中國不同民族HLA 多態(tài)性與乙肝相關(guān)性研究進(jìn)展①

林牧，申元英，②，蔣錫超

（1.大理學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，云南 大理 671000 E-mail：546699462＠qq.com；2.大理學(xué)院公共衛(wèi)生學(xué)院，云南 大理 671000）

乙型肝炎病毒（HBV）是一種嗜肝病毒，主要存在于肝細(xì)胞內(nèi)并損害肝細(xì)胞，引起肝細(xì)胞炎癥、壞死、纖維化。我國乙肝報(bào)告病例多年來居所有法定傳染病的首位，約占總傳染病總數(shù)的1／3。據(jù)2006年全國人群血清流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國1～59歲人群HBsAg攜帶率為7.18%，估算全國HBsAg攜帶者約為9 300萬人［1］。研究顯示，HBV 感染的結(jié)局主要依賴于宿主免疫應(yīng)答［2］，而個(gè)體的免疫應(yīng)答能力取決于主要組織相容性復(fù)合體（Major histocompatibility complex，MHC）［3］。

人類MHC分子即人類白細(xì)胞抗原（Human leucocyte antigen，HLA）是目前所知的最具有高度多態(tài)性的遺傳系統(tǒng)，作為個(gè)體組織細(xì)胞的遺傳標(biāo)志，特別是免疫細(xì)胞上的HLA 具有向抗原特異性T 細(xì)胞受體傳遞抗原多肽的生物學(xué)特性，在抗原識(shí)別、免疫應(yīng)答和免疫調(diào)控，破壞外來抗原靶細(xì)胞方面起著重要作用。近年研究發(fā)現(xiàn)，某些疾病的發(fā)生與一些特殊型別的HLA 檢出率相關(guān)。與HLA 有關(guān)的疾病，大多是發(fā)病機(jī)制不明并伴有免疫功能異常和有遺傳傾向的疾病。因此，分析HLA與疾病的相關(guān)性不僅有助于某些疾病的診斷，而且對了解HLA 在某些疾病的發(fā)病機(jī)制中的作用有重要意義。HLA-Ⅱ類分子的一些等位基因已經(jīng)被證實(shí)在HBV 持續(xù)感染中起重要作用，HLA-Ⅱ類等位基因多態(tài)性與HBV 感染與轉(zhuǎn)歸的研究也取得了一定進(jìn)展［4-5］。本文綜述近年來中國不同民族HLA等位基因多態(tài)性與乙型病毒性肝炎相關(guān)性研究進(jìn)展。

1 HLA 的結(jié)構(gòu)、組織分布和功能特點(diǎn)

HLA 是具有高度多態(tài)性的同種異體抗原，其化學(xué)本質(zhì)為一類糖蛋白，由一條α重鏈（被糖基化的）和一條β輕鏈非共價(jià)結(jié)合而成。其肽鏈的氨基端向外（約占整個(gè)分子的3／4），羧基端穿入細(xì)胞質(zhì)，中間疏水部分在胞膜中。HLA 按其分布和功能分為Ⅰ類抗原和Ⅱ類抗原。

HLA-Ⅰ類分子由重鏈（α鏈）和β2-m 組成，分布于所有有核細(xì)胞表面，具有識(shí)別和提成內(nèi)源性抗原肽，與輔助受體CD8結(jié)合，對CTL 的識(shí)別起限制作用。HLA-Ⅱ類分子由α鏈和β鏈組成，僅表達(dá)于淋巴組織中的某些細(xì)胞表面，如專職抗原提成細(xì)胞（包括B細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞）、活化的T 細(xì)胞等，具有識(shí)別和提成外源性抗原肽，與輔助受體CD4結(jié)合，對Th的識(shí)別起限制作用。HLA-Ⅰ類和HLA-Ⅱ類分子分別是CD8和CD4分子的配體，有穩(wěn)定和促進(jìn)免疫細(xì)胞間相互結(jié)合，增強(qiáng)免疫應(yīng)答和啟動(dòng)或效應(yīng)功能。只有當(dāng)相互作用的細(xì)胞間MHC分子表達(dá)一致時(shí)，才能發(fā)揮有效的免疫應(yīng)答，即MHC限制性，從而參與免疫調(diào)節(jié)和免疫細(xì)胞間相互作用［6-7］。

