生活飲用水中的微生物檢驗(yàn)

韋清玲

河池市金城江區(qū)疾病預(yù)防控制中心，廣西河池 547000

生活飲用水中的微生物檢驗(yàn)

韋清玲

河池市金城江區(qū)疾病預(yù)防控制中心，廣西河池 547000

水是人類社會賴以生存和發(fā)展的根本所在，無論是人們的日常生活還是工業(yè)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，都離不開水資源的支持。生活飲用水是關(guān)系社會發(fā)展的重要民生問題，其質(zhì)量直接影響著社會大眾的身體健康，對此，政府相關(guān)部門針對生活飲用水頒布了相應(yīng)的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范，明確要求生活飲用水中的微生物含量應(yīng)該在允許范圍內(nèi)。該文對生活飲用水中的微生物檢驗(yàn)方法進(jìn)行了分析，并就相應(yīng)的評價標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制進(jìn)行了討論。

生活飲用水；微生物；檢驗(yàn)方法；評價標(biāo)準(zhǔn)；質(zhì)量控制

水資源在社會發(fā)展以及人類生存中占據(jù)著至關(guān)重要的位置，而最近幾年，伴隨著工業(yè)化進(jìn)程的持續(xù)加快，在推動社會生產(chǎn)力水平不斷提高的同時，也在一定程度上加劇了環(huán)境污染問題，水污染的存在對于生活飲用水的處理提出了更加嚴(yán)苛的要求。與其他資源相比，水資源的分布廣泛，而且擴(kuò)散性較強(qiáng)，一旦受到污染，對于人們的身體健康將會造成巨大的威脅。在這種情況下，做好生活飲用水中微生物的檢驗(yàn)，對水質(zhì)進(jìn)行評價，就顯得非常必要。

1 生活飲用水水質(zhì)評價標(biāo)準(zhǔn)

在經(jīng)濟(jì)發(fā)展的帶動下，我國的城市化進(jìn)程持續(xù)加快，許多地區(qū)都出現(xiàn)了水資源短缺以及城市飲用水水源污染的問題，使得居民的生活飲用水安全受到了很大的威脅。對此，原衛(wèi)生部以及國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會在原有衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了相應(yīng)的修訂，頒布了強(qiáng)制性的《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB5749-2006）。

作為保障生活飲用水安全的重要舉措，新標(biāo)準(zhǔn)的修訂涉及到了國土資源部、水利部、國家環(huán)?？偩值榷鄠€部門，相比較原有的標(biāo)準(zhǔn)，存在3個比價顯著的特點(diǎn)，①強(qiáng)化了對于有機(jī)物、微生物以及水質(zhì)消毒等方面的相關(guān)要求，將原本的35項(xiàng)飲用水水質(zhì)指標(biāo)增加到了106項(xiàng)，要求更加全面細(xì)致；②對城鎮(zhèn)及農(nóng)村飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了統(tǒng)一；③實(shí)現(xiàn)了標(biāo)準(zhǔn)的國際化，其在水質(zhì)項(xiàng)目的劃定以及指標(biāo)值的選擇方面，參考了世界衛(wèi)生組織的《飲用水水質(zhì)準(zhǔn)則》以及一些發(fā)達(dá)國家的飲用水標(biāo)準(zhǔn)，同時充分考慮了我國的實(shí)際情況[1]。

新的標(biāo)準(zhǔn)對生活飲用水水質(zhì)衛(wèi)生要求、水質(zhì)監(jiān)測及水質(zhì)檢驗(yàn)方法進(jìn)行了明確，同時適用于城鄉(xiāng)等各類集中式供水以及分散式供水的生活飲用水。

2 生活飲用水中的微生物檢驗(yàn)

2.1 樣品采集

想要對生活飲用水中的微生物進(jìn)行檢驗(yàn)，對水質(zhì)進(jìn)行評價，需要首先做好樣品的采集工作。需要確保采集水樣的代表性，而在整個采樣過程中，應(yīng)該盡可能做到無菌操作，以減少對于檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的影響。首先，對于采樣容器，需要做好相應(yīng)的殺菌處理，并保證在水樣采集、運(yùn)輸以及保存的過程中，不會受到任何形式的污染。其次，在對自來水樣品進(jìn)行采集時，應(yīng)該先利用酒精燈，對水龍頭出水口進(jìn)行輕微燒灼滅菌處理，然后完全打開水龍頭，將積存在水管中的水完全排出，才能進(jìn)行取樣，這個過程通常需要5～10 min；在對河流、湖泊等水源地進(jìn)行取樣時，應(yīng)該將采樣深度設(shè)置在水面以下10～15 cm，避免水面漂浮物的影響。然后，在對水樣進(jìn)行運(yùn)輸時，應(yīng)該采用棕色瓶，避免陽光的直接照射[2]。同時，需要做好采樣地點(diǎn)、水樣來源、采樣時間等的記錄工作，并且保證采集到的樣品可以在4 h內(nèi)完成檢驗(yàn)。

2.2 微生物檢驗(yàn)

