結(jié)直腸癌患者手術(shù)前后血清TGF-β1下降水平與預(yù)后的關(guān)系

王本軍，韓瑋瑋，解廣東，白克運

(1山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，濟(jì)南250014；2山東中醫(yī)藥大學(xué))

結(jié)直腸癌患者手術(shù)前后血清TGF-β1下降水平與預(yù)后的關(guān)系

王本軍1，韓瑋瑋1，解廣東2，白克運1

(1山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，濟(jì)南250014；2山東中醫(yī)藥大學(xué))

目的分析結(jié)直腸癌手術(shù)前后血清轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)下降水平與預(yù)后的關(guān)系。方法選擇TNM 分期為Ⅱ～Ⅲ期的結(jié)直腸癌患者114例，術(shù)前未行新輔助化療或放療，均行結(jié)直腸癌根治切除術(shù)，術(shù)后采用FOLFOX4方案化療12個周期；分別于術(shù)前及術(shù)后第1周取空腹靜脈血，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清TGF-β1；術(shù)后均至少隨訪3年，觀察復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況， 統(tǒng)計無瘤生存期。結(jié)果結(jié)直腸癌患者術(shù)后較術(shù)前血清TGF-β1水平降低(P<0.05)，血清TGF-β1下降率為37%±17%、中位數(shù)為39%。114例患者中，術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移38例，無瘤生存期(29.17±10.81)個月，無瘤生存率為66.7%(76/114)。其中，血清TGF-β1下降率≥39%者中發(fā)生復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移者少于下降率<39%者(P<0.05)。Pearson相關(guān)分析顯示，血清TGF-β1下降水平與結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移患者3年無瘤生存期呈正相關(guān)(r=0.414，P=0.01)。血清TGF-β1下降率≥39%者無瘤生存率為78.9%(45/57)，高于<39%者的54.4%(31/57)，P<0.05。結(jié)論結(jié)直腸癌患者術(shù)后第1周血清TGF-β1水平較術(shù)前顯著降低，其下降程度較大者預(yù)后較好，可為結(jié)直腸癌患者預(yù)后判斷提供參考。

結(jié)直腸癌；轉(zhuǎn)化生長因子 1；疾病預(yù)后；無瘤生存期

轉(zhuǎn)化生長因子 1(TGF-β1)是一種多功能的多肽類生長因子，對結(jié)直腸癌的發(fā)生及發(fā)展具有雙向作用。在正常組織及癌變早期，TGF-β1誘導(dǎo)上皮細(xì)胞凋亡而發(fā)揮抑制癌變的作用；隨著腫瘤的進(jìn)展，腫瘤細(xì)胞對TGF-β1誘導(dǎo)的抑制信號失去敏感性，TGF-β1逐漸發(fā)揮抑制免疫應(yīng)答，促進(jìn)腫瘤血管及腫瘤基質(zhì)形成、侵襲、轉(zhuǎn)移等多種生物活性[1]。TGF-β1在評價結(jié)直腸癌患者術(shù)后預(yù)后方面具有一定的敏感性和特異性[2]，但目前研究主要集中在測定TGF-β1濃度高低來判斷預(yù)后，而動態(tài)監(jiān)測其下降水平評估結(jié)直腸癌手術(shù)患者預(yù)后的報道較少。因此，本研究觀察了結(jié)直腸癌患者術(shù)前及術(shù)后1周時血清TGF-β1下降水平與預(yù)后的關(guān)系。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集2012年8月～2014年5月在山東省中醫(yī)院肛腸科行結(jié)直腸癌根治切除術(shù)治療，且術(shù)后按AJCC7.0標(biāo)準(zhǔn) TNM 分期為Ⅱ～Ⅲ期，術(shù)前未行新輔助化療或放療且隨訪資料完整者114例。患者中男80例,女34例；年齡32～73歲，平均51.7歲； TNM分期Ⅱ期52例，Ⅲ期62例。

1.2 治療方法 患者均由本院同一組醫(yī)生行結(jié)直腸癌根治切除術(shù)，手術(shù)過程順利，術(shù)后均行常規(guī)抗感染治療及營養(yǎng)支持；術(shù)后第14天開始行常規(guī)化療，均采用FOLFOX4方案，14 d為1個周期，共化療12個周期。

1.3 血清TGF-β1檢測方法 分別于術(shù)前及術(shù)后第1周抽取清晨空腹外周靜脈血2～5 mL，采用EDTA-Na2抗凝，3 000 r/min離心5 min，取血清-80 ℃冰箱保存待測。采用 ELISA法檢測血清TGF-β1，試劑盒由上海博蘊生物科技有限公司提供，操作嚴(yán)格按試劑盒說明進(jìn)行。血清TGF-β1下降率=(術(shù)前TGF-β1-術(shù)后第1周TGF-β1)/術(shù)前TGF-β1×100%。

