枯草芽孢桿菌048對(duì)雪山草雞抗腸炎沙門(mén)氏菌感染能力的影響

朱沛霽徐 歆齊玉凱王洪榮

（1.揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，揚(yáng)州 225000；2.江蘇立華牧業(yè)股份有限公司，常州 213100）

枯草芽孢桿菌048對(duì)雪山草雞抗腸炎沙門(mén)氏菌感染能力的影響

朱沛霽1，2徐 歆2齊玉凱2王洪榮1?

（1.揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，揚(yáng)州 225000；2.江蘇立華牧業(yè)股份有限公司，常州 213100）

本試驗(yàn)旨在研究枯草芽孢桿菌（BS）048對(duì)雪山草雞抗腸炎沙門(mén)氏菌（SE）感染能力的影響。選擇240只體重（61.5±0.5）g的1日齡雪山草雞公雞（SE陰性），隨機(jī)分為4組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞。對(duì)照組和對(duì)照感染組飼喂基礎(chǔ)飼糧，BS組和BS感染組飼喂添加0.1%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）BS048的基礎(chǔ)飼糧。對(duì)照感染組和BS感染組在5～7日齡時(shí)每天以1×108CFU的SE感染試驗(yàn)雞只，試驗(yàn)期14 d。測(cè)定BS048對(duì)正常和SE感染雪山草雞盲腸黏膜、肝臟、腎臟SE載菌量，血清免疫球蛋白（Ig）和回腸分泌型免疫球蛋白A（sIgA）含量，空腸黏膜堿性磷酸酶（ALP）、髓過(guò)氧化物酶（MPO）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）活性與總抗氧化能力（T-AOC）以及丙二醛（MDA）含量的影響。結(jié)果表明：1）與對(duì)照組相比，BS組顯著提高了雪山草雞8、10、14日齡回腸sIgA含量（P＜0.05），顯著提高了10、14日齡空腸黏膜ALP活性（P＜0.05），極顯著提高了10、14日齡的空腸黏膜T-AOC及T-SOD、GSH-Px活性（P＜0.01），顯著降低了8、14日齡的空腸黏膜MDA含量（P＜0.05）。2）與對(duì)照感染組相比，BS感染組極顯著減少了 SE感染雪山草雞盲腸黏膜、肝臟和腎臟SE載菌量（P＜0.01），顯著提高了10、14日齡的血清IgA、IgG、IgM 及8、10、14日齡的回腸 sIgA含量（P＜0.05），顯著提高了8、10、14日齡的空腸黏膜ALP活性P＜0.05），極顯著降低了8、10、14日齡的空腸黏膜MPO活性（P＜0.01），顯著或極顯著提高了8、10、14日齡的空腸黏膜 T-AOC及T-SOD、GSH-Px活性（P＜0.05或P＜0.01），顯著或極顯著降低了8、10、14日齡的空腸黏膜MDA含量（P＜0.05或P＜0.01）。由此可見(jiàn)，BS048能夠增強(qiáng)雪山草雞的抗SE感染能力。

