芒柄花黃素對(duì)阿爾茨海默病小鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬β-淀粉樣蛋白前體蛋白的影響*

費(fèi)洪新，沈 博，陳玉琦，潘思文，明 玥，張英博*

（齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院，黑龍江 齊齊哈爾 161006）

阿爾茨海默病是一種常見的機(jī)體神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病之一，其病理特征為腦組織神經(jīng)元外沉積β-淀粉樣蛋白，而β-淀粉樣蛋白來源于β-淀粉樣蛋白前體蛋白，APP經(jīng)過一系列的剪切、修飾后可以形成β-淀粉樣蛋白，β-淀粉樣蛋白異常積累后還可以誘發(fā)機(jī)體學(xué)習(xí)記憶能力減退，進(jìn)而引起行為學(xué)異常，由此分析，AD因?yàn)锳PP含量增加致使β-淀粉樣蛋白異常積累出現(xiàn)學(xué)習(xí)記憶能力減退是具有理論依據(jù)的。課題組前期研究顯示，補(bǔ)陽還五湯（黃芪、當(dāng)歸、赤芍、川芎、地龍、紅花、桃紅）對(duì)AD模型形態(tài)學(xué)、學(xué)習(xí)記憶、細(xì)胞凋亡、血腦屏障、核轉(zhuǎn)錄因子-κBp65[1]等有改善作用，補(bǔ)陽還五湯含藥血清或補(bǔ)陽還五湯對(duì)肝纖維化模型具有改善作用。

1 材料與方法

（1）安排好實(shí)驗(yàn)儀器、實(shí)驗(yàn)試劑、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、復(fù)制模型

分組給藥，包括對(duì)照組、模型組、多奈哌齊組、FMN高劑量組、FMN中劑量組、FMN低劑量組，每組8只，共48只。對(duì)照組和模型組小鼠給予生理鹽水灌胃，多奈哌齊組小鼠給予多奈哌齊1 mg/kg灌胃，F(xiàn)MN高劑量組、FMN中劑量組、FMN低劑量組小鼠分別給予FMN 30、15、7.5 mg/kg灌胃，各組小鼠灌胃給藥40天。

（2）FMN對(duì)AD小鼠學(xué)習(xí)能力、記憶能力的影響

各組小鼠灌胃結(jié)束后，經(jīng)過1天的休整期，采用Morris水迷宮系統(tǒng)訓(xùn)練和測(cè)定各組小鼠學(xué)習(xí)能力。

（3）統(tǒng)計(jì)FMN對(duì)AD小鼠學(xué)習(xí)記憶保持能力的影響，F(xiàn)MN對(duì)AD小鼠海馬APP的影響。

（4）統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以百分?jǐn)?shù)（%），例（n）表示，采用x2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以“±s”表示，采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 FMN對(duì)AD小鼠學(xué)習(xí)能力、記憶能力的影響

與對(duì)照組比較，模型組小鼠潛伏期明顯延長（P＜0.05），游泳距離明顯增加（P＜0.05）；與模型組比較，多奈哌齊組，F(xiàn)MN高、中劑量組小鼠潛伏期明顯縮短（P＜0.05），游泳距離明顯減少（P＜0.05），而FMN低劑量組小鼠潛伏期、游泳距離改變不明顯（P＞0.05）。

2.2 FMN對(duì)AD小鼠學(xué)習(xí)記憶保持能力的影響

小鼠學(xué)習(xí)記憶保持能力使用目標(biāo)停留時(shí)間和跨平臺(tái)次數(shù)表示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組比較，模型組小鼠目標(biāo)停留時(shí)間明顯縮短和跨平臺(tái)次數(shù)明顯減少（P＜0.05）；與模型組比較，多奈哌齊組，F(xiàn)MN高、中劑量組小鼠目標(biāo)停留時(shí)間明顯延長和跨平臺(tái)次數(shù)明顯增加（P＜0.05），而FMN低劑量組小鼠目標(biāo)停留時(shí)間和跨平臺(tái)次數(shù)改變不明顯（P＞0.05）。

2.3 FMN對(duì)AD小鼠學(xué)習(xí)記憶綜合能力的影響

模型組、FMN低劑量組小鼠游泳軌跡多為邊緣型，說明小鼠的學(xué)習(xí)記憶綜合能力較差，而對(duì)照組、多奈哌齊組、FMN高劑量組、FMN中劑量組小鼠游泳軌跡多為趨化型、直線型，說明小鼠的學(xué)習(xí)記憶綜合能力較好。

2.4 FMN對(duì)AD小鼠海馬APP的影響

結(jié)果表明，與對(duì)照組比較，模型組小鼠海馬APP明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，多奈哌齊組，F(xiàn)MN高、中劑量組小鼠海馬APP明顯降低（P＜0.05），而FMN低劑量組小鼠海馬APP改變不明顯（P＞0.05）。

3 討 論

AD表現(xiàn)為學(xué)習(xí)能力、記憶能力的減退，其與β-淀粉樣蛋白明顯增多密切相關(guān)，而β-淀粉樣蛋白的前體成分就是APP，基于此，本實(shí)驗(yàn)主要開展對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力和APP水平的測(cè)定。

本實(shí)驗(yàn)表明，模型組小鼠潛伏期及游泳距離增加，伴有目標(biāo)停留時(shí)間縮短和跨平臺(tái)次數(shù)減少，同時(shí)游泳軌跡多為邊緣型，經(jīng)過補(bǔ)陽還五湯主要成分FMN治療后，F(xiàn)MN高、中劑量可以促使AD小鼠較快尋找到Morris水迷宮系統(tǒng)水下平臺(tái)，尋找水下平臺(tái)難度降低。

綜上所述，F(xiàn)MN通過抑制APP改善AD小鼠模型學(xué)習(xí)記憶能力，以此在AD治療中發(fā)揮重要的作用。

[1]費(fèi)洪新,韓玉生,杜 徽,等.補(bǔ)陽還五湯對(duì)阿爾茨海默病小鼠海馬形態(tài)學(xué)和β淀粉樣蛋白水平的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2014(20):23.