人非小細(xì)胞肺癌腫瘤組織中叉頭框蛋白Q1的表達(dá)水平

鐘惠鈴

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人非小細(xì)胞肺癌腫瘤組織中叉頭框蛋白Q1的表達(dá)水平

鐘惠鈴

目的 探討叉頭框蛋白Q1(FOXQ1)在人非小細(xì)胞肺癌腫瘤組織中的表達(dá)水平。方法 選取2011年1月至2012年1月我院病理科取得的非小細(xì)胞肺癌腫瘤組織，檢測(cè)FOXQ1在腫瘤組織中的表達(dá)，分析影響FOXQ1表達(dá)因素，以及探討FOXQ1表達(dá)的臨床意義。結(jié)果 FOXQ1表達(dá)陽(yáng)性率為90%，F(xiàn)OXQ1蛋白的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者的年齡、性別無(wú)關(guān)(P>0.05)，與癌細(xì)胞的分化程度、病理類型、有無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移以及腫瘤分期有密切關(guān)系(P<0.05)。結(jié)論 FOXQ1的表達(dá)水平與患者的預(yù)后狀況呈負(fù)相關(guān)性。

FOXQ1；非小細(xì)胞肺癌；病理

肺癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，其病死率也非常高，其中非小細(xì)胞肺癌占到80%的比例，有研究表明，僅有16%的肺癌患者能有5年的生存率，其中大概有45%的非小細(xì)胞肺癌患者會(huì)在5年內(nèi)死亡[1]。腫瘤的發(fā)生發(fā)展與轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)異常有著密不可分的聯(lián)系，叉頭框蛋白Q1(fork head box protein Q1,FOXQ1)[FOXQ1]作為叉頭框蛋白家族的一員，參與了細(xì)胞的周期調(diào)控，在腫瘤的發(fā)生、侵襲及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移中起到了重要作用[2-3]，本文對(duì)80例非小細(xì)胞肺癌患者的腫瘤組織通過(guò)SP染色以及對(duì)患者進(jìn)行隨訪等方式觀察FOXQ1在患者組織中的表達(dá)水平，探討分析FOXQ1與非小細(xì)胞肺癌患者臨床特征及預(yù)后之間的影響關(guān)系。

資料與方法

一、一般資料

選取我院2011年1月-2012年1月在我院收治的明確診斷為非小細(xì)胞肺癌患者80例，其中男性52例、女性28例，年齡32-71歲，平均年齡(52.7±11.3)歲，其中60歲以上的患者49例，小于60歲的患者31例；分化程度：中高分化54例、低分化26例；病理類型：鱗癌20例、腺癌42例、其他類型18例；淋巴轉(zhuǎn)移情況：已發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移62例、無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移18例；腫瘤分期：Ⅰ期20例、Ⅱ期31例、Ⅲ期25例、Ⅳ期4例。所有患者除淋巴轉(zhuǎn)移外，均無(wú)廣泛轉(zhuǎn)移，為達(dá)到臨床治愈效果，所有患者均接受手術(shù)治療，均在我院手術(shù)治療取得所有患者腫瘤組織，其中，對(duì)所有手術(shù)標(biāo)本均用10%甲醛固定。以上患者均通過(guò)門診復(fù)查及電話隨訪，隨訪截止時(shí)間為2015年12月，所有患者的臨床病歷資料均保存完好。

