PD-1/PD-L1信號(hào)通路與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病理機(jī)制的研究進(jìn)展*

任繼剛，劉旭光，雷 梟，牛彩琴，周海燕△

(1.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院中醫(yī)科，四川 南充 637000；2.成都中醫(yī)藥大學(xué), 成都 610075)

PD-1/PD-L1信號(hào)通路與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病理機(jī)制的研究進(jìn)展*

任繼剛1，劉旭光2，雷 梟1，牛彩琴1，周海燕2△

(1.川北醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院中醫(yī)科，四川 南充 637000；2.成都中醫(yī)藥大學(xué), 成都 610075)

類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)是一種由T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病，T細(xì)胞過(guò)度活化是其免疫反應(yīng)的重要始動(dòng)環(huán)節(jié)，其確切病因和發(fā)病機(jī)制迄今仍未完全明了。近年來(lái)的研究表明，共刺激分子在免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用，程序性死亡因子1及其配體作為T(mén)細(xì)胞活化的關(guān)鍵負(fù)性共刺激分子，在RA病理發(fā)生發(fā)展過(guò)程中具有重要意義。故綜述近年來(lái)關(guān)于PD-1/PD-L1信號(hào)通路在RA病理機(jī)制中的相關(guān)研究進(jìn)展，為艾灸治療RA的作用機(jī)制提供新的研究思路。

類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；程序性死亡因子1；信號(hào)通路；病理機(jī)制

類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎是一種累及多系統(tǒng)的慢性炎癥性自身免疫疾病，目前本病的病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，但T細(xì)胞過(guò)度活化作為其免疫反應(yīng)的重要始動(dòng)環(huán)節(jié)已成共識(shí)[1]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，程序性死亡因子1及其配體1(PD-1/PD-L1)作為T(mén)細(xì)胞活化的關(guān)鍵負(fù)性共刺激分子，在RA等自身免疫和感染性疾病慢性化的病理過(guò)程中影響重大[2-3]。本文就近年來(lái)PD-1/PD-L1信號(hào)通路與RA病理機(jī)制研究進(jìn)展作一綜述，以增強(qiáng)對(duì)PD-1/PD-L1信號(hào)通路在RA發(fā)病機(jī)制中重要性的認(rèn)識(shí)，也為RA的臨床研究提供新的思路和治療靶點(diǎn)。

1 PD-1/PD-L1信號(hào)通路的研究進(jìn)展

程序性細(xì)胞死亡蛋白1(programmed cell death-1,PD-1)是發(fā)現(xiàn)較晚的共刺激分子，其配體分別為程序性細(xì)胞死亡蛋白1配體1(PD-L1)和(PD-L2)，均屬CD28/B7家族。PD-1最初在凋亡小鼠T細(xì)胞雜交瘤2B4.11克隆中被發(fā)現(xiàn)，其結(jié)構(gòu)類(lèi)似于CD28分子。隨后的研究表明，PD-1的表達(dá)與細(xì)胞凋亡無(wú)關(guān)，但與淋巴細(xì)胞活化相關(guān)[4]。越來(lái)越多的研究表明，PD-1/PD-L1通路參與T、B細(xì)胞免疫應(yīng)答,調(diào)節(jié)并能誘導(dǎo)機(jī)體免疫耐受，在自身免疫性疾病、腫瘤免疫、移植免疫及急慢性感染等發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要作用[5]。

1.1 PD-1及其配體的生物學(xué)特征

PD-1可編碼288個(gè)氨基酸，分子量為50～55 kDa的I型跨膜蛋白，由PDCD1基因編碼，定位于人2號(hào)染色體上。其胞質(zhì)區(qū)有2個(gè)酪氨酸殘基,分別連接著免疫受體酪氨酸抑制基序(ITIM)和免疫受體酪氨酸轉(zhuǎn)化基序(ITSM)，這一結(jié)構(gòu)提示PD-1是一種具有免疫抑制功能的分子。ITIM可通過(guò)酪氨酸磷酸化發(fā)揮拮抗抗原受體刺激信號(hào)的作用，在免疫應(yīng)答過(guò)程中發(fā)揮負(fù)性調(diào)節(jié)作用，主要表達(dá)于活化的T、B淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞、單核以及樹(shù)突狀細(xì)胞。

