炎癥性腸病與干細(xì)胞源性微囊泡的研究進(jìn)展*

劉與進(jìn)， 范 恒， 劉星星

華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科，武漢 430022

綜 述

炎癥性腸病與干細(xì)胞源性微囊泡的研究進(jìn)展*

劉與進(jìn)， 范 恒△， 劉星星

華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院中西醫(yī)結(jié)合科，武漢 430022

炎癥性腸??； 潰瘍性結(jié)腸炎； 克羅恩??； 干細(xì)胞； 微囊泡； 外泌體

炎癥性腸病(inflammatory bowel disease，IBD)是一種病因與發(fā)病機(jī)制復(fù)雜且尚不完全清楚的慢性非特異性腸道炎癥性疾病，主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative disease，UC)和克羅恩病(Crohn’s disease，CD)。目前研究認(rèn)為，IBD與腸道免疫紊亂及腸道上皮細(xì)胞凋亡導(dǎo)致的腸道黏膜屏障破壞有著密切關(guān)系。干細(xì)胞源微囊泡是源于干細(xì)胞的膜性小體，具有免疫調(diào)節(jié)以及抑制凋亡、促進(jìn)組織損傷修復(fù)等作用。本文就干細(xì)胞源微囊泡對IBD的免疫調(diào)節(jié)及抑制腸道上皮細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展作一綜述。

1 炎癥性腸病

IBD是一種慢性非特異性腸道炎癥性疾病，包括潰瘍性結(jié)腸炎和克羅恩病，其臨床表現(xiàn)以慢性腹痛、腹瀉以及容易反復(fù)的黏液膿血便為主[1]。該病多發(fā)生于青少年，歐美國家發(fā)病率較高。但隨著中國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展以及人民生活方式的改變，潰瘍性結(jié)腸炎在我國的發(fā)病率也不斷增加[2]。

IBD的病因尚不明確，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為，IBD是多因素綜合作用導(dǎo)致的。有報道指出超過160個基因位點(diǎn)與IBD相關(guān)[3]。腸道菌群失調(diào)以及腸道免疫異常也在IBD發(fā)病中具有重要作用和地位。

IBD目前的藥物治療包括氨基水楊酸、激素、免疫調(diào)節(jié)劑、生物制劑及靶向藥物，出現(xiàn)嚴(yán)重的并發(fā)癥(竇道、腸梗阻)時需要外科手術(shù)治療，而且需要患者調(diào)整生活方式。近年來，許多研究表明干細(xì)胞移植在IBD的治療中有著巨大的潛力。干細(xì)胞移植可調(diào)節(jié)IBD患者腸道免疫，修復(fù)腸道組織炎癥損傷，重建腸道血管，進(jìn)而有助于減輕患者腸道炎癥。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，干細(xì)胞移植所發(fā)揮的作用主要在于其旁分泌，而微囊泡是其旁分泌的主要物質(zhì)之一。

2 干細(xì)胞源性微囊泡可能是治療IBD的新途徑

2.1 干細(xì)胞及微囊泡

干細(xì)胞(stem cell)是具有多向分化潛能和自我復(fù)制能力的原始未分化細(xì)胞，包括造血干細(xì)胞(hemopoietic stem cells，HSCs)、胚胎干細(xì)胞(embryonic stem cells，ESCs)、間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)等。

微囊泡是由Wolf[4]在1967年首次報道，他發(fā)現(xiàn)的微囊泡來源于激活的血小板。微囊泡主要存在于循環(huán)系統(tǒng)中，主要來源于血小板[5]，少部分來自于其他血液細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞[6]。有多種類型的細(xì)胞可以分泌微囊泡，例如干細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞等。

