紫外分光光度法測(cè)定參芪三七膠囊中總皂苷含量

岳展鵬，王賢英

(1.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院，重慶 400014；2.重慶市中藥研究院，重慶 400065)

·檢驗(yàn)檢測(cè)·

紫外分光光度法測(cè)定參芪三七膠囊中總皂苷含量

岳展鵬1，王賢英2

(1.重慶醫(yī)科大學(xué)附屬兒童醫(yī)院，重慶 400014；2.重慶市中藥研究院，重慶 400065)

目的建立測(cè)定參芪三七膠囊中總皂苷含量的紫外分光光度法。方法采用紫外分光光度儀，于542 nm波長(zhǎng)處，以高氯酸顯色法測(cè)定總皂苷含量。結(jié)果總皂苷質(zhì)量濃度在6.87～41.22 g／mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，Y＝0.015 54 X＋0.002 9，r＝0.999 6 (n＝6)，平均回收率為98.32%，RSD為1.08%(n＝9)。結(jié)論該方法簡(jiǎn)單、易操作、重復(fù)性良好，可用于測(cè)定參芪三七膠囊中總皂苷的含量，可用于參芪三七膠囊的質(zhì)量控制。

參芪三七膠囊；總皂苷；含量測(cè)定

參芪三七膠囊是由西洋參、黃芪、三七組方的保健食品，主要功效為增強(qiáng)免疫力。西洋參為五加科植物西洋參的根，具有養(yǎng)陰潤(rùn)肺、清心安神的功效，用于營(yíng)養(yǎng)、滋補(bǔ)、抗疲勞、養(yǎng)胃生津[1－2]。黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根，味甘，性溫，主歸脾肺二經(jīng)，具有補(bǔ)中益氣、健脾益肺、托毒生肌之功效。研究表明，黃芪的主要化學(xué)成分有皂苷類、多糖、黃酮類具有可提高免疫功能、抗輻射、抗癌、抗氧化、舒張血管平滑肌等作用[3]。三七為五加科植物三七的根，具有散瘀止血、消腫止痛之功效，用于改善血液系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)功能，以及滋補(bǔ)強(qiáng)壯、調(diào)節(jié)免疫等[4－6]。西洋參和三七同科、同屬，為親緣關(guān)系，化學(xué)成分相似，種類大體相同，均含有人參皂苷類成分，如人參皂苷(ginsenoside)Rg1，Rg2，Re，Rb1等。西洋參中以人參二醇型皂苷為主，人參皂苷Rb1含量(2.2129%）最高，三七中人參皂苷Rg1（2.632 6%）和人參皂苷Rb1（2.162 6%）含量都很高[6]。為此，本研究中建立以人參皂苷Rb1作為對(duì)照品來(lái)測(cè)定本品總皂苷的含量方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

UV－2006型紫外－可見(jiàn)分光光度計(jì)(日本島津公司)；AB265－S型電子分析天平(瑞士梅特勒公司)；SK250LH型超聲波清洗儀（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）；KW系列恒溫水浴鍋（上海必爾得儀器實(shí)業(yè)有限公司）；LIM－40型低速大容量離心機(jī)(北京醫(yī)用離心機(jī)廠)。

1.2 試藥

試劑：冰醋酸、高氯酸、正丁醇、乙醇、氫氧化鈉、無(wú)水乙醇、香草醛均為分析純；人參皂苷Rb1對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)為110704－201525）。

顯色劑：精密稱取香草醛0.5 g，冰醋酸溶解，移至10 mL容量瓶，并用冰醋酸稀釋至刻度，制得5%香草醛－冰醋酸溶液，臨用新配。

2 方法與結(jié)果[8－12]

2.1 溶液制備

對(duì)照品溶液：精密稱取人參皂苷Rb1對(duì)照品20.61mg，置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，配制成質(zhì)量濃度為2.061 g／L的對(duì)照品溶液。

供試品溶液：取參芪三七膠囊20粒，取囊內(nèi)容物約0.5g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，加水飽和正丁醇50mL，密塞，超聲處理30 min，再完全移至圓底燒瓶中，加水飽和正丁醇50 mL，加熱回流30 min，趁熱過(guò)濾至分液漏斗中，用1%NaOH溶液洗滌2次，每次15 mL，靜置分層，取正丁醇層，揮干溶劑，用甲醇移至100 mL容量瓶，加甲醇至刻度，搖勻；精密吸取10 mL溶液，置25 mL容量瓶，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2.2 測(cè)定波長(zhǎng)選擇

取人參皂苷Rb1對(duì)照品溶液，稀釋成0.206 1 g／L，按標(biāo)準(zhǔn)曲線制備項(xiàng)下方法顯色后，進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描。結(jié)果見(jiàn)圖1，最終選取最大吸收波長(zhǎng)542 nm作為測(cè)定波長(zhǎng)。

