血栓前體蛋白與P選擇素在急性冠脈綜合征患者的動態(tài)變化及其臨床意義探討

劉兆奕+劉麗敏

【摘要】 目的 研究血漿血栓前體蛋白（TpP）和血清P選擇素（Ps）水平在急性冠狀動脈（冠脈）綜合征（ ACS）患者中的動態(tài)變化， 探討兩者對ACS的預(yù)測價值。方法 收集136例受試人群的末梢血， 其中包括45例急性心肌梗死（AMI， AMI組） 和31例不穩(wěn)定心絞痛（UA， UA組）、30例穩(wěn)定心絞痛（SAP， SAP組）和30例健康者（正常對照組）。從ACS中選取AMI經(jīng)冠脈內(nèi)支架植入術(shù)（PCI術(shù)）開通罪犯血管者25例作為冠脈再通組， 經(jīng)藥物治療后冠脈未通者20例作為冠脈未通組， 用酶聯(lián)免疫分析法（ELISA）定量測定受試人群的血漿TpP水平和血清Ps水平。結(jié)果 正常對照組血漿TpP水平為（1.7±1.5）μg/ml， 血清Ps水平為（11.5±4.5）μg/ml， SAP組血漿TpP水平為（2.3±1.4）μg/ml， 血清Ps水平為（13.6±3.4）μg/ml， UA組血漿TpP水平為（6.2±2.1）μg/ml， 血清Ps水平為（27.7±15.3）μg/ml， AMI組血漿TpP水平為（22.8±9.1）μg/ml，

血清Ps水平為（46.2±18.1）μg/ml。正常對照組及SAP組血漿TpP水平及血清Ps水平比較， 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；UA組及AMI組血漿TpP水平及血清Ps水平均顯著高于正常對照組（P<0.01）。AMI組血漿TpP水平及血清Ps水平明顯高于UA組（P<0.01）。AMI患者診斷即可患者血漿TpP水平為（22.8± 9.1）μg/ml， 血清Ps水平為（46.2±18.1）μg/ml， 冠脈未通組血漿TpP水平為（19.3±7.4 ）μg/ml， 血清Ps水平為（40.6±13.4）μg/ml， 冠脈再通組血漿TpP水平為（ 9.8±7.1）μg/ml， 血清Ps水平為（15.2±7.6）μg/ml。冠脈未通組與AMI患者診斷即刻時的血漿TpP和血清Ps水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；冠脈開通組患者TpP和Ps水平明顯低于AMI診斷明確即刻時及冠脈未通組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)論 TpP和Ps水平的升高與ACS的發(fā)生及冠脈病變嚴重程度密切相關(guān)， 可以作為判斷ACS患者粥樣斑塊是否穩(wěn)定以及觀察病情變化的血清學(xué)指標(biāo)之一， 也可作為AMI冠脈再通治療是否成功的間接觀察指標(biāo)之一。

【關(guān)鍵詞】 急性冠狀動脈綜合征；血栓前體蛋白； P選擇素

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.04.004

【Abstract】 Objective To research dynamic changes of plasma thrombus precursor protein （TpP） and serum P-selectin （Ps） in acute coronary syndrome （ACS） patients， and to investigate their predictive value for ACS. Methods Peripheral blood of 136 study subjects were collects， including 45 cases with acute myocardial infarction （AMI， AMI group）， 31 cases with unstable angina pectoris （UA， UA group）， 30 cases with stable angina pectoris （SAP， SAP group） and 30 healthy people （normal control group）. Among patients with ACS， there were 25 cases receiving percutaneous coronary intervention for culprit vessel open in AMI as coronary artery reflow group and 20 cases receiving drug therapy with failed coronary reflow as non-coronary artery reflow group. Enzyme-linked immuno sorbent assay （ELISA） was applied to detect plasma TpP and serum Ps levels in study subjects. Results The normal control group had plasma TpP level as （1.7±1.5） μg/ml and serum Ps level as （11.5±4.5） μg/ml. SAP group had plasma TpP level as （2.3±1.4） μg/ml and serum Ps level as （13.6±3.4） μg/ml. UA gorup had plasma TpP level as （6.2±2.1） μg/ml and serum Ps level as （27.7±15.3） μg/ml. AMI group had plasma TpP level as （22.8±9.1） μg/ml and serum Ps level as （46.2±18.1） μg/ml. There was no statistically significant difference of plasma TpP and serum Ps levels between the normal control group and SAP group （P>0.05）. UA group and AMI group both had obviously higher plasma TpP and serum Ps levels than the normal control group （P<0.01）. AMI group had much higher plasma TpP and serum Ps levels than UA group （P<0.01）. Patients with immediately diagnosed AMI had plasma TpP level as （22.8±9.1） μg/ml and serum Ps level as （46.2±18.1） μg/ml. The non-coronary artery reflow group had plasma TpP level as （19.3±7.4） μg/ml and serum Ps level as （40.6±13.4） μg/ml， and the coronary artery reflow group had plasma TpP level as （9.8±7.1） μg/ml and serum Ps level as （15.2±7.6） μg/ml. There was no statistically significant difference of plasma TpP and serum Ps levels between the non-coronary artery reflow group and patients with immediately diagnosed AMI （P>0.05）. The coronary artery reflow group had obviously lower plasma TpP and serum Ps levels than those in patients with immediately diagnosed AMI and the non-coronary artery reflow group （P<0.01）. Conclusion Occurrence of ACS and severity of coronary artery lesion are closely correlated with increasing TpP and Ps levels， which can act as one of the serological indicators for judgment of stability of atheromatous plaque and change of disease condition， as well as one of the indirect observation indicators for successful coronary artery reflow in AMI.