PD-1的2個(gè)配體即PD-L1(又稱(chēng)B7-H1，CD274)和PD-L2(又稱(chēng)B7-DC，CD273)，先后于1999年和2001年被發(fā)現(xiàn)，胞外段都有IgC和IgV區(qū)。PD-L1基因可編碼290個(gè)氨基酸,定位于小鼠19號(hào)和人9號(hào)染色體上，主要表達(dá)于T、B淋巴細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等組織[6]。PD-1/PD-L1信號(hào)與誘導(dǎo)Th1型細(xì)胞反應(yīng)有關(guān)，而PD-1/PD-L2信號(hào)則主要參與誘導(dǎo)Th2型細(xì)胞反應(yīng)。由于PD-L1比PD-L2表達(dá)譜更廣，所以在免疫調(diào)控方面PD-1/PD-L1信號(hào)通路的作用更受關(guān)注。

1.2 膜型PD-1(mPD-1)及PD-L1(mPD-L1)是PD-1/PD-L1的重要分子形式

PD-1/PD-L1信號(hào)分子有可溶性和細(xì)胞膜型兩種形式?？扇苄訮D-1及其配體通過(guò)循環(huán)系統(tǒng)發(fā)揮著類(lèi)似細(xì)胞因子的作用，并與膜型分子相互作用共同參與機(jī)體免疫調(diào)控。而mPD-1和mPD-L1是PD-1/PD-L1信號(hào)通路的主要分子形式。在RA患者滑液中，mPD-1/mPD-L1高表達(dá)于浸潤(rùn)的T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表面，mPD-1主要表達(dá)在活化的T細(xì)胞表面，且以CD4+T細(xì)胞為主，而mPD-L1主要表達(dá)于活化的B淋巴細(xì)胞CD19+和單核細(xì)胞CD14+表面。在活化的T細(xì)胞表面，mPD-1與其配體結(jié)合后促使免疫受體酪氨酸抑制基序招募SHP-1和SHP-2分子，傳導(dǎo)抑制信號(hào)，抑制CD4+T和CD8+T細(xì)胞的增殖，降低IL-2、IFN-γ等細(xì)胞因子的合成，促進(jìn)IL-10等細(xì)胞因子的分泌，下調(diào)炎癥反應(yīng)程度[7]。

1.3 PD-1/PD-L1信號(hào)通路異常與免疫性疾病

機(jī)體免疫調(diào)節(jié)系統(tǒng)是一個(gè)復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)，負(fù)性共刺激分子對(duì)維持機(jī)體免疫耐受起著關(guān)鍵作用。協(xié)同刺激分子主要分為CD28/B7和TNFR/TNF兩大超家族。近年來(lái)B7家族成員不斷擴(kuò)大，相繼發(fā)現(xiàn)了B7-H1(PD-L1)、B7-DC(PD-L2)、B7-H3、B7-H4等新分子[8]。B7家族作為配體在抗原特異性T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答中發(fā)揮了關(guān)鍵的調(diào)控作用。PD-1與PD-L1相互作用引起T細(xì)胞停滯于G0/G1期，調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞周?chē)阅褪芎脱装Y反應(yīng)程度，但不增加T細(xì)胞的死亡率。Fife等[9]在Nature Immunology上發(fā)表了關(guān)于PD-1在調(diào)控自身免疫性疾病(1型糖尿病)中作用機(jī)制的文章。也有研究者發(fā)現(xiàn)，PD-1及其配體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病機(jī)制中有著重要的作用[10]。PD-1基因敲除小鼠可誘導(dǎo)多種自身免疫性疾病，PD-1作為一種免疫抑制分子在提高免疫細(xì)胞外周耐受中發(fā)揮著重要作用[11]。在腫瘤的研究中已證實(shí)，阻斷PD-1通路能有效地恢復(fù)T細(xì)胞功能和免疫反應(yīng)[12]。