枯草芽孢桿菌；雪山草雞；腸炎沙門(mén)氏菌；抗感染

沙門(mén)氏菌屬（Salmonella）是一種革蘭氏陰性、兼性厭氧的胞內(nèi)菌，廣泛分布于自然界中，其成員可感染人和多種動(dòng)物，大部分具有很強(qiáng)的致病性［1］。其中，腸炎沙門(mén)氏菌（Salmonella enteritis，SE）可使家禽出現(xiàn)腸炎、生產(chǎn)性能降低，甚至死亡，并且被該菌污染的家禽產(chǎn)品能夠進(jìn)一步導(dǎo)致人的急性胃腸炎，嚴(yán)重危害人類健康和公共衛(wèi)生安全［2］?？莶菅挎邨U菌（Bacillus subtilis，BS）是一種能夠產(chǎn)生抗逆性內(nèi)生孢子的需氧革蘭氏陽(yáng)性菌。作為一種優(yōu)質(zhì)、安全的益生菌，其具有提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能、增強(qiáng)機(jī)體免疫、抗菌、改善腸道菌群、提高機(jī)體抗氧化功能等多種功能［3］。而目前關(guān)于 BS對(duì)黃羽肉雞抗沙門(mén)氏菌感染能力的影響及其機(jī)理的研究鮮有報(bào)道。雪山草雞為優(yōu)質(zhì)黃羽肉雞品種之一，是由常州立華牧業(yè)股份有限公司科研人員以中國(guó)優(yōu)質(zhì)地方良種藏雞、茶花雞為主要素材，經(jīng)多種雜交選育而成的草雞新品種，具有肉質(zhì)鮮美、抗病能力強(qiáng)、飼養(yǎng)簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì)效益高等優(yōu)點(diǎn)。本研究旨在明晰BS048對(duì)雪山草雞抗SE感染能力的影響及其機(jī)理，從而為新型BS制劑的開(kāi)發(fā)及其在優(yōu)質(zhì)黃羽肉雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1日齡雪山草雞公雞，江蘇立華牧業(yè)股份有限公司提供；BS048制劑，山東寶來(lái)利來(lái)生物工程股份有限公司制備，活菌含量為5×108CFU/g；SE ATCC13076菌株，江蘇省家禽科學(xué)研究所提供；雞免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒，美國(guó) Life Diagnostics公司提供；堿性磷酸酶（ALP）、髓過(guò)氧化物酶（MPO）、總抗氧化能力（T-AOC）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）測(cè)定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，其他常規(guī)試劑均為分析純，由生工生物工程（上海）股份有限公司提供。主要儀器包括 MK3酶標(biāo)儀（美國(guó)Thermo公司）、UV-2100型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)［尤尼柯（上海）儀器有限公司］等。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理

選取240只1日齡體重（61.5±0.5）g雪山草雞公雞（SE陰性），隨機(jī)分為4組，每組設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20只雞。對(duì)照組和對(duì)照感染組飼喂基礎(chǔ)飼糧，BS組和BS感染組飼喂添加0.1%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）BS048的基礎(chǔ)飼糧。對(duì)照感染組和BS感染組采用強(qiáng)飼法在5～7日齡時(shí)每天口服1 mL SE菌液（細(xì)菌濃度為1×108CFU/mL）攻毒，對(duì)照組和BS組口服相同劑量的無(wú)菌生理鹽水。試驗(yàn)期14 d。

基礎(chǔ)飼糧參照中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（NY/T 33—2004）配制，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。飼養(yǎng)試驗(yàn)在江蘇立華牧業(yè)股份有限公司實(shí)驗(yàn)雞場(chǎng)完成。飼養(yǎng)方式為地面平養(yǎng)，自由采食，充足飲水，光照、免疫以及其他管理均按常規(guī)進(jìn)行。試驗(yàn)期間，每日觀察雞只的健康狀況，記錄死淘情況。

1.2.2 樣品收集與指標(biāo)測(cè)定

肉仔雞分別在8、10、14日齡（即SE攻毒結(jié)束后第1、3、7天）采集樣品。每組分別選取6只體重相近的雞只（每個(gè)重復(fù)2只）屠宰取樣。心臟取血，斷頸處死，打開(kāi)腹腔，迅速分離并取出肝臟、腎臟和腸段（空腸、回腸和盲腸），4℃保存待用。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet（air-dry basis） %

組織SE載菌量：稱取適量盲腸黏膜、肝臟、腎臟，加入3 mL無(wú)菌磷酸鹽緩沖液（PBS），冰浴勻漿2 min并做10倍系列梯度稀釋，取原液及其各濃度稀釋液100 μL均勻涂布于XLT-4瓊脂平板表面，置于生化培養(yǎng)箱，37℃培養(yǎng)24 h，計(jì)數(shù)SE典型菌落。

血清免疫球蛋白含量：促凝血37℃水浴1 h，1 000×g離心10 min，取適量上清液，以ELISA試劑盒檢測(cè)其中的IgA、IgG、IgM含量，按使用說(shuō)明書(shū)操作。

