桑樹水提物對桑黃液態(tài)深層發(fā)酵的影響

姜福春，馮 杰，張赫男，吳 艷，吳 迪，唐傳紅，楊 焱*

（1農業(yè)部南方食用菌資源利用重點實驗室，國家食用菌工程技術研究中心，上海市農業(yè)科學院食用菌研究所，上海201403；2上海海洋大學，上海 201306；3上海交通大學農業(yè)與生物學院，上海 200240）

桑樹水提物對桑黃液態(tài)深層發(fā)酵的影響

姜福春1，2，馮 杰1，張赫男1，吳 艷3，吳 迪1，唐傳紅1，楊 焱1*

（1農業(yè)部南方食用菌資源利用重點實驗室，國家食用菌工程技術研究中心，上海市農業(yè)科學院食用菌研究所，上海201403；2上海海洋大學，上海 201306；3上海交通大學農業(yè)與生物學院，上海 200240）

為研究兩種桑樹原料（桑樹粉和桑樹枝）水提物對桑黃液態(tài)深層發(fā)酵的影響，對平板培養(yǎng)基桑黃菌絲體生長的關鍵影響因子進行篩選，得出桑樹粉可作為生長因子；通過種子培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)試驗，探究桑樹粉或桑樹枝對桑黃液態(tài)發(fā)酵的影響。結果表明：3%桑樹粉及2%桑樹枝對桑黃菌絲體在種子培養(yǎng)基中的生長具有促進效果，且該條件下的菌絲體干重達到最大，分別為7.75 g/L和5.16 g/L，較空白對照分別提高了133.43%和55.42%。發(fā)酵培養(yǎng)基中，3%桑樹粉促進桑黃菌絲體生長作用最顯著，最大生物量達到17.15 g/L，較空白提高了16.43%，而桑樹枝對桑黃菌絲體生長產生抑制作用。該兩種桑樹水提物對桑黃液態(tài)深層發(fā)酵的研究，能為桑黃液體發(fā)酵及規(guī)?；a提供參考依據。

桑樹水提物；桑黃；液態(tài)深層發(fā)酵；等離子體光譜儀

桑黃（Sɑnghuɑngporussɑnghuɑng）俗稱桑黃菇，桑耳，是近年來開發(fā)的一種多年生藥用真菌［1-3］，最早收載于李時珍《本草綱目》中，據《藥性論》記載：桑黃性寒，味微苦，在傳統(tǒng)中醫(yī)藥中用于治療盜汗、痢疾、血淋、脫肛瀉血、臍腹?jié)?、閉經、帶下、脾虛泄瀉等［4］；現代藥理學研究證實，桑黃具有抗腫瘤［5-7］、抗氧化［8］、降血糖［9］、增強免疫力［10］等功效，是國際公認的最佳抗癌真菌之一。

目前，獲得桑黃提取物的途徑主要有野生采摘，人工固體栽培和液態(tài)發(fā)酵三種方式。由于天然野生桑黃被大面積采集，使得桑黃資源嚴重匱乏。同時，人工栽培桑黃的技術，還不是很成熟，加之桑黃培養(yǎng)條件較為苛刻，生長周期需要5—6個月，這使得桑黃來源不穩(wěn)定［11］。至今，適宜條件下的液體培養(yǎng)桑黃菌絲體需要10 d以上的時間，且其菌絲體生長不良及菌絲體產量較少。同時，目前桑黃菌絲體深層發(fā)酵培養(yǎng)基僅僅是依靠碳氮源來篩選最佳培養(yǎng)基配方，急需開發(fā)生長周期短，產量高的培養(yǎng)基。有研究表明，Ma等［12］研究發(fā)現通過Plackett-Burman設計法對影響桑黃液態(tài)培養(yǎng)7個營養(yǎng)要素進行篩選，并在此基礎上采用中心組合設計結合響應面進一步優(yōu)化得到最佳培養(yǎng)基配方，使得桑黃菌絲體干重提高到10.92 g/L。液體發(fā)酵培養(yǎng)具有菌絲體產量高、培養(yǎng)周期短、可控性好等優(yōu)點，更易于工業(yè)化持續(xù)大量生產，具有廣泛的市場前景。因此，采用液態(tài)發(fā)酵生產桑黃菌絲體代替子實體已成為當務之急。