圖1 人參皂苷Rb1波長(zhǎng)掃描紫外光譜圖

2.3 測(cè)定方法

精密量取供試品溶液1 mL置具塞試管，平行6份，水浴揮干溶劑，精密加入新鮮配制的5%香草醛－冰醋酸溶液0.2 mL、高氯酸0.8 mL顯色，在60℃水浴中保溫15 min，立即置冰水浴中冷卻5 min，加入冰醋酸5.0 mL，搖勻，用相應(yīng)試劑平行操作，作為空白溶液，按照2015年版《中國(guó)藥典（四部）》紫外－可見(jiàn)分光光度法(附錄ⅤA)于542 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。

對(duì)高校思想政治教育的環(huán)境進(jìn)行系統(tǒng)的分析，不僅僅是表面上的宏觀的環(huán)境，還應(yīng)該深入的分析圍觀的環(huán)境，分析各種要素之間的相互關(guān)系和相互的作用，使其教育功能發(fā)揮到最大。高校思想政治教育是在一定的社會(huì)中進(jìn)行的，因此影響思想政治教育環(huán)境最主要的因素就是社會(huì)環(huán)境。一定的社會(huì)具有一定的經(jīng)濟(jì)、政治、文化制度和環(huán)境。這三個(gè)層面相互作用，形成了思想政治教育環(huán)境的物質(zhì)要素、制度要素和精神要素。由社會(huì)的經(jīng)濟(jì)環(huán)境、政治環(huán)境和文化環(huán)境形成的思想政治教育要素結(jié)構(gòu)，與思想政治教育層次結(jié)構(gòu)相互滲透、相互影響、相互作用，形成了思想政治教育環(huán)境的特征，即多維性、復(fù)雜性、開(kāi)放性。

2.4 方法學(xué)考察

線性關(guān)系考察：精密吸取對(duì)照品溶液20，40，60，80，100，120 μL，置6支具塞試管中，水浴揮干溶液，分別精密加入新鮮配制的5%香草醛－冰醋酸溶液0.2 mL、高氯酸0.8 mL顯色，在60℃水浴中保溫15 min，立即置冰水浴中冷卻5 min，加入冰醋酸5.0 mL，搖勻，用相應(yīng)試劑平行操作，得空白對(duì)照溶液。于542 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，得回歸方程Y＝0.015 54 X＋0.002 9，r＝0.999 6(n＝6)。結(jié)果表明，人參皂苷Rb1質(zhì)量濃度在6.87～41.22 μg／mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn)：依法制備對(duì)照品溶液，于542 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。結(jié)果的RSD為1.52%(n＝6)，表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn)：分別精密稱取6份樣品，每份0.5 g，依法測(cè)定總皂苷含量（以人參皂苷Rb1計(jì)）。結(jié)果的RSD為1.25%(n＝6)，表明方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：依法制備供試品溶液，于542 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。結(jié)果供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。樣品溶液顯色后的穩(wěn)定性考察方法同前，每隔10 min于542 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。顯色后的供試品溶液在90 min內(nèi)基本穩(wěn)定，結(jié)果的RSD為1.93%(n＝6)。

加樣回收試驗(yàn)：精密稱取重復(fù)性試驗(yàn)項(xiàng)下樣品（含量1.63%）9份，每份0.25 g，置100 mL置具塞錐形瓶中，在每3份樣品中分別加入1.0，2.0，3.0 mL人參皂苷Rb1對(duì)照品溶液(2.061 g／L)，依法于542 nm波長(zhǎng)處進(jìn)行測(cè)定，測(cè)得總皂苷含量(以人參皂苷Rb1計(jì))。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 總皂苷加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）

2.5 樣品含量測(cè)定

按擬定方法測(cè)定3批參芪三七膠囊樣品中總皂苷的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 參芪三七膠囊總皂苷含量測(cè)定結(jié)果（%）

3 討論

3.1 比色法選擇

曾比較了香草醛－冰醋酸－高氯酸和香草醛－乙醇－高氯酸比色法，結(jié)果顯示，香草醛－乙醇－高氯酸法顯色過(guò)快，難以控制；香草醛－冰醋酸－高氯酸比色法顯色明顯，無(wú)干擾，顯色穩(wěn)定。故采用香草醛－冰醋酸－高氯酸比色法進(jìn)行測(cè)定。

3.2 對(duì)照品選擇

比較了人參皂苷Re、人參皂苷Rb1為對(duì)照品測(cè)定樣品中總皂苷的含量，結(jié)果以人參皂苷Rb1為對(duì)照品測(cè)定樣品中總皂苷的含量明顯高于以人參皂苷Re為對(duì)照品測(cè)定樣品中總皂苷的含量。