回腸分泌型免疫球蛋白 A（sIgA）含量：取10 cm回腸腸段，用2 mL無(wú)菌生理鹽水沖洗腸管并收集沖洗液至無(wú)菌1.5 mL離心管，5 000×g、4℃離心15 min，取適量上清液，以ELISA試劑盒檢測(cè)其中的sIgA含量，按使用說(shuō)明書(shū)操作。

ALP、MPO活性及抗氧化指標(biāo)：稱取約0.1 g空腸黏膜按1∶9（質(zhì)量體積分?jǐn)?shù)）加入生理鹽水，冰浴勻漿2 min，1 500×g離心10 min，取適量上清液，以南京建成試劑盒測(cè)定其中的 ALP、MPO、T-SOD、GSH-Px活性及T-AOC和MDA含量，按使用說(shuō)明書(shū)操作。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 22.0分析數(shù)據(jù)，以一般線性模型GLM進(jìn)行單變量雙因素方差分析，以單因素方差分析（one-way ANOVA）過(guò)程進(jìn)行Duncan氏法多重比較，P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著，P＞0.05為差異不顯著，0.05≤P＜0.10表示有變化趨勢(shì)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 BS048對(duì)SE感染雪山草雞盲腸黏膜、肝臟、腎臟SE載菌量的影響

由表2可知，與對(duì)照感染組相比，BS感染組雪山草雞8、10、14日齡盲腸黏膜內(nèi)的SE載菌量均極顯著減少（P＜0.01）。同時(shí)，BS感染組8、10日齡肝臟和腎臟的SE載菌量較對(duì)照感染組均極顯著下降（P＜0.01）。

上述結(jié)果表明，雪山草雞在連續(xù)口服SE攻毒3 d后，其盲腸黏膜、肝臟和腎臟已被SE感染；在基礎(chǔ)飼糧中添加BS048能夠顯著降低SE對(duì)雪山草雞盲腸黏膜、肝臟和腎臟的感染程度。

表2 BS048對(duì)SE感染雪山草雞盲腸黏膜、肝臟、腎臟SE載菌量的影響Table 2 Effects of BS048 on SE amount in cecal mucosa，liver and kidney of SE-infectedXueshanchickens lg（CFU/g）

2.2 BS048對(duì)SE感染雪山草雞血清免疫球蛋白和回腸sIgA含量的影響

由表3可知，BS處理對(duì)10、14日齡的血清IgA、IgG、IgM和回腸 sIgA含量有顯著影響（P＜0.05），SE感染對(duì)7、10、14日齡的血清IgA含量，7、14日齡的血清IgG含量，7日齡的血清IgM含量和7、10、14日齡的回腸sIgA含量有顯著影響（P＜0.05），而B(niǎo)S處理和SE感染的交互作用對(duì)7、10、14日齡的血清IgA、IgG、IgM和回腸sIgA含量沒(méi)有顯著影響（P＞0.05）。

與對(duì)照組相比，BS組8、10、14日齡的血清IgA、IgG、IgM含量均無(wú)顯著變化（P＞0.05）；對(duì)照感染組10、14日齡的血清IgA含量與8日齡的血清IgG含量分別顯著或極顯著減少了24.80%（P＜0.01）、41.68%（P＜0.01）和20.29%（P＜0.05），而14日齡的血清IgG含量和8日齡的血清IgM含量分別極顯著增加了56.53%和21.34%（P＜0.01）；BS感染組8日齡血清IgG含量顯著減少了17.55%（P＜0.05），而10、14日齡的血清IgG含量和8日齡的血清IgM含量分別顯著或極顯著增加了25.34%（P＜0.05）、96.16%（P＜0.01）和26.72%（P＜0.01）。同時(shí)，BS感染組10、14日齡的血清IgA、IgG、IgM含量較對(duì)照感染組分別顯著增加了18.70%、47.61%、29.36%、25.32%、27.36%和19.11%（P＜0.05）。