另外，吳亞召等［13］采用袋料栽培對秦巴山區(qū)野生桑黃進行人工馴化研究，發(fā)現添加桑樹木屑的栽培培養(yǎng)基，培養(yǎng)結束獲得桑黃干品36 g/袋。呂英華［14］發(fā)現在桑黃原種培養(yǎng)基和栽培培養(yǎng)基中分別添加桑樹木屑45%和35%，對桑黃菌種的培育及出菇都有顯著的促進作用。但桑樹木屑及其提取物是否對桑黃液態(tài)深層發(fā)酵有影響，目前還尚無研究報道?；诖?，本研究以桑黃菌絲體生物量為考察指標，通過添加桑樹枝或桑樹粉水提物到平板培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基中對桑黃菌絲體生長進行研究，為大規(guī)模生產富含功能活性成分的優(yōu)質桑黃菌絲體提供參考。

1 材料與方法

1.1 菌種

桑黃（Sɑnghuɑngporus sɑnghuɑng）SH1，由上海市農業(yè)科學院食用菌研究所栽培獲得，菌種保存于中國微生物菌種保藏中心上海食用菌分中心，標本存放于上海市農業(yè)科學院食用菌研究所加工技術與發(fā)酵工程研究室。

1.2 試驗材料和主要設備

桑樹粉（桑樹粉為新鮮桑樹去皮的木質部，粉碎為60—80目，購自安徽亳州馬力藥業(yè)有限公司）、桑樹枝（桑樹枝為曬干放置一段時間的枝條，且枝條大小不均一，直徑0.1—0.5 cm，購自浙江淳安千島湖桑都食用菌專業(yè)合作社）、馬鈴薯葡萄糖瓊脂、馬鈴薯葡萄糖肉湯（均購自美國BD公司）、酵母自溶粉（購自安琪酵母股份有限公司）、葡萄糖、七水硫酸鎂、磷酸二氫鉀、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁、無水乙醇（均購自國藥集團化學試劑有限公司）、高壓滅菌鍋SS-325型（TOMY公司）、酶標儀Biotek-Synergy HT型（美國Bio-Tek公司）、ZWY-2102雙層恒溫培養(yǎng)振蕩器（上海智城分析儀器制造有限公司）、Centrifuge 5810R高速冷凍離心機（Eppendorf公司）、iCAP 6000等離子體發(fā)射光譜儀（美國Thermo Fisher公司）。

1.3 培養(yǎng)基

平板培養(yǎng)基：馬鈴薯葡萄糖瓊脂3.9%，桑樹粉或桑樹枝（1%—3%）水提物，混合均勻，并用蒸餾水定容，于121℃，滅菌35 min。其中，桑樹粉或桑樹枝（1%—3%）水提物配制：將桑樹粉或桑樹枝（1%—3%）添加到蒸餾水中，其固液比（g∶mL）1∶100，100℃提取1 h，棄渣，濾出的煮出液備用。

種子培養(yǎng)基：桑樹粉或桑樹枝（1%—3%）水提物，馬鈴薯葡萄糖肉湯2.4%，pH自然，于滅菌鍋中121℃，滅菌35 min。其中，桑樹粉或桑樹枝（1%—3%）水提物配置，方法同上。

發(fā)酵培養(yǎng)基：桑樹粉或桑樹枝（1%—3%）水提物，葡萄糖2%、酵母自溶粉1%、磷酸二氫鉀0.1%、七水硫酸鎂0.1%，pH自然，于滅菌鍋中121℃，滅菌35 min。其中，桑樹粉或桑樹枝（1%—3%）水提物配置，方法同上。

1.4 試驗方法

1.4.1 培養(yǎng)條件

平板培養(yǎng)：從保存的母種試管中挑取0.03 cm2大小的桑黃菌絲塊接種于PDA培養(yǎng)基平板中部，于26℃恒溫培養(yǎng)15 d。

種子培養(yǎng)：用直徑為8 mm的打孔器取平板培養(yǎng)的桑黃菌塊6—7塊接種于種子培養(yǎng)基中。其中，250 mL三角瓶中裝液量100 mL，在26℃、150 r/min下培養(yǎng)7 d，即得種子液。

