尾加壓素Ⅱ與腫瘤生長(zhǎng)的研究進(jìn)展

張 君

尾加壓素Ⅱ與腫瘤生長(zhǎng)的研究進(jìn)展

張 君

尾加壓素Ⅱ（UⅡ）最早是從魚(yú)脊髓尾部下垂體中分離出的一種生長(zhǎng)抑素樣環(huán)肽。隨后在人體內(nèi)發(fā)現(xiàn)UⅡ的特異性受體，一種孤立的G蛋白偶聯(lián)受體GPR-14。UⅡ與腫瘤的發(fā)生發(fā)展具有密切關(guān)系，UⅡ及其受體在多種腫瘤細(xì)胞中均有表達(dá)，并且UⅡ?qū)δ[瘤細(xì)胞生長(zhǎng)具有顯著促進(jìn)作用。

尾加壓素Ⅱ；腫瘤細(xì)胞；表達(dá)

尾加壓素Ⅱ（UⅡ）最初是Bern于1985年自硬骨魚(yú)的脊髓尾部神經(jīng)分泌系統(tǒng)分離出來(lái)的一種生長(zhǎng)抑素樣環(huán)狀多肽[1-2]，其縮血管效應(yīng)比內(nèi)皮素強(qiáng)16倍多。后來(lái)人們又分別于不同種類(lèi)動(dòng)物體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了UⅡ的存在[1]。人UⅡ是由一種由11個(gè)氨基酸組成的多肽，近年來(lái)UⅡ已成功從人體中克隆出來(lái)[2]。1999年Ames等[3]首次證實(shí)人體內(nèi)有UⅡ特異性受體—孤兒受體GPR14的存在，其主要分布于心血管組織中。近年來(lái)研究證明，人類(lèi)脊髓、腦、腎、脾、小腸、胸腺、甲狀腺、前列腺和腎上腺等外周組織中均存在UⅡ前體基因的mRNA表達(dá)[2]。相關(guān)研究表明，對(duì)于心力衰竭及門(mén)靜脈高壓患者，其血液中UⅡ含量也會(huì)增多[3]。以上研究表明，UⅡ可能與心力衰竭、門(mén)靜脈血壓升高發(fā)生存在一定關(guān)系。此外，UⅡ及其受體GPR14在各種腫瘤細(xì)胞和組織內(nèi)大量表達(dá)，UⅡ還能夠促進(jìn)某些腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，提示UⅡ與腫瘤發(fā)生發(fā)展具有一定關(guān)系。

1 UⅡ及其受體GPR14mRNA在各種腫瘤細(xì)胞及組織中的表達(dá)

TajahashiK等[4]通過(guò)RT-PCR方法發(fā)現(xiàn)，UⅡmRNA在人絨毛膜癌滋養(yǎng)層細(xì)胞（BeWo）、腎上腺皮質(zhì)癌SW-13細(xì)胞、子宮頸癌HeLa細(xì)胞、惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞T98G、成神經(jīng)瘤細(xì)胞IMR-32、結(jié)腸腺癌DLD-1細(xì)胞中均有表達(dá)，但在成神經(jīng)瘤細(xì)胞NB69中無(wú)表達(dá)。

有研究發(fā)現(xiàn)，在成神經(jīng)瘤細(xì)胞、嗜鉻細(xì)胞瘤組織及腎上腺皮質(zhì)腺瘤組織中，UⅡ及其受體GPR-14的mRNA均呈高表達(dá)狀態(tài)[4]。分別包括7例嗜鉻細(xì)胞瘤，9例腎上腺皮質(zhì)腺瘤（其中有4例原發(fā)性醛固酮增多癥，4例皮質(zhì)醇增多綜合征和1例無(wú)功能腺瘤），4例腎上腺皮質(zhì)癌，1例成神經(jīng)節(jié)細(xì)胞瘤和5例成神經(jīng)細(xì)胞瘤。同時(shí)，在正常腎上腺組織中（皮質(zhì)和髓質(zhì)）也可檢測(cè)出UⅡ及其受體GPR14的mRNA[4-5]。

