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    藏藥柳茶的藥用功效研究進(jìn)展*

    2017-04-04 10:50:44潘雅婧秦靈靈吳麗麗宋紫臨秦田雨劉銅華
    關(guān)鍵詞:小鼠

    潘雅婧,秦靈靈,吳麗麗,孫 文,宋紫臨,秦田雨,劉銅華,2**

    (1.北京中醫(yī)藥大學(xué)教育部中醫(yī)養(yǎng)生學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 北京 100029;2.西藏藏醫(yī)學(xué)院 拉薩 850000)

    柳茶為種子植物薔薇科鮮卑花屬植物窄葉鮮卑花的一種(Sibiraea angustata(Rehd.)Hand.-Mazz.),主要分布于我國(guó)青海南部、四川西部、甘肅東南部和云南西北部及西藏等地,生長(zhǎng)于海拔3000-4000米的山坡灌叢、山谷砂石灘、河邊路旁等[1-4]。柳茶是藏族民間常用藥物之一,富含多種三萜類化合物、有機(jī)酸、酯類和烷烴類物質(zhì),如:齊墩果酸、熊果酸、羽扇豆酸、羽扇豆醇,阿魏酸、甲基阿魏酸、異阿魏酸、香草酸、咖啡酸、鮮卑花酯,E-羅勒烯酮、芳樟醇、胡蘿卜苷、金絲桃苷、蕓香苷、槲皮素、兒茶素以及柳茶多糖(核糖、葡萄糖、半乳糖等)多種活性成分[5-8]?,F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)其能調(diào)節(jié)糖脂代謝[9-17]、抗氧化[18-20]、調(diào)節(jié)免疫[21-24]及保肝[25-29]等。本文對(duì)近十幾年來文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)和實(shí)驗(yàn)研究中柳茶的藥用功效加以綜述。

    1 調(diào)節(jié)糖代謝

    糖尿病是一組以慢性高血糖為特征的代謝性疾病,其特點(diǎn)是胰島素的絕對(duì)或相對(duì)不足,以及組織對(duì)胰島素的抵抗,導(dǎo)致血糖水平的升高。糖尿病動(dòng)物模型是研究糖尿病的一個(gè)重要工具,其中四氧嘧啶(Allox?an,ALX)誘導(dǎo)糖尿病動(dòng)物模型較為常用,可使胰島β細(xì)胞不可逆性壞死,導(dǎo)致胰島素分泌障礙,血糖水平上升,且造模后血糖濃度穩(wěn)定,是一種比較理想的糖尿病模型[9]。衛(wèi)陽飛等[10]給糖尿病模型小鼠灌胃柳茶粗提物2周,發(fā)現(xiàn)4 g?kg-1?d和7 g?kg-1?d的柳茶水提物均能降低ALX誘導(dǎo)的糖尿病小鼠的血糖、減少OGTT曲線下面積、提高糖耐量,并一定程度上增加胰島數(shù)目,改善胰島形態(tài)。王佳冰等[11]及黨莉[12]以高脂飼料喂養(yǎng)糖尿病肥胖模型大鼠,給予柳茶水提物灌胃8周后,大鼠的體重、空腹血糖、血胰島素水平均有所下降,推論柳茶有改善胰島素抵抗的作用。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)[13-15]從柳茶中提取的活性成分如齊墩果酸、熊果酸、阿魏酸等能夠通過改善胰島素抵抗,通過改善脂肪、骨骼肌等的IRS-1/PI3K/AKT,增加胰島素信號(hào)傳導(dǎo),抑制糖異生等多靶點(diǎn)調(diào)節(jié)糖代謝,降低血糖。