存在于水中的微生物的種類是多種多樣的，根據(jù)不同的檢驗(yàn)?zāi)繕?biāo)，需要選擇不同的檢驗(yàn)方法。例如，在對細(xì)菌總數(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)時，可以采用平皿計數(shù)法；而在對總大腸菌群指數(shù)進(jìn)行檢驗(yàn)時，可以選擇多管發(fā)酵法。而在實(shí)際操作中，檢驗(yàn)人員應(yīng)該根據(jù)樣品情況、檢驗(yàn)環(huán)境等進(jìn)行靈活變通，確保微生物檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。這里針對一些比較常見的微生物檢驗(yàn)方法進(jìn)行簡要分析。

①菌落總數(shù)檢驗(yàn)：針對細(xì)菌群落總數(shù)的檢驗(yàn)，一般情況下都可以采用平皿計數(shù)法，可以取得良好的檢驗(yàn)成果[3]。在實(shí)際操作中，應(yīng)該首先保證無菌檢測環(huán)境，利用滅菌移液管，從充分混合的水樣中抽取1 mL，注入到經(jīng)過滅菌消毒的平皿中，然后加入融化后冷卻到45℃左右的營養(yǎng)瓊脂15 mL，搖晃均勻。應(yīng)該保證每一次試驗(yàn)都設(shè)置相應(yīng)的平行接種試驗(yàn)，以同樣條件下僅含有營養(yǎng)瓊脂的平皿作為對照。等到培養(yǎng)基徹底冷卻凝固后，使平皿底面朝上，放置在(36±1)℃的培養(yǎng)箱內(nèi)48 h，然后利用相應(yīng)的儀器設(shè)備進(jìn)行細(xì)菌群落總數(shù)的計量，就能夠達(dá)到1 mL水樣中的細(xì)菌含量。

②總大腸菌檢驗(yàn)：對于總大腸菌的檢驗(yàn)，采用的是多管發(fā)酵法，選擇兩個經(jīng)過滅菌處理的50 mL試管或者燒瓶，加入經(jīng)雙倍濃縮的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液以及100 mL水樣。之后將得到的150 mL培養(yǎng)液均勻加入到15支5 mL滅菌試管中，搖晃均勻，放置在37℃的培養(yǎng)箱內(nèi)24 h，然后可以對總大腸菌群數(shù)進(jìn)行計量和檢驗(yàn)[4]。

③耐熱大腸菌群檢驗(yàn)：這里的耐熱大腸菌群主要指埃希爾菌以及耐熱克雷伯氏菌屬，可以采用多管發(fā)酵法和濾膜法進(jìn)行檢驗(yàn)。一般情況下耐熱大腸菌群可以通過提高培養(yǎng)溫度的方式進(jìn)行檢測，如果其在(44.5±0.2)℃的溫度下，仍然能夠正常的存活和生長，就可以判定為耐熱大腸菌群。這里對濾膜檢驗(yàn)法進(jìn)行分析，首先需要進(jìn)行滅菌處理，多采用濾膜滅菌法或者過濾器滅菌法這兩種常規(guī)方法，這里不再贅述。其次需要對水樣進(jìn)行過濾，可以利用專業(yè)的無齒無菌鑷子和滅菌濾膜，將濾膜放置在無菌濾床上，在過濾器中注入100 mL水樣，打開過濾器閥門進(jìn)行抽濾，實(shí)現(xiàn)過濾水樣的目的。然后，對過濾后的水樣進(jìn)行抽氣，然后關(guān)閉過濾器閥門。使用無齒無菌鑷子，將濾膜放到培養(yǎng)基上，放入培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)。

3 生活飲用水中微生物檢驗(yàn)質(zhì)量控制

在現(xiàn)實(shí)生活中，如果經(jīng)過自來水廠加工處理后，生活飲用水沒有達(dá)到相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求，或者輸水管道破裂、二次供水污染等問題影響了水質(zhì)，則水中的微生物可能會出現(xiàn)超標(biāo)的情況，甚至出現(xiàn)一些容易致病的微生物，影響人們的身體健康。在這種情況下，做好生活飲用水中微生物的檢測就顯得非常重要。近年來，伴隨著工業(yè)化進(jìn)程的加快，環(huán)境污染問題也在不斷惡化，水質(zhì)的污染影響了人們的飲水安全，需要加強(qiáng)對于生活飲用水中的微生物檢驗(yàn)，同時做好微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制，切實(shí)保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性，為生活飲用水水質(zhì)評價和改善提供良好的參考依據(jù)[5]。

現(xiàn)階段，對于生活飲用水中微生物的檢驗(yàn)，多是依照《生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法》（GB/T5750-2006）的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行的，但是其僅僅是針對飲用水的理化指標(biāo)，基本上沒有涉及微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制。因此，這里從幾個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，對生活飲用水微生物檢驗(yàn)的質(zhì)量控制措施進(jìn)行分析和討論[6]。

3.1 采樣環(huán)節(jié)

