MUFA含量顯著高于Ⅲ組(P<0.05)，與Ⅱ組差異不顯著(P>0.05)，Ⅱ和Ⅲ組間差異不顯著(P>0.05)；Ⅱ組肝臟PUFA含量顯著高于Ⅰ和Ⅳ組(P<0.05)，與Ⅲ組差異不顯著(P>0.05)；Ⅰ和Ⅳ組肝臟n-3 PUFA含量極顯著高于Ⅱ和Ⅲ組(P<0.01)，Ⅱ組未檢出；Ⅱ和Ⅲ組肝臟n-6 PUFA含量極顯著高于Ⅰ和Ⅳ組(P<0.01)，Ⅱ與Ⅲ組間、Ⅰ與Ⅳ組間差異不顯著(P>0.05)。

2.3 飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐肝臟L-FABP和FATP基因表達(dá)的影響

由圖1可知，隨飼糧n-6/n-3 PUFA比值的升高，肝臟L-FABPmRNA相對表達(dá)量呈先升高再降低的趨勢，其中以Ⅲ組的相對表達(dá)量最高，但4組間差異不顯著(P>0.05)。

表4 飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐生長性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同或無字母表示差異不顯著(P>0.05)。下表同。

In the same row, values with different capital letter superscripts mean extremely significant difference (P<0.01), and with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), while with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05). The same as below.

表5 飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐肝臟脂肪酸組成的影響(占總脂肪酸的比例)

由圖2可知，隨著飼糧n-6/n-3 PUFA比值的升高，肝臟FATPmRNA相對表達(dá)量呈先降低再升高的趨勢，Ⅰ和Ⅳ組極顯著高于Ⅱ和Ⅲ組(P<0.01)，但Ⅰ和Ⅳ組間差異不顯著(P>0.05)，Ⅱ和Ⅲ組間差異不顯著(P>0.05)。

3 討 論

3.1 飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐生長性能的影響

研究發(fā)現(xiàn)魚油富含n-3 PUFA，除能提高家禽免疫力之外，其促生長作用也已被許多研究者證實(shí)[16-17]。郭志有[18]研究發(fā)現(xiàn)，魚油替代一定比例的玉米油可以增強(qiáng)腸道免疫應(yīng)答，提高機(jī)體免疫力，從而提高仔豬的F/G。本試驗(yàn)中，從生長性能指標(biāo)分析，Ⅳ和Ⅰ組的ADFI、ADG均高于Ⅱ和Ⅲ組，F(xiàn)/G均低于Ⅱ和Ⅲ組，表明魚油和植物油脂混合要優(yōu)于植物油脂間混合。這與在肉雞上的研究結(jié)果[19]相一致，即動、植物油脂混合添加效果優(yōu)于單獨(dú)添加，不同的油脂按一定比例混合使用可發(fā)揮脂肪酸互補(bǔ)效應(yīng)，更有利于脂肪的消化和利用，從而改善肉雞生產(chǎn)性能。Ⅲ和Ⅳ組油脂配比雖然差別不大，但Ⅳ組生長性能優(yōu)于Ⅲ組，這可能是由于飼糧n-6/n-3 PUFA比值不同導(dǎo)致的。研究表明，當(dāng)飼糧總脂肪含量一定而n-6和n-3 PUFA含量不同，即飼糧中n-6/n-3 PUFA比值不同時，斷奶仔豬的生產(chǎn)性能不同，適當(dāng)比值的n-6/n-3 PUFA通過提高仔豬的免疫機(jī)能提高其生產(chǎn)性能[20]。飼糧n-6/n-3 PUFA比值通過影響動物機(jī)體代謝，改善動物飼糧消化水平，從而影響動物的生產(chǎn)性能[21]。

數(shù)據(jù)柱形標(biāo)注不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，相同字母表示差異不顯著(P>0.05)。圖2同。

