白頭翁屬藥材鑒別及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究進(jìn)展

錢江平，楊 俊，王文昊，詹志來(lái)

(1.安徽中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，安徽 合肥 230012；2.安徽省中醫(yī)藥科學(xué)院，安徽 合肥 230012；3.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心道地藥材國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，北京 100700)

白頭翁屬藥材鑒別及質(zhì)量評(píng)價(jià)研究進(jìn)展

錢江平1,2，楊 俊1,2，王文昊1,2，詹志來(lái)3

(1.安徽中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，安徽 合肥 230012；2.安徽省中醫(yī)藥科學(xué)院，安徽 合肥 230012；3.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心道地藥材國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，北京 100700)

綜述了白頭翁屬藥材白頭翁、朝鮮白頭翁及興安白頭翁在藥材性狀鑒別、顯微鑒別及質(zhì)量控制方面的研究概況，分析歸納了文獻(xiàn)中白頭翁顯微鑒定存在的分歧，建議對(duì)白頭翁的鑒別進(jìn)行系統(tǒng)研究，為白頭翁的藥材鑒別提供依據(jù)；對(duì)白頭翁屬幾種藥材中白頭翁皂苷A3、白頭翁皂苷D等成分進(jìn)行深入研究，為擴(kuò)大藥源提供支撐；開(kāi)展白頭翁組織與化學(xué)成分積累關(guān)系研究，揭示白頭翁藥材“辨狀論質(zhì)”的科學(xué)內(nèi)涵。

白頭翁；朝鮮白頭翁；興安白頭翁；鑒別；質(zhì)量評(píng)價(jià)

白頭翁為常用中藥材，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》[1](P262-263)，具有治療狂易寒熱，癥瘕積聚等作用?！吨袊?guó)藥典》[2](P104)記載白頭翁來(lái)源于毛茛科植物白頭翁Pulsatillachinensis(Bge.) Regel的干燥根，具有燥濕殺蟲、涼血止痢、清熱解毒的功效?，F(xiàn)代藥理研究表明白頭翁具有治療炎癥、抗腫瘤、增強(qiáng)免疫功能和治療阿爾茨海默癥等作用[3-5]。目前白頭翁藥材均來(lái)源野生，隨著藥理研究的不斷深入，白頭翁用量逐漸增大，野生資源量越來(lái)越少。藥材市場(chǎng)調(diào)查顯示，白頭翁分布區(qū)河北、山西、河南、安徽等地的白頭翁藥材產(chǎn)量逐年減少[6]，東北貨逐漸成為市場(chǎng)上白頭翁藥材的主流；產(chǎn)地調(diào)查顯示我國(guó)東北地區(qū)白頭翁屬植物朝鮮白頭翁P.cernua(Thunb.) Berchtold et Presl.、興安白頭翁P.dahurica(Fisch.) Spreng.資源量豐富，尤其是朝鮮白頭翁個(gè)大、色澤好而藥農(nóng)樂(lè)意采挖，占市場(chǎng)白頭翁藥材的較大份額[7]，東北出產(chǎn)的白頭翁藥材基原包括白頭翁、朝鮮白頭翁、興安白頭翁等多種。前期關(guān)于白頭翁的藥理及化學(xué)成分研究進(jìn)展的報(bào)道較多[3，8-11]，但關(guān)于白頭翁與朝鮮白頭翁、興安白頭翁在性狀鑒別、顯微鑒別及質(zhì)量評(píng)價(jià)方面的綜述未見(jiàn)報(bào)道。本文通過(guò)對(duì)白頭翁類藥材——白頭翁、朝鮮白頭翁及興安白頭翁的性狀鑒別、顯微鑒別及質(zhì)量評(píng)價(jià)等方面的研究報(bào)道進(jìn)行歸納與分析，旨在為白頭翁類藥材鑒別提供依據(jù)，為白頭翁的進(jìn)一步研究與應(yīng)用提供參考。

