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    七味溫陽(yáng)膠囊鎮(zhèn)痛及抗炎作用的實(shí)驗(yàn)研究

    2017-02-05 03:32:20呂棟杜雅娟馬迎春王蘭霞王奕勻
    中國(guó)合理用藥探索 2017年12期
    關(guān)鍵詞:扭體藥組溫陽(yáng)

    呂棟,杜雅娟,馬迎春,王蘭霞,王奕勻

    (甘肅省藥品檢驗(yàn)研究院,甘肅 蘭州 730070)

    腰膝酸軟、畏寒肢冷、頭暈耳鳴、夜尿頻繁等是腎陽(yáng)虛的典型癥狀。七味溫陽(yáng)膠囊是由鹿角膠、鹿角霜、柏子仁、菟絲子、熟地黃、茯苓、補(bǔ)骨脂等七位藥材加工制成,具有補(bǔ)腎溫和、益精養(yǎng)血的功效。本文通過小鼠的動(dòng)物實(shí)驗(yàn),研究了七味溫陽(yáng)膠囊對(duì)小鼠鎮(zhèn)痛及抗炎作用的影響,為臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 動(dòng)物

    昆明種小鼠,體質(zhì)量18~22 g,雌雄各半[2],來(lái)源:蘭州生物制品研究所有限責(zé)任公司,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用號(hào):SYXK(甘)2016-0002,飼養(yǎng)于籠盒中,環(huán)境溫度18℃,濕度45%,自由飲食飲水。

    1.2 藥品及儀器

    七味溫陽(yáng)膠囊(甘肅隴神戎發(fā)制藥公司,批號(hào):20160301),36%乙酸(天津市化學(xué)試劑一廠,批號(hào):20140923),智能熱板儀(寧海白石電子醫(yī)藥儀器廠,型號(hào):GJ8402-型),吲哚美辛腸溶片(臨汾寶珠制藥有限公司,批號(hào):150701),電子天平,伊文思蘭(上海化學(xué)試劑公司,批號(hào)040503),紫外分光光度計(jì)(日本日立公司,型號(hào)U-3010),灌胃針,氫化可的松(浙江仙琚制藥有限公司,批號(hào):161140,規(guī)格5 mg/片),伊文氏藍(lán)(上海麥克林生化科技公司有限,批號(hào):B10089006)。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    1.3.1 腎陽(yáng)虛動(dòng)物模型的建立參照文獻(xiàn)方法[1-2],采用腹腔注射0.1%氫化可的松的方法建立小鼠腎陽(yáng)虛模型,具體方法為:實(shí)驗(yàn)小鼠腹腔注射0.1%氫化可的松0.5 mL,qd,連續(xù)10 d,每天觀察并記錄小鼠體質(zhì)量、飲水量、飲食量及溫度等指標(biāo)。

    1.3.2 小鼠熱板實(shí)驗(yàn)取痛閾值在5~30 s以內(nèi)合格的小鼠60只,隨機(jī)分為6組:對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組及高、中、低3個(gè)劑量的給藥組,每組10只,除對(duì)照組,其他5組按照“1.3.1”項(xiàng)建立腎陽(yáng)虛模型。對(duì)照組及模型組給予等量蒸餾水,陽(yáng)性對(duì)照組給予吲哚美辛腸溶片,19 mg/kg,隔日給藥1次,共3次,七味溫陽(yáng)給藥3個(gè)劑量組分別給予0.31 g/kg,0.62 g/kg,1.24g/kg,按0.5 mL/20 g,灌胃(ig),qd,連續(xù)5 d,于末次給藥后1 h,2 h,4 h,6 h測(cè)定痛閾值,以小鼠舔后足作為疼痛反應(yīng)指標(biāo),記錄時(shí)間。若痛閾值超過60 s,為防止?fàn)C傷小鼠足部,痛閾值記為60 s[3-7]。

