支氣管擴(kuò)張癥合并哮喘患者中IL-4和IFN-γ的表達(dá)水平及臨床意義

張海寧 張晴 張輝 林蘇杰 楊俊玲

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·呼吸病研究·

支氣管擴(kuò)張癥合并哮喘患者中IL-4和IFN-γ的表達(dá)水平及臨床意義

張海寧1，2張晴1張輝1林蘇杰1楊俊玲1

目的 檢測(cè)支氣管擴(kuò)張癥合并哮喘患者外周血清白介素-4(IL-4)、γ干擾素(IFN-γ)的表達(dá)水平，并分析其臨床意義。方法 按照支氣管擴(kuò)張及哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)將41例支氣管擴(kuò)張和哮喘患者分為A、B、C組，其中14例支氣管擴(kuò)張患者為A組，12例哮喘患者為B組，15例支氣管擴(kuò)張合并哮喘患者為C組，7例健康體檢者為D組。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法測(cè)定上述各組研究對(duì)象血清中IL-4、IFN-γ的表達(dá)水平。結(jié)果 (1) 外周血清IL-4的表達(dá)水平：支擴(kuò)合并哮喘組IL-4的表達(dá)水平317.02±53.53ng/L高于支擴(kuò)組279.02±44.24ng/L，低于哮喘組367.60±45.10ng/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(2) 外周血清IFN-γ的表達(dá)水平：支擴(kuò)合并哮喘組患者血清中IFN-γ的表達(dá)水平241.68±50.33 ng/L低于支擴(kuò)組295.65±77.10ng/L，高于哮喘組153.76±26.69 ng/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(*P<0.05，△P<0.01)。結(jié)論 IL-4，IFN-γ在支氣管擴(kuò)張癥合并哮喘的發(fā)病中可能起一定作用，檢測(cè)IL-4，IFN-γ對(duì)支氣管擴(kuò)張癥合并哮喘的輔助診斷有重要參考價(jià)值。

IL-4 主要是通過TH2細(xì)胞介導(dǎo)釋放，可以引起IgE水平增高，嗜酸性粒細(xì)胞及炎性介質(zhì)釋放增多，導(dǎo)致氣道平滑肌增生。IFN-γ則是由Th1細(xì)胞介導(dǎo)分泌，在增強(qiáng) Th1細(xì)胞應(yīng)答同時(shí)抑制 IL-4 產(chǎn)生，可以減輕氣道過敏性炎癥，并且能夠通過減少細(xì)菌的供鐵量及誘導(dǎo)內(nèi)源性NO的產(chǎn)生直接抑制細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌，還能增加單核巨噬細(xì)胞溶解細(xì)菌作用，通過以上途徑共同達(dá)到消滅細(xì)菌的作用。在呼吸系統(tǒng)疾病中，支氣管擴(kuò)張和支氣管哮喘屬于呼吸內(nèi)科的常見病及多發(fā)病，其發(fā)病機(jī)制及診治較為明確，但對(duì)于支氣管擴(kuò)張癥合并哮喘的發(fā)病機(jī)制研究較少，且由于其診斷需結(jié)合高分辨胸部CT及支氣管舒張?jiān)囼?yàn)，臨床上存在較高漏診率，因而本研究是通過對(duì)比支氣管擴(kuò)張合并哮喘與單純支氣管擴(kuò)張、單純哮喘患者血清中IL-4、IFN-γ的表達(dá)水平上的差異，從而提高對(duì)支氣管擴(kuò)張合并哮喘的認(rèn)識(shí)。

資料與方法

一、研究資料

選取2014年10月至2015年10月于吉林大學(xué)第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科明確診斷為支氣管擴(kuò)張合并支氣管哮喘15例患者設(shè)為A組，單純支氣管擴(kuò)張14例患者設(shè)為B組，單純支氣管哮喘12例患者設(shè)為C組，選取體檢科7例健康體檢者為D組。所有受試者均簽署知情同意書。

納入標(biāo)準(zhǔn)：支氣管擴(kuò)張?jiān)\斷標(biāo)準(zhǔn)參照2012年成人支氣管擴(kuò)張癥[1]診治專家共識(shí)，支氣管哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)符合2008年中國(guó)哮喘防治指南[2]。

排除標(biāo)準(zhǔn)：所選病例需排除變應(yīng)性支氣管肺曲霉菌病 (ABPA)，且行支氣管舒張?jiān)囼?yàn)，檢查前3天內(nèi)未使用支氣管舒張劑及抗炎藥，無高血壓、冠心病、心力衰竭等心血管病變。健康體檢者需排除呼吸、心血管、消化、神經(jīng)、內(nèi)分泌、泌尿及免疫系統(tǒng)疾病，從未應(yīng)用過免疫抑制劑及糖皮質(zhì)激素。

二、試劑與器材

人白細(xì)胞介素-4(IL-4)酶聯(lián)免疫分析試劑盒，人γ干擾素(IFN-γ)酶聯(lián)免疫分析試劑盒，低速臺(tái)式離心機(jī)，多功能酶標(biāo)儀，熱恒溫水溫箱。