發(fā)酵培養(yǎng)：將培養(yǎng)好的種子液勻漿后以10%接種量轉接至發(fā)酵培養(yǎng)基中，其中，250 mL三角瓶中裝液量100 mL在26℃、150 r/min培養(yǎng)7 d，即得發(fā)酵培養(yǎng)液。

1.4.2 分析方法

1.4.2.1 菌絲體生長速率測定

采用菌絲生長速率法［15］。將接種于無菌的培養(yǎng)平板（Φ9 cm）內的桑黃菌絲體培養(yǎng)第0—7天、第8—15天和第0—15天，通過十字交叉法測量菌絲體直徑，并計算第0—7天、第8—15天和第0—15天的桑黃菌絲體生長速率。其計算公式為：

1.4.2.2 菌絲體生物量的測定

將發(fā)酵培養(yǎng)液于5 000 r/min離心20 min，用蒸餾水洗滌菌絲體重復離心3次，收集菌絲體沉淀，將所得菌絲體于60℃烘干至恒重，計算菌絲體干重。

1.4.2.3 礦物元素的分析

準確稱取0.25 g試樣（精確至0.000 1 g），試樣置于150 m L PFA燒杯中，用PFA移液管沿杯壁加入2.5 mL氫氟酸，將壁上的樣品沖洗到燒杯底部，輕輕搖動燒杯，使樣品和氫氟酸混在一起，然后緩慢滴加2 mL硝酸使樣品逐漸溶解，待劇烈反應停止后，再加入1 mL高氟酸。在可控溫電熱板，95℃左右的溫度下，加熱約30 min，使樣品完全溶解至清亮，再加入5 mL鹽酸，用少許水沖洗燒杯壁，繼續(xù)加熱5 min，取下，冷卻至室溫，移入100 m L PFA容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，待測。

1.4.3 動力學參數的計算及數據處理

添加不同濃度桑樹水提物的桑黃菌絲體比生長速率根據參考文獻［16］計算得出。用Origin 8.5軟件對試驗數據進行插值計算，并求解兩種桑樹水提物添加下的菌絲體比生長速率。采用Excel 2013軟件進行數據處理，采用Origin 8.5軟件進行試驗數據繪圖分析。

2 結果與分析

研究表明，在桑黃菌株的培養(yǎng)過程中，菌株的生長較緩慢，菌絲體生物量低，且較易染菌，是該領域研究者一直較為關注的問題。本研究將兩種桑樹水提物添加到液體培養(yǎng)基對桑黃進行發(fā)酵培養(yǎng)，結果發(fā)現桑樹粉和桑樹枝對桑黃的菌絲生長均具有一定的促進作用。

2.1 兩種桑樹水提物對桑黃菌絲體在平板培養(yǎng)基上生長影響

以不同濃度的桑樹粉或桑樹枝加于PDA培養(yǎng)基中，每隔一定時間觀察桑黃菌株在平板培養(yǎng)基中的生長情況（圖1）。

圖1 桑黃菌株在平板上生長情況Fig.1 Grow th characteristics of Sanghuangporus sanghuang on PDA medium

從圖1可以看出，在添加桑樹粉或桑樹枝的桑黃菌絲體生長情況均優(yōu)于PDA培養(yǎng)基（即為空白對照組），且培養(yǎng)第15天時添加桑樹粉的桑黃菌落基本長滿整個平板，而桑樹枝和空白對照均未長滿，同時添加桑樹粉的菌絲體顏色比較亮黃。由此可知，桑樹粉對菌絲體生長的促進作用比較顯著。同時，通過計算桑黃菌株在15 d培養(yǎng)周期中菌體生長速度，發(fā)現其生長速度存在較大差異（表1）。