根據(jù)微囊泡細(xì)胞內(nèi)的來源及分泌機(jī)制的不同，可以將其分成細(xì)胞微粒(microvesicles，microparticles)和外泌體(exosome)。微囊泡表面攜帶有其來源細(xì)胞的表面粘附分子，而靶細(xì)胞正是通過特異性配體受體相互作用的方式來捕獲特定的囊泡。其主要通過3種方式來影響靶細(xì)胞的生物學(xué)行為：①微囊泡可以通過特異性配體受體的相互作用直接激活靶細(xì)胞。例如，血小板源微囊泡表面的組織因子可以與巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞以及血小板表面的分子如P-選擇素等相互作用，停留在這些細(xì)胞表面，并且為凝血因子的聚集提供膜表面。此外，血小板源囊泡可以直接激活內(nèi)皮細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞并且能影響正?；虬┳兊脑煅?xì)胞的功能。②微囊泡通過在細(xì)胞之間傳遞受體而發(fā)揮作用。例如，血小板源微囊泡可以將血小板表面的粘附分子CD41轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞[7]，進(jìn)而改變內(nèi)皮細(xì)胞的生物學(xué)特征。微囊泡將腫瘤細(xì)胞上的Fas配體轉(zhuǎn)移到活化的T淋巴細(xì)胞，可以促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的凋亡[8]。③微囊泡可以將蛋白或多種RNA傳遞給靶細(xì)胞，進(jìn)而影響靶細(xì)胞的生物學(xué)特性。研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)毒素激活的單核細(xì)胞可以通過微囊泡將Caspase-1轉(zhuǎn)移至血管平滑肌細(xì)胞中，為平滑肌細(xì)胞的凋亡提供死亡信號[9]。此外，腫瘤源微囊泡可以將癌基因翻譯的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到周圍臨近的細(xì)胞中[10]。腫瘤源微囊泡還可以將腫瘤細(xì)胞的mRNA轉(zhuǎn)移至單核細(xì)胞[11]。

2.2 干細(xì)胞源性微囊泡或可替代干細(xì)胞移植治療IBD

MSCs是來源于多種組織的具有多向分化潛能的干細(xì)胞，其不僅可以分化形成各種組織細(xì)胞，而且具有強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)能力。MSCs可通過減少IFN-γ和TNF-α、增加IL-10的分泌來抑制T細(xì)胞增殖[12]；也可以通過活化吲哚胺2，3-二加氧酶(indoleamine 2，3-dioxygenase，IDO)降解色氨酸且抑制T細(xì)胞增殖，而且可以通過活化IDO和誘生型一氧化氮合酶(inducible nitricoxide synthase，iNOS)進(jìn)而抑制T細(xì)胞的功能[13]。MSCs與T細(xì)胞(Th1、Th2)共培養(yǎng)時可促進(jìn)T細(xì)胞向分泌抗炎因子類型的細(xì)胞轉(zhuǎn)化，并增加調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory T cell，Treg)的比例[14]；且可以通過抑制活化的T細(xì)胞進(jìn)入S期、誘導(dǎo)G0/G1靜止而抑制活化的T細(xì)胞分裂[15]。MSCs可以分泌前列腺素E2(prostaglandin E2，PGE2)抑制NK細(xì)胞的增殖及其細(xì)胞毒性[14]，通過減少IL-1、CD40和TNF-α的分泌以及分泌PEG2抑制單核細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞(dendritic cells，DC)的成熟[16]。MSCs還可以抑制單核細(xì)胞分化為成熟的DC[17]，通過下調(diào)IFN-γ影響NK細(xì)胞的功能[14]。由此可見，MSCs對獲得性免疫和固有免疫都有強(qiáng)大的調(diào)節(jié)能力。

國內(nèi)外許多研究都表明MSCs對緩解IBD病情有著良好的效果。Lazebnik等[18]的臨床研究發(fā)現(xiàn)，MSCs移植治療后，潰瘍性結(jié)腸炎患者自身免疫反應(yīng)及腸道損傷黏膜的修復(fù)相較于標(biāo)準(zhǔn)治療有著顯著的提高，提示MSCs移植治療潰瘍性結(jié)腸炎可能成為一種新的治療方式。Garcia-Olmo等[19]的一項(xiàng)臨床一期試驗(yàn)也表明MSCs局部注射在治療并發(fā)瘺管的克羅恩病上有較好的效果。

然而多項(xiàng)研究表明，在MSCs移植治療中，MSCs定植到損傷組織處的數(shù)量以及分化為損傷組織處細(xì)胞的數(shù)量有限[20-21]。MSCs移植的治療效果并不依賴于其定植到相應(yīng)組織中的數(shù)目[22]。這表明MSCs移植的治療效果可能與其旁分泌的各種因子有著密切的聯(lián)系[23]。微囊泡是MSCs旁分泌產(chǎn)生的膜性小體。Bruno等[24]研究發(fā)現(xiàn)MSCs分泌的直徑在80 nm～1 μm的微囊泡能保護(hù)并修復(fù)急性腎小管損傷。近年來，越來越多的研究致力于探究MSCs源性微囊泡對各種疾病的治療作用。