1 性狀鑒別研究

1.1 白頭翁

《中國(guó)藥典》[2](P104)記載了白頭翁P.chinensis(Bge.)Regel根的性狀特征，呈圓柱形或圓錐形，稍扭曲，長(zhǎng)6～20 cm，直徑0.5～2 cm。表面黃褐色或黃棕色，具不規(guī)則的縱皺紋或縱溝，有的有裂隙或網(wǎng)狀裂紋，皮部常脫落露出木部，近根頭處常見(jiàn)朽狀凹洞。根頭部有白色絨毛，有的可見(jiàn)鞘狀葉柄殘基。質(zhì)硬而脆，斷面皮部淡黃色或淡黃棕色，木部黃白色。亦有記載其根呈劈破狀[12](P134-148)，根頭有時(shí)分叉，中部以下常有2～3支根[13](P239-243)；根頭處可見(jiàn)幼葉[13](P239-243)或鱗葉[14](P59-120)，還有記載根頭部葉柄可達(dá)20 cm，先端撕裂，呈纖維狀[15]。

1.2 朝鮮白頭翁

與白頭翁性狀基本相同，區(qū)別點(diǎn)主要為直徑不同，有記載朝鮮白頭翁較細(xì)，直徑0.4～0.8 cm[12](P134-148)，[13](P239-243)，[14](P59-120)，[16](P8-9)，[17]；也有記載較粗，直徑可達(dá)2 cm[17,18]，最長(zhǎng)可達(dá)30 cm[17]。

1.3 興安白頭翁

文獻(xiàn)報(bào)道興安白頭翁藥材性狀與白頭翁基本相似，區(qū)別點(diǎn)為較白頭翁細(xì)，直徑0.5～0.7 cm[13](P239-243)，[14](P59-120)，[16](P8-9)，長(zhǎng)10～20 cm；也有報(bào)道較粗，直徑可達(dá)2.4 cm[18]；表面顏色稍深，呈棕褐色或黃褐色[14](P59-120)；根中下部常有分枝[13](P239-243)，[14](P59-120)，[16](P8-9)，[18]。

2 顯微鑒別研究

文獻(xiàn)報(bào)道的白頭翁、朝鮮白頭翁以及興安白頭翁的顯微鑒別，可分為組織構(gòu)造及粉末鑒別兩個(gè)部分。

2.1 組織構(gòu)造研究

2.1.1 白頭翁

早在20世紀(jì)50年代，徐國(guó)鈞先生[15]報(bào)道了白頭翁的顯微構(gòu)造，為雙子葉植物根的構(gòu)造，其組織構(gòu)造從外到內(nèi)，依次由表皮、皮層、韌皮部、形成層及木質(zhì)部等組成，但幼根與老根結(jié)構(gòu)有較大差異。幼根最外保護(hù)組織為表皮或表皮脫落后形成后生皮層；皮層為5～7層薄壁細(xì)胞組成，具內(nèi)皮層；常無(wú)韌皮纖維。老根中表皮、皮層及內(nèi)皮層大多脫落，最外層由韌皮部細(xì)胞行使保護(hù)功能，韌皮部由篩管群、韌皮薄壁細(xì)胞及韌皮纖維組成，韌皮纖維單個(gè)散在或成束；形成層明顯；木質(zhì)部約占根的1/2，木質(zhì)部束2～5個(gè)或更多；近根頭部髓部明顯。

綜合其他文獻(xiàn)報(bào)道白頭翁結(jié)構(gòu)類型基本與徐國(guó)鈞先生的報(bào)道相似，主要區(qū)別在最外的保護(hù)組織、韌皮纖維的多少、木質(zhì)部束數(shù)及所占的比例、髓部的有無(wú)以及分泌組織是否存在。李廣民[19]、王桂芹[20]均報(bào)道白頭翁次生構(gòu)造最外為木栓組織，且栽培品的木栓組織更發(fā)達(dá)[20]。關(guān)于韌皮纖維，有報(bào)道韌皮纖維偶見(jiàn)或單個(gè)散在[18,21]；也有報(bào)道韌皮纖維散在或成束[14],[22](P997-980),[23](P328-332)。關(guān)于白頭翁的木質(zhì)部束，有文獻(xiàn)報(bào)道木質(zhì)部為3束約占橫切面半徑的3/5～4/7[14](P59-120)；亦有報(bào)道木質(zhì)部6～7束[21]；還有報(bào)道其形成了3個(gè)扇面[18]。關(guān)于白頭翁中髓的存在，有文獻(xiàn)記載較粗的根有髓[22](P997-980),[23](P328-332)；有報(bào)道老根有髓而幼根無(wú)髓[21]；也有文獻(xiàn)描述根上部(粗端)有髓而下部(細(xì)端)無(wú)髓[24](P130)；也有報(bào)道整根的中央具有髓部[18]，中心可見(jiàn)狹長(zhǎng)裂隙；也有報(bào)道整根均無(wú)髓[19]；亦有記載藥用部位存在根狀莖中央有髓[14](P59-120)。

