蘭索拉唑中雜質(zhì)的研究

湯媛媛， 張 佳， 糜志遠

(湖北工業(yè)大學(xué)生物工程與食品學(xué)院， 湖北 武漢 430068)

蘭索拉唑中雜質(zhì)的研究

湯媛媛， 張 佳， 糜志遠

(湖北工業(yè)大學(xué)生物工程與食品學(xué)院， 湖北 武漢 430068)

建立高效液相色譜法測定蘭索拉唑中已知雜質(zhì)的方法。方法:采用Agilent C18(4.6 mm×250 mm，5μm)色譜柱，流動相A為水，B為V(乙腈)∶V(水)∶V(三乙胺)=160∶40∶1的混合液，用磷酸調(diào)節(jié)pH至7.0，梯度洗脫，檢測波長284 nm，流速1mL/min，進樣量20 μL。結(jié)果:蘭索拉唑與各已知雜質(zhì)均分離良好，最低檢測限與最低定量限分別為1.0～2.0 ng與3.0～4.0 ng。結(jié)論:該方法簡便、快速、靈敏度高,可用于蘭索拉唑雜質(zhì)的檢查。

蘭索拉唑； 雜質(zhì)； 高效液相色譜法

消化系統(tǒng)疾病是一種常見病和多發(fā)病，質(zhì)子泵抑制劑是目前治療消化性潰瘍病抑制胃酸分泌的首選藥物[1]。蘭索拉唑是繼奧美拉唑之后第二個質(zhì)子泵抑制劑[2]，1992年由日本武田公司研制上市。目前，國內(nèi)蘭索拉唑的劑型有腸溶片、腸溶膠囊、凍干粉針劑，規(guī)格有15 mg和30 mg等，常用制劑為腸溶膠囊。

化學(xué)藥品中雜質(zhì)控制是藥品質(zhì)量控制中的一個重要內(nèi)容。為了提升本品的現(xiàn)有標準以得到更為優(yōu)異的產(chǎn)品，本研究旨在對蘭索拉唑中的已知雜質(zhì)(表1)[3-6]進行定性、定量分析方法的研究，為本品標準的提升提供參考。

目前國內(nèi)外“蘭索拉唑”標準(USP，Ph.Eur，中國藥典2010年版第一增補本)中均采用高效液相色譜法對蘭索拉唑中的雜質(zhì)進行檢查，中國藥品標準中采用等度法，而國外標準中采用梯度法。本文擬對上述兩種方法進行比較，并得到一種較為有效的檢查方法。

表1 蘭索拉唑雜質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)

本研究擬采用梯度洗脫法對上述雜質(zhì)進行研究，得到最佳分離條件。參照美國藥典“蘭索拉唑”有關(guān)物質(zhì)項下色譜條件，以及美國藥典、歐洲藥典及相關(guān)文獻資料中對“蘭索拉唑”原料中雜質(zhì)的界定，對已知雜質(zhì)蘭索拉唑砜、蘭索拉唑氮氧化物、蘭索拉唑硫醚和1H-2-巰基-苯并咪唑等分別進行了研究。

1 儀器與藥品

1.1 儀器

Dionex Ultimate 3000型雙三元液相色譜儀；VWD-3100雙光速可變波長紫外可見光檢測器；wps-3000sl·Analytical分析型全自動進樣器；METTLER TOLEDO DELTA 320 pH計，Sartorius Stedim超純水機。

1.2 藥品及對照品

蘭索拉唑?qū)φ掌?中國食品藥品檢定研究院，批號：100709-201304，純度99.8%)；雜質(zhì)A對照品(蘭索拉唑砜，美國藥典會，批號：Lot：HOI193，純度99.26%)；雜質(zhì)B對照品(蘭索拉唑氮氧化物，中美華世通公司，批號：WS0071-27-03，純度98.5%)；雜質(zhì)C對照品(蘭索拉唑硫醚，美國藥典會，批號：Lot：FOJ371，純度98.9%)；雜質(zhì)D 對照品(1H-2-巰基-苯并咪唑，阿拉丁試劑公司，批號：36129，純度98.0%)；甲醇(色譜純，美國Fisher公司)：乙腈(色譜純，美國Fisher公司)；三乙胺(色譜純，批號：20130918，國藥集團化學(xué)試劑有限公司)；磷酸(色譜純，批號：20121212，國藥集團化學(xué)試劑有限公司)；超純水(自制)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性實驗

