梁寶華
(廣東省惠州市龍門縣人民醫(yī)院,廣東 惠州 516800)
幽門螺桿菌是導(dǎo)致胃炎、胃癌、淋巴癌、消化道潰瘍等疾病的主要病因,行之有效的檢驗(yàn)方式是疾病診斷與療效評(píng)價(jià)的基本保障,同時(shí)也是當(dāng)代醫(yī)學(xué)中非常重要的檢驗(yàn)項(xiàng)目之一[1,2]。為了更好的優(yōu)化臨床幽門螺桿菌檢驗(yàn)技術(shù),本文以我院為例,探討幽門螺桿菌的最佳就檢驗(yàn)技術(shù),現(xiàn)報(bào)道如下。
于2015年3月至2017年3月在我院選擇60例胃粘膜患者作為本次研究患者。60例患者中男性患者36例,女性患者24例,年齡19至69歲,平均年齡(43.1±5.5)歲。幽門螺桿菌均采用北京世濟(jì)合力生物科技有限公司生產(chǎn)的幽門螺桿菌檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。
銀染檢驗(yàn)方法:將所采取的標(biāo)本采用4%的中型甲醛進(jìn)行固定嗎,同時(shí)在常規(guī)的脫水和包埋之后實(shí)行切片,切片的規(guī)格為4 μm。在脫蠟處理之后應(yīng)用蒸餾水進(jìn)行清理,并將標(biāo)本浸入到銀液缸當(dāng)中,并分別加入適量的容積到顯影液粉當(dāng)中,同時(shí)和浸銀共同放置60℃溫度箱當(dāng)中30分鐘。撤掉浸銀液缸中的液體之后,利用蒸餾水清洗兩次,并將顯影液1、2瓶當(dāng)中的液體快速混合并導(dǎo)入到銀液缸之中實(shí)行120秒的顯影處理,在組織轉(zhuǎn)變?yōu)榭Х壬F(xiàn)象之后,將顯影液完全傾倒出來(lái),同時(shí)應(yīng)用兩次水洗,在脫水處理之后應(yīng)用樹膠密封儲(chǔ)存。
免疫組化檢驗(yàn)方法:將石蠟切片之后脫蠟,應(yīng)用檸檬酸鹽實(shí)行液微波修復(fù)處理,并應(yīng)用DAB方式進(jìn)行色彩顯示,應(yīng)用蘇木精修復(fù)細(xì)胞核,并應(yīng)用醫(yī)用酒精脫水處理,并脫水之后采用樹膠密封。借助溴化聚苯乙烯替代一抗作為空白對(duì)照,將顯示為陽(yáng)性的切片與陽(yáng)性進(jìn)行對(duì)照。
對(duì)比兩組檢驗(yàn)方式的陽(yáng)性檢測(cè)率,檢測(cè)率采用半定量計(jì)法計(jì)數(shù)方式為標(biāo)準(zhǔn)。小凹腔內(nèi)、胃黏膜表面、黏膜間質(zhì)或上皮中所出現(xiàn)的陽(yáng)性待檢菌為輕度(+),散在陽(yáng)性菌但是并沒(méi)有集聚聚集的為中度(++),大量陽(yáng)性待檢菌并且積聚聚集為重度(+++),未檢查到陽(yáng)性待檢菌的為陰性(—)。
應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理,計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)(%)表示,采用x2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
銀染檢驗(yàn)結(jié)果顯示陽(yáng)性率為40.0%;免疫組化檢驗(yàn)結(jié)果顯示陽(yáng)性率為41.7%。兩種檢驗(yàn)方式的陽(yáng)性檢測(cè)率,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。
表1 兩種檢驗(yàn)方式的陽(yáng)性檢測(cè)率對(duì)比
采用銀染進(jìn)行檢測(cè)時(shí),當(dāng)幽門螺桿菌呈現(xiàn)出大量或集聚的情況時(shí),染色大多數(shù)都呈現(xiàn)出淡藍(lán)色的螺旋狀菌體[3]。在改良嗜銀染色切片當(dāng)中,螺旋狀形式的幽門螺桿菌主要呈現(xiàn)為短螺旋狀,主要包含較細(xì)并且較直或者呈海鷗翅膀樣式的細(xì)并且成交的短螺旋狀[4]。在淡黃色背景當(dāng)中則普遍呈現(xiàn)為黑褐色;多數(shù)幽門螺桿菌直徑較為相似[5]。幽門螺桿菌主要分布局黏膜表面的黏液、小凹腺腔或者上皮細(xì)胞表面當(dāng)中,散在或成群分布,同時(shí)間質(zhì)當(dāng)中的幽門螺桿菌辨認(rèn)較為困難。免疫組化是通過(guò)幽門螺桿菌的特異性抗體檢測(cè)組織當(dāng)中的幽門螺桿菌含量,其陽(yáng)性除了著色于菌體之外,對(duì)于菌體的成本也會(huì)呈現(xiàn)陽(yáng)性著色。
本研究結(jié)果顯示,銀染檢驗(yàn)結(jié)果顯示陽(yáng)性率為40.0%;免疫組化檢驗(yàn)結(jié)果顯示陽(yáng)性率為41.7%。兩種檢驗(yàn)方式的陽(yáng)性檢測(cè)率差異不顯著。這一結(jié)論說(shuō)明兩種檢驗(yàn)方式均具備一定的實(shí)用性,但是單獨(dú)應(yīng)用時(shí)實(shí)效性并不非常理想,聯(lián)合應(yīng)用對(duì)于患者幽門螺桿菌感染的檢測(cè)有著顯著的效果。
綜上所述,銀染法與免疫組化法在單獨(dú)應(yīng)用時(shí)無(wú)明顯的實(shí)際效果差異,銀染法與免疫組化法能夠相輔相成,能夠?qū)崿F(xiàn)互相補(bǔ)充,在實(shí)際的診斷過(guò)程中,能夠按照實(shí)際的需求選擇不同的檢測(cè)方式,兩種方式在檢測(cè)幽門螺桿菌的陰陽(yáng)性中均具備良好的作用,值得臨床推廣。
[1] 張夢(mèng),陳超英,王霄騰,等.左氧氟沙星為基礎(chǔ)的三聯(lián)療法與鉍劑四聯(lián)療法作為二線療法根除幽門螺桿菌的Meta分析[J].中華內(nèi)科雜志,2017,56(5)∶368-374.
[2] 何 強(qiáng),張 輝,李 靜,等.13 C-尿素呼氣試驗(yàn)對(duì)幽門螺桿菌感染的診斷及臨床療效評(píng)價(jià)的價(jià)值[J].中國(guó)綜合臨床,2016,32(11)∶51-52.