王桂芹等[20,25]報(bào)道白頭翁藥用部位中存在分泌組織，且主要存在于栓內(nèi)層和韌皮部中。組織化學(xué)定位顯示皂苷類物質(zhì)主要分布和積累在分泌細(xì)胞、分泌腔和分泌道中，且分泌腔和分泌道的數(shù)量變化可以作為判斷皂苷類成分含量變化的結(jié)構(gòu)性指標(biāo)，生長(zhǎng)4-5年的白頭翁藥用部位中分泌組織數(shù)量最多[25]。

2.1.2 朝鮮白頭翁

研究報(bào)道朝鮮白頭翁與白頭翁的構(gòu)造基本相似，由表皮、皮層、韌皮部、形成層、木質(zhì)部等部分構(gòu)成[14](P59-120),[17],[18],[21]。表皮及皮層僅幼嫩根部可見(jiàn)，老根最外層常為韌皮部，韌皮纖維多見(jiàn)[21]。木質(zhì)部導(dǎo)管3束約占半徑的1/2[14](P59-120),[17],[18],[21]，有時(shí)可見(jiàn)6～7束[17]，大導(dǎo)管與小導(dǎo)管相間排列[21]。中央無(wú)髓[14](P59-120),[17],[18]或有髓，常有裂隙[21]，或根頭部有髓[17]。亦有報(bào)道藥用部位存在根狀莖，中央有髓[14](P59-120)。

2.1.3 興安白頭翁

文獻(xiàn)報(bào)道興安白頭翁的顯微構(gòu)造與白頭翁基本相似，亦是由表皮、皮層、韌皮部、形成層、木質(zhì)部組成[14](P59-120),[17],[21]。表皮及皮層常脫落，使最外部分為木栓化增厚的韌皮細(xì)胞[21]。韌皮纖維單個(gè)散在或數(shù)個(gè)相連。有的排列成斷續(xù)的環(huán)狀[17]。木質(zhì)部導(dǎo)管略作2束狀[17,18,21]，或成2～3歧分叉[17,21]，也有報(bào)道[21]木射線部位可見(jiàn)3～7個(gè)斷續(xù)同心環(huán)狀倒“V”型裂隙。中央有髓[14](P59-120),[17],[21]，或根頭部有髓[17]。亦有報(bào)道[14](P59-120)藥用部位存在根狀莖，中央有髓。

2.2 粉末特征研究

文獻(xiàn)報(bào)道顯示，白頭翁、朝鮮白頭翁、興安白頭翁的粉末顯微特征沒(méi)有太大差異，主要鑒別特征有纖維、非腺毛、導(dǎo)管。纖維呈梭形或紡錘形，長(zhǎng)可達(dá)390 μm，直徑可達(dá)42 μm。非腺毛常破碎，為單細(xì)胞；完整的非腺毛細(xì)長(zhǎng)，較平直，上部漸尖，直徑6～32 μm，表面有螺狀角質(zhì)紋理。導(dǎo)管為網(wǎng)紋導(dǎo)管或具緣紋孔導(dǎo)管，有時(shí)可見(jiàn)螺紋導(dǎo)管，導(dǎo)管壁可見(jiàn)穿孔板[14](P59-120)。粉末中還有木栓細(xì)胞、淀粉粒[18]、葉柄下表皮細(xì)胞[14](P59-120),[17]、后生皮層細(xì)胞[14](P59-120),[17],[26](P66-67)。

