B—轉(zhuǎn)化生長因子與肝細胞生長因子在腎間質(zhì)纖維化中的關系

于爽　趙宏偉　魏紅艷

摘要：目的 探討轉(zhuǎn)化生長因子-B（TGF-B）和肝細胞生長因子（HGF）在腎間質(zhì)纖維化中的關系。方法 選擇腎活檢方法，明確診斷45例腎間質(zhì)纖維化患者，非腎小管間質(zhì)患者17例，分為實驗組1組，伴隨腎小管間質(zhì)患者28例，分為實驗2組。同時，選擇同期腎活檢非腎間質(zhì)纖維化患者，病例改變較強腎組織18例，分為對照組。選擇免疫組織化學方法，分析轉(zhuǎn)化生長因子-B和肝細胞生長因子在腎組織表達情況。結果 在所有實驗對象腎組織中，HGF和TGF-B都有表達，在對照組、實驗1組與實驗2組均逐漸升高，三組之間存在顯著性差異（P<0.05）。HGF和TGF-B表達，和腎小管間質(zhì)指數(shù)具有正相關關系，相關系數(shù)分別為0.660和0.762，。同時，HGF和TGF-B兩者表達量，經(jīng)過分析，也是一種正相關關系，相關系數(shù)0.583。結論 針對腎間質(zhì)纖維化，HGF和TGF-B均有較高表達。隨著腎間質(zhì)纖維化不斷發(fā)展，在腎組織表達量也逐漸著增加，使得腎小管間質(zhì)逐漸發(fā)展為纖維化，在促進腎臟纖維化中，具有一定協(xié)同作用。

關鍵詞：HGF；TGF-B；腎小球硬化；腎組織

1資料與方法

1.1一般資料 選擇腎活檢方法，明確診斷45例腎間質(zhì)纖維化患者，非腎小管間質(zhì)患者17例，分為實驗組1組，伴隨腎小管間質(zhì)患者28例，分為實驗2組。同時，選擇同期腎活檢非腎間質(zhì)纖維化患者，病例改變較強腎組織18例，分為對照組。在45例患者中，由3例腎病范圍，表現(xiàn)為大量蛋白尿，其他42例屬于腎病綜合征。在45例患者中，由4例腎活檢時，發(fā)現(xiàn)有腎衰竭癥狀，主要為肌酐、血尿素氮比正常值水平明顯要高，主要在實驗2組中。18例對照組患者，主要為單純性鏡下血尿。

1.2方法 選擇免疫組織化學方法，分析轉(zhuǎn)化生長因子-B和堿性成纖維細胞在腎組織表達情況。具體步驟如下：把所選病例腎組織標本存檔，2 um切片，設置防脫片，在小于60℃環(huán)境下過夜。選擇梯度酒精脫水，選擇二甲苯脫蠟，選擇蒸餾水洗脫。在抗原修復之后，滴加TGF-B的克隆抗體，和bFGF克隆抗體。

顯微圖像分析：處于顯微鏡下，實施單盲讀片，與DAB染色強度、染色范圍，準確判斷結果。若DAB顯示陽性，在特定區(qū)域明確定位，出現(xiàn)對比鮮明棕黃色，屬于特異性陽性反應。如果棕黃色愈深，則陽性強度越強。如果沒有棕黃色著色，則屬于陰性表達。在腎小球、腎小管區(qū)域內(nèi)，選擇10個高倍視野監(jiān)測，通過圖像輸入和增強，采取二值化處理和分割，獲取免疫組織化學指數(shù)。

1.3統(tǒng)計學分析 本次研究患者的臨床資料與數(shù)據(jù)全部采用SPSS18.0統(tǒng)計學軟件進行處理分析，計量資料采用t檢驗，治療前后采用？字2檢驗，P<0.05為差異有明顯性，有統(tǒng)計學意義。

2結果

所有實驗對象腎組織中，HGF和TGF-B都有表達，在對照組、實驗1組與實驗2組均逐漸升高，三組之間存在顯著性差異（P<0.05）。HGF和TGF-B表達，和腎小管間質(zhì)指數(shù)具有正相關關系，相關系數(shù)分別為0.660和0.762。同時，HGF和TGF-B兩者表達量，經(jīng)過分析，也是一種正相關關系，相關系數(shù)0.583。

3討論

腎間質(zhì)纖維化，是腎小球部分出現(xiàn)毛細血管非炎癥性的硬化性疾病，在確診為腎間質(zhì)纖維化后，經(jīng)過10年病程發(fā)展，約有38%患者發(fā)展為腎衰竭。進行20年隨訪，大約15%～77%患者，進入終末期腎衰竭。慢性腎臟病近年在我國的發(fā)病率呈逐漸增高的趨勢。我國患者腎間質(zhì)。

