蘭州地區(qū)4537例不育男性患者精液質(zhì)量分析

閻一鑫 郝娜 張文華 任杉杉 羅立成

隨著生育年齡增加，環(huán)境與生活方式改變，以及泌尿生殖道感染、藥物濫用等影響，男性不育的發(fā)病率呈上升趨勢，部分地區(qū)男性精液質(zhì)量呈下降趨勢，精液參數(shù)變化問題受到普遍關注[1-2]。本文對在本院不孕不育門診就診的不育男性的精液檢查情況進行統(tǒng)計分析，旨在探討蘭州地區(qū)不育男性精液質(zhì)量狀況。

對象與方法

1.對象：回顧性分析2013年9月至2016年4月在本院生殖中心門診男性患者4 537例，年齡18～60歲，平均年齡(31.0±5.5)歲。納入標準包括患者以不育為主訴，結婚1年以上不孕，性生活正常，未采取任何避孕措施，排除了女方因素。精液常規(guī)分析參照WHO標準[3]分為正常精液組(各項指標均正常者)與異常精液組(有一項或多項指標異常者)；精液參數(shù)與年齡分組比較按照年齡遞增順序分為五組，即A組(年齡≤25歲)、B組(26～30歲)、C組(31～35歲)、D組(36～40歲)和E組(年齡≥41歲)。

2.測量方法：手淫法留取精液后立即送檢，樣本置于恒溫恒濕箱內(nèi)37℃液化后檢測。精液液化后混勻，在精子計數(shù)板上滴加10 μl精液，蓋上專用蓋片輕壓靜置于光學顯微鏡下，采用計算機輔助精子分析(CASA，北京偉力WLJY-9000型彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng))技術，對每份標本均隨機采樣至少200個精子，在3 min內(nèi)完成參數(shù)分析。無精子樣本均離心后鏡檢處理，確保沉淀中無精子。

3.質(zhì)量控制：本實驗操作人員按衛(wèi)計委要求，均在具有輔助生殖技術資質(zhì)的培訓基地經(jīng)考試合格上崗，實驗數(shù)據(jù)來自生殖中心檢驗室，按照WHO標準[3]對精液量、pH值、精子活力、精子濃度、精子形態(tài)正常率等參數(shù)進行檢測。

4.統(tǒng)計學處理：運用SPSS19.0統(tǒng)計軟件，計量資料采用單因素方差分析，率的比較采取F檢驗和Pearson相關性分析。

結果

1.精液常規(guī)分析：4 537例精液中，正常精液組為520例(11.5%)，異常精液組為4 017例(88.5%)。兩組精液常規(guī)分析中各指標比較，年齡、禁欲天數(shù)、精子活力、精子濃度、精子形態(tài)正常率等指標差異均有統(tǒng)計學意義，兩組間精液量與精液pH值差異無統(tǒng)計學意義。見表1。

表1 4 537例精液樣本基本情況

注：與正常精液比較，*P<0.05

2.異常精液分類統(tǒng)計：4 537例精液比較發(fā)現(xiàn)，異常精液主要表現(xiàn)為精子活力低(71.2%)，其他異常依次有精子形態(tài)正常率低(56.3%)、精子濃度低(33.1%)、精液量少(28.9%)、精液液化異常(15.2%)、精液pH值異常(9.3%)、無精子癥408例(9.0%)。見表2。

表2 4 537例精液質(zhì)量分析比較

3.不同年齡間精液參數(shù)比較及年齡與精子活力、精子濃度的相關性：不同年齡間精液參數(shù)比較，除去408例無精子癥患者，4 129例不育男性患者按年齡遞增順序分組，單因素方差分析顯示，各組間年齡、禁欲天數(shù)、精液量、精子活力、精子總活力、精子濃度差異均有統(tǒng)計學意義，而pH值、液化時間則差異無統(tǒng)計學意義。其中兩兩比較發(fā)現(xiàn)，E組禁欲時間顯著高于其他四組，差異有統(tǒng)計學意義；A組精液量與其他四組比較差異有統(tǒng)計學意義。其中D組、E組精子活力、精子總活力與A組、B組、C組比較差異有統(tǒng)計學意義；A組精子濃度與C組、D組比較差異有統(tǒng)計學意義；但精子濃度各年齡組間比較有遞增趨勢，差異有統(tǒng)計學意義；而E組精子濃度與B組、C組、D組比較，差異無統(tǒng)計學意義。見表3。

表3 各年齡組間精液參數(shù)比較

注：A組精液量與其他四組比較，D、E組精子活力、精子總活力與A、B、C組比較，*P<0.05；E組禁欲時間與其他四組比較，A組精子濃度與C、D組比較，#P<0.01；組間比較，##P<0.001。

4 537例精液依據(jù)年齡分組行年齡、禁欲天數(shù)與精液量、精子活力、精子濃度的相關性分析，結果表明患者年齡與精子活力(r=-0.099，P<0.01)存在負相關；年齡與精子濃度(r=0.077，P<0.01)存在正相關；年齡與精液量無顯著性相關(P>0.05)，年齡與禁欲天數(shù)(r=0.065，P<0.01)正相關性，禁欲天數(shù)與精液量(r=0.197，P<0.01)有正相關，禁欲天數(shù)與精子活力(r=-0.140，P<0.01)有負相關，禁欲天數(shù)與濃度(r=0.161，P<0.01)存在正相關。