3 質(zhì)量評(píng)價(jià)研究

《中國(guó)藥典》[2](P104)記載白頭翁質(zhì)量評(píng)價(jià)以高效液相色譜法為含量測(cè)定方法，以白頭翁皂苷B4作為白頭翁藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)成分。對(duì)于白頭翁類藥材化學(xué)成分的含量測(cè)定，相關(guān)報(bào)道主要以HPLC法測(cè)定白頭翁皂苷B4，少量報(bào)道測(cè)定總皂苷、白頭翁皂苷D以及23-羥基白樺酸，比較不同基原、不同產(chǎn)地以及不同采收期成分含量的區(qū)別。

3.1 白頭翁屬不同基原藥材成分的含量測(cè)定

郝寧等[27]對(duì)4種白頭翁屬藥材的總皂苷進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)興安白頭翁大于朝鮮白頭翁大于白頭翁大于細(xì)葉白頭翁。李海燕等[28]通過(guò)測(cè)定白頭翁、興安白頭翁、朝鮮白頭翁及細(xì)葉白頭翁藥材中白頭翁皂苷B4的含量，結(jié)果顯示白頭翁中的含量最高。崔曉東等[29]對(duì)遼寧省大連大黑山的野生白頭翁及朝鮮白頭翁中白頭翁皂苷B4進(jìn)行含量測(cè)定，顯示白頭翁要稍高于朝鮮白頭翁。

3.2 不同產(chǎn)地白頭翁類藥材成分的含量測(cè)定

不同產(chǎn)地白頭翁成分的含量測(cè)定 報(bào)道大多以白頭翁皂苷B4為指標(biāo)，張振華等[30]對(duì)全國(guó)十七批不同產(chǎn)地的白頭翁進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)安徽滁州者含量最高。方艷夕等[31]對(duì)全國(guó)十個(gè)產(chǎn)地的白頭翁進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示產(chǎn)自安徽鳳陽(yáng)者含量最高，安徽滁州者稍次。李立順等[32]對(duì)全國(guó)十個(gè)不同產(chǎn)地的野生白頭翁進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果安徽白頭翁含量高出長(zhǎng)春20多倍。時(shí)維靜等[33]采集滁州野生白頭翁，并對(duì)比市場(chǎng)上不同地區(qū)的白頭翁藥材及飲片，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)自安徽滁州的野生白頭翁的含量最高，而采自市場(chǎng)的藥材含量相對(duì)較低，飲片則更低。楊傳偉等[34]對(duì)市場(chǎng)上25個(gè)不同產(chǎn)地的白頭翁進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)自東北地區(qū)的白頭翁皂苷B4的含量最高。

也有報(bào)道比較不同產(chǎn)地白頭翁皂苷D的含量差異，尹姍等[35]對(duì)樟樹(shù)藥材市場(chǎng)上10個(gè)不同地區(qū)的白頭翁藥材中白頭翁皂苷D的含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果產(chǎn)吉林者含量高出廣東20倍。饒小勇等[36]對(duì)市場(chǎng)上不同地區(qū)的白頭翁進(jìn)行測(cè)定，亦發(fā)現(xiàn)產(chǎn)吉林者白頭翁皂苷D含量最高，產(chǎn)自浙江的藥材則未檢驗(yàn)出有白頭翁皂苷D。

此外，王勇等[37]還對(duì)安徽境內(nèi)五個(gè)不同地區(qū)的野生白頭翁中23-羥基白樺酸含量進(jìn)行了測(cè)定，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)自金寨皮仿者含量最高,滁州產(chǎn)的含量最低。

不同產(chǎn)地朝鮮白頭翁成分的含量測(cè)定 曹祥武等[38]測(cè)定了白頭翁皂苷B4在長(zhǎng)白山地區(qū)十個(gè)不同產(chǎn)地朝鮮白頭翁中的含量，發(fā)現(xiàn)其含量差異不大。