1.4 預(yù)后觀察方法 術(shù)后均至少隨訪3年或出現(xiàn)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移時截止，隨訪方式包括電話、門診及返院復(fù)診。如臨床懷疑腫瘤復(fù)發(fā)，復(fù)查血清 CEA、CA19-9水平升高，行電子結(jié)腸鏡檢查、胸腹盆腔CT掃描，必要時可行PET-CT檢查來判定結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)。無瘤生存期定義為手術(shù)日至腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或者任何原因引起死亡的時間。

2 結(jié)果

2.1 血清TGF-β1檢測結(jié)果 本組患者手術(shù)前后血清TGF-β1水平分為(1.34±0.16)、(0.85±0.27)ng/mL，術(shù)后較術(shù)前血清TGF-β1水平降低(P<0.05)，血清TGF-β1下降率為37%±17% 、中位數(shù)為39%。

2.2 預(yù)后隨訪結(jié)果 患者均獲得有效隨訪，無失訪病例。114例患者中，術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移38例，無瘤生存期(29.17±10.81)個月，無瘤生存率為66.7%(76/114)。其中，血清TGF-β1下降率≥39%的57例患者中復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移12例，<39%的57例患者中復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移26例，兩者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移情況比較P<0.05。

2.3 血清TGF-β1下降水平與結(jié)直腸癌患者預(yù)后的關(guān)系 Pearson相關(guān)分析顯示，血清TGF-β1下降水平與結(jié)直腸癌復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移患者患者3年無瘤生存期呈正相關(guān)(r=0.414，P=0.01)。血清TGF-β1下降率≥39%者無瘤生存率為78.9%(45/57)，高于<39%者的54.4%(31/57)，P<0.05。

3 討論

據(jù)統(tǒng)計，我國結(jié)直腸癌發(fā)病率居惡性腫瘤第3位、病死率居第5位，每年新發(fā)已超過 17 萬例、死亡近10萬例[4]。并且，隨著社會的發(fā)展，結(jié)直腸癌的發(fā)病率仍呈明顯上升趨勢[5]；手術(shù)切除、放療、化療是治療結(jié)直腸癌的主要手段，但其復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移而導(dǎo)致的死亡仍居高不下。如何判斷患者的預(yù)后，提高患者生理功能和生活質(zhì)量，提高5年生存率，成為外科治療的最終目標(biāo)[6]。

TGF-β1是一種具有潛力的靶向調(diào)控多效分子，由112個氨基酸構(gòu)成，是TGF中含量最高、表達(dá)最豐富的亞型，也是目前已知的與腫瘤關(guān)系非常密切且具有代表性的細(xì)胞因子，廣泛參與細(xì)胞的分化、增殖、形態(tài)改變、黏附、轉(zhuǎn)移、細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生及凋亡等[7]。在結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展中，TGF-β1表現(xiàn)出多種生物學(xué)效應(yīng)。在癌癥發(fā)生的早期，TGF-β1轉(zhuǎn)錄后可抑制癌基因C-myc 的表達(dá)，使細(xì)胞分裂間期停滯于DNA合成前期，從而發(fā)揮生長抑制、促進(jìn)凋亡、保持基因穩(wěn)定等抑制癌細(xì)胞因子的作用；隨著病情的發(fā)展，癌細(xì)胞對TGF-β1抑制作用失去敏感性，TGF-β1的異常表達(dá)大量增加，通過與血管內(nèi)皮生長因子的協(xié)同作用，促進(jìn)腫瘤血管生成，進(jìn)而加速癌細(xì)胞的浸潤、轉(zhuǎn)移，并發(fā)揮免疫抑制的作用。這種雙向作用亦可見于肺癌、乳腺癌、前列腺癌等惡性腫瘤[8～11]。