由表1可知，由于桑黃菌絲體在第0—7天處于生長適應期，造成其生長速度較緩，而桑黃菌株在第8—15天生長速度較快，且菌絲體生長速度最快為添加3%桑樹粉，達到0.70 cm/d，較空白對照提高了34.62%。且在第0—15天的培養(yǎng)時間內，添加不同質量濃度桑樹粉和桑樹枝的桑黃菌絲體生長速度均大于空白對照。由此說明，兩種桑樹水提物對桑黃菌絲體生長具有顯著的促進作用，且桑樹粉的促進效果優(yōu)于桑樹枝。

表1 不同培養(yǎng)基中桑黃菌絲生長速度Table1 Differentmedium on the grow th rate of Sanghuangporus sanghuang mycelia cm·d－1

2.2 兩種桑樹水提物對桑黃菌絲體在種子培養(yǎng)基中的生長影響

基于桑黃菌株在平板培養(yǎng)基上的生長情況，考察不同濃度桑樹粉或桑樹枝添加于PDB培養(yǎng)基中對桑黃菌絲體液體生長狀況（圖2）。

從圖2可以看出，兩種桑樹水提物對桑黃菌絲體生長的促進作用與平板培養(yǎng)一致，桑樹粉對桑黃菌絲體生物量產量的促進效果優(yōu)于桑樹枝。同時，添加1%桑樹粉的菌絲體干重為7.28 g/L，相對于3%桑樹粉的最大菌絲體干重7.75 g/L相差甚小，兩者較空白對照分別提高了119.28%和133.43%。添加2%桑樹枝的菌絲體生物量達到5.16 g/L，較空白對照提高了55.42%。由此說明，兩種桑樹水提物對桑黃液體菌絲體生長均具有一定的促進作用，1%桑樹粉的促進效果要優(yōu)于2%桑樹枝?；诖?，進一步探究添加1%桑樹粉及2%桑樹枝對桑黃菌絲體生長的影響，通過階段取樣測試桑黃液體深層培養(yǎng)菌絲體的生長曲線及菌絲體的比生長速率（圖3）。

由圖3A可以看出，添加1%桑樹粉的桑黃菌絲體生長遲緩期為第1—2天，第2—5天達到對數期，而2%桑樹枝對數期為第2—4天，且后期一直處于穩(wěn)定期。而空白對照組的桑黃菌絲體第1—2天為遲緩期，第2—4天為對數期，之后菌絲體的生長進入穩(wěn)定期。同時，對添加1%桑樹粉和2%桑樹枝的桑黃菌絲體的比生長速率進行求解（圖3B），所謂比生長速率就是指每小時單位質量的菌絲體所增加的菌絲體量，它是表征微生物生長速率的一個參數，也是發(fā)酵動力學中的一個重要參數。發(fā)現桑黃菌絲體達到最大比生長速率先后順序分別為：1%桑樹粉＞2%桑樹枝＞空白對照，桑樹粉促進桑黃菌絲體生長最早達到最大比生長速度，對桑黃菌絲生長促進效果尤為顯著。

圖2 不同濃度桑樹粉和桑樹枝對種子培養(yǎng)基中菌絲體干重的影響Fig.2 Effect of different concentration ofm ulberry pow der and mulber ry branches on dry weight ofmycelia in the seed m edium

圖3 種子培養(yǎng)基中桑黃菌絲體生長曲線Fig.3 Grow th curve of Sanghuangporus sanghuang mycelia in the seed medium

2.3 兩種桑樹水提物對桑黃菌絲體在發(fā)酵培養(yǎng)基中的生長影響

將不同濃度的桑樹粉及桑樹枝分別添加于發(fā)酵培養(yǎng)基中探究其對桑黃菌絲體生長的影響（圖4）。

由圖4分析可知，不同濃度的桑樹粉和桑樹枝對桑黃菌絲體生長的促進效果不同。不同質量濃度桑樹粉對桑黃菌絲體干重影響由大到小的排序依次為：3%＞2%＞1%，且3%桑樹粉促進桑黃菌絲體干重達到最大為17.15 g/L，且不同濃度桑樹粉促進菌絲體生長效果均優(yōu)于空白對照。同時，不同質量濃度桑樹枝對菌絲體干重影響由大到小的排序依次為：2%＞1%＞3%，且2%桑樹枝的桑黃菌絲體干重達到最大為13.87 g/L?；诖?，同樣選擇添加2%桑樹枝和1%桑樹粉分析桑黃菌絲體在發(fā)酵培養(yǎng)基中的生長曲線及菌絲體的比生長速率（圖5）。

