• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    血漿腎素活性測量的研究進展*

    2017-03-07 12:18:02李瑾綜述陳寶榮徐蓓審校
    臨床檢驗雜志 2017年2期
    關(guān)鍵詞:腎素醛固酮質(zhì)譜

    李瑾綜述,陳寶榮,徐蓓審校

    (1.遵義醫(yī)學(xué)院,貴州遵義 563000;2.北京航天總醫(yī)院檢驗科,北京 100076;3.中國計量科學(xué)研究院化學(xué)所,北京 100029)

    ·綜述·

    血漿腎素活性測量的研究進展*

    李瑾1綜述,陳寶榮2,徐蓓3審校

    (1.遵義醫(yī)學(xué)院,貴州遵義 563000;2.北京航天總醫(yī)院檢驗科,北京 100076;3.中國計量科學(xué)研究院化學(xué)所,北京 100029)

    血漿腎素活性(PRA)作為繼發(fā)性高血壓最重要的實驗室篩查項目之一,對鑒別原發(fā)性與繼發(fā)性醛固酮增多癥有重要意義。為更好地開展PRA測量的標(biāo)準(zhǔn)化工作,給臨床提供準(zhǔn)確可比的檢驗結(jié)果,該文系統(tǒng)地闡述了腎素的理化特性與臨床應(yīng)用、各種測量方法的性能與優(yōu)劣、測量標(biāo)準(zhǔn)化的現(xiàn)狀與問題,指明了探尋PRA標(biāo)準(zhǔn)化的路徑。

    血漿;腎素;血管緊張素Ⅰ;測量;標(biāo)準(zhǔn)化

    血漿腎素活性(plasma renin activity,PRA)、醛固酮(aldosterone,ALD)和血管緊張素(angiotensin,Ang)Ⅱ水平是腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(renin-angiotensin-aldosteronesystem,RAAS)失調(diào)所導(dǎo)致的代謝紊亂疾病輔助診斷及高血壓分類的重要依據(jù)[1-2]。腎素作為RAAS中一系列激素鏈的激發(fā)物質(zhì),對機體的體液容量、電解質(zhì)平衡、血壓調(diào)節(jié)等起重要作用[3]。PRA檢測目前作為繼發(fā)性高血壓的實驗室篩查項目之一,是原發(fā)性和繼發(fā)性高血壓分型診斷的重要指標(biāo)。腎素分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜、血中含量少,目前實驗室多通過測量PRA來表示腎素含量,但PRA測量尚未標(biāo)準(zhǔn)化。因此,如何根據(jù)血漿腎素的特點,選擇并建立合適的PRA測量方法,為臨床提供準(zhǔn)確可比的測量結(jié)果具有重要意義。

    1 腎素的理化特性與臨床應(yīng)用

    1898年,Tigerstedt和Bergman首先在兔腎臟提取物中發(fā)現(xiàn)了一種強升壓物質(zhì),被命名為腎素[4]。腎素在人體內(nèi)以無活性的腎素原、有活性的腎素原、腎素3種形式存在,其中后兩種具有腎素活性,能催化血管緊張素原(angiotensinogen,AGT)轉(zhuǎn)化為AngⅠ。在體外,腎素原可以通過酸激活、酶激活、冷激活的方式轉(zhuǎn)化成活性腎素[5]。腎素原是腎素的前體,與腎素的結(jié)構(gòu)十分相似,呈低活性,較腎素多43個氨基酸。腎素原在酶作用下生成腎素,也被稱為血管緊張素原酶。腎素由腎小球中入球小動脈上的近球細(xì)胞分泌,含340個氨基酸殘基,相對分子質(zhì)量約為40 000[6],呈二葉體結(jié)構(gòu),每個葉上有1個天冬氨酰基活性部位。腎素的活性位點在2葉間的裂隙內(nèi),此裂隙能結(jié)合底物即AGT的7~8個氨基酸[7]。

    腎素與Ang、ALD三者構(gòu)成RAAS。當(dāng)血壓降低時,腎臟分泌腎素,腎素經(jīng)腎靜脈進入血液,催化由肝臟分泌于血液中的AGT轉(zhuǎn)變成AngⅠ(10肽),血液和肺組織中的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)使AngⅠ降解為AngⅡ(8肽),后者可被氨基肽酶水解為AngⅢ(7肽)[6]。其中,AngⅡ能夠有效收縮血管,使血壓升高;也能刺激腎上腺皮質(zhì)球狀帶分泌ALD和抗利尿激素,促進腎臟對水和鈉離子的重吸收,增加體液容量,最終升高血壓[8]。

