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    紅曲菌主要代謝產(chǎn)物檢測(cè)方法研究進(jìn)展

    2017-01-19 06:58:08鞏健樊慶魯
    中國(guó)調(diào)味品 2017年3期
    關(guān)鍵詞:曲菌洛伐他汀紅曲

    鞏健,樊慶魯

    (1.淄博職業(yè)學(xué)院制藥與生物工程系,山東淄博 255314;2.山東省曲霉應(yīng)用工程技術(shù)研究中心,山東淄博 255314)

    紅曲菌主要代謝產(chǎn)物檢測(cè)方法研究進(jìn)展

    鞏健1,2,樊慶魯1,2

    (1.淄博職業(yè)學(xué)院制藥與生物工程系,山東淄博 255314;2.山東省曲霉應(yīng)用工程技術(shù)研究中心,山東淄博 255314)

    紅曲菌能產(chǎn)生多種代謝產(chǎn)物,這些代謝產(chǎn)物大多具有一定的生理活性,而桔霉素是一種真菌毒素。文章對(duì)紅曲菌主要代謝產(chǎn)物Monascolins K、紅曲色素、麥角甾醇、γ-氨基丁酸和桔霉素的檢測(cè)方法進(jìn)行歸納總結(jié),以期對(duì)紅曲菌代謝產(chǎn)物的研究開(kāi)發(fā)提供參考。

    紅曲菌;次級(jí)代謝產(chǎn)物;檢測(cè)方法;綜述

    紅曲菌(Monascus)是一種絲狀真菌,屬真菌門(mén)、子囊菌亞門(mén)、不整子囊菌綱、散囊菌目、紅曲科,該科僅有一屬,即紅曲菌屬[1]。紅曲菌能產(chǎn)生Monascolins類(lèi)物質(zhì)、紅曲色素、γ-氨基丁酸、麥角甾醇、桔霉素以及多種酶類(lèi)等次級(jí)代謝產(chǎn)物,這些代謝產(chǎn)物大多數(shù)具有生理活性。Monascolin K能有效地抑制膽固醇生物合成過(guò)程中的關(guān)鍵酶HMG-CoA(3-hydroxy-3-methyl glutaryl coenzyme A reductase)還原酶的活性,發(fā)揮降低人體膽固醇含量的作用[2]。紅曲色素是由紅曲菌發(fā)酵生產(chǎn)的天然色素,在食品工業(yè)中廣泛應(yīng)用。γ-氨基丁酸有降血壓的作用[3]。麥角甾醇作為維生素D2的重要前體,在紫外光照的條件下能夠立即轉(zhuǎn)化為維生素D2

    [4]。桔霉素是一種真菌毒素,必須對(duì)其含量進(jìn)行控制。本文對(duì)上述5種代謝產(chǎn)物的檢測(cè)方法進(jìn)行綜述,以期為紅曲菌代謝產(chǎn)物的研究開(kāi)發(fā)提供參考。

    1 Monascolin K

    Monascolin K即洛伐他汀,是Monascolins類(lèi)物質(zhì)中最常見(jiàn)的一種,在溶液中洛伐他汀有兩種形式:酸式和內(nèi)酯式,在紅曲中主要以酸式結(jié)構(gòu)為主。目前,Monacolin K的檢測(cè)方法主要有:薄層色譜法(thin-layerchromatography,TLC)、紫外分光光度法、毛細(xì)管電泳法、高效液相色譜法(high performance liquid chromatography,HPLC)、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MS)等,現(xiàn)在檢測(cè)Monascolin K最常用的方法是HPLC(238nm)。

    1.1 薄層色譜法

    薄層色譜法是一種快速、簡(jiǎn)便、高效、經(jīng)濟(jì)、應(yīng)用廣泛的色譜分析方法,此方法屬于經(jīng)典傳統(tǒng)的化學(xué)分析方法,適合于定性、半定量檢測(cè)[5]。楊麗等[6]采用TLC法,以60%乙腈溶液作為提取劑,氯仿∶甲醇∶氨水為25∶3∶1(體積比)作為展開(kāi)劑,以10%硫酸-乙醇溶液顯色,紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為365nm,可同步檢測(cè)酸型和內(nèi)酯型Monascolin K。該法適用于任何含Monascolin K樣品的檢測(cè),特別適用于大批量經(jīng)常性的定性或半定量檢測(cè)。