3.3 方法優(yōu)勢(shì)

紫外分光光度法作為一種常用的分析方法，在中藥質(zhì)量分析中大量應(yīng)用[13－15]，具有快速、簡(jiǎn)單、良好的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性及結(jié)果準(zhǔn)確[16－17]。本研究中采用紫外－可見(jiàn)分光光度法測(cè)定參芪三七膠囊總皂苷的含量，精密度、重復(fù)性和準(zhǔn)確度好，可作為其質(zhì)量控制方法。

[1]王蕾，王英平，許世全，等.西洋參化學(xué)成分及藥理活性研究進(jìn)展[J].特產(chǎn)研究，2007，29(3):73－77.

[2]李冀，付雪艷，郝嫻.西洋參多糖類物質(zhì)研究進(jìn)展[J].中醫(yī)藥信息，2006，23(4):14－15.

[3]孫政華，邵晶，郭玫.黃芪化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J].中醫(yī)臨床研究，2015，7(25):22－25.

[4]鮑建才，劉剛，叢登立，等.三七的化學(xué)成分研究進(jìn)展[J].中成藥，2006，28(2):246－253.

[5]曹越，趙赤.淺析中藥三七的化學(xué)成分和藥理作用[J].中西醫(yī)結(jié)合心血管病雜志（電子版），2014，20(8):150.

[6]鐘曉鳳.三七的藥理作用及其臨床應(yīng)用研究[J].中醫(yī)臨床研究，2015，7(6):116－117.

[7]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：1 136.

[8]萬(wàn)燕晴，李震宇，李科，等.蒙古黃芪藥材多指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)研究[J].山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，46(3):234－239.

[9]李文仕.分光光度法測(cè)定三七傷藥膠囊中三七總皂苷的含量[J].黑龍江醫(yī)藥，2010，23(1)：6－7.

[10]郭子杰，黃儒強(qiáng).三七中總皂苷的含量測(cè)定[J].中國(guó)藥業(yè)，2007，16(7):13－14.

[11]曲正義，劉宏群，趙景輝，等.吉林省不同產(chǎn)地西洋參中人參總皂苷含量的測(cè)定[J].天津藥學(xué)，2012，24(3):10－11.

[12]吳斌秀，賴招蓮.紫外分光光度法測(cè)定西洋參含片中人參總皂苷[J].海峽藥學(xué)，2007，19(8):68－70.

[13]任亞碩，吳德玲，張偉，等.紫外分光光度法測(cè)定醉魚(yú)草果實(shí)中總?cè)坪縖J].安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，31(5): 78－80.

[14]徐東升，高言明，楊春，等.鉤藤總黃酮含量測(cè)定研究[J].微量元素與健康研究，2015，32(1)：29－30.

[15]彭敏樺，張敏敏，沈雅婕，等.崗梅總皂苷含量測(cè)定方法建立及不同部位含量比較研究[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2015，21(3)：29－30.

[16]王雷，楊新建，寇欣.紫外分光光度法在中藥分析中的應(yīng)用進(jìn)展[J].天津藥學(xué)，2003，15(5):62－64.

[17]李蘭英，鄭國(guó)金.紫外－可見(jiàn)分光光度法在藥物分析中的應(yīng)用[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2013，11(30):295－297.

Content Determination of Total Saponins in Shenqi Sanqi Capsules by Ultraviolet Speetrophotometry

Yue Zhanpeng1,Wang Xianying2
(1.Children′s Hospital of Chongqing Medical University,Chongqing,China400014; 2.Chongqing Academy of Chinese Medicine,Chongqing,China400065)

Objective To determine the content of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules.M ethodsThe content of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules was determined by an ultraviolet－visible speetrophotometer at 542 nm with perchloric acid as the ehromogenie reagent.ResultsThe total saponins was linear in the range of 6.87－41.22 μg／mL,Y＝0.015 54 X＋0.002 9,r＝0.999 6(n＝6), and the average recovery rate was 98.32%,RSD＝1.08%(n＝9).ConclusionThe determination method of total saponins is simple, fast,accurate with high sensitivity as well as good repeatability,which can be applied for qualitative discrimination of total saponins in Shenqi Sanqi Capsules.

Shenqi Sanqi Capsules;total saponins;content determination

R284.1；R286.0

A

1006－4931(2017)01－0022－03

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.01.007

2016－10－14)

岳展鵬（1977－），男，藥師，主要從事門(mén)診藥房調(diào)劑工作，（電子信箱）415995220＠qq.com。

王賢英（1973－），女，副主任中藥師，主要從事藥品開(kāi)發(fā)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，（電子信箱）wangxianying＿315＠163.com。