與對(duì)照組相比，BS組10、14日齡的回腸sIgA含量分別顯著增加了 28.41%和 29.24%（P＜0.05）；對(duì)照感染組8日齡的回腸sIgA含量顯著減少了32.50%（P＜0.05），14日齡的回腸sIgA含量顯著增加了33.24%（P＜0.05）。同時(shí)，BS感染組8、10、14日齡的回腸sIgA含量較對(duì)照感染組分別顯著增加了 41.97%、40.22%和 27.24%（P＜0.05）。

上述結(jié)果表明，基礎(chǔ)飼糧中添加BS048對(duì)正常雪山草雞血清免疫球蛋白分泌并沒(méi)有顯著影響，卻能夠顯著促進(jìn)其腸道sIgA的分泌；而SE感染會(huì)導(dǎo)致血清免疫球蛋白和腸道sIgA的消耗與產(chǎn)生；基礎(chǔ)飼糧中添加BS048則能夠顯著促進(jìn)SE感染雪山草雞的血清免疫球蛋白和腸道sIgA分泌。

2.3 BS048對(duì)SE感染雪山草雞空腸黏膜ALP和MPO活性的影響

由表4可知，BS處理和SE感染對(duì)8、10、14日齡空腸黏膜的ALP和MPO活性均有顯著的影響（P＜0.05），而B(niǎo)S處理和SE感染的交互作用對(duì)7、10、14日齡空腸黏膜的ALP活性沒(méi)有顯著影響（P＞0.05），對(duì)7、10、14日齡空腸黏膜的MPO活性有顯著的影響（P＜0.05）。

與對(duì)照組相比，BS組 10日齡空腸黏膜的ALP活性有升高的趨勢(shì)（0.05≤P＜0.10），14日齡空腸黏膜的ALP活性顯著升高了37.26%（P＜0.05），而8、10、14日齡空腸黏膜的MPO活性均無(wú)顯著變化（P＞0.05）；對(duì)照感染組8、10、14日齡空腸黏膜的ALP活性分別顯著或極顯著降低了61.71%（P＜0.01）、55.07%（P＜0.01）和42.22%（P＜0.05），8、10、14日齡空腸黏膜的MPO活性分別極顯著升高了291.92%、294.24%和234.23%（P＜0.01）；BS感染組8日齡空腸黏膜的ALP活性顯著降低了25.61%（P＜0.05），而8、10、14日齡空腸黏膜的MPO活性分別顯著或極顯著升高了98.28%（P＜0.01）、77.58%（P＜0.01）、41.92%（P＜0.05）。同時(shí)，BS感染組8、10、14日齡空腸黏膜的ALP活性較對(duì)照感染組分別顯著升高了94.29%、101.32%和74.45%（P＜0.05），而8、10、14日齡空腸黏膜的MPO活性則較對(duì)照感染組分別極顯著降低了49.41%、54.96%、57.54%（P＜0.01）。

上述結(jié)果表明，在基礎(chǔ)飼糧中添加BS048能夠顯著提高正常雪山草雞空腸黏膜的ALP活性，而對(duì)空腸黏膜的MPO活性沒(méi)有影響；而SE感染會(huì)顯著降低雪山草雞空腸黏膜ALP活性并提高M(jìn)PO活性；在基礎(chǔ)飼糧中添加BS048則能夠顯著提高SE感染雪山草雞空腸黏膜的ALP活性并降低MPO活性。

表4 BS048對(duì)SE感染雪山草雞空腸黏膜ALP和MPO活性的影響Table 4 Effects of BS048 on activities of ALP and MPO in jejunum mucosal of SE-infectedXueshanchickens

續(xù)表4

2.4 BS048對(duì)SE感染雪山草雞空腸黏膜抗氧化功能的影響

由表5可知，BS處理對(duì)8、10、14日齡空腸黏膜的T-AOC、T-SOD活性、MDA含量和10、14日齡空腸黏膜的 GSH-Px活性有顯著影響（P＜0.05），SE感染對(duì) 7、10、14日齡空腸黏膜的T-AOC、T-SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量有顯著影響（P＜0.05），而B(niǎo)S處理和SE感染的交互作用對(duì)7、10、14日齡空腸黏膜的T-AOC、T-SOD活性、GSH-Px活性、MDA含量沒(méi)有顯著影響（P＞0.05）。