以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，以水作為A液，混合液V(乙腈)∶V(水)∶V(三乙胺)=160∶40∶1為B液，用磷酸調(diào)節(jié)pH至7.0，檢測波長284 nm，流速1mL/min，進樣量20 μL，從0到40 min，B液由10%到80%；40到50 min，B液保持80%；50到51 min，B液由80%到10%；51到60 min，B液保持10%[7-8]。蘭索拉唑與蘭索拉唑雜質(zhì)A的分離度大于5(圖1)。

圖 1 蘭索拉唑系統(tǒng)適應(yīng)性實驗色譜圖

2.2 測定法

避光操作。精確稱取蘭索拉唑雜質(zhì)對照品適量置于10 mL量瓶中，用稀釋液(V(0.1 mol·L-1NaOH)∶V(CH3OH)=75∶25)溶解并稀釋定容至刻度，0.22 μm微孔濾膜過濾，取上述對照溶液20 μL，注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)儀器靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的15%～20%。記錄色譜圖，采用自身對照法計算，即得。

2.3 蘭索拉唑雜質(zhì)方法學(xué)研究

2.3.1 檢測下限 照2.1項下色譜條件測定，調(diào)整檢測靈敏度及進樣量，測定峰高為基線噪聲3倍時的進樣量，作為最低檢出限。結(jié)果見表2。

2.3.2 定量限 照2.1項下色譜條件測定，調(diào)整檢測靈敏度及進樣量，測定峰高為基線噪聲10倍時的進樣量，作為定量限。結(jié)果見表2。

2.3.3 線性方程 精密稱取蘭索拉唑各雜質(zhì)對照品適量，用流動相溶解并稀釋制成0.2、0.4、0.8、1.6、3.2、6.4 mg/L的溶液，各取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖，以濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，得線性方程。結(jié)果見表2。

表2 蘭索拉唑雜質(zhì)研究方法學(xué)實驗結(jié)果

2.3.4 雜質(zhì)混合物 分別精確稱取蘭索拉唑雜質(zhì)A，B，C，D和蘭索拉唑?qū)φ掌愤m量(約10.0 mg)，置于10 mL量瓶中，用稀釋液(V(0.1 mol·L-1NaOH)∶V(CH3OH=75∶25)溶解并稀釋定容至刻度，0.22 μm微孔濾膜過濾，備用。照2.1項下條件測定，記錄色譜圖(圖2)。結(jié)果顯示，蘭索拉唑和4個主要雜質(zhì)的分離良好(表3)。

圖 2 蘭索拉唑雜質(zhì)混合物HPLC圖

名稱響應(yīng)值相對保留時間/min蘭索拉唑1．01．0蘭索拉唑雜質(zhì)A0．821．1蘭索拉唑雜質(zhì)B1．30．8蘭索拉唑雜質(zhì)C0．791．2蘭索拉唑雜質(zhì)D0．780．5

2.4 中國藥品標準方法(中國藥典2010年版第一增補本)

該方法為等度法[9]，具體為：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑(推薦色譜柱為：250 mm×4.6 mm，5 μm或能效相當(dāng)?shù)纳V柱)；以甲醇-水-三乙胺-磷酸(體積比為600∶400∶5∶1.5，用磷酸溶液(1→10 mL)調(diào)節(jié)pH值至7.3)為流動相，檢測波長為284 nm。按照該方法得到色譜圖(圖3)。

圖 3 蘭索拉唑雜質(zhì)HPLC圖

由色譜圖可知，該方法雖然分離度可滿足要求，但雜質(zhì)D保留時間太短(5.1 min)，容易和溶劑峰重疊，不利于雜質(zhì)的判斷；而雜質(zhì)B的保留時間太長(91 min)，且峰型不好，使檢測效率降低，在實際應(yīng)用中不太適用。