2 PD-1/PD-L1信號(hào)通路與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎

2.1 T細(xì)胞過(guò)度活化在調(diào)控RA滑膜炎癥中的重要作用

目前研究普遍認(rèn)為，RA是由T細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫性疾病，過(guò)度活化的T淋巴細(xì)胞是RA免疫病理的重要環(huán)節(jié)。RA病理過(guò)程中，滑膜細(xì)胞的異常致炎、類(lèi)腫瘤樣生長(zhǎng)及組織破壞作用與炎癥細(xì)胞因子IL-1、TNF-α、OPN和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子以及抑炎細(xì)胞因子IL-4、IL-10之間的失衡有關(guān)[13]。當(dāng)T細(xì)胞識(shí)別抗原經(jīng)雙信號(hào)激活后，經(jīng)p56Lck及p59fyn激酶作用促使酪氨酸蛋白分子磷酸化產(chǎn)生激酶活化的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，異常激活MAPK、JAK-STAT等信號(hào)通路，調(diào)節(jié)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子活性，調(diào)控相關(guān)基因表達(dá)，對(duì)滑膜細(xì)胞的分泌、增殖和分化產(chǎn)生重要影響。最后導(dǎo)致滑膜組織炎癥、增生和血管翳形成，甚至出現(xiàn)關(guān)節(jié)骨質(zhì)破壞、關(guān)節(jié)變形等一系列典型的臨床表現(xiàn)。

2.2 PD-1/PD-L1是負(fù)性調(diào)控T細(xì)胞活化的關(guān)鍵信號(hào)分子

T細(xì)胞活化作為RA免疫反應(yīng)重要起始環(huán)節(jié)，其有效活化需要雙信號(hào)刺激。若缺少協(xié)同刺激分子提供的第二信號(hào)，將導(dǎo)致T細(xì)胞無(wú)反應(yīng)性或功能失活。當(dāng)協(xié)同刺激信號(hào)過(guò)強(qiáng)則會(huì)出現(xiàn)免疫細(xì)胞的異常激活，誘發(fā)自身免疫性疾病[14]。PD-L1通過(guò)與T細(xì)胞表面PD-1相互作用，顯著抑制T細(xì)胞的生物學(xué)功能[15]。這一抑制作用依賴于TCR與CD28信號(hào)的強(qiáng)度,在最低有效量的TCR信號(hào)情況下,PD-L1對(duì)T細(xì)胞的增殖抑制作用明顯，而在最適量的TCR信號(hào)下,僅在沒(méi)有CD28協(xié)同刺激的情況時(shí),才對(duì)T細(xì)胞增殖發(fā)揮抑制作用[16]。研究還發(fā)現(xiàn)，在T細(xì)胞活化階段，PI3K/Akt信號(hào)通路被激活，并通過(guò)提高葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)水平，增加葡萄糖的吸收和T細(xì)胞的代謝，促進(jìn)T細(xì)胞增殖和分泌細(xì)胞因子。PD-1通過(guò)干擾CD28介導(dǎo)PI3K的激活來(lái)抑制Akt磷酸化，從而導(dǎo)致細(xì)胞因子合成減少，抑制T細(xì)胞存活及增殖[17]。