二、試驗(yàn)方法

1 SP染色方法及結(jié)果判定： 對(duì)所取得的腫瘤組織采用免疫組織化學(xué)SP染色法，常規(guī)拷片脫蠟包埋，乙醇脫水。用濃度為3%H2O2、溫度為37℃溫育10min以滅活阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，通過(guò)PBS沖洗后修復(fù)抗原；37℃山羊血清溫育10min，加入濃度為1:500的FOXQ1抗體50uL，放入恒溫4℃的冰箱過(guò)夜，PBS沖洗3遍，每次沖洗5min。加入生物素標(biāo)記二抗，37℃溫育30min再PBS沖洗3遍，每次5min。加入鏈霉素卵白素工作液，37℃溫育30min再PBS沖洗3遍，每次5min；DAB顯色。生理鹽水沖洗徹底，復(fù)染、脫水待干燥后封片，用PBS替代一抗做陰性對(duì)照。細(xì)胞質(zhì)內(nèi)或者細(xì)胞核出現(xiàn)棕褐色或棕黃色的顆粒提示FOXQ1蛋白呈陽(yáng)性表達(dá)，根據(jù)染色強(qiáng)度分為4級(jí)：無(wú)著色0分、輕度染色(黃色)得1分、中度染色(棕黃色)得2分、重度染色(棕褐色)得3分；根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)值的百分比可分為5級(jí)：低于10%為0分、大于10%而低于25%為1分、大于25%低于50%為2分、大于50%低于75%為3分、大于75%為4分；最后將染色強(qiáng)度得分乘以陽(yáng)性細(xì)胞百分比：低于3分為表達(dá)陰性、高于3分為表達(dá)陽(yáng)性。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、FOXQ1表達(dá)陽(yáng)性情況

80例腫瘤組織標(biāo)本中，F(xiàn)OXQ1表達(dá)陽(yáng)性大部分出現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞核內(nèi)也有部分表達(dá)陽(yáng)性，大于3分即FOXQ1表達(dá)陽(yáng)性72例，低于3分即FOXQ1表達(dá)陰性8例，表達(dá)陽(yáng)性率90%。FOXQ1蛋白的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者的年齡、性別無(wú)關(guān)(P>0.05)，與癌細(xì)胞的分化程度、病理類型、有無(wú)淋巴轉(zhuǎn)移以及腫瘤分期有密切關(guān)系，P<0.05，(見(jiàn)表1)。

表1 FOXQ1蛋白在非小細(xì)胞肺癌腫瘤組織中的表達(dá)情況

二、 FOXQ1的表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者預(yù)后的關(guān)系

80例患者的平均生存時(shí)間為18個(gè)月，其中FOXQ1表達(dá)陽(yáng)性的患者平均生存時(shí)間為13個(gè)月，F(xiàn)OXQ1表達(dá)陰性的患者平均生存時(shí)間為21.5個(gè)月(P<0.05)。

討 論

研究表明，在世界范圍內(nèi)肺癌的發(fā)病率及病死率已居所有惡性腫瘤的首位，非小細(xì)胞肺癌屬于肺癌的一種，其患者細(xì)胞呈無(wú)序性增值狀態(tài)，機(jī)體內(nèi)某些重要細(xì)胞因子在調(diào)節(jié)細(xì)胞周期進(jìn)程、分化增殖以及凋亡衰老等方面出現(xiàn)表達(dá)紊亂[4]。叉頭框蛋白是一類有翼狀螺旋結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子蛋白質(zhì)，參與機(jī)體多種生理生化過(guò)程，涉及到細(xì)胞周期調(diào)控、免疫調(diào)節(jié)等，目前已被證實(shí)的叉頭框蛋白家族成員多達(dá)100多個(gè)，包括FOXA-S共19個(gè)亞家族，他們對(duì)維持細(xì)胞生命活動(dòng)起到關(guān)鍵性的調(diào)控作用[5-6]。研究表明，在胚胎發(fā)育的每一步都有FOX基因的特征性表達(dá)，因此細(xì)胞的代謝與分化都有FOX蛋白家族的參與[7]，他們可以調(diào)控細(xì)胞周期、衰老和死亡，對(duì)腫瘤細(xì)胞的無(wú)序增殖有抑制作用，通過(guò)與靶細(xì)胞啟動(dòng)子區(qū)域的GC盒等元件相結(jié)合控制基因轉(zhuǎn)錄，從而發(fā)揮生物功效，他們的異常及突變與腫瘤的發(fā)生發(fā)展以及腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。