三、研究方法

1 標(biāo)本收集及處理：支氣管擴(kuò)張合并哮喘組、支氣管擴(kuò)張組、哮喘組及正常對(duì)照組患者于晨起時(shí)采取空腹外周靜脈血5mL，將靜脈血置于我院呼吸內(nèi)科實(shí)驗(yàn)室的低速臺(tái)式離心機(jī)上，以3000r/min的速度離心10min，分離出血清后置于-80℃冰箱中保存。

2 血清IFN-γ及IL-4檢測(cè)水平

采用上海豐壽公司的人IL-4、IFN-γ酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)試劑盒，檢測(cè)血清IL-4、IFN-γ水平，操作步驟按照說明書進(jìn)行，每個(gè)樣本做2個(gè)復(fù)孔檢測(cè)。采用多功能酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度值。

3 統(tǒng)計(jì)分析

結(jié) 果

一、血清IL-4的表達(dá)水平

A組、B組、C組患者血清中IL-4的表達(dá)水平均高于D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)；C組患者血清中IL-4的表達(dá)水平高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C組患者血清中IL-4的表達(dá)水平低于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.05，(見表1)。

二、血清IFN-γ的表達(dá)水平

A組、C組患者血清中IFN-γ的表達(dá)水平均高于D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(△P<0.05,*P<0.01)；B組血清中IFN-γ的表達(dá)水平低于D組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C組患者血清中IFN-γ的表達(dá)水平低于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；C組患者血清中IFN-γ的表達(dá)水平高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P<0.01，(見表1)。

表1 各組研究對(duì)象血清IL-4、IFN-γ表達(dá)水平比較(±s)

表1 各組研究對(duì)象血清IL-4、IFN-γ表達(dá)水平比較(±s)

分組nIL?4(ng/L)IFN?γ(ng/L)A組14279．02±44．24△?295．65±77．10??B組12367．60±45．10△?153．76±26．69△△C組15317．02±53．53△241．68±50．33#D組7215．33±46．33192．14±25．99

注：1.IL-4：與D組比較，△P<0.01 與C組比較，*P<0.05; 2. IFN-γ: 與D組比較，*P<0.05,△P<0.01;與C組比較，*P<0.05，△P<0.01

討 論

Van der Pouw 等[6]的研究表明哮喘患者中IL-4的表達(dá)水平明顯升高，IFN-γ的表達(dá)水平明顯降低，目前國(guó)內(nèi)外研究認(rèn)為IFN-γ /IL-4 失衡是哮喘發(fā)病的關(guān)鍵因素之一，且與哮喘的病情加重有關(guān)。早在20世紀(jì)之前國(guó)外學(xué)者已證實(shí)在支氣管擴(kuò)張患者中IFN-γ的表達(dá)水平明顯升高[7-8]。但對(duì)于支氣管擴(kuò)張合并哮喘，此類疾病中IL-4及IFN-γ的表達(dá)水平如何目前并沒有相關(guān)文獻(xiàn)考證，因而本研究通過ELISA方法測(cè)定IL-4及IFN-γ在支氣管擴(kuò)張合并哮喘患者血清中的表達(dá)水平，為支氣管擴(kuò)張合并哮喘疾病的診斷提供新的輔助方法。

本研究中哮喘組患者血清中IL-4表達(dá)水平高于正常對(duì)照組，IFN-γ低于對(duì)照組，支氣管擴(kuò)張組IL-4表達(dá)水平低于對(duì)照組，IFN-γ高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.01)，此結(jié)論同Van der Pouw 等人的研究結(jié)論一致。支氣管擴(kuò)張合并哮喘組IL-4及IFN-γ的表達(dá)水平均高于對(duì)照組。本研究同時(shí)將支氣管擴(kuò)張合并哮喘組與支氣管擴(kuò)張組、哮喘組患者血清中IL-4及IFN-γ的表達(dá)水平進(jìn)行對(duì)比，發(fā)現(xiàn)支氣管擴(kuò)張合并哮喘組患者血清中IL-4的表達(dá)水平高于支氣管擴(kuò)張組，低于哮喘組，IFN-γ表達(dá)水平低于支氣管擴(kuò)張組而高于哮喘組。

支氣管擴(kuò)張合并哮喘是一種特殊類型的疾病，往往被臨床醫(yī)生所忽略，目前其發(fā)病機(jī)制仍然不明，是有特殊外界壞境刺激還是發(fā)病過程中必然會(huì)出現(xiàn)的并發(fā)癥，這個(gè)問題還需要更多的臨床研究去探討。本研究總結(jié)了支氣管擴(kuò)張合并哮喘患者在血清IL-4、 IFN-γ表達(dá)水平上的特點(diǎn)，目的在于進(jìn)一步提高臨床醫(yī)師對(duì)支氣管擴(kuò)張合并哮喘這種疾病的認(rèn)識(shí)和重視，同時(shí)由于其檢測(cè)方法簡(jiǎn)便安全快捷，能夠起到輔助診斷的作用，可以考慮在臨床上推廣應(yīng)用。

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10.3969/j.issn.1009-6663.2017.03.053

1. 130000 吉林 長(zhǎng)春，吉林大學(xué)第二醫(yī)院呼吸內(nèi)科 2. 257000 山東 東營(yíng)，東營(yíng)市人民醫(yī)院

楊俊玲，E-mail：junling@jlu.edu.cn

2016-08-05]