    腎素作為RAAS的重要組成部分,其活性檢測對臨床高血壓病因篩查、高血壓用藥指導(dǎo)及循環(huán)系統(tǒng)疾病輔助診斷具有重要意義[3]。原發(fā)性醛固酮增多癥(primary aldosteronism,PA)是因腎上腺皮質(zhì)病變導(dǎo)致醛固酮分泌增多、腎素-血管緊張素(renin angiotensinsystem,RAS)系統(tǒng)受抑制,表現(xiàn)出以低PRA和高ALD水平為主要特征、伴(或不伴)低血鉀為主要臨床表現(xiàn)的綜合征,是一種常見的繼發(fā)性高血壓,占全部高血壓的5%~15%[9]。研究表明,用ALD與PRA的比值(ARR)篩查后,PA檢出率提高了5~15倍[10]。《原發(fā)性醛固酮增多癥的臨床診療指南》[11]中明確建議將ARR作為PA首選篩查指標(biāo)。宋愛羚等[12]研究了PRA、AngⅡ及ALD水平在不同病因高血壓患者中的差異,表明PA患者較原發(fā)性高血壓患者具有高ALD濃度、低PRA水平,而嗜鉻細(xì)胞瘤(pheochromocytoma)患者則PRA水平升高。對伴低鈉血癥慢性心衰患者,具有原發(fā)性高血壓遺傳因素者檢測PRA也具有臨床意義[13-14]。此外,PRA的測定還可用于指導(dǎo)原發(fā)性高血壓用藥,研究發(fā)現(xiàn)低腎素群高血壓患者利尿劑及鈣拮抗劑降壓效果好,高腎素群高血壓患者使用ACE抑制劑、AngⅡ受體拮抗劑及β受體阻滯劑降壓效果更佳[15]。

    目前,PRA檢測的基本原理是通過間接測定AngⅠ的生成量來反映,即指血漿中內(nèi)源性腎素催化AGT產(chǎn)生AngⅠ的速率。

    2 血漿腎素活性的實驗室檢測方法

    20世紀(jì)60年代,Harber和Boyd等[16]首先提出用放射免疫分析法(radioimmunoassay,RIA)檢測PRA,至今已發(fā)展出多個實驗室測定PRA的方法[17-28]。目前,臨床實驗室常用的是RIA[16-18]和化學(xué)發(fā)光免疫分析法(chemiluminescence immunoassay,CLIA)[19-20]。此外,基于分子結(jié)構(gòu)建立的特異性好、靈敏度高的高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)[21-22]、質(zhì)譜分析法[23-29]也逐步開始用于PRA的研究與測量。

    2.1 放射免疫分析法 20世紀(jì)60年代,RIA[16]測定PRA開始應(yīng)用。1975年,Drayer改進RIA,在樣本中加入ACE抑制劑,提高了靈敏度[17]。2012年,邵嬌梅等[18]在RIA[16-17]基礎(chǔ)上,用液體閃爍計數(shù)器檢測PRA及ALD,使RIA測量性能得到很好提升,精密度可達6.18%~10.79%,AngⅠ、ALD回收率分別為87.61%~116.89%、82.98%~119.22%。盡管改良后RIA測量性能已顯著優(yōu)于原RIA[16],但RIA法難于自動化、測量影響因素多和對環(huán)境的污染問題等限制了該方法的臨床應(yīng)用,將逐步被其他方法所取代。

    2.2 化學(xué)發(fā)光免疫分析法 雷永富等[19]用CLIA檢測PRA及ALD濃度,輔助診斷PA。2016年,楊超一等[20]提出建立CLIA測量人AngⅠ計算PRA,測量范圍為0.1~7.8 μg·L-1·h-1,靈敏度0.024 3 μg·L-1·h-1,批內(nèi)變異5.6%~8.7%,批間變異6.8%~10.4%,經(jīng)方法學(xué)評價符合免疫分析的基本要求。該類方法市場已有商品試劑盒,測量簡便易行、可自動化、無環(huán)境污染,是臨床易于接受的方法,但測量性能還有待進一步評價。

    2.3 高效液相色譜法 1982年,Klickstein等[21]首次將HPLC用于檢測AngⅠ,并提出該法可用于PRA測定。1992年,Nakamura等[22]將HPLC與熒光法相結(jié)合,用含熒光殘基的N-(2-pyridyl)glyeine代替AGT作為底物,用熒光HPLC探測處理后樣品的熒光信號,批內(nèi)變異系數(shù)小于6%,批間變異系數(shù)小于15%,與RIA相關(guān)性很好。但HPLC因測定費時、工作量大等缺點,尚未見臨床應(yīng)用報道。

    2.4 質(zhì)譜法 質(zhì)譜技術(shù)近年逐步進入醫(yī)學(xué)檢驗領(lǐng)域,并廣泛用于血液或體液中氨基酸、肽、維生素、激素、血藥濃度、微量元素等微量或痕量物質(zhì)的測量[30-31]。1999年,F(xiàn)redline等[13]率先用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)技術(shù)測定PRA。PRA檢出限0.14 μg·L-1·h-1,樣品回收率92.3%。2010年,Bystrom等[24]通過監(jiān)測AngⅠ的體外降解程度間接測量PRA。2012年,Chappell等[25]用LC-MS/MS檢測腎素作用生成的AngⅠ,得出PRA定量限為0.005 μg·L-1·h-1,加標(biāo)回收率達93%,AngI萃取絕對回收率達60%。Carter等[26]用在線固相萃取LC-MS/MS測定PRA,線性范圍0.12~1.75 nmol·L-1·h-1;并研究樣本室溫保存的穩(wěn)定性,證明樣本室溫24 h內(nèi)穩(wěn)定。Owen等[27]用離線固相萃取LC-MS/MS測量PRA,同濃度樣本變異系數(shù)低于Carter等[26]的方法;對PRA小于0.3 nmol·L-1·h-1的樣本孵育不同時間,認(rèn)為不需要對低腎素活性樣本延長孵育時間,但該結(jié)論尚未見其他作者研究證實。2015年,Popp等[28]用免疫基質(zhì)輔助激光解離電離技術(shù)(iMALDI)測定PRA;PRA線性范圍0.04~5.3 ng·L-1·s-1;與LC-MS/MS法比較發(fā)現(xiàn)該法不僅樣本用量少且能顯著改善PRA的線性范圍(R2≥0.98)。2016年,Van Der Gugten等[29]用離線固相萃取LC-MS/MS對PRA定量,線性范圍0.11~10.0 μg·L-1·h-1,與Carter等[26]在線固相萃取方法相比降低了PRA檢出限,擴大了測量的線性范圍。