FOXQ1屬于FOXQ亞家族，是Fox機(jī)組基因中新發(fā)現(xiàn)的逆轉(zhuǎn)錄因子，它位于6號(hào)染色體短臂的25.3區(qū)，含403個(gè)氨基酸，全長(zhǎng)2319bq，僅一個(gè)外顯子[8]，能夠從正方向調(diào)控基因調(diào)控，對(duì)腫瘤組織的血管以及組織生長(zhǎng)發(fā)揮重要作用。在非小細(xì)胞肺癌發(fā)生過(guò)程中，F(xiàn)OXQ1發(fā)揮著重要作用，主要機(jī)制是FOXQ1能夠調(diào)控E-cadherin(E-人鈣黏附蛋白)，E-cadherin是一種鈣依賴型粘糖蛋白和上皮標(biāo)志物，介導(dǎo)組織細(xì)胞黏附反應(yīng)，對(duì)腫瘤發(fā)生進(jìn)展具有抑制作用，F(xiàn)OXQ1與E-cadherin蛋白的核心啟動(dòng)區(qū)域結(jié)合，介導(dǎo)抑制E-cadherin的表達(dá)，E-cadherin表達(dá)降低后導(dǎo)致β-catenin在腫瘤組織細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)聚集，導(dǎo)致WNT信號(hào)通路阻礙，組織細(xì)胞黏附力下降，組織細(xì)胞容易發(fā)生游離而向組織外浸潤(rùn)生長(zhǎng)，當(dāng)獲得轉(zhuǎn)移的條件時(shí)，則會(huì)脫離原發(fā)灶而發(fā)生浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致肺上皮細(xì)胞發(fā)生EMT(上調(diào)能促進(jìn)-間質(zhì)轉(zhuǎn)化，epithelial-mesenchymal transition)化[9-10]，即腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)移。本文研究結(jié)果顯示，在80例非小細(xì)胞肺癌患者中，處于中高度分化和癌癥中晚期與病理類型差且已發(fā)生淋巴轉(zhuǎn)移的患者，其腫瘤組織中的FOXQ1蛋白表達(dá)水平升高，表明FOXQ1蛋白表達(dá)水平與腫瘤的發(fā)展過(guò)程、腫瘤細(xì)胞的分化程度及淋巴轉(zhuǎn)移進(jìn)程呈正相關(guān)性。在隨訪過(guò)程中，F(xiàn)OXQ1表達(dá)陽(yáng)性的患者生存時(shí)間明顯少于FOXQ1表達(dá)陰性的患者，說(shuō)明FOXQ1的表達(dá)與患者的預(yù)后有著密切聯(lián)系。

綜上所述，F(xiàn)OXQ1的陽(yáng)性表達(dá)與非小細(xì)胞肺癌患者的不良預(yù)后有明顯的相關(guān)性，但其具體機(jī)制還有待深入研究，本文結(jié)果為探索FOXQ1與非小細(xì)胞肺癌的發(fā)生發(fā)展起到了重要作用，下一步我們將深入探討非小細(xì)胞肺癌的生物學(xué)機(jī)制以及能否下調(diào)FOXQ1基因的表達(dá)，為治療非小細(xì)胞肺癌提供新的思路及更多可能。

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Expression level of fork head box protein Q1 in human non small cell lung cancer tumor tissue

ZHONGHui-ling

theCentralHospitalofPanyuDistrict,Guangzhou,Guangzhou511400,China

Objective To discuss the expression level of fork head box protein Q1 (FOXQ1) in human non small cell lung cancer tumor tissue. Methods The non small cell lung cancer tumor tissue were collected from January 2011 to January 2012 in our hospital, and the expression of Q1 in tumor tissues was detected. The expression factor of influencing fork head box protein Q1 was analyzed, and the clinical significance of the expression of fork head box protein Q1 was discussed. Results The positive rate of Q1 expression was 90%, and the expression of FOXQ1 protein had no relation with their age and sex (P>0.05), but it was closely related with the degree of differentiation, pathological type, lymph node metastasis and tumor stage (P<0.05). Conclusion The expression level of Q1 is negatively correlated with the prognosis of patients.

FOXQ1; non small cell lung cancer; pathology

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.03.039

511400 廣東 廣州，廣州市番禺區(qū)中心醫(yī)院

2016-05-06]