2.3 PD-1/PD-L1相互作用與RA發(fā)病

研究發(fā)現(xiàn)，PD-1分子單核苷酸多態(tài)性與RA基因易感性有關(guān)聯(lián)，PD-1.3等位基因A與RA發(fā)病密切相關(guān)[18]。PD-1基因敲出或缺陷小鼠對(duì)外周耐受能力減低，可自發(fā)誘導(dǎo)產(chǎn)生多種自身免疫性疾病。也有研究報(bào)道，在RA患者滑膜和滑膜液中PD-1+T細(xì)胞與PD-L1+單核細(xì)胞的數(shù)量增加[19]。在未接受免疫抑制治療的RA患者中，其滑膜T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞PD-L1和PD-1呈高表達(dá)。Achi等分析44個(gè)RA及6個(gè)骨關(guān)節(jié)炎患者的滑膜液及外周血中T細(xì)胞PD-1的表達(dá)，結(jié)果表明RA患者滑膜液T細(xì)胞中PD-1呈高表達(dá)。也有研究發(fā)現(xiàn)，在RA疾病早期患者的血漿中PD-1水平顯著升高，并與疾病活動(dòng)及影像學(xué)改變程度有相關(guān)性[20]。而在健康機(jī)體中，PD-1/PD-L1通路的激活可最大程度地減少免疫反應(yīng)對(duì)周?chē)M織的損傷，避免發(fā)生自身免疫疾病。

3 艾灸治療RA機(jī)制研究

目前RA仍以傳統(tǒng)合成改變病情抗風(fēng)濕藥物作為一線治療方案,尚缺乏根治和預(yù)防的有效措施。近年來(lái)，針灸治療RA取得了一定的進(jìn)展。針灸治療通過(guò)調(diào)節(jié)神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫三大系統(tǒng)，能有效地緩解或控制RA的病情。大量臨床報(bào)道充分證實(shí)了艾灸在治療RA方面的獨(dú)特療效，部分研究者還對(duì)艾灸治療RA的機(jī)理進(jìn)行了深層次探討。有研究表明，艾灸對(duì)實(shí)驗(yàn)性RA動(dòng)物的下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸(HPAA)功能以及海馬、下丘腦糖皮質(zhì)激素受體(GR)的表達(dá)具有良性調(diào)控作用[21-22]。而艾灸的良性調(diào)控作用與RA大鼠ACTH、CS含量晝夜節(jié)律紊亂有一定的相關(guān)性，艾灸可能通過(guò)對(duì)ACTH、CS節(jié)律紊亂進(jìn)行良性調(diào)整，從而發(fā)揮抗炎治療作用[23]。局部作用機(jī)制的研究主要從滑膜細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路、滑膜細(xì)胞分泌增殖和滑膜炎癥等方面切入。研究發(fā)現(xiàn)，艾灸可能通過(guò)調(diào)節(jié)HPAA功能，從而間接抑制NF-kB炎性信號(hào)通路而發(fā)揮治療RA的抗炎作用，艾灸對(duì)實(shí)驗(yàn)性RA家兔的滑膜細(xì)胞MAPKS和JAK-STAT信號(hào)通路的異常激活有明顯抑制作用，艾灸還能明顯抑制滑膜細(xì)胞的增殖分化及其分泌炎癥因子的能力。此外，艾灸作為一種溫?zé)岽碳み€能誘導(dǎo)局部組織大量合成具有細(xì)胞保護(hù)作用的HSP70[24-26]。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，RA病理過(guò)程中存在多種協(xié)同刺激分子異常，T細(xì)胞的過(guò)度活化作為其免疫反應(yīng)的重要環(huán)節(jié)而備受關(guān)注。PD-1/PD-L1作為T(mén)細(xì)胞增殖活化的第二信號(hào)通路，通過(guò)對(duì)T細(xì)胞活化的調(diào)控參與RA免疫反應(yīng)等病理過(guò)程，但其與RA病理發(fā)展的相關(guān)性尚待進(jìn)一步的研究。艾灸治療RA具有明顯的療效，但其作用機(jī)制目前仍未完全明了。PD-1/PD-L1信號(hào)通路在平衡T細(xì)胞活化耐受中的重要作用，已成為研究RA治療的新靶點(diǎn)，有望成為RA免疫干預(yù)和治療的新突破。PD-1/PD-L1信號(hào)通路的研究不僅對(duì)深入揭示艾灸治療RA 的作用原理具有重要意義，也為RA的臨床治療提供了新的靶點(diǎn)，具有重要的臨床意義和價(jià)值。

[1] NOVIKOVA DS,POPKOVA TV，NASONOV EL.Current knowledge about pathogenesis and treatment of arterial hypertension in rheumatoid arthritis[J].Ter Arkh,2011, 83(5):24-33.