Douglas等[6]的報(bào)道顯示，UⅡ受體GPR14mRNA在橫紋肌肉瘤細(xì)胞系SJRH30和TE671中均大量表達(dá)。

Morimoto等[7]通過(guò)免疫定位方法，檢測(cè)到UⅡ及其受體GPR14表達(dá)在所有檢測(cè)的腎上腺瘤中，包括8例醛固酮腺瘤、2例無(wú)功能腺瘤、17例腎上腺皮質(zhì)癌和8例嗜鉻細(xì)胞瘤。正常腎上腺組織髓質(zhì)中可檢測(cè)到UⅡ的免疫反應(yīng)性，但是其免疫反應(yīng)要比在皮質(zhì)瘤皮質(zhì)層中弱很多，這表明新生腎上腺皮質(zhì)UⅡ的表達(dá)有所上調(diào)。UⅡ受體GPR14的表達(dá)水平在腫瘤組織和正常腎上腺皮質(zhì)組織中無(wú)顯著性差異。在腎上腺瘤和正常腎上腺組織中也檢測(cè)到UⅡ及其受體GPR14的表達(dá)，表明UⅡ及其受體GPR14與腫瘤生長(zhǎng)以及這些腫瘤的分泌性活動(dòng)可能有關(guān)[7]。

Shemouda等[8]在8例透明細(xì)胞癌中的癌細(xì)胞和脈管系統(tǒng)中發(fā)現(xiàn)UⅡ的表達(dá)，并且指出在正常人的腎組織和腎癌組織中均有UⅡ大量表達(dá)。這些發(fā)現(xiàn)提示，UⅡ在人腎臟系統(tǒng)的病理生理學(xué)中均有一定作用。

在嗜鉻細(xì)胞瘤中檢測(cè)到的UⅡ及其受體GPR14mRNA的表達(dá)明顯低于其在正常腎上腺皮質(zhì)和髓質(zhì)的表達(dá)；在腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤中UⅡ及其受體GPR14mRNA的表達(dá)明顯低于腎上腺外嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞[9-11]。

人肺鱗癌NCI-H520細(xì)胞在含有10%新生牛血清的RPMI1640完全培養(yǎng)基，37 ℃，5%CO2培養(yǎng)基中培養(yǎng)；在基因定性水平，采用RT-PCR法檢測(cè)UⅡ及其受體GPR14mRNA在人肺鱗癌NCI-H520細(xì)胞的表達(dá)情況；在蛋白質(zhì)定性水平，采用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、Western blot 法檢測(cè)UⅡ肽及其受體GPR14分子在人肺鱗癌NCI-H520細(xì)胞中的表達(dá)情況；在蛋白質(zhì)定量水平，采用ELISA法檢測(cè)UⅡ肽在人肺鱗癌NCI-H520細(xì)胞裂解液及培養(yǎng)基上清液中的含量。無(wú)論是從基因水平還是蛋白質(zhì)水平檢測(cè)，UⅡ其受體GPR14在人非小細(xì)胞肺鱗癌NCI-H520細(xì)胞系中均有表達(dá)。

2 UⅡ具有促進(jìn)多種腫瘤細(xì)胞增殖的作用

Tajahashi等[12]的研究發(fā)現(xiàn)，外加UⅡ處理24 h，人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞系SW-13和VMRC-RCW可以明顯地促進(jìn)SW-13細(xì)胞（10-8和10-7 mol/L的UⅡ）和VMRC-RCW細(xì)胞（10-8 mol/L的UⅡ）生長(zhǎng)。

Zeng等[10]研究發(fā)現(xiàn)，UⅡ?qū)C12細(xì)胞無(wú)增殖作用，但其能夠促進(jìn)人嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞增殖，表明UⅡ可能與嗜鉻細(xì)胞瘤發(fā)病有一定關(guān)系。