    3 血漿腎素活性測量的標(biāo)準(zhǔn)化

    由于腎素缺少國際公認(rèn)的PRA測量的參考方法和參考物質(zhì),目前尚未實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化。各實驗室測量設(shè)備、方法、條件、參考范圍不盡相同,PRA測量結(jié)果缺乏可比性,這使臨床醫(yī)生在用PRA結(jié)果診斷疾病時困惑很大。賀冶冰等[32]曾探討ARR測定方法,通過停用降壓藥、取固定體位、固定時間段采血、充分鈉攝入以及低血鉀者補鉀等,得出ARR大致范圍,認(rèn)為ARR檢測方法或條件標(biāo)準(zhǔn)化,將有助于臨床醫(yī)生依據(jù)其結(jié)果篩查PA。賴鳳華等[33]用RIA與CLIA檢測PRA和ALD,評價兩種方法對PA的篩查效率,發(fā)現(xiàn)CLIA具有更高的靈敏度,但RIA特異性更好。一方面,因PRA測定的是體內(nèi)有活性的腎素,所以測定過程中應(yīng)避免腎素原激活成腎素的影響。對低濃度樣本一般通過延長孵育時間,測定增加AngⅠ的生成量,但存在即使樣本孵育時間延長且有肽酶抑制劑存在的情況下,AngⅠ仍能很快降解的情況[24]。另一方面,AGT濃度也會影響PRA的測定,在肝硬化、充血性心力衰竭等情況下,AGT水平下降,PRA降低,而雌激素能增加AGT水平使PRA升高[9]。除此之外,溶血反應(yīng)、妊娠、pH、抑制劑、孵育時間、體位、空白底物、樣本的收集與貯存都可能成為影響PRA準(zhǔn)確測量的因素[26,34-36]。

    質(zhì)譜分析技術(shù)是理想的候選參考測量技術(shù)之一。國際上已用該技術(shù)建立了醛固酮、皮質(zhì)醇等項目的參考方法[37]。盡管Fredline等[23]基于質(zhì)譜技術(shù)建立了測量PRA的方法,但目前的測量性能還遠(yuǎn)不能滿足國際臨床化學(xué)與檢驗醫(yī)學(xué)聯(lián)合會(IFCC)對參考方法測量性能的要求。2014年,臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(CLSI)又發(fā)布了C62-A文件[38],旨在指導(dǎo)、規(guī)范LC-MS法的開發(fā)和應(yīng)用。Van Der Gugten等[29]提出應(yīng)按照文件C62-A及EP32-R要求評價并保證質(zhì)譜方法測量結(jié)果的可比性及溯源性。文件對基于質(zhì)譜技術(shù)建立的各測量方法的性能驗證提出了明確而具體的要求,對質(zhì)譜測量標(biāo)準(zhǔn)化及質(zhì)譜技術(shù)的廣泛應(yīng)用發(fā)揮積極的推動作用。

    目前,盡管臨床急需標(biāo)準(zhǔn)化的人血漿腎素活性的測量結(jié)果,但限于血漿中腎素低含量、結(jié)構(gòu)復(fù)雜、在機體內(nèi)的復(fù)雜代謝和測量形式的差異等問題的局限性,研究文獻仍很少,急需深入研究與探索。通過系統(tǒng)研究建立PRA參考測量程序、并在此基礎(chǔ)上研制具有互換性的PRA標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),并用于臨床實驗室的常規(guī)測量系統(tǒng)是最終實現(xiàn)PRA各實驗室測量結(jié)果準(zhǔn)確可比的關(guān)鍵,也是實現(xiàn)PRA標(biāo)準(zhǔn)化的必由之路。

    4 小結(jié)與展望

    血漿中腎素活性對于維持正常血壓起重要調(diào)節(jié)作用。由于PRA檢測的原理、方法不同,目前各實驗室仍無法向臨床提供準(zhǔn)確可比的測量結(jié)果,給臨床高血壓的診斷、鑒別診斷及合理治療帶來困擾。通過對腎素的理化特性、PRA實驗室檢測現(xiàn)狀及臨床應(yīng)用需求的了解,選擇并建立靈敏度高、特異性強、測量范圍寬、可自動化并易于標(biāo)準(zhǔn)化的測量方法是實驗室當(dāng)務(wù)之急。質(zhì)譜技術(shù)具有靈敏度高、特異性強、測量范圍寬等優(yōu)勢,是理想的候選參考測量技術(shù)之一,但仍需系統(tǒng)研究并建立滿足ISO 15193性能要求的測量方法。在此基礎(chǔ)上若能將質(zhì)譜技術(shù)的研究成果與各類自動化方法結(jié)合必將對改進人PRA測量結(jié)果的準(zhǔn)確可比發(fā)揮積極的作用。

    [1]羅立基,陳浩明.腎素、醛固酮的實驗室檢測及其臨床意義[J].中國檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2001,2(4):188-189.