實(shí)驗(yàn)表明，在培養(yǎng)外周血單個核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell，PBMC)時，加入BM-MSCs源性的外泌體可抑制其產(chǎn)生INF-γ[25]。BM-MSC源性外泌體含有與免疫相關(guān)的miRNA，包括miR301a、miR-Let-7a和miR22。miR301a為NF-κB通路關(guān)鍵分子，與炎癥反應(yīng)和腫瘤遷移密切相關(guān)。體內(nèi)外研究均證實(shí)微囊泡可有效轉(zhuǎn)移特定的mRNAs和miRNAs，且mRNA可以在受體細(xì)胞內(nèi)翻譯成相應(yīng)的蛋白質(zhì)[26]。干細(xì)胞源外泌體還可通過上調(diào)受體細(xì)胞抗凋亡基因(Bcl2L1、Bcl2和BIRC8)，下調(diào)細(xì)胞凋亡基因(CASP1、CASP8和LTA)表達(dá)而抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞增殖、血管再生，進(jìn)而促進(jìn)組織修復(fù)[27]?？傊?，MSCs源性微囊泡也具有調(diào)節(jié)免疫、抑制細(xì)胞凋亡、促進(jìn)組織修復(fù)等功能，因此其可能替代干細(xì)胞移植成為IBD治療的新途徑。

3 干細(xì)胞源性微囊泡可調(diào)節(jié)IBD腸道免疫

腸道固有免疫和獲得性免疫缺失或者應(yīng)答異常在IBD的發(fā)病中起著關(guān)鍵的作用，各國學(xué)者在腸道免疫方面對IBD進(jìn)行了深入而廣泛的研究。多項(xiàng)研究[28-29]發(fā)現(xiàn)，IBD患者存在腸黏膜固有免疫的異常與缺失。腸黏膜內(nèi)免疫細(xì)胞(B細(xì)胞、T細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和NK細(xì)胞)對腸道致病菌的異常免疫反應(yīng)為IBD的重要特征[30-31]。其中腸道抗炎因子(IL-10、TGF-β等)與炎癥因子(IL-1β、IL-6、TNF等)的平衡失調(diào)及Treg細(xì)胞數(shù)量和功能明顯不足是IBD發(fā)病的重要機(jī)制。MSCs源性微囊泡可降低實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠組織中IL-1β，增加IL-10含量[32-33]，且可以增加共培養(yǎng)免疫細(xì)胞中Treg細(xì)胞的比例。

3.1 IL-1β和IL-10

IL-1β是一個由固有免疫細(xì)胞(如巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、單核細(xì)胞)或非免疫細(xì)胞(如上皮細(xì)胞)分泌的多效炎癥細(xì)胞因子。經(jīng)炎性體活化的Caspase-1可以酶切Pro-IL-1β形成具有活性的IL-1β。分泌到細(xì)胞外的IL-1β可以與細(xì)胞表面的IL-1R1結(jié)合形成IL-1R復(fù)合體。該復(fù)合體胞內(nèi)部分可募集MyD88進(jìn)而磷酸化一些激酶(IRAK)。通過一系列磷酸化級聯(lián)反應(yīng)促使NF-κB進(jìn)入細(xì)胞核，進(jìn)而激活炎癥相關(guān)基因。有研究發(fā)現(xiàn)IBD患者腸黏膜固有層內(nèi)的巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞及腸道上皮細(xì)胞分泌IL-1β有所增加[34-35]。腸黏膜內(nèi)高水平的IL-1β與IBD患者疾病活動度密切相關(guān)[36]。此外，在IBD動物模型中也發(fā)現(xiàn)了高水平的IL-1β與腸炎的發(fā)生發(fā)展過程密切相關(guān)[37]，并且運(yùn)用IL-1阻滯劑可以改善IBD的嚴(yán)重程度[38-39]。由此可見，IL-1β在IBD的發(fā)生發(fā)展中起著關(guān)鍵的作用。