與對(duì)照組相比，BS組10、14日齡空腸黏膜的T-AOC及T-SOD、GSH-Px活性分別顯著或極顯著提高了37.20%（P＜0.01）、43.00%（P＜0.01）、35.83%（P＜0.05）、72.52%（P＜0.01）、43.81%（P＜0.01）和74.52%（P＜0.01），8、14日齡空腸黏膜的MDA含量分別顯著減少了38.28%和40.47%（P＜0.05），10日齡空腸黏膜的MDA含量有減少的趨勢(shì)（0.05≤P＜0.10）；對(duì)照感染組8、10、14日齡空腸黏膜的T-AOC及T-SOD、GSH-Px活性分別顯著或極顯著降低了48.60%（P＜0.01）、20.55%（P＜0.05）、28.31%（P＜0.05）、28.08%（P＜0.05）、34.07%（P＜0.05）、33.04%（P＜0.05）、48.96%（P＜0.05）、35.79%（P＜0.01）和36.00%（P＜0.05），8、10、14日齡空腸黏膜的MDA含量分別顯著或極顯著增加了33.95%（P＜0.05）、88.02%（P＜0.01）和33.63%（P＜0.05）；BS感染組14日齡空腸黏膜的T-SOD活性顯著提高了35.68%（P＜0.05）。同時(shí)，BS感染組8、10、14日齡空腸黏膜的T-AOC及T-SOD、GSH-Px活性較對(duì)照感染組分別顯著或極顯著提高了 62.91%（P＜0.01）、22.63%（P＜0.05）、51.09%（P＜0.05）、32.56%（P＜0.05）、64.60%（P＜0.01）、102.63%（P＜0.01）、81.96%（P＜0.05）、49.68%（P＜0.05）和 85.33%（P＜0.01），而8、10、14日齡空腸黏膜的MDA含量較對(duì)照感染組分別顯著或極顯著減少了28.88%（P＜0.05）、38.64%（P＜0.01）和27.73%（P＜0.05）。

上述結(jié)果表明，在基礎(chǔ)飼糧中添加BS048能夠顯著增強(qiáng)正常雪山草雞的小腸抗氧化功能；而SE感染會(huì)顯著削弱小腸抗氧化功能；在基礎(chǔ)飼糧中添加BS048則能夠顯著提高SE感染雪山草雞的小腸抗氧化功能。

3 討 論

本試驗(yàn)中，雪山草雞在SE連續(xù)口服攻毒3d后，其盲腸黏膜、肝臟和腎臟中均存在大量SE，且盲腸黏膜SE載菌量遠(yuǎn)高于肝臟和腎臟，說(shuō)明SE首先入侵并感染盲腸黏膜，隨后繼續(xù)感染肝臟和腎臟。該試驗(yàn)結(jié)果也證明了雪山草雞SE攻毒模型的成功建立，可用于后續(xù)研究。同時(shí)，組織SE載菌量試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)飼糧中添加BS048能夠顯著降低SE對(duì)雪山草雞盲腸黏膜、肝臟和腎臟的感染程度，表明BS048在雪山草雞感染SE的過(guò)程中發(fā)揮了較好的保護(hù)作用。該結(jié)論可與王愛(ài)萍等［4］和向貴友等［5］的研究結(jié)果相驗(yàn)證。

血清IgG和腸道sIgA是機(jī)體特異性免疫的重要組成部分，二者分別在體液免疫和腸道黏膜免疫中起關(guān)鍵作用。本試驗(yàn)中，基礎(chǔ)飼糧中添加BS048可顯著促進(jìn)雪山草雞腸道sIgA的分泌，這說(shuō)明BS048能夠增強(qiáng)其腸道黏膜免疫，從而提高其腸道黏膜的抗感染能力；而SE感染導(dǎo)致了雪山草雞血清免疫球蛋白和腸道sIgA的消耗與產(chǎn)生，這說(shuō)明SE感染同時(shí)啟動(dòng)了其體液免疫和腸道黏膜免疫；基礎(chǔ)飼糧中添加BS048則能夠顯著促進(jìn)SE感染雪山草雞的血清免疫球蛋白和腸道sIgA分泌，這說(shuō)明BS048能夠在雪山草雞感染SE的過(guò)程中增強(qiáng)其體液免疫和腸道黏膜免疫，從而增強(qiáng)機(jī)體對(duì)SE的特異性免疫，提高機(jī)體對(duì)SE的清除和殺滅能力。該結(jié)論與之前組織SE載菌量試驗(yàn)的結(jié)果相符。