    1.3.3 小鼠扭體實(shí)驗(yàn)取符合“1.1”項(xiàng)小鼠60只,隨機(jī)分為6組:對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組及高、中、低3個(gè)劑量的給藥組,每組10只,除對(duì)照組,其他5組按照“1.3.1”項(xiàng)建立腎陽(yáng)虛模型。對(duì)照組及模型組給予等量蒸餾水;陽(yáng)性對(duì)照組給予吲哚美辛腸溶片,19 mg/kg,隔日給藥1次,共3次;七味溫陽(yáng)給藥組0.62 g/kg,1.24 g/kg,2.48 g/kg,按 0.5 mL/20 g,灌胃(ig),qd,連續(xù)5 d。于末次給藥1 h后,每鼠腹腔注射0.8%冰醋酸溶液0.2 mL,由于疼痛使小鼠產(chǎn)生扭體反應(yīng),根據(jù)文獻(xiàn)[2],該反應(yīng)在注射后15 min內(nèi)發(fā)生的頻率高,因此以注射后15 min內(nèi)發(fā)生的扭體反應(yīng)次數(shù)作為指標(biāo)。進(jìn)行t檢驗(yàn),并計(jì)算各組小鼠對(duì)醋酸刺激造成扭體反應(yīng)的疼痛抑制率[3-7]。

    1.3.4 醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性改變的影響取符合“1.1”小鼠60只,同“1.3.3”方法分組及給藥,每組10只。于末次給藥1 h后,每鼠腹腔注射0.8%醋酸0.3 mL,并立即尾靜脈注射1%伊文氏藍(lán)0.2 mL/只,30 min后處死小鼠,用注射器吸取5 mL生理鹽水反復(fù)沖洗腹腔,收集洗液,離心(1 500 r/min)10 min,取上清液在590 nm處測(cè)定吸光度[6-7],比較小鼠毛細(xì)血管通透性。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS 10.0軟件分析數(shù)據(jù),計(jì)量資料以“±s”表示,采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)分析,計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)(%)表示,采用χ2檢驗(yàn),P<0.05,為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 七味溫陽(yáng)膠囊對(duì)小鼠熱板致痛的影響

    陽(yáng)性組在給藥后1 h,2 h,4 h的痛閾值顯著高于模型組(P<0.01),七味溫陽(yáng)給藥中劑量組在1 h,2 h,4 h時(shí)痛閾值均高于模型組(P<0.01),七味溫陽(yáng)給藥低劑量與高劑量組在2 h時(shí)痛閾值均高于模型組(P<0.01);七味溫陽(yáng)給藥低劑量組在2 h,中劑量在1 h,4 h,高劑量在1 h,2 h時(shí)痛閾值顯著高于對(duì)照組(P<0.05或P<0.01)。見表1。

    表1 七味溫陽(yáng)膠囊對(duì)小鼠熱板致痛的影響

    2.3 七味溫陽(yáng)膠囊對(duì)醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)的影響

    陽(yáng)性組與七味溫陽(yáng)給藥組(低、中、高劑量)小鼠扭體次數(shù)顯著低于模型組(P<0.01);模型組小鼠扭體次數(shù)與對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),陽(yáng)性組與七味溫陽(yáng)給藥組(低、中、高劑量)小鼠扭體次數(shù)顯著低于對(duì)照組(P<0.01);給藥組小鼠扭體次數(shù)與陽(yáng)性組比較,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),七味溫陽(yáng)給藥組中劑量組的扭體次數(shù)明顯低于低、高劑量組(P<0.05),且對(duì)炎癥的抑制率也高于低、高劑量組(P<0.05)。見表2。

    表2 七味溫陽(yáng)膠囊對(duì)醋酸致小鼠扭體實(shí)驗(yàn)的影響

    2.4 七味溫陽(yáng)膠囊對(duì)小鼠毛細(xì)血管通透性改變的影響

    陽(yáng)性組與七味溫陽(yáng)給藥組(低、中、高劑量)均顯著低于模型組(P<0.01);給藥組與陽(yáng)性組比較,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。給藥組低、中劑量的通透性顯著高于高劑量組(P<0.05)。

    表3 七味溫陽(yáng)膠囊對(duì)小鼠毛細(xì)血管通透性改變的影響

    3 討論

    七味溫陽(yáng)膠囊主要用于腎陽(yáng)虛引起的腰膝酸軟、畏寒肢冷、頭暈耳鳴、夜尿頻繁等癥狀。本實(shí)驗(yàn)采用小鼠鎮(zhèn)痛模型及抗炎模型,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,七味溫陽(yáng)膠囊對(duì)上述鎮(zhèn)痛及抗炎模型均具有一定的作用,既能顯著緩解醋酸引起的疼痛,又可以延長(zhǎng)熱板致痛時(shí)間,還能顯著降低小鼠毛細(xì)血管通透性。其中中劑量抑炎時(shí)間最持久,為臨床科學(xué)合理用藥提供參考。

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