3 UⅡ在血管中的作用

上世紀(jì)70年代，美國(guó)J.Folkman教授提出新生血管的生成促使了實(shí)體腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移[14]，其認(rèn)為“血管生成開(kāi)關(guān)”打開(kāi)后，部分化學(xué)信號(hào)就可以借助此渠道使腫瘤從靜止?fàn)顟B(tài)至快速生長(zhǎng)狀態(tài)，而導(dǎo)致新的腫瘤血管生成。經(jīng)證實(shí)，腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移是以新血管的生成為前提，腫瘤如果沒(méi)有剛剛形成的新血管作為繼續(xù)發(fā)展的平臺(tái)就會(huì)被約束在狹小的空間內(nèi)，僅為1～2 mm3，幾乎不會(huì)對(duì)機(jī)體造成明顯影響[15-16]。最近研究表明，在血管內(nèi)皮細(xì)胞中UⅡ及其受體均有表達(dá)，體內(nèi)和體外實(shí)驗(yàn)均表明UⅡ與其受體結(jié)合后能夠促進(jìn)新血管形成，UⅡ促進(jìn)新生血管形成作用與FGF-2相似[17]，UⅡ可能通過(guò)打開(kāi)“血管生成開(kāi)關(guān)”從而啟動(dòng)腫瘤的血管生成[18]。因此，UⅡ可能與腫瘤發(fā)生、發(fā)展以及轉(zhuǎn)移具有一定關(guān)系。

4 結(jié)語(yǔ)

盡管UⅡ的生理學(xué)活性還沒(méi)有完全被人們所認(rèn)識(shí)，但是大量研究表明UⅡ及其受體GPR14mRNA在各種人腫瘤細(xì)胞和腫瘤組織中均有表達(dá)[2,4-11]。UⅡ不僅能夠促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞[14]和心肌細(xì)胞[19]生長(zhǎng)，也能夠促進(jìn)人腫瘤細(xì)胞，如人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞系SW-13和人腎細(xì)胞癌細(xì)胞系VMRC-RCW[6]、人嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)[10]。UⅡ可能通過(guò)旁分泌和（或）自分泌方式促進(jìn)細(xì)胞增殖。UⅡ只有與其受體GPR14結(jié)合后才能促進(jìn)細(xì)胞增殖[13]。UⅡ受體拮抗劑被認(rèn)為能夠拮抗UⅡ與其受體的結(jié)合[20]。開(kāi)發(fā)新型UⅡ受體拮抗劑，阻止UⅡ與其受體GPR14結(jié)合，從而拮抗UⅡ促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖的作用，可能成為將來(lái)治療腫瘤的新靶點(diǎn)。

[1] Bern HA,Pearson D,Larson BA,et al.Neurobrmones from fish tails:th caudal neurosecretory system I.“Urophysiology”and the caudal neurosecretory system of fishes[J].Recent Prog Horm Res,1985(41):533-552.

[2] Coulouarn Y,Lihrmann I,Jegou S,et al.Cloning of th cDNA encoding the UⅡ precursor in frog and human reveals intense expression of the UⅡ ggene in motoneruons of the spinal cord[J].Proc Natl Aacad SCI USA,1998,95(26):15803-15808.

[3] Ames RS,Saraku HM,Chambers JK,et al.Human UⅡis a potent vasoconstrictor and agonist for the orphan receptor GPR14[J].Nature,1999,401(6750):282-286 .

[4] Takahasi K,Tosume K ,Murakami O,et al.Expression of urotensinⅡ and urotensin Ⅱ receptor mRNAs in various human tumor cell lines and secretion of urotensin Ⅱ-like immunoreactivity by SW-13 adrenocortical carcinoma cells[J].Peprides,2001,22(7):1175-1179.

[5] Takahasi K,Tosume K,Murakami O.Expression of three vasoactive peptides urotensin- Ⅱ,adrenomedullin and endthelin-1,in a human renal cell carcinoma cell line[J].Clin Exp Nephrol,2001,4(4):246-249.