    2 調(diào)節(jié)脂代謝及體重

    脂肪組織是人體重要的內(nèi)分泌器官之一,脂質(zhì)代謝參與多種生理病理狀態(tài),如肥胖、非酒精性脂肪肝、糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化和心血管疾病等。早在20世紀(jì)末期就有研究發(fā)現(xiàn)[16]柳茶能使高血脂小鼠脂肪細(xì)胞縮小、變性,降低其血清TG、TC、β蛋白和FFA水平,脂肪動(dòng)員加快,推論柳茶降脂機(jī)制與安妥明相似。之后多位學(xué)者[17,18]發(fā)現(xiàn)柳茶提取物能使肥胖大鼠TC、TG水平降低,HDL水平增高,證實(shí)柳茶具有降低血脂的作用;能使大鼠體重及Lee's指數(shù)下降、脂聯(lián)素升高、PPARα表達(dá)增高,認(rèn)為柳茶可通過脂聯(lián)素過氧化物酶體增殖物激活受體(Peroxisome Proliferator Activated Receptor,PPAR)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路干預(yù)脂肪代謝。夏苗等[19]通過給肥胖大鼠灌胃柳茶提取物,發(fā)現(xiàn)2.1 g?kg-1?d的柳茶水提物能夠升高脂肪組織AdipoR2、AMPKα2、PPARγ基因表達(dá)以及AMPK蛋白表達(dá),縮小脂肪細(xì)胞直徑,推斷柳茶的減肥作用可能是通過脂聯(lián)素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑實(shí)現(xiàn)的。此外,體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)[20]也發(fā)現(xiàn)柳茶水提物能抑制脂肪分化關(guān)鍵調(diào)控蛋白酶C/EBPβ,PPARγ,AdipoR2和GLUT4等的表達(dá),使3T3-L1細(xì)胞停滯在細(xì)胞周期的G1-S過渡期,從另一層面證實(shí)了柳茶對(duì)脂代謝的調(diào)節(jié)作用。柳茶中的活性成分齊墩果酸、阿魏酸等能夠減輕糖尿病模型鼠的脂肪重量,并可降低血清TG、TC、LDL-C和FFA,升高HDL-C,降低肝臟脂質(zhì)沉積,發(fā)揮其調(diào)節(jié)脂代謝的作用[14,15]。

    3 抗氧化

    氧化應(yīng)激是導(dǎo)致包括神經(jīng)退行性疾病和心血管疾病在內(nèi)的多種疾病發(fā)生發(fā)展的重要因素之一,超氧化物歧化酶(SuperoxideDismutase,SOD)能夠清除自由基,維持機(jī)體氧化動(dòng)態(tài)平衡;谷胱甘肽過氧化物酶(GlutathionePeroxidasem,GSH-Px)能清除過氧化物化謝產(chǎn)物,阻斷脂質(zhì)過氧化,很多植物藥中富含的GSHPx、SOD具有強(qiáng)的抗氧化作用[21]。柳茶的活性成分如阿魏酸能使糖尿病模型大鼠的脂質(zhì)過氧化水平降低,胰腺中SOD、GSH-Px活性增加,改變機(jī)體抗氧化能力;齊墩果酸、咖啡酸等能夠抑制NO、PGE2的產(chǎn)生和NF-κB的表達(dá),激活Nrf2,并明顯降低MafK介導(dǎo)的p65乙?;M(jìn)程,上調(diào)機(jī)體抗氧化能力,減少氧化應(yīng)激[22]。劉昕等[23]給小鼠灌胃柳茶提取物2周后,發(fā)現(xiàn)小鼠血中SSOD活性明顯升高,GSH-Px活性增加,丙二酸(Malonic Acid,MDA)MDA含量顯著降低,脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的能力明顯減弱。研究學(xué)者[24]從體外實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)柳茶抗氧化能力,發(fā)現(xiàn)0.80 mg?mL-1柳茶葉提取液與0.02 mg?mL-1抗壞血酸對(duì)DPPH自由基清除能力相當(dāng)。