2 中國不同民族HLA 基因多態(tài)性與乙型病毒性肝炎相關(guān)性

依據(jù)HLA 頻率分布的趨勢，我國大陸HLA 多態(tài)性分布以長江為界，大致分為華北和華南兩大群體［8］。

2.1 華北群體

2.1.1 與HBV 感染不同結(jié)局的關(guān)聯(lián) 盧亮平［9］對中國北方漢族人群中207例慢性乙型肝炎患者、212例無癥狀HBV 長期攜帶者（HBV 攜帶者）和148例HBV 自限性感染者作為研究對象的研究中發(fā)現(xiàn)：攜帶HLA-DQA1＊0302等位基因者感染HBV 后可能增加慢性乙型肝炎發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，而攜帶HLADQA1＊0301和HLA-DQA1＊1102可能降低慢性乙型肝炎發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。其他研究中發(fā)現(xiàn)該人群中HLA-DR＊9可能有助于HBV 對宿主的感染，HLA-DR＊8，DR＊12可能有助于HBV 對宿主的持續(xù)感染，對HBV 感染的慢性化有促進(jìn)作用；而HLA-DR13，DR＊15可能有助于宿主對HBV 的清除，對HBV 感染的慢性化有抑制作用［10］。山東漢族人群中發(fā)現(xiàn)HLA-B55、71、72基因表型與山東地區(qū)乙肝慢性化相關(guān)。而HLA-B54基因型與抗HBV 的感染相關(guān)，免疫遺傳因素參與慢性乙肝的發(fā)病機(jī)制［11］。安紀(jì)紅等［12］研究表明蒙古族人群HBV 感染的易感基因可能為HLA-DRB1＊03 和HLADRB1＊07，抗性基因可能為DRB1＊04，進(jìn)一步說明特異性的遺傳因素可增加或降低人群對HBV 感染的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后。也有研究表明攜帶HLA-DRB1＊03、HLA-DRB1＊07與慢性乙型肝炎持續(xù)發(fā)展相關(guān)［13］。HLA-DRB1＊1201／1202等位基因可能為河南地區(qū)漢族人群乙肝后肝硬化形成的易感基因［14］。而HLA-DRB1＊12也可能是藏族人群乙型肝炎易感基因，是該人群乙型肝炎進(jìn)展為肝硬化的關(guān)鍵位點(diǎn)［15］。李真等［16］通過比較HLA-DQA1的6個(gè)等位基因在新疆維族、漢族乙肝患者病例組及維族、漢族健康體檢對照組四組研究對象分布頻率的差異，分析HLA-DQA1基因多態(tài)性是否與HBV感染結(jié)局相關(guān)聯(lián)。對研究結(jié)果進(jìn)行匯總并比較分析顯示：HLA-DQA1＊0501是維族HBV 感染保護(hù)基因，也是維族健康對照者的優(yōu)勢基因。有研究表明HLA-DRB1＊03、HLADRB1＊07與陜西地區(qū)漢族人HBV 感染后的慢性化相關(guān)聯(lián)，HLA-DRB1＊15為陜西地區(qū)漢族人乙肝感染的抗性基因［17］。2.1.2 與乙肝疫苗免疫應(yīng)答的關(guān)聯(lián) 乙型肝炎疫苗（Hepatitis B vaccine）的免疫效果現(xiàn)已肯定，接種后顯著降低人群乙型肝炎病毒的感染率，從而降低慢性肝炎和原發(fā)性肝癌的發(fā)生率。應(yīng)答水平的差異受多種因素影響，其無應(yīng)答發(fā)生機(jī)制迄今尚不明確，目前認(rèn)為與HLA 的等位基因多態(tài)性有關(guān)［18］。吉林地區(qū)漢族乙肝疫苗接種后經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)HLA-DRB1＊14等位基因可能與無或低應(yīng)答相關(guān)，而HLA-DRB1＊12、15等位基因可能與中或強(qiáng)應(yīng)答相關(guān)［19］。