    [2]趙連友.血漿腎素活性在高血壓鑒別診斷中的應(yīng)用[J].陜西醫(yī)學(xué)雜志,1994,23(3):135-138.

    [3]張仕清,丁爾乾,王敬良,等.血漿腎素活性測定的臨床意義[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,1981(2):65-68.

    [4]Tigerstedt R, Bergman PQ. Niere und Kreislauf [J]. Skandinavisches Archiv Für Physiologie, 2012, 8(1): 223-271.

    [5]羅洪,陳孟勤.無活性腎素[J].生理科學(xué)進展,1988(1):32-37.

    [6]丁報春,李子瑜,肖偉文.腎素-血管緊張素系統(tǒng)[J].生理科學(xué)進展,1979(4):318-329.

    [7]楊曉慧,盧新政.腎素原及其受體的研究進展[J].中國病理生理雜志,2010,26(2):405-408.

    [8]杜乃立,杜瑞芝.腎素-血管緊張素系統(tǒng)的研究進展[J].心血管病學(xué)進展,2005,26(s1):43-45.

    [9]鄞國書,張少玲,嚴(yán)勵,等.原發(fā)性醛固酮增多癥篩查中血漿醛固酮/腎素活性比值的影響因素[J].中華內(nèi)分泌代謝雜志,2009,25(2):238-241.

    [10]Fardella C, Mosso SC, Cortes P,etal. Primary hyperaldosteronism in essential hypertensives: prevalence, biochemical profile, and molecular biology[J]. J Clin Endocrinol Metab, 2000, 85(85):1863-1867.

    [11]Funder JW, Carey RM, Fardella C,etal. Case detection, diagnosis, and treatment of patients with primary aldosteronism: an endocrine society clinical practice guideline[J]. Eur J Endocrinol, 2009, 93(9):3266-3281.

    [12]宋愛羚,曾正陪,童安莉,等.不同病因高血壓患者血漿腎素活性、血管緊張素Ⅱ及醛固酮水平的差異[J].中華高血壓雜志,2012,51(6):294-298.

    [13]富路,葛海龍,李佳,等.慢性心力衰竭患者血鈉水平與血漿腎素活性、抗利尿激素、腦利鈉肽的關(guān)系[J].中華心血管病雜志,2006,34(9):781-783.

    [14]公茂蓮,張紅葉.原發(fā)性高血壓與血漿腎素活性及血管緊張素原遺傳關(guān)系研究[J].中國循環(huán)雜志,1998(6):340-342.

    [15]Laragh JH, Sealey JE. The plasma renin test reveals the contribution of body sodium-volume content (V) and renin-angiotensin (R) vasoconstriction to long-term blood pressure[J]. Am J Hypertens, 2011, 24(11):1164-1180.

    [16]Boyd GW, Adamson AR, Fitz AE,etal. Radioimmunoassay determination of plasma-renin activity[J]. Lancet, 1969, 1(1):213-218.

    [17]Drayer JI , Benraad TJ. The reliability of the measurement of plasma renin activity by radioimmunoassay[J]. Clin Chim Acta, 1975, 61(3):309-324.

    [18]邵姣梅,汪道雙,趙春霞,等.液體閃爍計數(shù)器檢測血漿腎素活性及醛固酮[J].中華全科醫(yī)學(xué),2012,10(12):1937-1939.

    [19]雷永富,李敏.化學(xué)發(fā)光法在原發(fā)性醛固酮增多癥診斷中的應(yīng)用研究[J].中國實驗診斷學(xué),2015,19(10):1780-1783.

    [20]楊超一,馮婷婷,張雪峰,等.血管緊張素Ⅰ化學(xué)發(fā)光免疫分析方法的建立[J].中國免疫學(xué)雜志,2016,32(6):838-841.

    [21]Klickstein LB, Wintroub BU.Separation of angiotensins and assay of angiotensin-generating enzymes by high-performance liquid chromatography[J]. Anal Biochem, 1982, 120(1):146-150.

    [22]Nakamura-Imajo N, Satomura S, Matsuura S,etal. Renin assay using a fluorogenic substrate and high performance liquid chromatography[J]. Clin Chim Acta, 1992, 211(1-2):47-57.

    [23]Fredline VF, Kovacs EM, Taylor PJ,etal. Measurement of plasma renin activity with use of HPLC-electrospray-tandem mass spectrometry[J]. Clin Chem, 1999, 45(5):659-664.

    [24]Bystrom CE, Salameh W, Reitz R,etal. Plasma renin activity by LC-MS/MS: development of a prototypical clinical assay reveals a subpopulation of human plasma samples with substantial peptidase activity[J]. Clin Chem, 2010, 56(10):1561-1569.

    [25]Chappell DL, Mcavoy T, Weiss B,etal. Development and validation of an ultra-sensitive method for the measurement of plasma renin activity in human plasma via LC-MS/MS[J]. Bioanalysis, 2012, 4(23):2843-2850.

    [26]Carter S, Owen LJ, Kerstens MN,etal. A liquid chromatography tandem mass spectrometry assay for plasma renin activity using online solid-phase extraction[J]. Ann Clin Biochem, 2012, 49(6):570-579.