不同產(chǎn)地興安白頭翁成分的含量測(cè)定 鄭光浩等[39]對(duì)不同產(chǎn)地的興安白頭翁中常春藤皂苷元的含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果產(chǎn)吉林延吉市者含量最高，產(chǎn)吉林撫松縣者含量最低。

3.3 不同采收期白頭翁屬藥材成分的含量測(cè)定

不同采收期白頭翁的含量測(cè)定 時(shí)維靜等[40]對(duì)安徽鳳陽(yáng)北九華山的野生白頭翁進(jìn)行每月定點(diǎn)采集，測(cè)定其總皂苷含量，發(fā)現(xiàn)8月采集的含量最高，10月份的最低。

朝鮮白頭翁不同采收期的含量測(cè)定 李海燕等[41]對(duì)不同月份的白頭翁的總皂苷的含量進(jìn)行測(cè)定，發(fā)現(xiàn)野生型中八月份的含量最高，而三年生的栽培者中9月份最高。

4 討論

4.1 白頭翁藥材鑒別特征研究有待加強(qiáng)

白頭翁治療熱毒血痢療效顯著，藥用歷史悠久，由于古代典籍記載粗略，白頭翁成為本草中偽品最多的藥材[42](P250-251),[43](P2)，偽品涉及6個(gè)科30多種植物，白頭翁藥材真?zhèn)舞b別備受重視。同時(shí)本草考證結(jié)果顯示朝鮮白頭翁、興安白頭翁可以作為地方習(xí)用品[7]。綜上文獻(xiàn)報(bào)道顯示，正品白頭翁的顯微結(jié)構(gòu)特征存在五點(diǎn)分歧：1)保護(hù)組織是木栓組織還是表皮、皮層或韌皮部？2)韌皮纖維多少？3)維管束的數(shù)目多少？4)髓的有無(wú)及存在部位？5)有無(wú)分泌組織存在？給鑒別白頭翁藥材留下模糊。另一方面，正品白頭翁與朝鮮白頭翁、興安白頭翁性狀特征僅在大小、顏色以及根下部的分支多少上有細(xì)微區(qū)別；其顯微結(jié)構(gòu)特征僅在韌皮纖維多少及木質(zhì)部射線中存在裂隙有所差異，依靠這些特征難以區(qū)別白頭翁與朝鮮白頭翁、興安白頭翁。因此，本文建議對(duì)正品白頭翁的顯微特征進(jìn)行系統(tǒng)研究，澄清結(jié)構(gòu)上的分歧；同時(shí)加強(qiáng)白頭翁與朝鮮白頭翁、興安白頭翁的性狀特征、顯微特征的區(qū)別研究，為市場(chǎng)上澄清白頭翁藥材的正品、地方習(xí)用品、偽品提供可靠的鑒別依據(jù)。

4.2 白頭翁皂苷類成分研究有待深入

文獻(xiàn)報(bào)道顯示白頭翁藥理活性顯著，主要有效成分是三萜皂苷，藥理研究表明白頭翁抗菌止痢的主要活性成分是白頭翁皂苷B4[44]，《中國(guó)藥典》[2](P104)規(guī)定以白頭翁皂苷B4作為白頭翁藥材質(zhì)量檢測(cè)的指標(biāo)成分，白頭翁質(zhì)量評(píng)價(jià)研究報(bào)道也多集中在測(cè)定白頭翁皂苷B4的含量上。近年來(lái)的藥理研究表明，白頭翁皂苷A3有較好的舒張血管[45]、治療白血病[46]及阿爾茨海默癥[5]的作用，白頭翁皂苷D能有效抑制腫瘤細(xì)胞的增長(zhǎng)[47-49]，但這兩種成分在白頭翁中的含量少有報(bào)道，在朝鮮白頭翁及興安白頭翁中的含量未見(jiàn)報(bào)道?；谧钚滤幚砘钚赃M(jìn)展建議加強(qiáng)白頭翁皂苷A3和白頭翁皂苷D在白頭翁及同屬植物朝鮮白頭翁及興安白頭翁的含量研究，為擴(kuò)大白頭翁藥源提供支撐。