[2] 楊浩,饒莉.程序性細(xì)胞死亡因子1信號(hào)通路研究進(jìn)展[J].西部醫(yī)學(xué),2013,25(9): 1422-1425.

[3] MERELLI B,MASSI D,CATTANEO L,et al.Targeting the PD1/PD-L1 axis in melanoma: Biologicalrationale clinical challenges and opportunities[J].Crit Rev Oncol Hematol,2014,89(1):140-165.

[4] 郭國(guó)寧，謝諄怡，陳永文.共抑制分子PD-1的研究進(jìn)展[J].免疫學(xué)雜志，2010,26(7)：639-642.

[5] 林城,陳雄,劉靜南,等.PD-1/PD-L1信號(hào)通路在非小細(xì)胞肺癌免疫逃逸及其治療中的研究進(jìn)展[J].中國(guó)肺癌雜志,2014,17(10)734-739.

[6] OKAZAKI T,HONJO T.PD-1 and PD-1 ligands: from discovery to clinical application[J]. Int Immunol，2007,19(7):813-824.

[7] JIN HT,AHMED R,OKAZAKI T.Role of PD-1 in regulating T-cell immunity[J].Curr Top Microbiol Immunol,2011,350:17-37．

[8] LI YJ,DONG WL.The last advances of study on the B7 family members[J].Guo Ji Mian Yi Xue Za Zhi,2011,34(3):221-226.

[9] FIFE BT，PAUKEN KE，EAGAR TN，et al．Interactions between PD-1 and PD-L1 promote tolerance by blocking the tcr-induced stop signal[J].Nat Immunol,2009,10(11):1185-1192.

[10] 謝長(zhǎng)好,王元元,李志軍,等.PD-1及其配體在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病機(jī)制中的作用[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志,2011,27(3):277-280.

[11] 郭國(guó)寧,謝諄怡,陳永文.共抑制分子PD-1的研究進(jìn)展[J].免疫學(xué)雜志,2010,26 (7):693-642.

[12] HAMID O,CARVAJAL RD.Anti-programmed death-1 and anti-programmed death-ligand 1 antibodies in cancer therapy[J].Expert opinion on biological therapy，2013,13(6):847-861.

[13] 任繼剛,羅薇,劉旭光.骨橋蛋白與類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病理研究進(jìn)展[J].吉林醫(yī)學(xué),2014, 35(33):7450-7452.

[14] HODGE JW,GREINER JW,TSANG KY,et al.Costimulatory molecules as adjuvants for immunotherapy[J].Front Biosci，2006,11:788-803.

[15] TOPALIAN SL,DRAKE CG,PARDOLL DM.Targeting the PD-1/B7-H1(PD-L1)pathway to activate anti-tumor immunity[J].Curr Opin Immunol，2012,24:207-212.

[16] FREEMAN GJ,LONG AJ,IWAI Y,et al.Engagement of the PD-1 immunoinhibitory receptor by a novel B7 family member leads to negative regulation of lymphocyte activation[J].Exp Med，2000,192:1027-1034.

[17] 張美玉,王穎,張雁云.PD-1/PD-L信號(hào)通路在免疫調(diào)節(jié)及免疫相關(guān)性疾病中的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代免疫學(xué),2014,34(2):160-164.