    4 調(diào)節(jié)免疫

    胸腺是T細(xì)胞發(fā)育、成熟的場(chǎng)所,T細(xì)胞在胸腺獲得MHC限制性的抗原識(shí)別能力和對(duì)自身抗原的耐受性,并能分泌胸腺素、胸腺生成素、胸腺刺激素等重要激素;脾臟是人體最大的淋巴器官,能合成補(bǔ)體等多種生物活性物質(zhì),也是免疫細(xì)胞定居的場(chǎng)所、免疫應(yīng)答的發(fā)生場(chǎng)所[25]。巨噬細(xì)胞能吞噬殺傷病原微生物,清除衰老和死亡細(xì)胞,分泌細(xì)胞因子及補(bǔ)體等,介導(dǎo)炎癥反應(yīng),在機(jī)體特異性免疫中發(fā)揮重要作用,在機(jī)體免疫穩(wěn)態(tài)的維持方面起重要作用[26]。劉昕等[27]發(fā)現(xiàn)柳茶水提物能使小鼠脾重和脾臟指數(shù)增加,光鏡下顯示柳茶組小鼠胸腺皮質(zhì)增厚、淋巴細(xì)胞多,脾小體增大,胸腺和脾臟內(nèi)生發(fā)中心活躍、細(xì)胞代謝旺盛,同時(shí)能增加小鼠抗綿羊紅細(xì)胞抗體水平(抗體凝集效價(jià)和HC50均顯著增高),促使PHA誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞向淋巴母細(xì)胞轉(zhuǎn)化;提高腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能,認(rèn)為柳茶具有很好的提高體液免疫、細(xì)胞免疫的功效。段博文等[28]給環(huán)磷酰胺制備免疫功能低下模型小鼠灌胃柳茶多糖10天,發(fā)現(xiàn)柳茶多糖能夠提高小鼠碳粒廓清指數(shù)K和吞噬指數(shù)α,促進(jìn)小鼠非特異性免疫功能;5 g?kg-1?d和10 g?kg-1?d的炮制柳茶多糖均能對(duì)抗環(huán)磷酰胺引起的脾臟、胸腺萎縮,增強(qiáng)小鼠體液免疫和細(xì)胞免疫功能。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)[29,30],柳茶的主要活性成分齊墩果酸以及熊果酸能夠高表達(dá)IFN-γ和TNF-α,提高結(jié)核菌素感染的巨噬細(xì)胞株的免疫力;促進(jìn)Th2分泌IL-5和IL-13來活化Th2-GATA-3通路,抑制哮喘模型BALB/c小鼠氣道高反應(yīng)性和氣道炎癥,發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。

    5 保肝作用

    非酒精性肝?。∟on-Alcoholic Fatty Liver Disease,NAFLD)全球患病率約達(dá)25%,是慢性肝病的主要原因之一,以肝脂肪堆積為主要特點(diǎn),與肥胖、胰島素抵抗、高脂血癥、代謝綜合征等密切相關(guān)[31]。柳茶水提浸膏[32]能降低高脂飼料喂養(yǎng)的非酒精性脂肪肝大鼠ALT、AST、TC、TG水平,上調(diào)脂肪代謝關(guān)鍵酶PPARα、ACOmRNA水平,促進(jìn)PPARα蛋白合成,增強(qiáng)脂肪酸氧化,改善肝功能;光鏡下觀察組織切片顯示柳茶灌胃組大鼠肝細(xì)胞內(nèi)脂滴變小或消失,無炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及細(xì)胞壞死,胞質(zhì)疏松,肝竇增寬,證實(shí)柳茶水提物明顯減輕肝臟損害。柳茶水提物[33]還能上調(diào)肝臟抗氧化酶CAT和GSH-Px2基因表達(dá),增強(qiáng)其抗脂質(zhì)過氧化能力,發(fā)揮保肝作用。同時(shí),柳茶水提物[34]使肝臟LCAD?mRNA、CYP4A1mRNA表達(dá)升高,增強(qiáng)線粒體脂肪酸氧化過程,證明柳茶促進(jìn)了肝臟脂肪β氧化和ω氧化,能有效減少肝細(xì)胞中脂肪堆積。此外,武燕等[35]給異煙肼(INH)誘發(fā)的肝損傷模型大鼠灌胃柳茶提取物,結(jié)果顯示1.5-2.0 g·kg-1·d的柳茶提取物能使大鼠的ALT、AST、MDA含量降低,SOD和GSH-Px含量升高,使CYP2E1酶活性明顯下降,說明柳茶對(duì)INH引起的肝損傷有較強(qiáng)的保護(hù)作用,推論其保肝作用可能與清除自由基、抑制脂質(zhì)過氧化有關(guān)。而齊墩果酸及其衍生物,有降低肝損害模型動(dòng)物轉(zhuǎn)氨酶水平、減輕肝細(xì)胞炎癥和抑制纖維化,促進(jìn)肝細(xì)胞再生的作用[36],其保肝作用確切,已制備成齊墩果酸片的成藥上市,在臨床中廣泛用于急性黃疸型和慢性中毒型肝炎的輔助治療。