    [27]Owen LJ, Adaway J, Morris K,etal. A widely applicable plasma renin activity assay by LC-MS/MS with offline solid phase extraction[J]. Ann Clin Biochem, 2014, 51(3):409-411.

    [28]Popp R, Malmstr?m D, Chambers AG,etal. An automated assay for the clinical measurement of plasma renin activity by immuno-MALDI (iMALDI)[J]. Biochim Biophys Acta, 2014, 1854(6):547-558.

    [29]Van Der Gugten JG, Holmes DT. Quantitation of Plasma Renin Activity in Plasma Using Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry (LC-MS/MS)[J]. Methods Mol Biol, 2016, 1378(185):243-253.

    [30]沈立松,馬妍慧.質(zhì)譜技術(shù)在檢驗醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用現(xiàn)狀和前景[J].診斷學(xué)理論與實踐,2012,11(5):536-538.

    [31]張自強,李巖.質(zhì)譜技術(shù)在臨床生化檢測中的應(yīng)用[J].檢驗醫(yī)學(xué),2015,30(5):407-409.

    [32]賀冶冰.血漿醛固酮與腎素活性比值測定方法標(biāo)準(zhǔn)化問題的探討[J].國際內(nèi)分泌代謝雜志,2008,28(6):374-377.

    [33]賴鳳華,曹筱佩,林慧美,等.兩種血漿腎素、醛固酮檢測方法對原發(fā)性醛固酮增多癥篩查效率的評價[J].中華高血壓雜志,2015,23(2):150-153.

    [34]邵姣梅,劉鈺濤,唐家榮.溶血反應(yīng)對高血壓患者腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)檢測的影響[J].臨床內(nèi)科雜志,2013,30(1):18-20.

    [35]陳永躍,劉丹,張屏,等.血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑對高血壓患者血漿腎素水平的影響[J].中國分子心臟病學(xué)雜志,2016,16(1):1585-1588.

    [36]Sealey JE. Plasma renin activity and plasma prorenin assays[J]. Clin Chem, 1991, 37(10):1811-1819.

    [37]List of reference measurement methods/procedures for Non-peptide hormones[EB/OL].(2015-01-16)[2016-12-31].http://www.bipm.org/jctlm/

    [38]CLSI C62-A.Liquid Chromatography-Mass Spectrometry Methods; Approved Guideline[S].Clinical and Laboratory Standards Institute,2014.

    (本文編輯:王海燕)

    10.13602/j.cnki.jcls.2017.02.13

    國家質(zhì)檢公益性行業(yè)科研指標(biāo)(201210066)。

    李瑾,1992年生,女,碩士研究生,研究方向為臨床化學(xué)測量標(biāo)準(zhǔn)化。

    陳寶榮,主任技師,碩士研究生導(dǎo)師,E-mail:jyk711@sina.com。

    R446

    A

    2016-11-29)