4.3 開(kāi)展白頭翁組織與化學(xué)成分積累關(guān)系研究

根類藥材的形態(tài)是其內(nèi)部組織結(jié)構(gòu)的發(fā)育而成，不同組織部位有效成分的積累不同。近年來(lái)，一些學(xué)者相繼對(duì)懷地黃[50,51]、西洋參[52,53]、牛膝[54,55]、太子參[56,57]等根類藥材開(kāi)展發(fā)育解剖學(xué)研究，并進(jìn)行不同組織中次生代謝產(chǎn)物的積累研究，定量地說(shuō)明了藥材形態(tài)與有效成分含量的關(guān)系。白頭翁根中主要的活性成分是皂苷類成分，雖然有報(bào)道對(duì)白頭翁根進(jìn)行皂苷類成分組織化學(xué)定位研究，認(rèn)為皂苷類物質(zhì)分布和積累與分泌組織有關(guān)[20,25]；而白頭翁已有的鑒別標(biāo)準(zhǔn)[2](P104),[23](P328-332)均無(wú)分泌組織的記載。白頭翁皂苷類成分在根中的積累規(guī)律尚未明確。因此本文建議開(kāi)展白頭翁不同部位(根頭部、主根、側(cè)根)和根的不同組織中次生代謝產(chǎn)物積累的研究，以闡明皂苷類成分在白頭翁藥用部位中的分布情況，進(jìn)而探明藥材形態(tài)與質(zhì)量的相關(guān)性，進(jìn)一步揭示白頭翁藥材“辨狀論質(zhì)”的科學(xué)內(nèi)涵。

綜上所述，建議對(duì)白頭翁的鑒別進(jìn)行系統(tǒng)研究，為市場(chǎng)上澄清白頭翁類藥材提供可靠的性狀、顯微鑒別特征依據(jù)；同時(shí)對(duì)白頭翁屬幾種藥材中白頭翁皂苷類成分的含量及在藥用部位分布進(jìn)行深入研究，為擴(kuò)大藥源提供支撐，揭示白頭翁藥材“辨狀論質(zhì)”的科學(xué)內(nèi)涵。

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ResearchProgressoftheIdentificationandQualityEvaluationofPulsatillaeRadix

QIAN Jiangping1, WANG Wenhao1, ZHAN Zhilai2, YANG Jun1

(1.SchoolofPharmacy,AnhuiUniversityofChineseMedicine/AnhuiAcademyofTraditionalChineseMedicine,Hefei230012,China；2.NationalResourceCenterforChineseMateriaMedica,ChinaAcademyofChineseMedicalSciences,Beijing100700/100069,China)

This paper comprehensively summarized the research situation of the morphological identification, microscopic identification and quality control ofPulsatillachinensis(Bge.) Regel，P.cernua(Thunb.) Bercht. et Opiz. andP.dahurica(Fisch.) Spreng. Meanwhile，it analyzed and summarized the differences in microscopic identification and suggested that a systematic study should be conducted to provide a basis for the identification of Pulsatillae Radix. Additionally, an intensive study on pulsatilla saponins A3, pulsatilla saponins D and several chemical composition was conducted to extend the medicine source. To reveal the scientific connotation of quality evaluation through morphological identification of Pulsatillae Radix, the study on the relationship between the organization structure and chemical composition accumulation was developed.

P.chinensis(Bunge) Regel；P.cernua(Thunb.) Bercht. et Opiz.；P.dahurica(Fisch.) Spreng.； identification； quality evaluation

R284.1

A

1009-9735(2017)05-0094-05

2017-05-08

中央本級(jí)重大增減支項(xiàng)目“名貴中藥資源可持續(xù)利用能力建設(shè)”(2060302)；安徽省高校省級(jí)自然科學(xué)研究項(xiàng)目(KJ2017A293)。

錢江平(1991-)，男，安徽安慶人，碩士研究生，研究方向：中藥資源與質(zhì)量評(píng)價(jià)；通信作者：楊俊(1961-)，女，河北武安人，教授，研究方向：中藥資源與鑒定。