討論

據(jù)WHO報道，全球大約15%的育齡夫婦受到不孕癥困擾。在不孕癥發(fā)病原因中，合并各種男性生育能力異常因素約占50%左右[4]。精液質(zhì)量分析是評價男性生育力最直觀方便的檢驗方法之一[5]。研究表明，近幾十年全球范圍內(nèi)男性生育能力明顯呈下降趨勢[6-7]。針對我國男性精液質(zhì)量狀況，國內(nèi)學者也有相關研究[8-9]。盡管對精液質(zhì)量總體變化尚無明確結論，但部分地區(qū)精液質(zhì)量下降已被多數(shù)學者所接受[10]。

本文將4 537例男性不育患者的精液納入分析，其中有一項異?；蚨囗棶惓Ｕ? 017例(88.5%)，比全國多中心調(diào)查報道的平均水平(57.7%，2003年)要高[11]。異常精液主要表現(xiàn)為精子活力低(71.2%)，其他異常依次有精子形態(tài)正常率低(56.3%)、精子濃度低(33.1%)、精液量少(28.9%)、精液液化異常(15.2%)、精液pH值異常(9.3%)、無精子癥408例(9.0%)，與李艷[12]、張紅斌[13]等報道的廣東地區(qū)和川南地區(qū)結果相似。本研究表明精子活力下降已成為本地區(qū)男性不育的主要因素。尤其是附睪、輸精管、陰囊和前列腺等生殖道和生殖腺體的急慢性炎癥時，酸堿度、供養(yǎng)、代謝等均不利于精子的存活，都可降低精子的運動能力。但文任乾等[14]報道廣東人的精子活力并沒有下降。這可能與不同地區(qū)的氣候環(huán)境、飲食習慣、生活方式等差別有關。比較不同地區(qū)精液檢查結果有助于掌握不同人群精液質(zhì)量分布差異，為進一步了解國人體質(zhì)提供參考依據(jù)。本研究精液異常結果中無精癥408例(9.0%)高于左陽花等[15]報道淮安地區(qū)的結果。導致無精癥的因素較為復雜，以先天性睪丸異常、睪丸病變、放射性損傷、染色體異常等因素較為普遍，可通過檢查精液、睪丸、血清以及染色體等指標確定病因。通常精液檢查3次以上離心鏡檢無精子者可確診是無精子癥。因此精液檢查可幫助患者及早發(fā)現(xiàn)并確定病因，成為治療不育癥的關鍵。

在不同年齡組間精液參數(shù)比較中，D組、E組精子活力、精子總活力與A組、B組、C組比較差異顯著，同時發(fā)現(xiàn)本地區(qū)不育癥患者年齡與精子活力呈負相關性，與徐廷云等[16]報道的蘇州地區(qū)結果相近，提示精子活力會隨年齡增長呈下降趨勢，尤其是40歲以上男性下降更為顯著。精子活力下降多是由于內(nèi)分泌因素導致的。劉太華等[17]研究發(fā)現(xiàn)隨著年齡的增加，血清總睪酮呈現(xiàn)微弱升高趨勢，而游離睪酮水平在40歲以后出現(xiàn)明顯下降。睪酮是男性內(nèi)分泌雄激素之一，在血液中含量偏低也可能導致精子發(fā)育異常，從而影響精子活動力。對40歲以上不育男性檢查精液同時建議檢查血清睪酮，以提供更多治療不育癥判斷依據(jù)。

近年來，關于男性年齡與精子濃度的研究結果不盡相同。與年齡相關的精液質(zhì)量研究中，有實驗觀察表明未發(fā)現(xiàn)精子濃度有任何變化[18]，Rolf等[19]研究表明精子濃度與患者年齡存在負相關性。但Brahem等[20]研究不育男性年齡與精液參數(shù)發(fā)現(xiàn)，精子濃度與不育男性年齡呈正相關性。本文結果與Brahem等研究一致，但Brahem等對正常男性不同年齡分組中未觀察到精液濃度變化。本研究中各年齡組精子濃度隨年齡增長而增加，而Plastira等[21]研究發(fā)現(xiàn)少弱精癥患者精子濃度與患者年齡也存在正相關性，并且精子濃度增加會導致DNA碎片率的增加，這可能也是導致不育產(chǎn)生的原因之一。但是年齡對不育男性精子濃度影響仍存在爭議，有待今后進一步的研究。同時本研究發(fā)現(xiàn)A組精子濃度明顯低于各年齡組，E組精子濃度與B組、C組、D組相比差異無統(tǒng)計學意義；E組禁欲時間顯著高于其他四組。表明年齡≤25歲尚未處于最佳生育年齡且睪丸產(chǎn)精能力有限，而E組是40歲以上患者，排精困難與禁欲時間延長可能是影響精子濃度的重要因素之一。本文相關性分析表明禁欲天數(shù)與精液量、精子濃度存在正相關性，而與精子活力存在負相關性，這與Jonge等[22]研究相一致。禁欲天數(shù)延長會導致精子衰老和死亡，從而使異常精子增多而致活力下降。同時本研究中發(fā)現(xiàn)精液量與年齡變化相關性無顯著性差異，與Schwartz等[18]研究結果相似，而精漿約占90%的精液量，是由附性腺的分泌液組成的，有研究表明精漿產(chǎn)生能力在60歲以前沒有顯著性變化[23]，精液量變化受年齡影響變化較小。