3.2 飼糧n-6/n-3 PUFA比例對冬毛期北極狐肝臟脂肪酸組成的影響

本試驗(yàn)測定發(fā)現(xiàn)，北極狐肝臟脂肪酸中SFA約占總脂肪酸的62%，MUFA約占總脂肪酸的12%，PUFA約總脂肪酸的占26%，說明在北極狐肝臟中脂肪酸主要以飽和形式沉積，這與Rouvinen等[11]的研究報道相一致。研究表明畜禽產(chǎn)品中的脂肪酸組成可能受到飼糧中脂肪酸組成的影響[22-23]，本試驗(yàn)中北極狐肝臟脂肪酸中MUFA、PUFA、n-3 PUFA和n-6 PUFA含量的變化規(guī)律基本與飼糧中變化規(guī)律相同，即隨n-6/n-3 PUFA比值的升高，MUFA和n-3 PUFA的含量呈先降低后升高趨勢，PUFA和n-6 PUFA的含量呈先升高后降低趨勢，這與Gudbjarnason等[24]的研究報道一致，說明飼糧n-6/n-3 PUFA比值影響著肝臟中n-6和n-3 PUFA的含量。本試驗(yàn)中，Ⅰ和Ⅳ組飼糧均含魚油，在肝臟中沉積的n-3 PUFA量也最高，研究表明魚油能降低合成C20∶4n-6和C18∶2n-6的△-6去飽和酶、延伸酶和△-5去飽和酶的活性[25]，這些酶主要是調(diào)控合成n-6 PUFA。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組飼糧含有豐富的n-6 PUFA，在肝臟中沉積的n-6 PUFA量也高于Ⅰ組。

圖2 飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐肝臟FATP mRNA相對表達(dá)量的影響

3.3 飼糧n-6/n-3 PUFA比值對冬毛期北極狐L-FABP和FATP基因表達(dá)的影響

體外研究表明L-FABP與FATP對長鏈(>C14)脂肪酸具有高度親和性，在脂肪酸攝取及轉(zhuǎn)運(yùn)等方面具有重要調(diào)控作用[26-28]。L-FABP與不飽和脂肪酸具有高度親和性[29]，本試驗(yàn)中Ⅲ組北極狐肝臟L-FABPmRNA相對表達(dá)量最高，可能由于Ⅲ組飼糧不飽和脂肪酸含量相對高于其他組飼糧，北極狐攝入的較高含量的長鏈不飽和脂肪酸經(jīng)腸道消化轉(zhuǎn)運(yùn)至肝臟，促進(jìn)了L-FABP基因的表達(dá)[9]。Ⅰ和Ⅳ組北極狐肝臟FATPmRNA相對表達(dá)量顯著高于Ⅱ和Ⅲ組，說明Ⅰ和Ⅳ組肝臟中FATP基因轉(zhuǎn)運(yùn)脂肪酸的效率高于Ⅱ和Ⅲ組，更有利于機(jī)體對脂肪酸的利用，促進(jìn)北極狐的生長，這可從北極狐的生長性能結(jié)果上得到證實(shí)。近些年，隨著對FABPs和FATPs基因研究的不斷深入，其在北極狐脂肪代謝方面的調(diào)控機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

綜合分析本試驗(yàn)結(jié)果得出，飼糧添加1.50%魚油與12.50%玉米油的混合油脂，即飼糧n-6/n-3 PUFA比值為136.36時，上調(diào)了肝臟中FATP基因的表達(dá)，增加了肝臟長鏈脂肪酸的轉(zhuǎn)運(yùn)及利用效率，促進(jìn)了冬毛期北極狐的生長。

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*Corresponding author, professor, E-mail: tcslgy@126.com

(責(zé)任編輯 菅景穎)

Effects of Dietary n-6/n-3 Polyunsaturated Fatty Acids Ratio on Growth Performance and Related Protein Gene Expression of Liver Fatty Acid Metabolism of Arctic Foxes During the Winter Fur-Growing Period

ZHONG Wei ZHANG Ting LUO Jing YUE Zhigang LIU Xueqing FAN Yanyan SUN Haoran SUN Xuyang LI Guangyu*