    猜你喜歡
    腎素醛固酮質(zhì)譜
    氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀在農(nóng)殘檢測中的應(yīng)用及維護
    繼發(fā)性高血壓患者尿微量蛋白含量與腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)中腎素的關(guān)系研究
    AAV9-Jumonji對慢性心力衰竭犬心臟腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)活性的影響
    原發(fā)性醛固酮增多癥中腎上腺醛固酮瘤和特發(fā)性醛固酮增多癥的臨床特點分析
    吹掃捕集-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用測定水中18種揮發(fā)性有機物
    淺析原發(fā)性醛固酮增多癥中腎上腺醛固酮瘤和特發(fā)性醛固酮增多癥的臨床特點
    醛固酮腎素定量比值篩查原發(fā)性醛固酮增多癥的探討
    棗霜化學(xué)成分的色譜質(zhì)譜分析
    Modeled response of talik development under thermokarst lakes to permafrost thickness on the Qinghai-Tibet Plateau
    腎素-血管緊張素系統(tǒng)與糖尿病的研究進展
    国产老妇女一区| 看片在线看免费视频| 最近2019中文字幕mv第一页| 成人欧美大片| 九草在线视频观看| 美女cb高潮喷水在线观看| .国产精品久久| 一本一本综合久久| 联通29元200g的流量卡| 婷婷六月久久综合丁香| 青春草亚洲视频在线观看| 国产午夜精品论理片| 亚洲欧洲国产日韩| 精品午夜福利在线看| 国产一级毛片在线| 精品久久久久久久久久免费视频| 99久久中文字幕三级久久日本| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 99在线人妻在线中文字幕| 人体艺术视频欧美日本| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 97超视频在线观看视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 午夜激情欧美在线| 不卡视频在线观看欧美| 亚洲七黄色美女视频| 黄片无遮挡物在线观看| 真实男女啪啪啪动态图| 综合色丁香网| 国产精品一区二区在线观看99 | 亚洲精品国产成人久久av| 少妇熟女aⅴ在线视频| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲精品国产成人久久av| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产探花极品一区二区| 麻豆av噜噜一区二区三区| 九色成人免费人妻av| 国产一级毛片七仙女欲春2| 高清毛片免费观看视频网站| 哪个播放器可以免费观看大片| 中文字幕久久专区| 日本欧美国产在线视频| 99热网站在线观看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 一本精品99久久精品77| 两个人视频免费观看高清| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 波野结衣二区三区在线| 国产在视频线在精品| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲精品影视一区二区三区av| 男人舔女人下体高潮全视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 美女被艹到高潮喷水动态| 国产69精品久久久久777片| 插阴视频在线观看视频| 成人漫画全彩无遮挡| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产精品.久久久| 美女被艹到高潮喷水动态| 成人鲁丝片一二三区免费| 精品欧美国产一区二区三| 日本爱情动作片www.在线观看| 久久久久久久久大av| av福利片在线观看| 麻豆一二三区av精品| 亚洲精品456在线播放app| 亚洲欧洲日产国产| 国产一区二区在线观看日韩| 国产一级毛片七仙女欲春2| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 精品一区二区三区视频在线| 丰满的人妻完整版| 成人特级黄色片久久久久久久| 日韩大尺度精品在线看网址| 久久99热6这里只有精品| 国产视频首页在线观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 亚洲性久久影院| 久久精品久久久久久久性| 可以在线观看毛片的网站| 99热6这里只有精品| 六月丁香七月| 国产高清视频在线观看网站| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 午夜激情福利司机影院| 欧美日韩乱码在线| 精品国产三级普通话版| 国产极品精品免费视频能看的| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 久久久国产成人精品二区| 国产黄a三级三级三级人| 日本免费一区二区三区高清不卡| 久久久久免费精品人妻一区二区| 如何舔出高潮| 国模一区二区三区四区视频| 深夜a级毛片| .国产精品久久| 看黄色毛片网站| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品久久视频播放| 在线观看一区二区三区| 亚洲成人av在线免费| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 天天躁日日操中文字幕| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 一边摸一边抽搐一进一小说| 国产精品一区二区三区四区久久| av天堂在线播放| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲国产精品合色在线| 欧美变态另类bdsm刘玥| 直男gayav资源| 久久草成人影院| 能在线免费观看的黄片| 亚洲va在线va天堂va国产| 99九九线精品视频在线观看视频| 成人二区视频| 男女边吃奶边做爰视频| 白带黄色成豆腐渣| 两个人的视频大全免费| 国产高清三级在线| 成年免费大片在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 美女cb高潮喷水在线观看| 男人和女人高潮做爰伦理| 97在线视频观看| 美女黄网站色视频| 一区二区三区高清视频在线| av天堂中文字幕网| 久久亚洲国产成人精品v| 成熟少妇高潮喷水视频| 国产精品久久视频播放| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 3wmmmm亚洲av在线观看| 欧美又色又爽又黄视频| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 在线观看av片永久免费下载| 日本成人三级电影网站| 色5月婷婷丁香| 亚洲天堂国产精品一区在线| 欧美成人免费av一区二区三区| 久久久国产成人精品二区| 午夜免费激情av| 精品久久国产蜜桃| 亚洲自拍偷在线| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 亚洲中文字幕日韩| 女同久久另类99精品国产91| 国产在线男女| 国产在线男女| 日韩欧美在线乱码| 看黄色毛片网站| 成人永久免费在线观看视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| 国产探花极品一区二区| 大香蕉久久网| 中国美白少妇内射xxxbb| 国产成人freesex在线| 99久久九九国产精品国产免费| 一个人看的www免费观看视频| 色综合色国产| 赤兔流量卡办理| 国产久久久一区二区三区| 观看免费一级毛片| 午夜视频国产福利| 国产激情偷乱视频一区二区| 