    1.2 紫外分光光度法

    湯衛(wèi)華等[7]用紫外分光光度法檢測(cè)Monascolin K的含量,用70%乙醇萃取試樣,處理時(shí)間是8~10h,Monascolin K乙醇溶液的最大吸收波長(zhǎng)為236nm。這種方法的準(zhǔn)確度較高,操作簡(jiǎn)單快捷。文鏡等[8]用雙波長(zhǎng)(246,254nm)紫外分光光度法測(cè)定紅曲中洛伐他汀的含量,采用75%乙醇超聲提取20min,離心后用中性氧化鋁柱層析吸附上清液中的色素。該法能夠排除樣品經(jīng)吸附層析分離后殘存色素的干擾,具有良好的實(shí)用性,適用于中小企業(yè)對(duì)洛伐他汀產(chǎn)品的科研開(kāi)發(fā)及產(chǎn)品質(zhì)量控制。

    1.3 毛細(xì)管電泳法

    張慶慶等[9]用毛細(xì)管電泳法測(cè)定了紅曲膠囊中洛伐他汀含量,該方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏度高、重復(fù)性好,可用于紅曲膠囊中洛伐他汀含量的檢測(cè)。Nigovic等[10]建立了用毛細(xì)管電泳法同時(shí)測(cè)定紅曲菌保健品中內(nèi)酯式和酸式洛伐他汀和桔霉素的方法,洛伐他汀和桔霉素在2min內(nèi)成功地實(shí)行了分離,分析條件如下:分離電壓25kV,柱溫25℃,洛伐他汀的檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm,桔霉素的檢查波長(zhǎng)為216nm,背景電解質(zhì)(BGE)為20mmol/L磷酸鈉緩沖液(pH 7.0)和30mmol/L SDS。

    1.4 高效液相色譜法和液質(zhì)聯(lián)用法

    目前,高效液相色譜法是紅曲菌中洛伐他汀檢測(cè)和定量常用的方法,洛伐他汀的內(nèi)酯式和酸式都可以用C18反相柱分離和定量。液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)也成功地應(yīng)用于紅曲菌中洛伐他汀的檢測(cè)和定量,并逐漸發(fā)展成為常規(guī)技術(shù)。

    Friedrich等[11]用HPLC法測(cè)定了紅曲菌(M.rubber)發(fā)酵液提取物中酸式的洛伐他汀。Su等[12]用HPLC法檢查了添加硝酸鈉固態(tài)發(fā)酵紅曲菌(M.purpureus)CCRC31615中Monascolin K的含量為378mg/kg。Lee等[13]建立了同時(shí)快速測(cè)定內(nèi)酯式和酸式Monascolin K和桔霉素的HPLC法,Lee等同時(shí)用LC-MS進(jìn)行了檢測(cè)。Ajdari等[14]用LC/PDA和LC/PDA/MS檢測(cè)了紅曲菌(M.purpureus)FTC5391發(fā)酵產(chǎn)物中的Monascolin。Song等[15]用FI-MS/MS和LC-MS/MS方法對(duì)紅曲菌保健品進(jìn)行了檢測(cè)和半定量分析,這種方法能夠快速檢測(cè)紅曲菌中的洛伐他汀,也可以用于洛伐他汀的半定量。

    2 桔霉素

    桔霉素是一種真菌毒素,嚴(yán)重威脅紅曲產(chǎn)品的安全,建立桔霉素有效的檢測(cè)方法顯得越來(lái)越重要。目前,桔霉素的檢測(cè)方法主要有抑菌圈法、分光光度法、薄層層析法、酶聯(lián)免疫吸附法和高效液相色譜法。

    2.1 抑菌圈法

    陳奇等[16]利用桔霉素的抑菌作用,借助枯草桿菌作為指示菌,考察了紅曲米產(chǎn)品的抗菌性。結(jié)果表明:紅曲米產(chǎn)品中桔霉素含量越高,抑菌圈越大。因此,用枯草桿菌作為指示菌,通過(guò)濾紙片擴(kuò)散法考察紅曲米產(chǎn)品中桔霉素含量高低是可行的,該方法重復(fù)性好,效果明顯,操作快速、方便、廉價(jià),且以乙醇作為桔霉素的萃取劑安全性好,比較適合企業(yè)用來(lái)考察其紅曲產(chǎn)品中桔霉素含量的高低。