(StateKeyLaboratoryofSpecialEconomicAnimalMolecularBiology,InstituteofSpecialAnimalandPlantScience,ChineseAcademyofAgricultureSciences,Changchun130112,China)

This experiment was conducted to study the effects of dietary n-6/n-3 polyunsaturated fatty acids (PUFA) ratio on growth performance, liver fatty acid composition and liver-type fatty acid binding protein (L-FABP) and fatty acid transport protein (FATP) gene expression of Arctic foxes during the winter fur-growing period. Forty-eight 157-day-old male Arctic foxes with the average body weight of (5 658±47) g were randomly divided into 4 groups with 12 replicates per group and 1 fox per replicate, and they were fed experimental diets containing 12.00% fish oil and 2.00% soybean oil (group Ⅰ), 9.38% corn oil and 4.62% soybean oil (group Ⅱ), 12.00% corn oil and 2.00% soybean oil (group Ⅲ), 1.50% fish oil and 12.50% corn oil (group Ⅳ) with the n-6/n-3 PUFA ratios were 3.00, 18.03, 40.83 and 136.36, respectively. The oil composition and proportion of diets among groups were different, but the other ingredients were consistent. The experiment was 7 days for adaption and 40 days for trial period. The results showed as follows: 1) dietary n-6/n-3 PUFA ratio extremely significantly affected average daily gain (ADG), average daily feed intake (ADFI) and the ratio of feed to gain (F/G) of Arctic foxes during the winter fur-growing period (P<0.01). The ADG in groups Ⅰ and Ⅳ was extremely significantly higher than that in groups Ⅱ and Ⅲ (P<0.01), the ADFI in groups Ⅰ, Ⅱ and Ⅳ was extremely significantly higher than that in group Ⅲ (P<0.01), and the F/G in group Ⅳ was extremely significantly lower than that in groups Ⅱ and Ⅲ (P<0.01). 2) Dietary n-6/n-3 PUFA ratio extremely significantly or significantly affected liver monounsaturated fatty acids (MUFA), PUFA, n-6 PUFA and n-3 PUFA contents of Arctic foxes during the winter fur-growing period (P<0.01 orP<0.05), but had no significant difference in liver saturated fatty acids (SFA) content (P>0.05). The liver n-3 PUFA content in groups Ⅰ and Ⅳ was extremely significantly higher than that in groups Ⅱ and Ⅲ (P<0.01), while the liver n-6 PUFA content in groups Ⅱ and Ⅲ was extremely significantly higher than that in groups Ⅰ and Ⅳ (P<0.01). 3) Dietary n-6/n-3 PUFA ratio did not significantly affect liverL-FABPmRNA expression level of Arctic foxes during the winter fur-growing period (P>0.05), but extremely significantly affected liverFATPmRNA expression level (P<0.01). TheFATPmRNA expression level in groups Ⅰ and Ⅳ was extremely significantly higher than that in groups Ⅱ and Ⅲ (P<0.01). In conclusion, when the ratio of n-6/n-3 PUFA is 136.36 (adding mixed oils of 1.50% fish oil+12.50% corn oil in the diets), it raises the expression of liverFATPgene, promotes the transportation and utilization efficiency of fatty acids, and improves the growth of Arctic foxes during the winter fur-growing period.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2017, 29(3)：906-915]

n-6/n-3 PUFA ratio; Arctic fox; liver; fatty acids; liver-type fatty acid binding protein; fatty acid transport protein

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.03.022

2016-08-11

吉林省自然基金科學(xué)項(xiàng)目(20140101033JC)；中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新工程項(xiàng)目

鐘 偉(1980—)，女，吉林永吉人，副研究員，博士研究生，從事特種經(jīng)濟(jì)動物營養(yǎng)代謝研究。E-mail： zhongwei8015@163.com

*通信作者:李光玉，研究員，博士生導(dǎo)師，E-mail： tcslgy@126.com

S816

A

1006-267X(2017)03-0906-10