洛伐他汀腫瘤治療的研究進(jìn)展

王天瑩，姜 瑤，褚 慧，代英輝，王東凱*

（1. 沈陽藥科大學(xué) 藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110016；2. 沈陽藥科大學(xué) 中藥學(xué)院，遼寧 沈陽 110016）

洛伐他汀最早是從中藥紅曲中發(fā)現(xiàn)具有降脂作用的有效成分，存在內(nèi)脂和酸式兩種結(jié)構(gòu)，可經(jīng)天然提取或發(fā)酵得到[1]。洛伐他汀是膽固醇合成過程中HMG-CoA 還原酶的抑制劑，在體內(nèi)能夠有效抑制膽固醇合成，1987 年由美國食品藥品管理局批準(zhǔn)上市，是臨床上治療高膽固醇血癥的首選藥物[2]。近來年研究表明，洛伐他汀除降脂作用外，還具有抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)凋亡、抑制細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移、抑制腫瘤血管生成的作用[3]。更有研究證實(shí)洛伐他汀與多種經(jīng)典抗癌藥聯(lián)合使用后具有顯著的協(xié)同抑制作用，增強(qiáng)化藥抗腫瘤作用[4]，并能夠降低相關(guān)毒性和不良反應(yīng)[5-6]。本文作者對洛伐他汀的抗腫瘤作用、作用機(jī)制及聯(lián)合治療的研究進(jìn)展進(jìn)行總結(jié)，為進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)洛伐他汀的臨床應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)和理論支持。

1 洛伐他汀用于乳腺癌的治療

羅遠(yuǎn)瓊等[7]采用8 μmol·L-1的洛伐他汀體外處理MCF-7 細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)洛伐他汀通過抑制乳腺癌異種移植瘤組織中cyclinD 1 和CDK 4 的表達(dá)，明顯阻滯MCF-7 細(xì)胞的生長，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)BRCA1 基因的高表達(dá)增強(qiáng)了MCF-7 細(xì)胞對于洛伐他汀的敏感性，提高洛伐他汀對MCF-7 乳腺癌細(xì)胞增殖的抑制作用。張明[8]通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)洛伐他汀能夠下調(diào)Bcl-2 蛋白、cdk2蛋白表達(dá)，顯著抑制MDA-MB-231 人乳腺癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡。同時(shí)發(fā)現(xiàn)≥0.1 μmo1·L-1洛伐他汀與低濃度紫杉醇和表阿霉素聯(lián)合給藥后，對MDA-MB-231 細(xì)胞的生長產(chǎn)生協(xié)同抑制效應(yīng)；≥0.2 μmo1·L-1洛伐他汀與表阿霉素、紫杉醇、他莫西芬聯(lián)合使用，可對MCF-7 細(xì)胞產(chǎn)生協(xié)同抑制效應(yīng)。這些研究結(jié)果為乳腺癌的治療提供新思路，豐富了臨床乳腺癌綜合治療的方案。

2 洛伐他汀用于卵巢癌的治療

武巧麗[9]發(fā)現(xiàn)洛伐他?。?.25、2.5、5、10、20、40 μmol·L-1）對SKOV3 細(xì)胞增殖具有抑制作用，洛伐他汀可阻滯SKOV3 細(xì)胞周期進(jìn)程于G0/G1 期，并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，該作用呈劑量一效應(yīng)依賴關(guān)系。其作用機(jī)制可能是洛伐他汀上調(diào)PTEN 和下調(diào)Survivin 蛋白表達(dá)水平，從而抑制人卵巢癌細(xì)胞SKOV3 增殖。研究結(jié)果還證實(shí)洛伐他汀可增強(qiáng)順鉑對人卵巢癌細(xì)胞SKOV3 的增殖抑制作用，并且抑制作用的強(qiáng)弱與給藥順序有關(guān)，先給予洛伐他汀再應(yīng)用順鉑抑制增殖作用明顯，為臨床卵巢癌及腫瘤治療的給藥順序提供了新思路。