【Key words】 Acute coronary syndrome； Thrombus precursor protein； P-selectin

急性冠脈綜合征 （acute coronary syndrome， ACS）是由不穩(wěn)定性冠狀動脈粥樣斑塊的破裂、出血， 繼發(fā)血栓形成為病理基礎(chǔ)的一組臨床綜合征[1]。探尋一些有效的內(nèi)源性生物因子監(jiān)測冠心病的早期動脈病變， 具有重要的臨床應(yīng)用價值[2]。血栓前體蛋白（thrombus precursor protein， TpP） 是血栓中不溶性纖維蛋白的直接前體， 它在血漿中的濃度反映了循環(huán)中凝血酶的活性。TpP 水平升高表明有急性血栓形成的危險， 具有較高的診斷特異性。P選擇素（P-selectin， Ps）是細胞粘附分子選擇素家族成員之一， 在炎癥反應(yīng)的啟動、介導(dǎo)白細胞在內(nèi)皮上粘附和聚集以及血栓形成過程中均發(fā)揮重要作用[3]。本研究通過檢測TpP和Ps在ACS及健康人群中的濃度， 探究二者作為預(yù)測不穩(wěn)定斑塊的血清學(xué)指標(biāo)， 對ACS的預(yù)測價值及對缺血—再灌注治療效果進行判定。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取病例均為本院心血管內(nèi)科2015年1～9月入院的76例ACS患者， 入選標(biāo)準符合國際心臟病學(xué)會及WHO制定的ACS診斷標(biāo)準， 以心電圖、心肌酶學(xué)檢查結(jié)果將其分為AMI組（45例）和UA組（31例）， 同時選取30例SAP患者作為SAP組；均排除感染、腫瘤、全身免疫性疾病、嚴重肝腎疾病。另選擇30例健康體檢者作為正常對照組。

1. 2 方法

1. 2. 1 標(biāo)本采集 所有患者組于入院次日清晨抽取肘靜脈血， 同時AMI組于確診即刻及經(jīng)PCI術(shù)冠狀動脈開通或經(jīng)藥物治療后12 h分別抽取肘靜脈血4 ml。正常對照組一次性采取肘靜脈血4 ml。所用標(biāo)本Ps管立即3000 r/min， 離心10 min后取上層血清， TpP管用枸椽酸鈉按1∶9比例抗凝后再以相同轉(zhuǎn)數(shù)離心吸取血漿， 置-70℃冷凍保存。

1. 2. 2 檢測方法 應(yīng)用ELISA定量測定血清Ps和血漿TpP水平 （試劑盒均由武漢優(yōu)爾生提供）。

1. 3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)± 標(biāo)準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 不同組別血漿TpP和血清Ps的檢測結(jié)果 正常對照組血漿TpP水平為（1.7±1.5）μg/ml， 血清Ps水平為（11.5±4.5）μg/ml，

SAP組血漿TpP水平為（2.3±1.4）μg/ml， 血清Ps水平為（13.6± 3.4）μg/ml， UA組血漿TpP水平為（6.2±2.1）μg/ml， 血清Ps水平為（27.7±15.3）μg/ml， AMI組血漿TpP水平為（22.8±9.1）μg/ml， 血清Ps水平為（46.2±18.1）μg/ml。正常對照組及SAP組血漿TpP水平比較， 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；UA組及AMI組血漿TpP水平均顯著高于正常對照組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。AMI組血漿TpP水平明顯高于UA組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。正常對照組及SAP組血清Ps水平比較， 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；UA組及AMI組血清Ps水平均顯著高于正常對照組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。AMI組血清Ps水平明顯高于UA組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見表1。