之前也提到，在進(jìn)行水樣采集時，應(yīng)該盡可能避免環(huán)境因素的影響，對水龍頭進(jìn)行燒灼滅菌處理，然后放水5～10 min，排除積存水以及生物膜對于水樣的影響。在采樣完成后，應(yīng)該做好低溫避光保存，保存溫度為0～4℃，同時需要在4 h內(nèi)進(jìn)行微生物檢驗(yàn)。

3.2 檢驗(yàn)環(huán)境

環(huán)境因素對于微生物檢驗(yàn)結(jié)果的影響是不容忽視的，因此，應(yīng)該盡可能確保檢驗(yàn)區(qū)域的潔凈度達(dá)到百級，嚴(yán)格依照無菌操作的要求進(jìn)行檢驗(yàn)。另外，還必須避免檢驗(yàn)環(huán)境以及檢驗(yàn)人員對于樣品的污染，避免不同樣品間的交叉污染。具體來講，應(yīng)該做到以下幾點(diǎn)。

①在選擇微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室時，必須確保其分區(qū)明確，布局合理，包括準(zhǔn)備室、潔凈室、培養(yǎng)室等，嚴(yán)格依照標(biāo)準(zhǔn)流程進(jìn)行試驗(yàn)，對往返和迂回的概率進(jìn)行控制。

②應(yīng)該定期對潔凈室進(jìn)行沉降菌檢查，如果發(fā)現(xiàn)細(xì)菌數(shù)量超標(biāo)，則需要及時對過濾器和紫外燈進(jìn)行清洗和更換，始終將沉降菌的數(shù)量控制在允許范圍內(nèi)。

③需要根據(jù)實(shí)際情況，制定相應(yīng)的消毒、滅菌和應(yīng)急處理程序[7]。

3.3 檢驗(yàn)設(shè)備

①對于微生物檢驗(yàn)中的常用設(shè)備，如培養(yǎng)箱、移液器、干燥箱等，應(yīng)該定期進(jìn)行檢測，確保設(shè)備狀態(tài)良好，處于檢定有效期內(nèi)，如果超出有效期，則需要及時進(jìn)行更換；②應(yīng)該保證培養(yǎng)箱的隔熱效果良好，將培養(yǎng)溫度的變化控制在1℃以內(nèi)，而且需要每天早晚各一次，針對培養(yǎng)箱的溫度控制進(jìn)行記錄；③應(yīng)該采用合理有效的方法，定期對高壓滅菌器的滅菌效果進(jìn)行檢查，確保其能夠發(fā)揮應(yīng)有的作用；④對于已經(jīng)經(jīng)過滅菌處理的采樣瓶、培養(yǎng)基等，需要做好標(biāo)示，分類存放，注明保質(zhì)期。

3.4 檢驗(yàn)人員

在飲用水微生物檢驗(yàn)中，采用的多是活菌培養(yǎng)的方法，存在著一定的隨機(jī)性和不穩(wěn)定性，因此，對于檢驗(yàn)人員而言，不僅需要具備一些基本的水質(zhì)分析知識，還應(yīng)該能夠熟練掌握和應(yīng)用無菌操作技術(shù)，以防止出現(xiàn)樣品、人員以及環(huán)境的相互污染，同時，還應(yīng)該了解均質(zhì)樣品檢驗(yàn)與微生物檢驗(yàn)存在的差異性，盡可能避免隨機(jī)取樣的情況。通常來講，檢驗(yàn)人員必須具備微生物檢驗(yàn)的專業(yè)知識和操作技能，最好是相關(guān)專業(yè)畢業(yè)，并且能夠持證上崗；應(yīng)該不斷對微生物檢驗(yàn)的新技術(shù)和新方法進(jìn)行學(xué)習(xí)，定期參與培訓(xùn)和技能考核[8]。

4 結(jié)語

綜上所述，通過對生活飲用水中微生物的檢驗(yàn)，可以了解水質(zhì)情況及污染情況，為飲用水質(zhì)量的改善提供相應(yīng)的參考依據(jù)。對于供水部門和衛(wèi)生部門而言，在生活飲用水衛(wèi)生管理中，應(yīng)該做好微生物檢驗(yàn)，強(qiáng)化監(jiān)管力度，保證人們的飲水安全。

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[3]邵云金.生活飲用水微生物檢驗(yàn)方法和評價標(biāo)準(zhǔn)分析[J].繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育,2016(5):128-129.

[4]羅茜,葉蕾.淺析生活飲用水中微生物檢驗(yàn)與質(zhì)量控制[J].科研,2015(30):298.

[5]張維娜.生活飲用水微生物檢驗(yàn)方法和評價標(biāo)準(zhǔn)探討[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘,2015,15(60):32.

[6]徐巖.探析日常飲用水中微生物的檢驗(yàn)[J].現(xiàn)代食品,2016(3):101-102.

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R7

A

1672-5654（2017）06（a）-0060-02

10.16659/j.cnki.1672-5654.2017.16.060

2017-03-10）

韋清玲（1967-），女，壯族，廣西河池人，大專，主管技師。