3 洛伐他汀用于宮頸癌的治療

在宮頸癌細(xì)胞中常表現(xiàn)為小窩蛋白-1 過度表達(dá)。陳龍[10]采用 25 μmol·L-1洛伐他汀處理宮頸癌SiHa 細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)洛伐他汀能夠通過抑制小窩蛋白-1 的表達(dá)，進(jìn)而抑制下游Akt、ERK1/2 和STAT3信號的激活，最終抑制宮頸癌SiHa 細(xì)胞的增值。郭剛[11]發(fā)現(xiàn)洛伐他汀和塞來昔布對小窩蛋白-1及表達(dá)均具有較強(qiáng)的抑制作用。18 μmol·L-1洛伐他汀與35 μmol·L-1塞來昔布聯(lián)用后，對小窩蛋白-1的抑制作用明顯增強(qiáng)，對下游信號分子的抑制效果也更顯著，從而能更有效的抑制宮頸癌細(xì)胞增殖，這為宮頸癌的臨床治療提供重要的理論基礎(chǔ)。杜克先等[12]發(fā)現(xiàn)塞來昔布處理Hela 細(xì)胞的IC50值為50 μmol·L-1，洛伐他汀能夠增強(qiáng)塞來昔布對Hela 細(xì)胞的抑制作用，80 μmol·L-1洛伐他汀與30 μmol·L-1聯(lián)合使用后，Caveolin-1 表達(dá)水平顯著上調(diào)，從而抑制其控制的下游信號分子p-STAT3和p-Akt 的表達(dá)，最終顯著抑制Hela 細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡。

4 洛伐他汀用于肺癌的治療

研究表明，洛伐他汀對多種肺癌具有良好的抑制作用。Hawk MA 等[13]將雄性小鼠隨機(jī)分成8 組，每組15 只，1～4 組小鼠腹腔給0.9%生理鹽水，一周后在食物中給與0、40、160 或400 μmol·L-1的洛伐他汀，5～8 組小鼠腹腔給10 μmol·L-1NNK。研究結(jié)果表明，洛伐他汀在早期階段可抑制NNK 誘導(dǎo)的肺腫瘤形成，從而抑制NCI-H125、NCI-H292、NCI-H441、NCI-H460 和NCI-H661肺癌細(xì)胞的體外生長。Zhang 等[14]用不同濃度的洛伐他?。?、2.5 、5 、10 和20 μmol·L-1）處理NSCLC，發(fā)現(xiàn)經(jīng)洛伐他汀治療后，p-JNK 表達(dá)上調(diào)，p-JNK 的高度表達(dá)導(dǎo)致MCM2 水平的下降，進(jìn)而抑制非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）中MCM2 引起的細(xì)胞增殖，使細(xì)胞周期阻滯于G1/S 期，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。此外，吉澤等[15]采用不同給藥組處理非小細(xì)胞肺癌，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)空白對照組耐吉非替尼的PC9 細(xì)胞凋亡率為2.5%，吉非替尼組和洛伐他汀組細(xì)胞凋亡率分別為5.5%和9.4%，兩藥聯(lián)合組凋亡率卻能夠達(dá)到65.5%。結(jié)果表明洛伐他汀能夠通過阻斷 PI3K/AKT 信號通路來增強(qiáng)非小細(xì)胞肺癌對吉非替尼的敏感性，并通過阻斷整合素β1-p-Akt-Survivin 信號通路，減弱吉非替尼的耐藥性。劉月娥[16]發(fā)現(xiàn)，0、2、5、10、20 μmol·L-1洛伐他汀作用于A549 細(xì)胞48 h 后，隨著藥物濃度的增大，細(xì)胞凋亡率逐漸增高，最大凋亡率可達(dá)到34.02%。結(jié)果表明洛伐他汀能明顯抑制人肺癌A549 細(xì)胞增值，誘導(dǎo)其凋亡，且該抑制作用呈時(shí)間-濃度依賴關(guān)系。作用機(jī)制為洛伐他汀上調(diào)PTEN 和p27mRNA 轉(zhuǎn)錄、蛋白的表達(dá)，從而抑制肺癌A549 細(xì)胞增殖、阻滯A549 細(xì)胞于Go/Gl 期并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。此外還發(fā)現(xiàn)，洛伐他汀與順鉑聯(lián)用后，可產(chǎn)生協(xié)同效應(yīng)，強(qiáng)化順鉑誘導(dǎo)A549 細(xì)胞凋亡的作用，這可能是因?yàn)槁宸ニ≡鰪?qiáng)了A549 細(xì)胞對化療藥的敏感性。