2.2 華南群體

2.2.1 與HBV 感染不同結(jié)局的關(guān)聯(lián) 陳智平等［20］采用序列特異性引物-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（SSP-PCR）法檢測壯族輕、中、重度各30例慢乙肝患者HLA-DQA1等位點(diǎn)并進(jìn)行基因分析研究得到攜帶DQA1＊0103等位基因個(gè)體感染HBV 以后更易發(fā)展為輕、中度肝炎，DQA1＊0301可能為重度慢乙肝抗性基因的結(jié)論。而韋康來等［21］研究也發(fā)現(xiàn)DQA1＊0103可能是廣西壯族慢性乙型病毒性肝炎患者易感基因，DQA1＊0102可能是保護(hù)基因。萬裴琦等［22］對廣西漢族老年慢性乙型肝炎患者HLA-DRB1基因多態(tài)性進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，慢性乙型肝炎組的HLA-DRB1＊03等位基因頻率明顯較健康對照組高，而HLA-DRB1＊15等位基因頻率明顯低于健康對照組（P ＜0.05），HBV 高復(fù)制狀態(tài)下的DRB1＊07基因位點(diǎn)明顯較低復(fù)制狀態(tài)組多見（P ＜0.05），得出了漢族老年人慢性乙型肝炎患者與HLA-DRB1基因多態(tài)性之間存在比較強(qiáng)的相關(guān)性的結(jié)論。

2.2.2 與乙肝疫苗免疫應(yīng)答的關(guān)聯(lián) 據(jù)研究顯示，廣西漢族人群HLA-DRB1＊15 表達(dá)與乙肝疫苗中、強(qiáng)應(yīng)答相關(guān)［23］。民族差異不是廣西人群乙肝疫苗應(yīng)答效果的影響因素，廣西壯、漢族人群中攜帶HLA-DRB1＊07基因都可能是導(dǎo)致機(jī)體對乙肝疫苗無／弱應(yīng)答的因素［24］。另有研究顯示，浙江寧波地區(qū)漢族人群接種乙肝疫苗免疫失敗與HLA-DR 抗原有關(guān)，HLA-DRB1＊O7可能為免疫失敗的易感基因［25］。對1 400名廣東籍漢旗學(xué)生進(jìn)行重組乙肝疫苗標(biāo)準(zhǔn)接種，末次接種后第8周檢測血清抗HBs抗體水平，對無、弱應(yīng)答者和強(qiáng)應(yīng)答者通過PCR-SSP法檢測HLA-DR＊2、7、9，其結(jié)果顯示廣東漢族人群乙肝疫苗無、弱應(yīng)答與HLA-DR＊7相關(guān)，與HLA-DR＊02的低攜帶有關(guān)［26］。也得出HLA-DRB1＊07與廣州某大學(xué)漢族人群乙肝疫苗無、弱應(yīng)答相關(guān)，HLA-DRB1＊02 與乙肝疫苗中、強(qiáng)應(yīng)答相關(guān)的結(jié)論［27］。涂正坤等［28］研究顯示，湖北漢族人群對乙肝疫苗免疫無應(yīng)答與HLA-DRB1＊10相關(guān)。

3 小結(jié)

通過綜述近年來中國不同民族HLA 等位基因多態(tài)性與乙型病毒性肝炎相關(guān)性研究進(jìn)展，我們發(fā)現(xiàn)國內(nèi)關(guān)于不同民族間HLA 多態(tài)性與HBV 相關(guān)性研究結(jié)果在不同地區(qū)、不同民族及人群中差異較大。同時(shí)研究存在一定的問題：①研究的人群具有局限性，都局限于華南華北的幾個(gè)群體幾個(gè)民族，沒有對全國范圍內(nèi)的不同民族進(jìn)行研究分析。②HLA 基因本身具有地域和人種差異。③已研究的HLA 基因具有局限性，大多局限于HLA-DRB1基因和HLA-DQA 基因，而HLA 是一個(gè)豐富的基因，還可能有其他基因座位與HBV 感染密切相關(guān)。④研究方法不同、樣本量不同、誤差存在等問題。

針對以上問題，為了更好的闡述HBV 感染與HLA 基因型在不同人群中關(guān)系，我們應(yīng)該加強(qiáng)全世界范圍內(nèi)的協(xié)作，擴(kuò)大HLA 上不同基因座位研究，增強(qiáng)對不同人群HBV 感染與HLA 相關(guān)性研究的探索，增加樣本量，提高基因分型分辨率，為探明HBV 相關(guān)的疾病易感（或拮抗）基因及其在發(fā)病機(jī)制中的作用，為乙肝的防治尋找新的突破口，從而使人類從基因水平預(yù)防乙肝病毒感染和治療乙肝所致疾病成為可能。

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