久久亚洲国产成人精品v| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 亚洲精品国产成人久久av| 成人特级av手机在线观看| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 欧美性感艳星| 国产成人a∨麻豆精品| 成人无遮挡网站| 久久九九热精品免费| 男人的好看免费观看在线视频| 欧美zozozo另类| 丝袜美腿在线中文| 美女内射精品一级片tv| 嫩草影院入口| 最近手机中文字幕大全| 老司机影院成人| 欧美色视频一区免费| 久99久视频精品免费| 春色校园在线视频观看| 久久九九热精品免费| 亚洲人与动物交配视频| 午夜激情福利司机影院| 国产中年淑女户外野战色| 嘟嘟电影网在线观看| 日韩欧美精品免费久久| 欧美在线一区亚洲| 丝袜美腿在线中文| 插阴视频在线观看视频| 能在线免费看毛片的网站| 日本av手机在线免费观看| 我要看日韩黄色一级片| 99九九线精品视频在线观看视频| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 在线免费观看的www视频| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲精品粉嫩美女一区| 淫秽高清视频在线观看| 黄色视频,在线免费观看| 午夜亚洲福利在线播放| av视频在线观看入口| 一边亲一边摸免费视频| 国国产精品蜜臀av免费| 成人特级av手机在线观看| av在线天堂中文字幕| 欧美激情在线99| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 韩国av在线不卡| 婷婷色av中文字幕| 国产91av在线免费观看| 免费观看精品视频网站| 赤兔流量卡办理| 九草在线视频观看| 国产精品一区二区性色av| avwww免费| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产成年人精品一区二区| 九色成人免费人妻av| 中文字幕熟女人妻在线| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲五月天丁香| 国产精品一区www在线观看| 性色avwww在线观看| 亚洲精品日韩在线中文字幕 | 欧美区成人在线视频| 国产熟女欧美一区二区| 三级经典国产精品| 小说图片视频综合网站| 色哟哟哟哟哟哟| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 日本熟妇午夜| 亚洲av二区三区四区| 日韩一本色道免费dvd| 91av网一区二区| 日韩制服骚丝袜av| 国产成人精品婷婷| 中国国产av一级| 青青草视频在线视频观看| 成熟少妇高潮喷水视频| 欧美成人免费av一区二区三区| 欧美色欧美亚洲另类二区| 欧美成人精品欧美一级黄| 高清毛片免费看| 亚洲美女搞黄在线观看| 免费看日本二区| 亚洲国产精品久久男人天堂| 99热精品在线国产| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 少妇熟女aⅴ在线视频| 色哟哟哟哟哟哟| 久久精品国产自在天天线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 欧美在线一区亚洲| 午夜爱爱视频在线播放| 成人性生交大片免费视频hd| 人妻系列 视频| 又爽又黄a免费视频| 可以在线观看毛片的网站| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产成人精品久久久久久| 亚洲成人精品中文字幕电影| 国产成人精品久久久久久| 91av网一区二区| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 欧美一区二区亚洲| 性插视频无遮挡在线免费观看| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 最近2019中文字幕mv第一页| 青春草国产在线视频 | 亚洲精华国产精华液的使用体验 | 国产国拍精品亚洲av在线观看| 久久久久久久午夜电影| 日日干狠狠操夜夜爽| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产日本99.免费观看| 丝袜喷水一区| 国产精品.久久久| 12—13女人毛片做爰片一| 欧美日韩精品成人综合77777| 国产高清视频在线观看网站| 国模一区二区三区四区视频| 亚洲成a人片在线一区二区| 亚洲欧美精品综合久久99| 欧美一级a爱片免费观看看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 久久99精品国语久久久| 综合色av麻豆| 嫩草影院新地址| 亚洲人与动物交配视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 欧美人与善性xxx| 1000部很黄的大片| 一边亲一边摸免费视频| 国产麻豆成人av免费视频| 亚洲最大成人中文| 亚洲性久久影院| 国产成人精品久久久久久| a级毛片a级免费在线| 久久精品夜色国产| 久久久久久久久久久免费av| 亚洲国产欧美在线一区| 久久草成人影院| 国内精品美女久久久久久| 日韩强制内射视频| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 亚洲电影在线观看av| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 一级黄片播放器| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲av男天堂| 亚洲av免费高清在线观看| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 国内揄拍国产精品人妻在线| 51国产日韩欧美| 国产精品国产高清国产av| 精品国产三级普通话版| 麻豆乱淫一区二区| 国产熟女欧美一区二区| 国产精品一区二区三区四区久久| 国产69精品久久久久777片| 日本黄色视频三级网站网址| 淫秽高清视频在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 波野结衣二区三区在线| 亚洲自拍偷在线| 搞女人的毛片| 麻豆久久精品国产亚洲av| 日韩三级伦理在线观看| 给我免费播放毛片高清在线观看| 高清毛片免费看| 一个人看的www免费观看视频| 91av网一区二区| 日本免费a在线| 麻豆乱淫一区二区| 91狼人影院| 亚洲真实伦在线观看| 欧美一区二区亚洲| 婷婷色av中文字幕| 国内精品一区二区在线观看| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 有码 亚洲区| 精品一区二区三区视频在线| 99热精品在线国产| 国产三级中文精品| 国产精品精品国产色婷婷| 一级av片app| 伊人久久精品亚洲午夜| 国产一区二区在线观看日韩| 一个人观看的视频www高清免费观看| 如何舔出高潮| 三级经典国产精品| 国产成人91sexporn| 国产亚洲精品久久久com| 可以在线观看毛片的网站| 男女啪啪激烈高潮av片| 又粗又硬又长又爽又黄的视频 | 国产亚洲av嫩草精品影院| 亚洲国产精品国产精品| 一区二区三区高清视频在线| 我要搜黄色片| 观看免费一级毛片| 亚洲成人精品中文字幕电影| 综合色丁香网| 精品无人区乱码1区二区| 免费av观看视频| 人人妻人人澡欧美一区二区| 久久中文看片网| 99久久精品国产国产毛片| 久久人妻av系列| 两个人的视频大全免费| 精品久久国产蜜桃| 午夜爱爱视频在线播放| 一级毛片aaaaaa免费看小| 22中文网久久字幕| 欧美性感艳星| 中文字幕免费在线视频6| h日本视频在线播放| 精品一区二区免费观看| 一本一本综合久久| 男女那种视频在线观看| 国内精品美女久久久久久| 国产精品爽爽va在线观看网站| 久久99热6这里只有精品| 国产午夜精品论理片| 精品久久久久久久久亚洲| av视频在线观看入口| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲第一区二区三区不卡| 久久久精品94久久精品| 国产麻豆成人av免费视频| 久久久欧美国产精品| 亚洲自拍偷在线| 日本爱情动作片www.