5 洛伐他汀用于肝癌的治療

洛伐他汀對多種肝癌細(xì)胞具有抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用，吳寶安[17]利用cDNA 基因芯片分析洛伐他汀處理HepG2 細(xì)胞前后的基因變化，探索洛伐他汀的抗腫瘤機(jī)制。研究結(jié)果表明，經(jīng)20 μmol·L-1洛伐他汀處理后的HepG2 細(xì)胞中，表達(dá)上調(diào)的基因有30 個(gè)，下調(diào)的有11 個(gè)。其中洛伐他汀通過抑制甲羥戊酸（MVA）通路的戊烯化，導(dǎo)致與RhoA 和Ras 異戊烯基化有關(guān)的香葉基香葉基焦磷酸(GGPP)和法呢基焦磷酸(FPP)水平下調(diào)，從而抑制腫瘤生長增殖，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)RhoA蛋白對腫瘤發(fā)展的影響比Ras 蛋白大。洛伐他汀通過高表達(dá)TIMP3，抑制基質(zhì)金屬酶（MMPs）的活性，對腫瘤細(xì)胞血管生成、細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移也有一定抑制作用。劉振軍[18]采用陰性對照組、洛伐他汀組（10、20、40、80、160 和320 mg·L-1）、5-Fu 組（5、10、15 和20 mg·L-1）、聯(lián)合用藥組（洛伐他汀80 mg·L-1+ 5-Fu 10 mg·L-1、洛伐他汀1 60 mg·L-1+ 5-Fu l0 mg·L-1）處理HepG2腫瘤細(xì)胞。當(dāng)洛伐他汀濃度達(dá)20 mg·L-1及以上、5-Fu 濃度達(dá)5 mg·L-1及以上時(shí)可抑制細(xì)胞增殖，與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且聯(lián)合用藥抑制率與相應(yīng)濃度的單藥相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，洛伐他汀80 mg·L-1組、洛伐他汀160 mg·L-1組、5-Fu 10 mg·L-1組、5-Fu 10 mg·L-1+洛伐他汀80 mg·L-1組、5-Fu 10 mg·L-1+ 洛伐他汀160 mg·L-1組，細(xì)胞凋亡率分別為（15.23 ± 0.79）%、（27.53 ± 0.57）%、（35.52 ± 0.96）%、（47.52 ± 2.16）%和（67.3 1 ± 3.21）%，與陰性對照組（7.83 ± 0.79）%比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。因此結(jié)果表明，洛伐他汀與5-Fu 聯(lián)用后，對HepG2 腫瘤細(xì)胞抑制率明顯高于單藥的治療效果，其作用機(jī)制可能是洛伐他汀增強(qiáng)了5-Fu 對腫瘤細(xì)胞中NF-κB 蛋白和Bcl-2 蛋白表達(dá)的抑制作用。