    2.2 分光光度法

    桔霉素分子結(jié)構(gòu)中含有一個(gè)共軛結(jié)構(gòu),賦予了桔霉素?zé)晒馕盏奶匦?,因而可以通過(guò)熒光分光光度法測(cè)定桔霉素。Zhou等[17]研究了桔霉素的熒光特性,研究發(fā)現(xiàn)pH、β-環(huán)糊精和有機(jī)溶劑對(duì)桔霉素?zé)晒鈴?qiáng)度有影響,發(fā)現(xiàn)低pH、乙腈、乙酸和β-糊精能增強(qiáng)桔霉素?zé)晒鈴?qiáng)度,而乙醇和水會(huì)降低其熒光強(qiáng)度。熒光分光光度法操作簡(jiǎn)便,檢測(cè)速度快捷,溶劑使用量少,成本較低,適用于大批量的樣品檢測(cè)。

    2.3 薄層層析法

    宮慧梅等[18]采用雙向展開(kāi)TLC法檢測(cè)紅曲中的桔霉素,第一相分離紅曲中除桔霉素外的其他成分,第二相主要分離桔霉素。最小檢出量為0.1μg,可檢測(cè)出紅曲中的桔霉素,方法簡(jiǎn)單易行,容易掌握。胡曉清等[19]以酸性水溶液作為提取劑,以苯∶乙酸乙酯∶甲酸(6∶3∶1)為展開(kāi)劑,桔霉素的分離檢測(cè)效果較好。

    2.4 酶聯(lián)免疫吸附法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)

    1995年,Abramson等[20]首先報(bào)道了采用間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)紅曲中的桔霉素,檢測(cè)范圍為0.1~300ng/mL。陳福生等[21]用卵蛋白-桔霉素連接物免疫小白鼠,間接ELISA測(cè)小鼠抗血清效價(jià),建立競(jìng)爭(zhēng)ELISA檢測(cè)紅曲樣品中桔霉素含量的方法,結(jié)果表明此法具有較高的特異性和加標(biāo)回收能力,桔霉素的測(cè)定濃度范圍為5.0~200ng/mL,回收率為97%~104%。相對(duì)TLC法,ELISA具有靈敏度高、檢測(cè)范圍廣的優(yōu)點(diǎn)。汪媛媛等[22]以1,4-丁二醇二縮水甘油醚(雙環(huán)氧試劑)為偶聯(lián)劑,合成桔霉素-蛋白質(zhì)偶聯(lián)抗原CIT-BSA,通過(guò)免疫BALB/C小鼠獲得抗桔霉素多克隆抗體,效價(jià)達(dá)到1.1×105,桔霉素的最低檢測(cè)濃度為10μg/L,其線性范圍為10~250μg/L,IC50為100μg/L。酶聯(lián)免疫檢測(cè)法具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、檢測(cè)時(shí)間短等特點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于各種霉菌毒素的檢測(cè)。

    2.5 高效液相色譜法

    HPLC法在桔霉素的檢測(cè)中應(yīng)用得越來(lái)越多。其中,反相HPLC是應(yīng)用較為廣泛的一種,選用草酸作為流動(dòng)相,采用熒光或紫外檢測(cè)器檢測(cè),還可將HPLC與其他設(shè)備聯(lián)用,建立新的檢測(cè)技術(shù)。

    許贛榮等[23]用乙腈作萃取劑,經(jīng)薄板層析初步分離后,采用紫外檢測(cè)器用HPLC方法檢測(cè)了紅曲米樣品中的桔霉素。文鏡等[24]使用HPLC法檢測(cè)了紅曲醋中的桔霉素。陳蘊(yùn)等[25]對(duì)高效液相色譜測(cè)定紅曲桔霉素的方法進(jìn)行優(yōu)化,比較不同色譜柱及流動(dòng)相組成對(duì)分離效果的影響,確立了采用色譜柱Zorbax Eclipse XDB-C18,流動(dòng)相為乙睛∶水(pH 2.5)為35∶65的最佳分析條件下,標(biāo)準(zhǔn)桔霉素HPLC的最低檢測(cè)質(zhì)量濃度為0.05mg/mL。李志強(qiáng)等[26]以HPLC法測(cè)定了紅曲菌AS3.531桔霉素的含量。