ALP是一種在動(dòng)物體內(nèi)普遍存在的磷酸單脂水解酶，根據(jù)其表達(dá)的組織部位可分為4種同工酶，即腸ALP、胎盤(pán)ALP、生殖細(xì)胞ALP和組織非特異性ALP（包括肝臟、骨骼、腎臟 ALP）［6］。其中，腸ALP在腸黏膜屏障的維護(hù)中發(fā)揮著重要作用，包括調(diào)節(jié)十二指腸表面pH、解除脂多糖（LPS）和游離核苷酸的毒性、抑制腸道炎癥反應(yīng)、調(diào)節(jié)腸道菌群等［7］。MPO存在于髓系細(xì)胞（主要是中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞）的嗜苯胺藍(lán)顆粒中，是髓系細(xì)胞的特異性標(biāo)志。作為中性粒細(xì)胞的功能標(biāo)志和激活標(biāo)志，MPO的活性可用于衡量組織的中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)情況。本試驗(yàn)中，在基礎(chǔ)飼糧中添加BS048能夠顯著增加正常雪山草雞空腸黏膜的ALP活性，而對(duì) MPO活性沒(méi)有影響，這說(shuō)明BS048不僅不會(huì)導(dǎo)致小腸黏膜的損傷和局部炎癥，還能夠增強(qiáng)小腸黏膜屏障；而SE感染會(huì)顯著降低雪山草雞空腸黏膜ALP活性并提高M(jìn)PO活性，這說(shuō)明SE不僅入侵了其小腸黏膜屏障，損傷小腸黏膜，而且引起其小腸黏膜的局部炎癥，導(dǎo)致中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)；在基礎(chǔ)飼糧中添加BS048則能夠顯著提高SE感染雪山草雞空腸黏膜的ALP活性并降低MPO活性，這說(shuō)明BS048能夠在雪山草雞感染SE的過(guò)程中對(duì)其小腸黏膜起到一定的保護(hù)作用，降低了其小腸黏膜的損傷和炎癥程度。本研究中，BS048對(duì)SE感染雪山草雞小腸MPO活性的影響，與Li等［8］的研究結(jié)果類似。

動(dòng)物機(jī)體內(nèi)存在著完善的抗氧化系統(tǒng)，防止自由基的過(guò)度累積，避免機(jī)體遭受氧化損傷。本試驗(yàn)中，在基礎(chǔ)飼糧中添加BS048能夠顯著增強(qiáng)正常雪山草雞的小腸抗氧化功能，這與李衛(wèi)芬等［9］的研究結(jié)果相近。當(dāng)病原微生物（細(xì)菌、病毒等）入侵機(jī)體時(shí)，動(dòng)物機(jī)體處于應(yīng)激狀態(tài)，其產(chǎn)生大量的活性氧（ROS）和活性氮（RNS）等自由基和炎癥因子，用于殺滅病原微生物。但該抗感染機(jī)制的副作用為組織的氧化和炎癥損傷，從而影響其正常生理功能（如新陳代謝、免疫、抗氧化等）。宮秀燕等［10］發(fā)現(xiàn)，SE感染可降低肉雞抗氧化功能，而飼糧添加凝結(jié)芽孢桿菌能夠通過(guò)提高肉雞的抗氧化能力而緩解因SE感染所造成的氧化應(yīng)激。這與本研究結(jié)果一致。