6 洛伐他汀用于黑色素瘤的治療

李穎等[19]建立B16 細(xì)胞C57 小鼠皮下移植瘤模型，隨機(jī)分為5 組，即空白對照組（8 只）：給予等滲鹽水灌胃l 日；Lov l 組（12 只）：給予Lov 4 mg·kg-1·d-1灌胃；Lov 2 組（12 只）：給予Lov 16 mg·kg-1·d-1灌胃；順鉑組（12 只）：給予順鉑10 mg·kg-1于第14、21 天腹腔注射；聯(lián)合組（12 只）：給予Lov1 6 mg·kg-1·d-1+順鉑10 mg·kg-1（第14、21 天給藥）。每隔一天測量各小鼠腫瘤的最長徑和最短徑，計(jì)算腫瘤體積。結(jié)果表明各處理組小鼠腫瘤體積明顯小于空白組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。并運(yùn)用免疫組化手段研究了洛伐他汀對小鼠惡性黑色素瘤B16的作用及其作用機(jī)制。發(fā)現(xiàn)洛伐他汀通過調(diào)節(jié)Fas 和Survivin 表達(dá)抑制了黑色素瘤B16 的生長。祝賀等[20]通過體外細(xì)胞毒及相關(guān)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，每天給予大劑量的洛伐他汀45 mg·kg-1，血藥質(zhì)量濃度峰值可達(dá)到3.9 mg·L-1，此時(shí)洛伐他汀與米法斯丁聯(lián)合使用能夠增強(qiáng)對HT144、M14 和SK-MEL-28 黑色素瘤的抑瘤效果。

7 洛伐他汀對其他癌癥的治療

洛伐他汀還對多種癌癥具有明顯的治療作用，劉磊等[21]分別采用的濃度為0、2 和4 μmol L-1的洛伐他汀和濃度為10 μmol·L-1、25 μmol·L-1的KRN633 以及兩者聯(lián)合應(yīng)用（2 μmol·L-1洛伐他汀 + 10 μmol·L-1KRN633）處理生長期的QBC939 細(xì)胞。結(jié)果發(fā)現(xiàn)洛伐他汀可顯著抑制膽管癌細(xì)胞增殖、遷移并有效誘導(dǎo)其凋亡，其抑制作用具有劑量-時(shí)間依賴性。血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）是在腫瘤血管的生長、細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲過程中起重要作用。研究表明VEGF 在腫瘤部位高度表達(dá)，洛伐他汀經(jīng)證明能夠有效降低VEGF 的表達(dá)水平，從而抑制腫瘤血管生成。研究發(fā)現(xiàn)洛伐他汀與血管內(nèi)皮生長因子受體酪氨酸激酶抑制劑KRN633 具有協(xié)同效應(yīng)，二者聯(lián)用后，細(xì)胞凋亡率明顯增加，抑瘤作用與單藥相比明顯增強(qiáng)。楊琳等[22]采用空白對照組、DMSO 對照組和2 μmol·L-1或10 μmol·L-1洛伐他汀組，分別處理前列腺癌PC3 細(xì)胞24、48、72 h。結(jié)果表明洛伐他汀對前列腺癌PC3 細(xì)胞具有抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用，實(shí)驗(yàn)中2 μmol·L-1洛伐他汀處理PC3 細(xì)胞48 h 后，casepase7 和casepase3 經(jīng)過誘導(dǎo)活化，同時(shí)PARP 蛋白裂解，促使腫瘤細(xì)胞凋亡。楊曉領(lǐng)[23]發(fā)現(xiàn)洛伐他?。?、10、20 和40 μmol·L-1）對結(jié)腸癌HCT-116 細(xì)胞增殖具有抑制作用，這可能與洛伐他汀能夠抑制Bal-2 蛋白、MMP9 表達(dá)，上調(diào)bax 蛋白表達(dá)有關(guān)。

8 展望

洛伐他汀的抗腫瘤作用已經(jīng)被廣泛研究，研究表明洛伐他汀對乳腺癌、肝癌、卵巢癌、宮頸癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞具有抑制作用，且大多呈現(xiàn)劑量-時(shí)間依賴性。同時(shí)還有大量研究證實(shí)洛伐他汀與阿霉素、紫杉醇、順鉑聯(lián)用后，能夠產(chǎn)生協(xié)同抑制作用，顯著提高抗腫瘤作用。但目前的研究仍處于體外實(shí)驗(yàn)，實(shí)現(xiàn)洛伐他汀抗腫瘤的臨床應(yīng)用還需進(jìn)一步的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)佐證。總體來說，洛伐他汀的腫瘤抑制作用十分顯著，對于癌癥治療和新藥開發(fā)具有指導(dǎo)意義。