在线观看| 中出人妻视频一区二区| 亚洲经典国产精华液单| 久久这里只有精品中国| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 中文字幕久久专区| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 一边亲一边摸免费视频| 秋霞在线观看毛片| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 男人舔女人下体高潮全视频| 久久九九热精品免费| 人人妻人人看人人澡| 国产爱豆传媒在线观看| 国产黄片视频在线免费观看| 亚洲人成网站高清观看| 中文亚洲av片在线观看爽| 欧美精品国产亚洲| 亚洲最大成人手机在线| 午夜久久久久精精品| 天堂中文最新版在线下载 | 国产精品国产高清国产av| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 久久国内精品自在自线图片| 国产精品野战在线观看| 国产三级在线视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 性欧美人与动物交配| 九九在线视频观看精品| 国产高清视频在线观看网站| 在线免费观看不下载黄p国产| 久久久久久久久中文| 只有这里有精品99| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 亚洲va在线va天堂va国产| 午夜爱爱视频在线播放| 国产精品99久久久久久久久| 国产精品一区二区性色av| 亚州av有码| 一进一出抽搐动态| 日韩国内少妇激情av| 亚洲真实伦在线观看| 国产av不卡久久| 精品欧美国产一区二区三| 99热这里只有精品一区| 波野结衣二区三区在线| 有码 亚洲区| 99久国产av精品| 高清午夜精品一区二区三区 | 校园春色视频在线观看| av在线蜜桃| 亚洲av第一区精品v没综合| 国产乱人偷精品视频| av在线蜜桃| 91在线精品国自产拍蜜月| 欧美最黄视频在线播放免费| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 在线观看午夜福利视频| 日韩成人伦理影院| 美女黄网站色视频| 国产v大片淫在线免费观看| 寂寞人妻少妇视频99o| 亚洲av熟女| 欧美变态另类bdsm刘玥| 在线观看一区二区三区| 国产成人aa在线观看| 成人亚洲欧美一区二区av| 激情 狠狠 欧美| 午夜久久久久精精品| 欧美日本亚洲视频在线播放| 午夜老司机福利剧场| 欧美日本视频| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 男人狂女人下面高潮的视频| 熟女电影av网| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产一区二区三区av在线 | 日本三级黄在线观看| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 欧美+日韩+精品| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 一边摸一边抽搐一进一小说| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国内揄拍国产精品人妻在线| 秋霞在线观看毛片| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线 | 久久精品夜色国产| 婷婷亚洲欧美| 亚洲最大成人av| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久 | 亚洲成a人片在线一区二区| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 男插女下体视频免费在线播放| 18+在线观看网站| 久久国产乱子免费精品| 美女黄网站色视频| 欧美精品国产亚洲| 变态另类丝袜制服| 亚洲综合色惰| 99国产极品粉嫩在线观看| 亚洲美女视频黄频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 在线观看免费视频日本深夜| 久久久久久国产a免费观看| av黄色大香蕉| av免费观看日本| 国产人妻一区二区三区在| 久久久久久久久久久免费av| 综合色av麻豆| 亚洲三级黄色毛片| 国产高清激情床上av| 亚洲成a人片在线一区二区| 色哟哟哟哟哟哟| 久久午夜福利片| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲精品粉嫩美女一区| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 久久热精品热| 春色校园在线视频观看| 岛国毛片在线播放| 老司机福利观看| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 一级毛片电影观看 | 中文精品一卡2卡3卡4更新| 中文字幕制服av| 一进一出抽搐gif免费好疼| 插阴视频在线观看视频| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 国产精品久久电影中文字幕| 国产av在哪里看| 亚洲四区av| 小说图片视频综合网站| av视频在线观看入口| 日韩欧美在线乱码| 成人三级黄色视频| 最近的中文字幕免费完整| 99视频精品全部免费 在线| 亚洲av第一区精品v没综合| 少妇的逼水好多| 变态另类丝袜制服| 老女人水多毛片| 日韩精品有码人妻一区| 中出人妻视频一区二区| 只有这里有精品99| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 成人毛片a级毛片在线播放| 最近手机中文字幕大全| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 99国产精品一区二区蜜桃av| 色5月婷婷丁香| 免费观看a级毛片全部| 久久精品久久久久久久性| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产成人aa在线观看| 两个人的视频大全免费| 午夜免费激情av| www.av在线官网国产| а√天堂www在线а√下载| 91狼人影院| 成人漫画全彩无遮挡| 人人妻人人看人人澡| 精品久久国产蜜桃| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 国产高清三级在线| 我的女老师完整版在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 高清毛片免费看| 亚洲欧洲国产日韩| 精品久久久久久成人av| 在线观看一区二区三区| 欧美另类亚洲清纯唯美| 久久精品国产自在天天线| 特大巨黑吊av在线直播| 久久99精品国语久久久| 人妻系列 视频| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 一本一本综合久久| av在线蜜桃| 国产亚洲av嫩草精品影院| 欧美三级亚洲精品| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美三级亚洲精品| 欧美色视频一区免费| 12—13女人毛片做爰片一| 99在线视频只有这里精品首页| 国产免费一级a男人的天堂| 国产亚洲av嫩草精品影院| 寂寞人妻少妇视频99o| 精品欧美国产一区二区三| 悠悠久久av| 国产成人aa在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看| 欧美xxxx性猛交bbbb| 蜜臀久久99精品久久宅男| 成人鲁丝片一二三区免费| eeuss影院久久| 高清毛片免费看| 亚洲av.av天堂| 男女那种视频在线观看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 欧美最黄视频在线播放免费| 国国产精品蜜臀av免费| 亚洲成av人片在线播放无| 18禁在线播放成人免费| 伊人久久精品亚洲午夜| 99国产精品一区二区蜜桃av| 国语自产精品视频在线第100页|