[18] PROKUNINA L,PADYUKOV L,BENNET A,et al.Association of the PD-1.3A allele of the PDCD1 gene in patients with rheumatoid arthritis negative for rheumatoid factor and the shared epitope[J].Arthritis rheumatism,2004,50(6):1770-1773.

[19] 郭國(guó)寧,尚永軍，朱國(guó)宴.共抑制分子PD-1在類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型免疫系統(tǒng)及滑膜組織的表達(dá)[J].中國(guó)免疫學(xué)雜志,2010,26(12):1119-1123.

[20] GREISEN SR,RASMUSSEN TK,et al.Increased soluble programmed death-1(sPD-1) is associated with disease activity and radiographic progression in early rheumatoid arthritis[J].Scand J Rheumatol，2014,43(2):101-108.

[21] 唐照亮，宋小鴿.艾灸抗炎免疫作用及對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2000,6(9):53-54．

[22] 周海燕，劉旭光．艾灸調(diào)整實(shí)驗(yàn)性RA大鼠HPAA功能的GR機(jī)制研究[J]．中華中醫(yī)藥學(xué)刊,2010,28(6):1169．

[23] 高駿，劉旭光．從RA 大鼠夜間ACTH、CS水平探討艾灸抗炎效應(yīng)的HPAA晝夜節(jié)律基礎(chǔ)[J].中國(guó)中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志,2010,16(6):523．

[24] 高駿,劉旭光．HPAA在艾灸調(diào)控類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠滑膜組織NF-kB信號(hào)通路中的作用[J].針刺研究,2010,35(3):198．

[25] 楊馨，李繼書(shū),等.艾灸對(duì)實(shí)驗(yàn)性類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎家兔滑膜細(xì)胞JAK-STAT信號(hào)通路影響的研究[J].針刺研究,2007,32(2):75-82．

[26] 劉旭光，宋開(kāi)源．艾灸對(duì)實(shí)驗(yàn)性RA大鼠熱休克蛋白(HSP70)表達(dá)的影響[J]．中醫(yī)藥學(xué)刊,2003,21(7):1034-1051．

Rersearch Progress of PD-1/PD-L1 signaling pathway and Rheumatoid Arthritis pathology

REN Ji-gang1, LIU Xu-guang2, LEI Xiao1, NIU Cai-qin1, ZHOU Hai-yan2△

(1.TraditionalChineseMedicinedepartment,affiliatedhospitalofnorthSichuanmedicalcollege,NanchongSichuan637000,China;2.ChengduUniversityofTCM,Chengdu610075,China)

Rheumatoid arthritis (RA) is a kind of autoimmune diseases mediated by T cell.Excessive activation of T cells is one of the important initiating in the immune response,but its exact etiology and pathogenesis is still not fully understood.In recent years, research has shown that a total of stimulating molecules play an important role in the immune regulation.Programmed cell death-1 and its ligands as the key negative regulation molecule for T cell activation, Which plays an important role in the process of RA pathology.This paper reviewed about the research progress of PD-1/PD-L1 signaling pathways on RA pathogenesis.It will provide a new idea for the study of moxibustion for treatment of RA.

RA； PD-1； Signaling Pathmay； Pathomechanism

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81173319)-不同灸法治療RA的抗炎效應(yīng)及其HSP70分子調(diào)控機(jī)制研究;國(guó)家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(81403480)-艾灸調(diào)控類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎免疫異常的PD-1/PD-L1信號(hào)機(jī)制研究

任繼剛(1989-)，男，四川南充人，醫(yī)學(xué)碩士，從事 針灸調(diào)節(jié)神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌疾病的機(jī)制研究。

△通訊作者：周海燕(1979-)，女，浙江諸暨人，助理研究員，醫(yī)學(xué)博士，從事針灸治療類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的基礎(chǔ)研究及經(jīng)穴效應(yīng)研究，E-mail：5014296@qq.com。

R392

A

1006-3250(2017)03-0437-03

2016-09-12