圖4 不同濃度桑樹粉和桑樹枝對發(fā)酵培養(yǎng)基中菌絲體干重的影響Fig.4 Effect of different concentration ofmulberry powder and mulberry branches on dry weight ofmycelia in the fermentation medium

圖5 種子培養(yǎng)基中桑黃菌絲生長曲線Fig.5 Grow th curve of Sanghuangporus sanghuang mycelia in the ferm entation m edium

由圖5A可以看出，添加1%桑樹粉的桑黃菌絲體生長遲緩期為培養(yǎng)前2 d，第2—6天處于對數期，而第2—6天2%桑樹枝為對數期，且后期兩者一直處于穩(wěn)定期。而空白對照組的桑黃菌絲體在前2 d為遲緩期，第2—5天為對數期，之后處于穩(wěn)定期。通過對桑黃菌絲體比生長速率進行求解（圖5B），發(fā)現桑黃菌絲體達到最大生長速率先后順序分別為：1%桑樹粉＞2%桑樹枝＞空白對照，且1%桑樹粉促進桑黃菌體生長維持對數期周期較長。由此可知，桑樹粉對于桑黃菌絲體液態(tài)生長的促進效果比較顯著，與平板培養(yǎng)和液體種子培養(yǎng)的效果一致。

2.4 桑樹粉和桑樹枝成分分析

采用等離子體光譜儀（Inductively coupled plasma，ICP）對桑樹粉水提物、桑樹枝水提物和添加兩種桑樹水提物培養(yǎng)獲得菌絲體中礦物元素的含量進行分析（表2）。

表2 ICP測定樣品中礦物元素含量Table 2 Determ ination of m ineral elem ent content in the samp le by ICP%

由表2可以看出，桑樹粉和桑樹枝的水提物中的Ca、Cu、Fe、K、Mg、Mn、Na、Zn這8種礦物元素的K、Mg含量存在較大差異，且桑樹粉水提物中的K、Mg元素含量高于桑樹枝水提物，而其他6種元素含量相當。同時，添加桑樹粉水提物培養(yǎng)的桑黃菌絲體中K、Mg和Na這三種元素含量高于桑樹枝培養(yǎng)的菌絲體。由此說明，礦物元素K、Mg對桑黃菌絲的生長有很大的促進作用，菌絲生長過程中易富集此類元素，但其促進生長的機理還有待探究。

3 結論與討論

本研究考察了兩種桑樹水提物對桑黃菌絲體生長狀況的影響。結果發(fā)現，兩種桑樹水提物可明顯促進桑黃菌絲生長，且不同濃度兩種桑樹水提物對桑黃菌絲體生長速度影響存在明顯差異，菌絲體生長速度最大為添加2%桑樹粉，為0.70 cm/d，較空白對照提高了34.62%；桑黃種子培養(yǎng)基中，3%桑樹粉和2%桑樹枝對桑黃菌絲體的生長具有最優(yōu)的促進效果，菌絲體干重分別達到為7.75 g/L和5.16 g/L，較空白對照分別提高了133.43%和55.42%。發(fā)酵培養(yǎng)基中，添加3%桑樹粉促進桑黃菌絲體生長最為顯著，達到最大生物量17.15 g/L，較空白對照提高了16.43%，而桑樹枝對桑黃菌絲體生長產生抑制作用。

不同質量濃度的桑樹粉或桑樹枝對桑黃菌絲體的生長影響不同，桑樹粉對桑黃菌絲體生長促進作用尤為顯著。通過等離子體光譜儀對桑樹粉水提物、桑樹枝水提物和添加兩種桑樹水提物培養(yǎng)獲得的菌絲體中常規(guī)8種礦物元素含量進行分析。發(fā)現桑樹粉和桑樹枝的水提物中的礦物元素K、Mg含量存在較大差異，且桑樹粉水提物中的K、Mg兩種元素含量高于桑樹枝水提物，而其他6種元素含量相當。同時，添加桑樹粉培養(yǎng)獲得的菌絲體中K、Mg、Na三種元素的含量要高于桑樹枝獲得的菌絲體。這將很有可能是導致平板培養(yǎng)、種子培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)中桑樹粉對桑黃菌絲體生長促進作用均優(yōu)于桑樹枝的原因。