3 討論與結(jié)論

目前文獻報道的多為蘭索拉唑含量的測定方法及注射用蘭索拉唑有關(guān)物質(zhì)的檢測方法，并未對已知雜質(zhì)進行逐項研究和規(guī)定。美國藥典中對幾個主藥雜質(zhì)的響應(yīng)值、相對保留時間和限度進行了規(guī)定，其中蘭索拉唑砜、蘭索拉唑氮氧化物、蘭索拉唑硫醚為美國藥典中規(guī)定的檢查雜質(zhì)，1H-2-巰基-苯并咪唑為歐洲藥典中規(guī)定的檢查雜質(zhì)?？紤]到1H-2-巰基-苯并咪唑為本品原料合成中的主要中間體，故筆者對其也一并進行了研究。將已知量的雜質(zhì)對照品和蘭索拉唑原料對照品進行混合洗脫，

根據(jù)保留時

間計算相對保留時間，結(jié)果顯示：響應(yīng)因子和相對保留時間和美國藥典規(guī)定的基本一致，即雜質(zhì)A，響應(yīng)因子0.82，相對保留時間1.1 min；雜質(zhì)B，響應(yīng)因子1.3，相對保留時間0.8；雜質(zhì)C，響應(yīng)因子0.79，相對保留時間1.2；雜質(zhì)D，響應(yīng)因子0.78，相對保留時間0.5 min，其他未知雜質(zhì)響應(yīng)因子1.0。按上述方法對蘭索拉唑的雜質(zhì)進行控制，可有效提高國產(chǎn)蘭索拉唑的質(zhì)量。

[1] 任萃文.HPLC梯度洗脫法測定蘭索拉唑含量和有關(guān)物質(zhì)[J].食品與藥品，2012，14(5)：185-186.

[2] 曹永安，劉留成，吉同琴，等.注射用蘭索拉唑制備、質(zhì)量控制及穩(wěn)定性考察[J].藥物分析雜志，2009，29(9)：1510.

[3] 俞小弟，金文虎，許煦，等.蘭索拉唑的合成工藝改進[J].合成化學(xué)，2007,15(5)：648.

[4] Rane A，Pathak R K，Kaushik C P ,et al.A practical one pot synthesis of 2-[2-(pyridylmethyl)-thio]-1H-benzimidazoles[J]．Synth Commun．2002，32(8)：1211-1218.

[5] Reddy G M，Mukkanti K，Kumar T L，et al.Synthesis and characteration of metabolites and potential impurites of lansoprazole ,an antiulcerative drug[J]. Synth Commun，2008,38(20)：3477-3489.

[6] 夏桂民，王麗云，馮超敏，等.蘭索拉唑腸溶膠囊中雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)確證、檢查及控制[J].藥物分析雜志，2012,32(6)：1022-1025.

[7] European Pharmacopoeia Commission.European pharmacopoeia[M].7th ed.Strasbourg,France:European Directorate for the Quality of Medicine,2010:2219.

[8] USP[S]. 30th ed. 2012. 3642-3643.

[9] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010版第一增補本[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010:282．

[責(zé)任編校： 張 眾]

Research on Impurities of Lansoprazole

TANG Yuanyuan，ZHANG Jia，MI Zhiyuan

(SchoolofFoodandBiologicalEngin.，HubeiUniv.ofTech.,Wuhan430068,China)

The study established an HPLC method for the determination of known impurities in Lansoprazole. It adopted a Agilent C18 (250mm×4.6mm，5μm) column, pure water (A)-acetonitrile: water: triethylamine (160:40:1)(B) ,adjusted to pH=7.0 by phosphoric acid as mobile phases, with the detection wavelength of 284 nm,the flow rate of 1.0mL·min 1 and the injection volume of 20μL. Experiments show that Lansoprazole and its impurities were well separated ,and the limit of detection (LOD) and limit ofquantification (LOQ) of lansoprazole impurities were between 1-2ng and3-4ng, respectively. The results show that the method is fast, simple and sensitive, and suitable for the determination of the impurities in lansoprazole.

Lansoprazole；impurities；HPLC

2016-10-07

湯媛媛(1992-)， 女，湖北武漢人，湖北工業(yè)大學(xué)碩士研究生，研究方向為藥物制劑

糜志遠(1963-)，男，湖北武漢人，湖北工業(yè)大學(xué)副教授，研究方向為藥物制劑

1003-4684(2017)01-0109-03

R975.6, R927.11

A