    6 抗腫瘤

    藏藥柳茶水提物[37]能使體外培養(yǎng)的K562腫瘤細(xì)胞軟瓊脂集落形成能力下降,破壞腫瘤細(xì)胞線粒體和核的結(jié)構(gòu),抑制K562腫瘤細(xì)胞體外生長(zhǎng)。柳茶提取物[38]對(duì)小鼠移植性腫瘤S180的體內(nèi)生長(zhǎng)有明顯的抑制作用:一定程度誘發(fā)腫瘤組織壞死,促進(jìn)機(jī)體脾淋巴細(xì)胞分泌IL-2和TNF-α、提高機(jī)體腫瘤免疫能力,下調(diào)腫瘤組織mtP53基因和Bcl-2基因的表達(dá)、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。同時(shí),實(shí)驗(yàn)證實(shí)[39]柳茶水提物能劑量依賴性、時(shí)效依賴性地抑制人胃癌5-氟尿嘧啶耐藥細(xì)胞株BGC823/5-FU增殖,誘導(dǎo)其凋亡,且柳茶與5-氟尿嘧啶聯(lián)用,能更好地協(xié)同抑制耐藥細(xì)胞增殖。研究還發(fā)現(xiàn),非細(xì)胞毒性劑量的柳茶水提物可顯著降低化療藥物5-FU,CDDP,PTX和ADM對(duì)BGC823/5-FU細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度,一定程度上逆轉(zhuǎn)耐藥細(xì)胞對(duì)化療藥物的耐藥性,并認(rèn)為柳茶對(duì)抗腫瘤細(xì)胞增殖、逆轉(zhuǎn)耐藥性可能與其抑制抗凋亡蛋白表達(dá)、激活促凋亡蛋白、誘導(dǎo)耐藥細(xì)胞發(fā)生凋亡有關(guān)。柳茶所富含的齊墩果酸能夠通過抑制增殖,促進(jìn)凋亡,介導(dǎo)TRAIL信號(hào)通路,與化療藥物協(xié)同增效,增加腫瘤細(xì)胞對(duì)放療敏感性等多方面作用抗腫瘤[40]。

    7 延緩衰老

    安小勇等[41]給14月齡的衰老模型昆明小鼠灌胃柳茶水提液,發(fā)現(xiàn)一定劑量(2.52 g·kg-1·d)的柳茶水提物能抑制衰老小鼠免疫器官的萎縮,減少M(fèi)DA積累,降低單胺氧化酶(Monoamine Oxidase,MAO)活性,增加SOD活性,抑制單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的減少,改善小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力,延緩小鼠衰老。

    此外,柳茶揮發(fā)油對(duì)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢菌有較強(qiáng)的抑制作用,證實(shí)了柳茶的抑菌作用[42]。柳茶水提物能使小鼠胃腸節(jié)律性蠕動(dòng)增強(qiáng),加快胃排空和小腸推進(jìn)速度,提高胃蛋白酶活性,增加膽汁分泌量,證實(shí)了柳茶的助消化作用[43]。柳茶是藏族常用藥之一,其種植分布廣泛、資源豐富,有調(diào)節(jié)糖脂代謝、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫及保肝等多種藥用功效,服用安全范圍廣(急毒實(shí)驗(yàn)示柳茶對(duì)于小鼠的有毒劑量>60 g·kg-1)[44]。結(jié)合目前柳茶的研究現(xiàn)狀來看,國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)于其藥用功效和有效成分的研究不少,但是對(duì)于其藥效機(jī)理,尚缺少深入全面的研究和探討。且多數(shù)文獻(xiàn)選用的是柳茶的水提物、醇提物等,尚未對(duì)柳茶全株的整體藥效的研究和探討,因此,下一步可以對(duì)柳茶的藥用機(jī)理進(jìn)行深入的研究,并對(duì)柳茶全株進(jìn)行整體的藥效評(píng)價(jià)??傊A枳鳛橐环N高原中藥資源,值得進(jìn)一步的開發(fā)利用和更深入的機(jī)制機(jī)理研究,以便今后為柳茶的臨床使用提供更充分的基礎(chǔ)理論支持。

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