    2.6 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

    氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)在20世紀(jì)70年代早期就開(kāi)始應(yīng)用于桔霉素的檢測(cè)中。氣質(zhì)聯(lián)用儀以氣體為流動(dòng)相,分辨率較好,質(zhì)量穩(wěn)定性良好,在生物代謝物和藥物的定性和定量檢測(cè)中得到了廣泛應(yīng)用。在分離柱溫度范圍內(nèi),桔霉素可揮發(fā)或可轉(zhuǎn)化為可揮發(fā)物質(zhì),從而使氣相色譜可用于桔霉素的測(cè)定。Liu等[27]采用GC-MS方法測(cè)定了紅曲中的桔霉素。質(zhì)譜中離子監(jiān)控器檢測(cè)質(zhì)荷比分別為220,205,177,105,91的一系列離子峰,方法檢測(cè)限為1μg/mL,保留時(shí)間為10.89min,該法測(cè)定得到6種紅曲樣品中桔霉素的含量范圍為4.2~25.1mg/kg。

    2.7 高效毛細(xì)管電泳法

    高效毛細(xì)管電泳法具有高分辨率、高靈敏度、高分析速度、分離模式多、應(yīng)用范圍廣、試劑使用量少、儀器簡(jiǎn)單、操作成本低、操作簡(jiǎn)單的優(yōu)點(diǎn)。Nigovic等在對(duì)紅曲中洛伐他汀和桔霉素的檢測(cè)方法研究中,以20nm的磷酸鹽溶液和30nm的十二烷基硫酸鈉溶液作為電泳緩沖液,工作電壓為25kV,建立了膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法,實(shí)驗(yàn)表明桔霉素的檢出限為0.08μg/kg。陳軍等[28]采用復(fù)合提取劑提取紅曲樣品,建立了高效毛細(xì)管電泳法測(cè)定紅曲中桔霉素的方法。

    3 紅曲色素

    紅曲色素是紅曲菌發(fā)酵生產(chǎn)的天然食用色素。紅曲色素具有較強(qiáng)的耐熱性,對(duì)酸、堿、氧化劑、還原劑均較穩(wěn)定,但光穩(wěn)定性差。紅曲色素的檢測(cè)方法主要有薄層色譜法、分光光度法、高效液相色譜法、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等。

    3.1 薄層色譜法

    GB/T 5009.150-2003《食品中紅曲色素的測(cè)定》以硅膠GF-254為固定相,用兩種不同的展開(kāi)劑進(jìn)行展開(kāi),均在UV 254nm下觀察。甘純璣等[29]以硅膠GF-254為固定相,以乙醚∶苯∶乙醇∶水(20∶22∶40∶15)為展開(kāi)劑,分離出7個(gè)斑點(diǎn),其中1個(gè)黃色斑點(diǎn),1個(gè)具有熒光性質(zhì)的無(wú)色斑點(diǎn)和5個(gè)紅色斑點(diǎn)。并針對(duì)展開(kāi)劑組分用量的選擇、點(diǎn)樣量及點(diǎn)樣濃度對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響和重現(xiàn)性進(jìn)行了探討。薄層色譜方法只能對(duì)樣品中紅曲色素粗略定性。

    3.2 分光光度法

    GB 15961-2005《食品添加劑紅曲紅》中分光光度計(jì)波長(zhǎng)在(495±10)nm處,試樣溶液的濃度應(yīng)使測(cè)出的吸光度在0.2~0.7范圍內(nèi)為最佳,GB 4926-2008《食品添加劑紅曲米》和GB 1886.19-2015《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑紅曲米》中波長(zhǎng)為505nm,最終稀釋液吸光度為0.3~0.6。王偉民等[30]根據(jù)溶液中色素含量的多少與OD值成正比的原理用分光光度法測(cè)定了紅曲色素。傅亮等[31]用分光光度法測(cè)定了MF107菌株的色價(jià)可達(dá)410.04U/mL。毛瑞豐[32]用分光光度法測(cè)定了11株紅曲菌純培養(yǎng),色價(jià)最高的為131.55U/mL。孫艷君等[33]按照GB 4926-2008的方法用分光光度法測(cè)定了9株紅曲菌的紅曲色素,最高的色價(jià)為1532.69U/g,符合GB 4926-2008中對(duì)食品添加劑紅曲米(粉)產(chǎn)品的色價(jià)(U/g)≥1000的要求。分光光度法以色價(jià)為指標(biāo)反映紅曲混合色素的總量,而色價(jià)只能從一定程度上反映色素含量的高低和產(chǎn)品著色能力的強(qiáng)弱,該方法不能對(duì)紅曲色素各組分進(jìn)行定性定量分析。