IL-10是由免疫細(xì)胞(Th2、Th1、Treg及TH17等)分泌的多效抗炎細(xì)胞因子。其主要作用于抗原遞呈細(xì)胞(antigen presenting cells，APCs)和淋巴細(xì)胞，調(diào)節(jié)Th1和Th2細(xì)胞因子的平衡，進(jìn)而調(diào)節(jié)機(jī)體炎癥反應(yīng)；IL-10可與IL-10受體結(jié)合促進(jìn)Foxp3+T淋巴細(xì)胞的增殖，進(jìn)而抑制產(chǎn)IL-17的TH17的活化和增殖；有些活化的TH17細(xì)胞分泌的IL-10可以抑制TH17的致病效應(yīng)；IL-10可有效地抑制IL-1、IL-6、IL-12和TNF等促炎因子的產(chǎn)生。因?yàn)镮L-10具有強(qiáng)力的抗炎作用及免疫調(diào)節(jié)作用，所以其作用的缺失與IBD的發(fā)生有著重要的關(guān)系。全基因組相關(guān)性研究(genome-wide association studies，GWASs)揭示了IL-10和IL-10R等位基因的變異與IBD有著緊密的聯(lián)系，尤其與潰瘍性結(jié)腸炎的關(guān)系特別密切。有研究發(fā)現(xiàn)由于基因突變引起IL-10和IL-10R功能缺失與早發(fā)性IBD患兒的發(fā)病有著密切的聯(lián)系[40]。甚至有研究人員用IL-10基因缺陷小鼠來做結(jié)腸炎實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?。由此可見，IL-10在IBD的發(fā)病過程中有著重要的作用。

MSCs源性微囊泡可以通過降低炎癥組織中IL-1β水平，增加IL-10的含量來調(diào)節(jié)炎癥因子與抗炎因子的平衡。有實(shí)驗(yàn)將MSCs源微囊泡靜脈注入TNBS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠體內(nèi)，ELISA檢測顯示實(shí)驗(yàn)組小鼠結(jié)腸組織中的IL-1β含量較對照組明顯降低，而組織中的IL-10較對照組明顯升高[33]。同樣的，F(xiàn)attore等[32]將MSCs源性微囊泡靜脈注射入DSS誘導(dǎo)的潰瘍性結(jié)腸炎小鼠體內(nèi)，通過RT-PCR分析發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組小鼠結(jié)腸組織中的IL-1β較對照組明顯降低。由此可以說明，MSCs微囊泡可以調(diào)節(jié)炎癥因子與抗炎因子的平衡而在IBD的治療中有著巨大的潛能。

3.2 調(diào)節(jié)性T細(xì)胞

Treg是CD4+T細(xì)胞的亞群，在抑制機(jī)體免疫反應(yīng)方面有著重要的作用。根據(jù)Treg分化發(fā)育的途徑不同，可以將其分成天然型Treg(natural Treg，nTreg)和誘導(dǎo)Treg(induced Treg，iTreg)。nTreg是在胸腺中由部分未成熟CD4+T細(xì)胞經(jīng)過活化后表達(dá)CD25發(fā)育而來的，iTreg則是由機(jī)體外周初始T細(xì)胞(naive T cell)在特異性抗原刺激下被激活分化，并在IL-2及TGF-β1作用下上調(diào)叉頭翼狀螺旋轉(zhuǎn)錄因子(forkhead box P3，F(xiàn)oxp3)基因表達(dá)形成，iTreg又可分為Tr1、Th3、CD8+CD28+T細(xì)胞等。Treg細(xì)胞表面有多種高表達(dá)的特異性分子，如Foxp3、CTLA-4、GITR、CD45RO等。其中Foxp3是Treg細(xì)胞特異性標(biāo)志性分子，也是Treg發(fā)育和完善功能主要的調(diào)節(jié)分子[41]。

Treg是獲得性免疫系統(tǒng)的重要組成成分，在抑制炎癥反應(yīng)及維持免疫平衡方面有著重要的作用。它主要通過分泌可溶性細(xì)胞因子及直接作用于其他免疫細(xì)胞這兩種方式發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)及抑制炎癥反應(yīng)的作用?；罨腡reg可分泌大量的IL-10和TGF-β等細(xì)胞因子[42-43]，其中IL-10是重要的抗炎因子，TGF-β則可以通過調(diào)節(jié)Foxp3的表達(dá)來影響Treg的發(fā)育和功能。Treg表面的CTLA-4/CD28與APC表面的B7結(jié)合產(chǎn)生共刺激信號，發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，與DC表面的B7相結(jié)合可以抑制其成熟，進(jìn)而產(chǎn)生特異性免疫耐受[44]。CTLA-4與B7的結(jié)合可以減少Th1的生成，誘導(dǎo)Th1/Th2分化偏移，進(jìn)而促進(jìn)IL-10等抗炎細(xì)胞因子的分泌。Treg還以介導(dǎo)致炎性CD4+T細(xì)胞凋亡來抑制炎癥反應(yīng)。