在結(jié)直腸癌術(shù)后，因高度表達(dá)TGF-β1蛋白的腫瘤組織被切除，患者血清TGF-β1水平均有不同程度下降。臨床研究[12]證實，患者術(shù)后體內(nèi)TGF-β1水平與其預(yù)后密切相關(guān)。例如，黃永紅等[13]觀察50例結(jié)直腸癌患者和25例健康體檢者外周血TGF-β1水平，發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌患者術(shù)前外周血TGF-β1水平明顯高于術(shù)后以及健康對照者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；并且，外周血TGF-β1水平與腫瘤大小呈正相關(guān)，并隨腫瘤分期的進(jìn)展而升高。故其認(rèn)為TGF-β1表達(dá)與腫瘤的惡性程度相關(guān)，可用于評價結(jié)直腸癌患者的預(yù)后，又可為基于抗TGF-β1的靶向免疫治療提供臨床依據(jù)，這與本研究的結(jié)果類似。王夢潔等[14]觀察了結(jié)直腸癌術(shù)后發(fā)生轉(zhuǎn)移者44例、未發(fā)生轉(zhuǎn)移者59例，術(shù)后轉(zhuǎn)移者血清TGF-β1水平明顯高于未轉(zhuǎn)移者，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；其認(rèn)為TGF-β1與結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展具有顯著的相關(guān)性，且在腫瘤的轉(zhuǎn)移中可能起到關(guān)鍵作用。此外，國外相關(guān)研究報道，切除的腫瘤組織中TGF-β1的表達(dá)水平可作為獨立因子預(yù)測結(jié)直腸癌的復(fù)發(fā)；通過長期的隨訪發(fā)現(xiàn)，只有中高水平表達(dá)TGF-β1的結(jié)直腸癌患者出現(xiàn)了腫瘤的復(fù)發(fā)，所有低水平表達(dá)者獲得了長期無瘤生存[9]。亦有相關(guān)文獻(xiàn)[15]報道，結(jié)直腸癌根治性手術(shù)切除的患者，術(shù)后切除的腫瘤組織中TGF-β1高水平可用于預(yù)測肝轉(zhuǎn)移。因此，TGF-β1可以作為結(jié)直腸癌術(shù)后監(jiān)測預(yù)后的一個重要參考指標(biāo)。

本研究引入TGF-β1下降率的概念，可以降低個體差異對血清TGF-β1值的影響，并以114例結(jié)直腸癌術(shù)后患者的TGF-β1下降率的中位數(shù)為界進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，所有患者行結(jié)腸癌或直腸癌根治術(shù)后血清TGF-β1水平皆有不同程度地下降，術(shù)后高下降率者復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移率明顯低于低下降率者，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移患者血清TGF-β1下降率與無瘤生存時間呈顯著正相關(guān)，血清TGF-β1下降率越高，3年內(nèi)無瘤生存期越長；從Kaplan-Meier生存曲線也顯示，TGF-β1高下降率者的3年無瘤生存率顯著高于低下降率者。分析其產(chǎn)生機(jī)制可能是:①結(jié)直腸癌患者術(shù)后TGF-β1水平高，對機(jī)體免疫系統(tǒng)抑制作用強(qiáng)，則癌細(xì)胞易逃脫機(jī)體的免疫監(jiān)視而擴(kuò)散轉(zhuǎn)移，促進(jìn)了腫瘤的發(fā)生與發(fā)展，反之則抑制了腫瘤的發(fā)生與發(fā)展。②高水平的TGF-β1導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)過度，促使瘤體的血管生長加速，血供增加；并且，其促進(jìn)了細(xì)胞外基質(zhì)的合成，減少其降解，從而改善了癌細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)錄的局部環(huán)境，增強(qiáng)了其侵襲能力，引起腫瘤的快速生長。因此，TGF-β1下降水平對結(jié)直腸癌術(shù)后患者的臨床治療、預(yù)后判斷有重要參考價值；下降水平較高者復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移率低，無瘤生存期長，患者預(yù)后越好。但是，本研究樣本量相對較少，并且未對結(jié)直腸癌患者其他指標(biāo)的相關(guān)性深入研究；今后可繼續(xù)增加相關(guān)指標(biāo)，進(jìn)行大樣本量的多中心臨床研究。

總之，監(jiān)測手術(shù)治療前后結(jié)直腸癌患者血清TGF-β1下降水平對了解病情、觀察手術(shù)療效和判斷預(yù)后均具有實踐指導(dǎo)意義，并可為個體化靶向治療提供可信的依據(jù)，患者術(shù)后應(yīng)用化療、放療可以TGF-β1為特異性靶點，聯(lián)合新型靶向藥物阻斷其生物學(xué)功能，從分子水平逆轉(zhuǎn)腫瘤的侵襲，從而達(dá)到治療的目的。

[1] Liu FL, Mo EP, Yang L, et al. Autophagy is involved in TGF-β1-induced protective mechanisms and formation of cancer-associated fibroblasts phenotype in tumor microenvironment[J]. Oncotarget, 2016,7(4):4122-4141.

[2] Daniel R, Jennifer A, Jessica Bauer, et al. TGF-β:duality of function between tumor prevention and carcinogenesis[J]. J Natl Cancer Inst, 2014,106(2):369.

[3] Zhou XR, Mao Y, Zhu JJ, et al. TGF-β1promotes colorectal cancer immune escape by elevating B7-H3 and B7-H4 via the miR-155/miR-143 axis[J]. Oncotarget, 2016,7(41):67196-67211.