2. 2 AMI組再灌注治療效果與血漿TpP和血清Ps水平的動態(tài)變化 診斷即可患者血漿TpP水平為（22.8±9.1）μg/ml， 血清Ps水平為（46.2±18.1）μg/ml， 冠脈未通組血漿TpP水平為（19.3± 7.4）μg/ml， 血清Ps水平為（40.6±13.4）μg/ml， 冠脈再通組血漿TpP水平為（9.8±7.1）μg/ml， 血清Ps水平為（15.2±7.6）μg/ml。冠脈未通組與AMI診斷即刻時的血漿TpP和血清Ps水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；冠脈開通組患者TpP和Ps水平明顯低于AMI診斷明確即刻時及冠脈未通組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。見表2。

3 討論

ACS是由于侵蝕破裂的動脈粥樣硬化斑塊所誘發(fā)的一種較為嚴重的冠心病類型， 其粥樣斑塊中有大量脂質(zhì)核心與彈性蛋白含量較低的薄纖維帽， 其容易形成血栓， 造成血管管腔堵塞， 使心肌發(fā)生缺血性損傷甚至梗死， 引起相應(yīng)癥狀[4]。為了進一步更好的干預(yù)ACS的發(fā)生， 就需要對導(dǎo)致動脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定及破裂的因素做更深一步的追溯和更為詳細的研究。

TpP是一種可溶性纖維蛋白多聚體， 其是由纖維蛋白原受到凝血酶的影響， 聚合纖維蛋白單體而形成的， 且可能形成不溶性纖維蛋白導(dǎo)致出現(xiàn)血栓[5-7]。在ACS的形成過程中會形成急性血栓。有研究表明[8， 9]， TpP含量是判斷血栓形成的證據(jù)之一， 且有利于腦栓塞、下肢靜脈栓塞及AMI的診斷。由于患者在臨床癥狀發(fā)作時， 血液能快速的檢測到心肌損傷血清生物標(biāo)志物[10]， 因此在疾病早期進行TpP含量有利于疾病的診斷和對癥治療。Carville等[11]首先發(fā)現(xiàn)AMI患者TpP水平明顯高于正常人群， 非AMI患者TpP水平與正常人無區(qū)別。本研究結(jié)果與相關(guān)文獻[12， 13]具有一致性。因此， 在心肌出現(xiàn)不可逆損傷之前早期診斷AMI明顯改善患者的預(yù)后。Ps為細胞粘附分子中的選擇素家族， 其參與早期炎癥反應(yīng)發(fā)生。在ACS發(fā)作患者中， 冠狀動脈內(nèi)粥樣硬化斑塊破裂及內(nèi)膜受損并同時啟動凝血系統(tǒng)， 此過程它可以反饋性誘導(dǎo)Ps在活化血小板周圍及受損的內(nèi)皮細胞表面表達。經(jīng)免疫組化的實驗檢查發(fā)現(xiàn)[14， 15]， 在動脈粥樣硬化的各個不同時期及階段都有高劑量的Ps的表達。在血栓形成過程， 大量活化血小板及損傷內(nèi)皮細胞高度表達Ps， Ps介導(dǎo)血小板及白細胞活化、聚集， 促進血栓形成， 造成一種不良循環(huán)， 從而成為ACS病理基礎(chǔ)[16-18]。

本研究結(jié)果提示， 正常對照組血漿TpP水平為（1.7±1.5）μg/ml， 血清Ps水平為（11.5±4.5）μg/ml， SAP組血漿TpP水平為（2.3±1.4）μg/ml， 血清Ps水平為（13.6±3.4）μg/ml， UA組血漿TpP水平為（6.2±2.1）μg/ml， 血清Ps水平為（27.7±15.3）μg/ml， AMI組血漿TpP水平為（22.8±9.1）μg/ml， 血清Ps水平為（46.2±18.1）μg/ml。

正常對照組及SAP組血漿TpP水平及血清Ps水平比較， 差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；UA組及AMI組血漿TpP水平及血清Ps水平均顯著高于正常對照組（P<0.01）。AMI組血漿TpP水平及血清Ps水平明顯高于UA組（P<0.01）。AMI患者診斷即可患者血漿TpP水平為（22.8±9.1）μg/ml， 血清Ps水平為（46.2±18.1）μg/ml， 冠脈未通組血漿TpP水平為（19.3±7.4 ）μg/ml， 血清Ps水平為（40.6±13.4）μg/ml， 冠脈再通組血漿TpP水平為（9.8±7.1）μg/ml， 血清Ps水平為（15.2±7.6）μg/ml。冠脈未通組與AMI患者診斷即刻時的血漿TpP和血清Ps水平比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；冠脈開通組患者TpP和Ps水平明顯低于AMI診斷明確即刻時及冠脈未通組， 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。

綜上所述， TpP和Ps水平的升高與ACS的發(fā)生及冠脈病變嚴重程度密切相關(guān)， 可以作為判斷ACS患者粥樣斑塊是否穩(wěn)定以及觀察病情變化的血清學(xué)指標(biāo)之一， 也可作為AMI冠脈再通治療是否成功的間接觀察指標(biāo)之一。

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