另外，現代藥理學已經證明桑樹水提物中含有三大營養(yǎng)成分，即蛋白質、礦物質和維生素，以及五大功能活性物質，即黃酮類、植物甾醇、γ-氨基丁酸、生物堿、有益有機酸［17-21］。本研究中桑樹水提物對桑黃菌絲體生長具有促進作用，與桑樹水提物的營養(yǎng)成分和活性物質密切相關。

桑樹水提物促進桑黃菌絲體生長機理還需進一步研究，同時對于菌絲體生物量的增產還需要更優(yōu)更完善的培養(yǎng)基配方，如篩選碳源、氮源、無機鹽和桑樹水提物最優(yōu)組合培養(yǎng)基。這將為大規(guī)模生產富含功能活性成分的優(yōu)質桑黃菌絲體提供參考。

［1］戴玉成.藥用擔子菌-鮑氏層孔菌（桑黃）的新認識［J］.中草藥，2003，34：94-95.

［2］戴玉成，崔寶凱.藥用真菌桑黃種類研究［J］.北京林業(yè)大學學報，2014，36（5）：1-6.

［3］ZHOU L W，JOSEF V，CONY D，et al.Global diversity and taxonomy of the Inonotus linteus complex（Hymenochaetales，Basidiomycota）：Sɑnghuɑngporus gen.nov.，Tropicoporus excentrodendri and T.guɑnɑc-ɑstensi s gen.et spp.nov.，and 17 new combinations［J］.Fungal Diversity，2016，77（1）：335-347.

［4］江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典［M］.上海：上?？茖W技術出版社，2005：1-1264.

［5］DONGW，NING L，LUW D，et al.Tumor-inhibitory and liver-protective effects of Phellinus igniɑrius extracellular polysaccharides［J］.World Journal ofMicrobial Bioethanol，2009，25（4）：633-638.

［6］JEON T I，JUNG CH，CHO JY，et al.Identification of an anticancer compound against HT-29 cells from Phellinus linteus grown on germinated brown rice［J］.Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine，2013，3（10）：785-789.

［7］SUN J，CHEN Q J，ZHU M J，et al.An extracellular laccase with antiproliferative activity from the sɑnghuɑng mushroom Inonotus bɑumii［J］. Journal of Molecular Catalysis B：Enzymatic，2014，99：20-25.

［8］WANG Y，YU J X，ZHANG C L，et al.Influence of flavonoids from Phellinus igniɑrius on sturgeon caviar：Antioxidant effect and sensory characteristics［J］.Food Chemistry，2012，131（1）：206-210.

［9］ZOU X，GUO X，SUN M.pH control strategy in a shakenmini-bioreactor for polysaccharide production bymedicinalmushroom Phellinus linteus and its anti-hyperlipemia activity［J］.Bioprocess Biosyst Eng，2009，32（2）：277-281.

［10］LUO JG，LIU J，KE C，et al.Optimization ofmedium composition for the production of exopolysaccharides from Phellinus bɑumii Pilát in submerged culture and the immune-stimulating activity of exopolysaccharides［J］.Carbohydrate Polymers，2009，78（3）：409-415.

［11］LUO JG，LIU J，SUN Y，etal.Medium optimization，preliminary characterization and antioxidantactivity in vivo ofmycelialpolysaccharide from Phellinus bɑumii Pilát［J］.Carbohydrate Polymers，2010，（81）：533-540.

［12］MA X K，ZHANG H，PETERSON E C，et al.Enhancing exopolysaccharide antioxidant formation and yield from Phellinus species through medium optimization studies［J］.Carbohydrate Polymers，2014，107：214-220.

［13］吳亞召，吳未鳴，張文雋，等.秦巴山區(qū)野生桑黃人工栽培技術研究［J］.中國食用菌，2014，33（3）：20-22.