    3.3 高效液相色譜法

    由于紅曲色素單一組分的標(biāo)準(zhǔn)品不容易得到,HPLC法多用于分析紅曲色素的組成。

    鐘立人等[34]用HPLC法分析了經(jīng)各種有機(jī)溶劑萃取的紅曲色素樣品溶液,分類(lèi)得到20余種組分,除了6種脂溶性色素外,還有紅色的水溶性色素成分。張慧娟等[35]利用薄層層析的方法從紅曲色素中分離精制出了多種紅曲素,重點(diǎn)對(duì)紅斑紅曲素的HPLC定性定量檢測(cè)方法進(jìn)行了研究,在紅斑紅曲素最大吸收波長(zhǎng)(465nm)處可以靈敏快速地對(duì)紅斑紅曲素進(jìn)行定性定量的檢測(cè)。崔莉等[36]用HPLC法同時(shí)測(cè)定紅曲色素中的紅曲素和安卡紅曲黃素。胡麗芳等[37]建立了同時(shí)測(cè)定食品中5種紅曲色素的高效液相色譜檢測(cè)方法。儲(chǔ)怡士等[38]發(fā)明了一種用HPLC法對(duì)紅曲色素各組分進(jìn)行定性定量分析的檢測(cè)肉制品中紅曲色素的方法,該方法簡(jiǎn)便、快速、靈敏、準(zhǔn)確且經(jīng)濟(jì)。Sonia Campoy等[39]采用HPLC法檢測(cè)了一突變菌株發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的黃色素(紅曲素和安卡紅曲黃素)、橙色素(紅斑紅曲素和紅曲玉紅素)、紅色素(紅斑紅曲胺和紅曲玉紅胺)(色素標(biāo)準(zhǔn)品由Coca Cola Co.,Atlanta,GA提供)。

    3.4 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)

    Teng等[40]用LC-MS的方法對(duì)6種紅曲色素進(jìn)行了分離,通過(guò)比較分子量、分子式和碎片模式確定了每種色素。以自制的黃色素(紅曲素和安卡紅曲黃素的混合物)、橙色素(紅斑紅曲素和紅曲玉紅素的混合物)為標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行了HPLC定量分析,由于沒(méi)有紅色素(紅斑紅曲胺和紅曲玉紅胺)的標(biāo)準(zhǔn)品,只進(jìn)行了定性分析。馬書(shū)民等[41]采用LC-MS法測(cè)定了食品中紅曲紅胺、紅曲紅素、紅曲素、紅曲黃素的含量,并選擇離子檢測(cè)進(jìn)行陽(yáng)性確證。

    3.5 近紅外光譜法

    張曉偉等[42]采用近紅外光譜技術(shù)結(jié)合化學(xué)計(jì)量學(xué)方法構(gòu)建紅曲米中紅曲橙色素、紅曲紅色素、紅曲黃色素的預(yù)測(cè)模型。分別采用多元線性回歸、偏最小二乘回歸、主成分回歸構(gòu)建所有色素組分的數(shù)學(xué)模型,以相關(guān)系數(shù)、校正均方根誤差、預(yù)測(cè)均方根誤差、預(yù)測(cè)相對(duì)分析偏差值來(lái)評(píng)價(jià)模型的綜合性能。結(jié)果顯示:多元散射校正技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)歸一化方法能夠消除紅曲米粉顆粒不均對(duì)光譜的散射影響;導(dǎo)數(shù)處理消除了基線漂移;對(duì)于紅曲橙色素、紅曲黃色素、紅曲紅色素3種模型均具有良好的穩(wěn)定性;利用3種模型對(duì)未知紅曲樣品預(yù)測(cè)時(shí),預(yù)測(cè)結(jié)果具有較高的線性,預(yù)測(cè)性能較好,可用于準(zhǔn)確定量預(yù)測(cè)。近紅外光譜技術(shù)可用于紅曲色素的快速無(wú)損測(cè)定,為紅曲米質(zhì)量的智能化控制提供了新的途徑。

    4 麥角甾醇

    紅曲中麥角甾醇的檢測(cè)方法主要有紫外分光光度法和HPLC法。陳松生等[43,44]用紫外分光光度法測(cè)定了紅曲菌中麥角甾醇的含量,100g干菌體中含量最高可達(dá)3g。朱效剛等[45]采HPLC方法對(duì)功能性紅曲中麥角甾醇進(jìn)行定性定量檢測(cè),比紫外分光光度法精確、可靠。谷學(xué)新等[46]采用 HPLC法測(cè)定了功能性紅曲米粉中的麥角甾醇的含量。林杰等[47]采用HPLC法測(cè)定紅曲中麥角甾醇的含量。