[4] 王寧,孫婷婷,鄭榮壽,等.中國2009年結(jié)直腸癌發(fā)病和死亡資料分析[J].中國腫瘤,2013,22(7):515-520.

[5] Robert E, Paul F, Joel L, et al. Colorectal-cancer incidence and mortality with screening flexible sigmoidoscopy[J]. N Engl J Med, 2012,366(25):2345-2357.

[6] 李智,張雅玲,汪曉東,等.NRS-2002評估術(shù)前不同營養(yǎng)狀態(tài)對結(jié)直腸癌患者生存質(zhì)量的影響[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2014,21(1):41-45.

[7] Mitchell S. Targeting the TGF-β1pathway to prevent normal tissue injury after cancer therapy[J]. Oncologist, 2010,15(4):350-359.

[8] Grandclement C, Pallandre JR, Valmary DS, et al. Neuropilin-2 expression promotes TGF-β1-mediated epithelial to mesenchymal transition in colorectal cancer cells[J]. PLoS One, 2011,6(7):e20444.

[9] Zhu J, Chen XJ, Liao ZC, et al. TGF-β1protein high expression predicts poor prognosis in colorectal cancer patients[J] .Int J Clin Exp Pathol, 2015,8(1):702-710.

[10] Li LM, Qi LS, Liang ZJ, et al. Transforming growth factor-β1induces EMT by the transactivation of epidermal growth factor signaling through HA/CD44 in lung and breast cancer cells[J]. Int J Mol Med, 2015,36(1):113-122.

[11] Zhang Q, Chen L, Helfand BT, et al. TGF-β regulates DNA methyltransferase expression in prostate cancer, correlates with aggressive capabilities, and predicts disease recurrence[J]. PLoS One, 2011,6(9):e25168.

[12] Xu YF, Pasche B. TGF-beta signaling alterations and susceptibility to colorectal cancer[J]. Hum Mol Genet, 2007,16(1):14-20.

[13] 黃永紅,曹云飛,高楓,等.外周血及大腸癌組織 TGF-β1含量檢測及臨床意義[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2014,34(12):1790-1793．

[14] 王夢潔,孫蘇平,錢科卿,等.結(jié)直腸癌患者血清IL-17和TGF-β濃度及其相關(guān)性的初步研究[J].中國腫瘤臨床,2013,40(13)：767-778．

[15] 劉賢偉,曹俊達(dá),熊功友,等.TGF-β1、Smad7與樹突狀細(xì)胞在結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移中作用的初步研究[J].中國普通外科雜志,2015,24(1):63-69.

為便于文獻(xiàn)的統(tǒng)計和期刊評價，確定文獻(xiàn)的檢索范圍，提高檢索結(jié)果的適用性，每一篇文章或資料應(yīng)根據(jù)其內(nèi)容性質(zhì)標(biāo)識一個文獻(xiàn)標(biāo)志碼。文獻(xiàn)標(biāo)志碼共設(shè)置以下五種：

A：基礎(chǔ)性理論與應(yīng)用研究(應(yīng)具有創(chuàng)新性研究成果)。

B：應(yīng)用性技術(shù)成果報告(科技)、理論學(xué)習(xí)與社會實踐扎記(社科)。

C：業(yè)務(wù)指導(dǎo)與技術(shù)管理性文章(包括領(lǐng)導(dǎo)講話、政策性評論、標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)規(guī)范等)。

D：一般動態(tài)性信息(通訊、報道、會議活動、專訪等)。

E：文件、資料(包括歷史資料、統(tǒng)計資料、機(jī)構(gòu)、人物、書刊、知識介紹等)。

不屬于上述各類的文章以及文摘、零訊、補白、廣告、啟事等不加文獻(xiàn)標(biāo)志碼。

中文文章的文獻(xiàn)標(biāo)志碼以“文獻(xiàn)標(biāo)志碼：”作為標(biāo)志(如：文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A)。

英文文章的文獻(xiàn)標(biāo)志碼以“Document code:”作為標(biāo)志。

摘自《中國學(xué)術(shù)期刊(光盤版)檢索與評價數(shù)據(jù)規(guī)范》(修訂版CAJ-CD B/T 1-2006)

10.3969/j.issn.1002-266X.2017.34.016

R735.3

B

1002-266X(2017)34-0050-03

2017-03-12)

的標(biāo)識

山東省自然科學(xué)基金資助項目(ZR2013HM43)；山東省中醫(yī)藥科技發(fā)展計劃項目(2013ZDZK-029)。

解廣東(E-mail： guangdong0537@163.com)

·作者·編者·讀者·