TGF-β作為一種生物學效應較多的細胞因子，如果機體組織發(fā)生損傷，則TGF-β極有可能被炎性細胞合成進行釋放，例如淋巴、血小板、巨噬細胞或單核細胞。TGF-β如果被釋放、活化，進而導致纖維細胞增殖或者分裂，蛋白FN與纖維結合之后，多種細胞基質(zhì)經(jīng)過沉積，可產(chǎn)生蛋白多糖或者膠原，利用蛋白酶合成，增加了蛋白酶抑制水平，對細胞外基質(zhì)降解具有一定抑制作用，可促進損傷修復。然而，TGF-β如果持續(xù)表達，或過度表達，會引起臟器、皮膚纖維化。因此，對于腎間質(zhì)損傷或炎癥，或纖維化三者之間，TGF-β具有一定連接作用。

肝細胞生長因子，是細胞分化、生長的關鍵性調(diào)節(jié)因子，可促進血管生成，實現(xiàn)細胞增殖，促進細胞遷移和趨化，具有一定活性作用。對于細胞分化，以及機體發(fā)育，肝細胞生長因子發(fā)揮重要作用，通過細胞膜表面，和特異性配體進行結合，在細胞內(nèi)能夠產(chǎn)生級聯(lián)反應，進而發(fā)揮生物學效應。HGF在神經(jīng)外胚層、中胚層，對于細胞來說，具有明顯促增殖作用，在組織創(chuàng)傷修復中，會大多數(shù)參與，是一種關鍵性創(chuàng)傷愈合因子，可產(chǎn)生許多生物學作用，對于腎間質(zhì)纖維細胞和系膜細胞，能夠促進增殖。同時，對于足突細胞，能夠產(chǎn)生一定破壞作用，使得腎臟疾病逐漸纖維化。因此，對于腎間質(zhì)纖維化，HGF具有非常重要、實際檢測意義。

在本組實驗中，在所有實驗對象腎組織中，HGF和TGF-B都有表達，在對照組、實驗1組與實驗2組均逐漸升高，三組之間存在顯著性差異（P<0.05）。HGF和TGF-B表達，和腎小管間質(zhì)指數(shù)具有正相關關系，相關系數(shù)分別為0.660和0.762，。同時，HGF和TGF-B兩者表達量，經(jīng)過分析，也是一種正相關關系，相關系數(shù)0.583。這說明， 針對腎間質(zhì)纖維化，HGF和TGF-B均有較高表達。隨著對腎間質(zhì)纖維不斷發(fā)展，在腎組織表達量也逐漸著增加，使得腎小管間質(zhì)逐漸發(fā)展為纖維化，在促進腎臟纖維化中，具有一定協(xié)同作用。同時，HGF、TGF-B在診斷對腎間質(zhì)纖維化疾病中，具有重要診斷價值。

參考文獻：

[1]Kiryluk K，Julian B A，Wyatt R J，et al.Genetic studies of IgA nephropathy：past，present，and future[J].Pediatric Nephrology，2010，25（11）：2257-2268.

[2]張巧玲，蔣小云，吳偉，等.IgA對人腎小球系膜細胞TGF-β1、Smad7和纖連蛋白表達的影響[J].中國誤診學雜志，2010，10（7）：1513-1516. [3]衛(wèi)建平，高麗芳，王晨，等.IgA腎病中轉(zhuǎn)化生長因子β1和Smad7 蛋白的表達及其與臨床病理特征的相關性分析[J].中華臨床醫(yī)師雜志，2011，5（18）：5276-5279.

[4]劉林林，陳瑩，劉楠，等.血清B細胞活化因子檢測在IgA腎病中的意義[J].中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2013（6）：2327-2331.

[5]杜園園，呂吟秋，黃朝興，等.血和尿轉(zhuǎn)化生長因子-β1 在預測 IgA 腎病進展中的臨床應用價值[J].浙江醫(yī)學，2009，30（11）：1173-1175.

[6]張國珍，吳小川，彭曉杰，等.黃芪對實驗性 IgA腎病大鼠 Th1/Th2免疫失衡與核因子-κB 表達的影響[J].實用兒科臨床雜志，2010，25（5）：357-360.

[7]沈蓮莉，鄧躍毅，陳以平.腎平顆粒對 IgA 腎病小鼠腎組織病理及 TGF―β1 的影響[J].遼寧中醫(yī)雜志，2008，34（11）：1652-1653.

[8]馮現(xiàn)竹，侯平，朱厲，等.轉(zhuǎn)鐵蛋白受體基因多態(tài)性與 IgA 腎病易感性及臨床病理表型的相關性[J].北京大學學報：醫(yī)學版，2008（40）：369-373.

[9]衛(wèi)建平，王秋紅，王晨，等.肝細胞生長因子 轉(zhuǎn)化生長因子-β在IgA 腎病腎組織的表達及意義[J].中國藥物與臨床，2010，10（4）：381-384.

編輯/肖慧