［14］呂英華.桑黃菌固體栽培和液體培養(yǎng)基優(yōu)化及人工栽培研究［D］.楊凌：西北農林科技大學，2010.

［15］陳年春.農藥生物測定技術［M］.北京：北京農業(yè)大學出版社，1991.

［16］JIX J，HE H，JUN D，et al.Enhanced 2.3-butanediol production by Klebsiellɑoxytocɑusing a two-stage sgitation speed control strategy［J］. Bioresour Technol，2009，100：3410-3414.

［17］YOHJIE，SHIGEAKEM，KATSUNORIM，et al.Moranoline（1-deoxynojirimycin）fermentation and its improvem-ent［J］.Agric.Biol.Chem.，1985，49（4）：1119-1125.

［18］YOHJIE.Enzymatic synthesis of4-o-a-D-glucopyranosylmoranoline［J］.Agric.Biol.Chem.，1985，49（7）：2159-2165.

［19］YOHJIE，SHIGEAKIM，BOBUTOSHIO，et al.Enzymatic preparation of N-substituted 4-o-a-D-glucopyranosylm-oranoline derivatives［J］. Agric.Biol.Chem.1989，53（1）：61-68.

［20］YOSHIAKIY.Inhibition of intestinal a-glucosidase activity and postprandialhyperglycemiabymoranolineand its N-alkylderivatives［J］.Agric. Biol.Chem.，1988，52（1）：50-52.

［21］代君君，吳傳華，肖林珍，等.桑樹不同組織的水提物對α-葡萄糖苷酶的抑制作用研究［J］.中國農學通報，2011，27（5）：466-469.

（責任編輯：張睿）

Effects ofmulberry extracts on liquid submerged fermentation of Sanghuangporus sanghuang

JIANG Fu-chun1，2，FENG Jie1，ZHANG He-nan1，WU Yan3，WU Di1，TANG Chuan-hong1，YANG Yan1*
（1Key Lɑborɑtory of Edible Fungus Resourcesɑnd Utilizɑtion（South），Ministry of Agriculture，Nɑtionɑl Engineering Reseɑrch Center of Edible Fungi，Institute of Edible Fungi，Shɑnghɑi Acɑdemy of Agriculturɑl Sciences，Shɑnghɑi201403，Chinɑ；2Shɑnghɑi Oceɑn University，Shɑnghɑi201306，Chinɑ；3School of Agricultureɑnd Biology，Shɑnghɑi Jiɑo Tong University，Shɑnghɑi200240，Chinɑ）

To explore the effects of two kinds ofmulberry（mulberry powder andmulberry branches）extracts on liquid submerged fermentation of Sɑnghuɑngporus sɑnghuɑng，the key factor of the growth ofmycelia on PDA medium were investigated，and the result was mulberry powder extracts.Then seed culture and fermentation experimentswere done to explore the impact of mulberry powder and mulberry branches extracts on liquid submerged fermentation of Sɑnghuɑngporus sɑnghuɑng.The results showed thatmulberry powder and mulberry branches extracts had significant impacts on the growth of Sɑnghuɑngporus sɑnghuɑng.The yield ofmycelia was the highest when mulberry powder and mulberry branches extracts were 3%and 2%，reached 7.75 g/L and 5.16 g/L，which were 133.43%and 55.42%higher than the control.Highest yield of mycelia was reached 17.15 g/L when mulberry powder extracts were reached 3%in fermentation medium，while mulberry branches extracts had inhibitive effect.Moreover，this study presented a scientific basis for further liquid fermentation and facilitate production on larger scales.

Mulberry extracts；Sɑnghuɑngporus sɑnghuɑng；Liquid submerged fermentation；Inductively coupled plasma

S567.39

A

1000-3924（2017）01-056-07

2016-08-15

國家十二五科技支撐課題（2012BAD36B05）

姜福春（1990—），男，在讀碩士，研究方向：藥用真菌發(fā)酵。E-mail：fchjiang120＠163.com

*通信作者，楊焱（1970—），女，博士，研究員，研究方向：藥用真菌發(fā)酵與活性。E-mail：yangyan＠saas.sh.cn