4 結(jié) 論

BS048能夠增強(qiáng)雪山草雞的抗SE感染能力，包括：

① 增強(qiáng)機(jī)體的體液免疫和腸道黏膜免疫，促進(jìn)SE的清除和殺滅；

②增強(qiáng)腸道黏膜屏障，降低SE感染引起的損傷和炎癥；

③ 增強(qiáng)腸道抗氧化功能，緩解因細(xì)菌感染引起的氧化應(yīng)激，保護(hù)組織及其正常功能。

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Effects ofBacillus subtilis048 on Anti-Salmonella enteritisInfection Ability ofXueshanChickens

ZHU Peiji1，2XU Xin2QI Yukai2WANG Hongrong1?
（1.Institute of Animal Science and Technology，Yangzhou Agricultural University，Yangzhou225000，China；2.Lihua Livestock Company of Jiangsu Province，Changzhou213100，China）

The aim of this study was conducted to investigate the effects of Bacillus subtilis 048（BS048）on the anti-Salmonella enteritis（SE）infection ability ofXueshanchickens.Two hundred and fourty 1-day-old SE-negativeXueshancocks with similar weight of（61.5±0.5）g were randomly divided into four groups with 3 replicates per group and 20 chickens per replicate.Chickens in the control group and control infected group were fed a basal diet，and the others in the BS group and BS infected group were fed the basal diet supplemented with 0.1% （mass fraction）BS048.The experiment lasted for 14 days.The control infected group and BS infected group were infected with 1×108CFU SE per cock each day for 3 days when they were 5-day-old，and to observe the effects of the BS048 on the SE amount in cecal mucosa，liver and kidney，serum immunoglobulin（Ig）and ileal secretory immunoglobulin A（sIgA）contents，and alkaline phosphatase（ALP），myeloperoxidase（MPO），total superoxide dismutase（T-SOD），glutathione peroxidase（GSH-Px）activities and total antioxidant capacity（T-AOC）and malonaldehyde（MDA）content in jejunum mucosa of normal and SE infectedXueshanchickens.The results showed as follows：1）compared with the control group，BS group significantly increased the ileal sIgA content ofXueshanchickens at 8，10 and 14 days of age（P＜0.05），and significantly increased the activity of ALP in jejunum mucosa at 10 and 14 days of age（P＜0.05），and significantly increased the T-AOC and activity of T-SOD and GSH-Px in jejunum mucosa at 10 and 14 days of age（P＜0.01），while significantly decreased the jejunum mucosa MDA content at 10 and 14 days of age（P＜0.05）.2）Compared with the control infected group，BS infected group significantly reduced the SE amount in cecal mucosa，liver and kidney of SE infectedXueshanchickens（P＜0.01），significantly increased the contents of IgA，IgG and IgM in saerum at 10 and 14 days of age and sIgA in ileum at 8，10 and 14 days of age（P＜0.05），significantly increased the jejunum mucosa ALP activity at 8，10 and 14 days of age（P＜0.05），significantly decreased the jejunum mucosa MPO activity at 8，10 and 14 days of age（P＜0.01），significantly increased the T-AOC and activity of T-SOD and GSH-Px in jejunum mucosa at 8，10 and 14 days of age（P＜0.05 orP＜0.01），while significantly decreased the jejunum mucosa MDA content at 8，10 and 14 days of age（P＜0.05 orP＜0.01）.It is concluded that S048 can enhance the anti-SE infection ability ofXueshanchickens.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2017，29（2）：479-487］

Bacillus subtilis；Xueshanchickens；Salmonella enteritis；anti-infection

S831

A

1006-267X（2017）02-0479-09

10.3969/j.issn.1006-267x.2017.02.015

（責(zé)任編輯 武海龍）

2016-08-25

益生素在黃羽肉雞養(yǎng)殖中的應(yīng)用效果項(xiàng)目；Danisco Animal Nutrtion與揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院合作項(xiàng)目

朱沛霽（1977—），男，江蘇南通人，博士研究生，研究方向?yàn)槲⑸鷳B(tài)制劑與黃羽肉雞營(yíng)養(yǎng)。E-mail：2568758585＠qq.com

?通信作者：王洪榮，教授，博士生導(dǎo)師，E-mail：hrwang＠yzu.edu.cn

?Corresponding author，professor，E-mail：hrwang＠yzu.edu.cn