[6] Douglas SA,Naselsky D,Ao Z,et al.Identification and pharmacological characterization of native ,functional human urotensin-Ⅱreceptors in rhabdomyosarcoma cell lines[J].Br J Pharmacol,2004,142(6):921-932.

[7] Morimoto R,Satoh F,Murakami O,et al.Immunolocalization of UⅡ and its receptor in human adrenal tumors and attached nonneoplastic adrenal tissues[J].Peptides,2008,29(5):873-880.

[8] Shenouda A,Douglas SA,Ohlstein EH,et al.Localization of ruotensin-Ⅱimmunoreactivity in normal human kidneys and renal carcinoma[J].J Histocherm Cytochem,2002,50(7):885-889.

[9] Zeng ZP,Liu GQ,Li HZ,et al.The effects of urotensin-Ⅱ on proliferation of pheochromocytoma cells and mRNA expression of urotensin-Ⅱ and its receptor in pheochromocytoma tissues[J].Ann N Y Acad Sci,2006,1073(1):284-289.

[10] Liu GQ,Zeng ZP,Li HZ,et al.Exptession of UⅡ and G-protein coupled receptor14 mRNA in Human pheochromocytoma tissues[J].Zhongguo Yi Xue Ke Xue Yuan Xue Bao,2005,27(4): 457-460.

[11] Liu GQ,Zeng ZP,Li HZ,et al.Exptession of UⅡ mRNA in nomal adrenal medulla and pheochromocytoma tissues[J].Zhonghua Yi Xue Za Zhi,2003,83(14):1225-1228.

[12] Takahasi K,Tosume K,Murakami O,et al.Expression of UⅡand its receptor in adrenal tumors and stimulation of proliferation of cultured tumor cells by UⅡ[J].Peptides,2003,24(2):301-306.

[13] Matsushita M,Sichiri M,Fukai N,et al.Urotensin Ⅱ is an autocrine/paracrine growth factor for the porcine renal epithelial cell line, LLCPK1[J].Endocrinology,2003,144(5):1825-1831.

[14] Follaman J.Tumor angiogenesis:in Plieations[J].N Engl J Med,1971,285(21):1182-1186.

[15] Augustin HG.Antiangiogenic tumor theray:will it work[J].Trends Pharmacol Sci,1998,19(6):216-222.

[16] Folkman J.Seminars in Medicine of the Beth Israel Hospital,Boston.Clinical applications of research on angiogenesis[J].N Engl J Med,1995,333(26):1757-1763.

[17] Spinazzi R,Albertin G,Nico B,ea al.Urotensin-Ⅱ and its receptor(UT-R) are expressed in rat brain endothelial cells,and urotensin-Ⅱvia UT-R stimulates anjiogenesin in vivo[J].Int J Mol Med,2006,18(6):1107-1112.

[19] Zou Y,Nafai R,Yamazaki T.UⅡ induces hypertrophic responses in cultured cardiomyocytes from neonatal rats[J].FEBS Lett,2001,508(1):57-60.

[20] Carotenuto A,Grieco P,Rovero P,et al.Urotensin-Ⅱ receptor antagonists[J].Curr Med Chem,2006,13(3):267-275.

Advances in the research of UrotensinⅡand tumor

Zhang Jun

Urotensin Ⅱ(UⅡ) is one of the earliest somatostatin peptide isolated from the fish tail pituitary in spinal cord.The specific receptor of UⅡ was found in the human body,an isolated G protein coupled receptor GPR-14.UⅡis closely related to the occurrence and development of tumor,UⅡ and its receptor are expressed in a variety of tumor cells,and U.

UrotensinⅡ;Tumor cells;Expression

10.12010/j.issn.1673-5846.2017.06.061

湖北省武漢市優(yōu)撫醫(yī)院，湖北武漢 435000

張君，碩士學(xué)位，主管藥師。研究方向：藥物化學(xué)