綜上所述，蘭州地區(qū)不育男性精液質(zhì)量異常主要表現(xiàn)為精子活力下降，隨著年齡增長夫妻性生活頻度可能減少，不同年齡段患者禁欲時間可能有差別。因此，在精液檢查時應考慮禁欲時間對精液質(zhì)量的影響。此外，應將精液檢查與血清睪酮檢查、精子功能實驗等方法相結合,準確評估男性生育力。對不育患者提供個性化診療方案與優(yōu)生優(yōu)育保健服務，提高生殖健康水平。

1 郭應祿,李宏軍.男性生殖健康面臨的挑戰(zhàn).中華男科學,2003,9:1-6.

2 Nallella KP,Sharma RK,Aziz N,et al.Significance of sperm characteristics in the evaluation of male infertility.Fertil Steril,2006,85:629-634.

3 世界衛(wèi)生組織著,(谷翊群,陳振文,盧文紅,等譯).人類精液檢驗與處理實驗室手冊.第5版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2011:115-119.

4 李宏軍,黃宇烽.實用男科學.第2版.北京:科學出版社,2015:419-424,859.

5 Lu JC,Huang YF,Lü NQ.Computer-aided sperm analysis:past,present and future.Andrologia,2014,46:329-338

6 Olsen J,Zhu JL,Ramlau-Hansen CH.Has fertility declined in recent decades? Acta Obstet Gynecol Scand,2011,90:129-135.

7 Stahl PJ,Schlegel PN.Genetic evaluation of the azoospermic or severely oligozoospermic male.Curr Opin Obstet Gynecol,2012,24:221-228.

8 張樹成,王弘毅,王介東.1981～1996年我國有生育力男性精液質(zhì)量的變化分析.生殖與避孕,1999,19:27-33.

9 朱心強,沈毅,張鑫陽,等.近13年國內(nèi)正常男子精子質(zhì)量變化趨勢的文獻分析.浙江大學學報(醫(yī)學版),2000,29:173-176.

10 谷翊群.男性生育力與精液參數(shù)的變化趨勢.中華男科學雜志,2014,20:1059-1062.

11 武俊青,高爾生,楊秋英,等.中國年輕男性精液質(zhì)量主成分分析.中國衛(wèi)生統(tǒng)計,2003,20:216-219.

12 李艷,楊曉揚,郭雄,等.廣州地區(qū)男性不育患者精液檢查5648例分析.中國衛(wèi)生檢驗雜志,2014,24:1125-1127.

13 張紅斌,付莉,毛熙光,等.川南地區(qū)2938例不育男性精液質(zhì)量分析.中國優(yōu)生與遺傳雜志,2014,22:124-125.

14 文任乾,馬春杰,唐立新,等.廣東人精液參數(shù)與18年前比較沒有下降.中國男科學雜志，2006,20:3-5.

15 左陽花,馮播,薛惠英,等.淮安地區(qū)4598例不育男性精液質(zhì)量分析.檢驗醫(yī)學與臨床,2012,9:168-169.

16 徐廷云,胡嘉波,高華生,等.蘇州地區(qū)2640例男性不育癥患者精液質(zhì)量分析.中華男科學雜志,2011,17:511-515.

17 劉太華,楊瑞峰,孔祥斌,等.不同年齡段男性血清總睪酮和游離睪酮水平分析.中國計劃生育和婦產(chǎn)科,2014,6:16-18.

18 Schwartz D,Mayaux MJ,Spira A,et al.Semen characteristics as a function of age in 833 fertile men.Fertil Steril,1983,39:530-535.

19 Rolf C,Behre HM,Nieschlag E.Reprodoctive parameters of older compared to younger men of infertile couples.Int J Androl,1996,19:135-142.

20 Brahem S,Mehdi M,Elghezal H,et al.The effects of male aging on semen quality,sperm DNA fragmenttation and chromosomal abnormalities in an infertile population.J Assist Reprod Genet,2011,28:425-432.

21 Plastira K,Msaouel P,Angelopoulou R,et al.The effects of age on DNA fragmentation,chromatin packaging and conventional semen parameters in spermatozoa of oligoasthenoteratozoospermic patients.J Assist Reprod Genet,2007,24:437-443.

22 Jonge CD,Lafromboise M,Bosmans E,et al.Influence of the abstinence period on human sperm quality.Fertil Steril,2004,82:57-65.

23 熊承良,吳明章,劉繼紅,等.人類精子學.武漢:湖北科學技術出版社,2001:401-403.