Treg細(xì)胞具有抑制炎癥反應(yīng)及調(diào)節(jié)免疫的作用，使得它在抑制腸道免疫，維持腸道免疫穩(wěn)態(tài)上有著重要的地位。Treg細(xì)胞數(shù)量的減少或功能異常均可能導(dǎo)致IBD的發(fā)生。IL-2或IL-2Ra基因缺陷小鼠增加了患腸炎的可能，人類基因組研究也報道IL-2基因是IBD的可疑相關(guān)基因[45]。研究發(fā)現(xiàn)IL-2相關(guān)信號通路對維持成熟Foxp3+Treg細(xì)胞的存活是必須的，IL-2或IL-2Ra基因缺陷的小鼠外周組織中成熟Foxp3+Treg細(xì)胞數(shù)量明顯減少[46]。由此推測Treg細(xì)胞數(shù)量的減少與IBD的發(fā)病有著密切的聯(lián)系。來源于CTLA-4或LAG-3基因缺陷小鼠的Treg細(xì)胞在體外試驗(yàn)中不能有效地抑制活化的T細(xì)胞增殖，而且在體內(nèi)試驗(yàn)中不能改善T細(xì)胞介導(dǎo)的慢性腸炎[47-48]。此外，實(shí)驗(yàn)表明Treg在治療實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎中也有明顯效果，且體內(nèi)增殖的iTreg比nTreg的治療效果好[49]。

有研究發(fā)現(xiàn)脂肪來源的MSCs的外泌體能夠調(diào)節(jié)T細(xì)胞的數(shù)量及功能[50]。進(jìn)一步的研究將干細(xì)胞源微囊泡與PBMC共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)其可以誘導(dǎo)Treg細(xì)胞的增殖[51]。而且有研究人員將人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體與CD3/CD28單抗刺激的正常人BPMC相互作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體可在體外明顯抑制CD4+T和CD8+T細(xì)胞增殖，且可以明顯誘導(dǎo)CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞比例的升高[52]。楊翔宇等[53]發(fā)現(xiàn)，炎性微環(huán)境中的IFN-γ可刺激臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞外泌體分泌量明顯增加，且IFN-γ可增強(qiáng)外泌體的免疫調(diào)節(jié)活性，促進(jìn)外泌體升高BPMC中CD4+CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞比例。由此可說明，干細(xì)胞源微囊泡可能在調(diào)節(jié)Treg，特別是炎性微環(huán)境中的Treg細(xì)胞的生長增殖及功能等方面有一定的作用，進(jìn)而在IBD的治療中有著巨大潛力。

4 干細(xì)胞源性微囊泡可減輕IBD腸道上皮細(xì)胞凋亡

腸道上皮細(xì)胞在腸道消化與營養(yǎng)吸收中發(fā)揮著重要的作用，同時它也形成一道屏障并且具有固有免疫的作用，在保護(hù)機(jī)體抵抗外來病原物質(zhì)方面發(fā)揮著重要作用。為了保持腸道屏障的完整性，腸道上皮細(xì)胞在不斷地更新。腸道上皮細(xì)胞的增殖與凋亡的失衡可以導(dǎo)致炎癥或者腫瘤等多種疾病發(fā)生。IBD患者腸道可發(fā)現(xiàn)大量上皮細(xì)胞凋亡。有研究發(fā)現(xiàn)，來自IBD患者結(jié)腸組織的細(xì)胞凋亡率高于健康患者結(jié)腸組織，且潰瘍性結(jié)腸炎患者和克羅恩病患者結(jié)腸組織的細(xì)胞凋亡率沒有差別[54]。蛋白質(zhì)組分析顯示IBD患者病變腸道上皮細(xì)胞中程序性細(xì)胞死亡蛋白8含量是對照組的7.4倍[55]。Rosen等[56]研究發(fā)現(xiàn)，潰瘍性結(jié)腸炎與結(jié)腸上皮細(xì)胞內(nèi)STAT6磷酸化增加密切相關(guān)，STAT6抑制劑可減少IL-13誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和腸道屏障的破壞。由此可知，上皮細(xì)胞凋亡的增加是IBD的重要特征，且在IBD的發(fā)生發(fā)展中有著重要的作用。