    5 γ-氨基丁酸

    由于γ-氨基丁酸(GABA)對(duì)電化學(xué)、紫外和可見(jiàn)光的不靈敏性,用直接的方法對(duì)它測(cè)定比較困難[48]。目前紅曲菌中GABA的測(cè)定方法有TLC法、比色法、毛細(xì)管電泳法和HPLC法。

    李利等[49]通過(guò)對(duì)紅曲中γ-氨基丁酸的提取方法、薄層色譜展開(kāi)劑及其顯色斑洗脫液的比色法測(cè)定波長(zhǎng)及范圍的研究,建立了一種簡(jiǎn)便、快速測(cè)定紅曲中GABA含量的方法。秦江輝等[50]用Ber-thelot比色法測(cè)定了紅曲菌菌株中GABA含量,波長(zhǎng)640nm,誘變菌株GABA的最高產(chǎn)量為5.255mg/g。張慶慶等[51]采用柱前衍生化毛細(xì)管電泳法(CE)對(duì)紅曲酒中γ-氨基丁酸含量進(jìn)行了測(cè)定。劉輝[52]采用相同的方法測(cè)定了紅曲中的γ-氨基丁酸。馬莉鋒等[53]采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)對(duì)紅曲菌發(fā)酵樣品中的γ-氨基丁酸進(jìn)行HPLC分析。丁獻(xiàn)榮等[54]用HPLC法測(cè)定紅曲酒糟發(fā)酵物中γ-氨基丁酸的含量。張圓林等[55]用HPLC法測(cè)定了紅曲菌菌株中GABA的含量。

    6 結(jié)語(yǔ)

    隨著紅曲菌代謝產(chǎn)物研究的深入,研究代謝產(chǎn)物的檢測(cè)方法顯得尤為重要。TLC檢測(cè)法是一種經(jīng)典的定性定量方法,一般實(shí)驗(yàn)室均能完成,雖經(jīng)過(guò)不斷改進(jìn),但其抗干擾和精密度仍有缺陷。紫外分光光度法簡(jiǎn)單、快速,儀器設(shè)備相對(duì)HPLC法便宜很多,但準(zhǔn)確度不如HPLC法。要求檢測(cè)靈敏度好、定量分析有較高準(zhǔn)確度以及選擇性高時(shí)應(yīng)該選擇HPLC法。近年來(lái)HPLC技術(shù)越來(lái)越成為一種常規(guī)技術(shù),在紅曲菌各種代謝產(chǎn)物檢測(cè)中的應(yīng)用越來(lái)越多。GC法靈敏度高,但要求被檢測(cè)樣品能夠揮發(fā)或能轉(zhuǎn)化為揮發(fā)性物質(zhì),目前僅在桔霉素檢測(cè)中有應(yīng)用。紅曲菌其他代謝產(chǎn)物能否用GC法檢測(cè)還有待于進(jìn)一步研究。由于質(zhì)譜能夠提供物質(zhì)的結(jié)構(gòu)信息,用樣量也非常少,近年來(lái)液-質(zhì)聯(lián)用技術(shù)也越來(lái)越多地用于紅曲菌代謝產(chǎn)物的檢測(cè)。其他的檢測(cè)方法也都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)和使用范圍。隨著分離檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展,越來(lái)越多先進(jìn)的儀器和分析技術(shù)(超高效液相色譜法等)將被應(yīng)用于紅曲菌代謝產(chǎn)物的檢測(cè),從而為紅曲菌深入開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供技術(shù)支持。

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    Research Progress on Detection Methods of Major Metabolites fromMonascus

    GONG Jian1,2,F(xiàn)AN Qing-lu1,2
    (1.Pharmaceutical &Biological Engineering Department,Zibo Vocational Institute,Zibo 255314,China;2.Shandong Provincial Engineering Center on Aspergillus Application,Zibo 255314,China)

    Monascuscan produce many compounds,most of which have obvious biological activity.While citrinin is a mycotoxin.In this paper,the detection methods of major metabolites Monascolins K,Monascuspigment,ergosterol,γ-aminobutyric acid(GABA),citrinin are summarized.It can be used as a reference for related research and development of secondary metabolites fromMonascus.

    Monascus;secondary metabolites;detection method;review

    TS201.3

    A

    10.3969/j.issn.1000-9973.2017.03.039

    1000-9973(2017)03-0166-06

    2016-09-16

    淄博職業(yè)學(xué)院應(yīng)用生物技術(shù)研究創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)資助項(xiàng)目

    鞏?。?967-),女,副教授,碩士,研究方向:工業(yè)微生物。

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