干細(xì)胞源微囊泡可通過抑制上皮細(xì)胞凋亡而減輕IBD病變。有研究發(fā)現(xiàn)MSC源性外泌體含有人乳脂肪球EGF因子蛋白(milk fat globule-EGF factor 8 protein，MFGE8)、丙酮酸激酶(pyruvate kinase，PK)等857種蛋白質(zhì)，其中具有全部7afa亞基和7β亞基20S蛋白酶體可降解損傷細(xì)胞中錯誤折疊的蛋白從而抑制損傷細(xì)胞的凋亡，促進(jìn)細(xì)胞修復(fù)與增殖[57]。TNBS誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸黏膜中c-Caspase-3、c-Caspase-8、c-Caspase-9含量較空白對照組顯著增加，尾靜脈注射入干細(xì)胞源微囊泡后，c-Caspase-3、c-Caspase-8、c-Caspase-9含量均降低，且注射入微囊泡的濃度越高，其降低的就越顯著[33]。Caspase的活性是用來檢測細(xì)胞凋亡的標(biāo)志。其在外源性細(xì)胞凋亡和內(nèi)源性細(xì)胞凋亡途徑都有著重要的地位。由此表明，干細(xì)胞源微囊泡可抑制實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠腸道上皮細(xì)胞凋亡。

5 MSCs移植治療的局限性及微囊泡治療IBD的優(yōu)勢及前景

MSCs因其免疫抑制及抑制組織損傷的作用，在用于IBD等自身免疫性疾病的治療上得到了重視。但是進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，MSCs移植治療在效用性和安全性上也存在著不可忽視的問題。在效用性方面，由于臨床研究中MSC的劑量國際上大多采用1.4×106個/kg治療移植物抗宿主病[58]，但是隨著MSCs的培養(yǎng)傳代，其免疫調(diào)節(jié)等功能逐漸喪失[59]，因此獲得大劑量有效的MSCs仍是一個有待解決的問題。而且靜脈注射MSCs治療時，其歸巢的比例很少，大部分滯留在肝臟和肺臟中，這就使得MSCs的效用大大降低。在安全性方面，病變組織的微環(huán)境對MSCs的影響尚不清楚，有研究指出MSCs在病變組織影響下極化成為促炎細(xì)胞[60]或者腫瘤細(xì)胞[61]。且有研究發(fā)現(xiàn)，移植的MSCs可轉(zhuǎn)變?yōu)槟[瘤表型進(jìn)而直接或間接促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長、轉(zhuǎn)移以及腫瘤組織的血管生成[62]?？傊琈SCs移植治療在效用性及安全性上都存在著局限性。

干細(xì)胞源微囊泡與干細(xì)胞有著調(diào)節(jié)免疫、抑制組織損傷等相似的作用，但沒有干細(xì)胞所具有的增殖分化等細(xì)胞學(xué)特性，其生物學(xué)特征較為穩(wěn)定。此外,外泌體表面有CD55和CD59，可避免激活調(diào)理素、補(bǔ)體或凝血因子，因此可以在體液中穩(wěn)定存在[63]。外泌體還可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用，且可以和多種細(xì)胞相互作用，不易被滅活，是很好的藥物載體[64]。Alvarez-Erviti等[65]首次應(yīng)用修飾后的小鼠外泌體將外源性siRNA傳遞到靶細(xì)胞，成功使小鼠腦組織特定基因沉默。因?yàn)楦杉?xì)胞源微囊泡有這些優(yōu)點(diǎn)，所以其在治療IBD上值得期待。

雖然目前關(guān)于干細(xì)胞源微囊泡的研究多集中于其對組織損傷的修復(fù)作用，國內(nèi)外關(guān)于干細(xì)胞源微囊泡在治療IBD方面的研究也很少，但是隨著其免疫調(diào)節(jié)等機(jī)制的進(jìn)一步揭示，其在IBD的治療上定會有很廣闊的前景。

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*國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81573784)；國家自然科學(xué)基金青年基金資助項(xiàng)目(No.81503416)

劉與進(jìn)，男，1990年生，碩士研究生，E-mail：m201575651@hust.edu.cn

△通訊作者，Corresponding author，E-mail：fanheng009@aliyun.com

R574.62

10.3870/j.issn.1672-0741.2017.06.020

(2017-01-06 收稿)