間充質(zhì)干細(xì)胞輔助治療耐多藥結(jié)核病的研究進(jìn)展

宋瑞娟 李鋒 盧水華

?

·綜述·

間充質(zhì)干細(xì)胞輔助治療耐多藥結(jié)核病的研究進(jìn)展

宋瑞娟 李鋒 盧水華

化學(xué)治療是近代人類對抗結(jié)核病的最重要手段，抗結(jié)核化療藥物的出現(xiàn)在一定程度上降低了結(jié)核病對人類的威脅。隨著耐藥結(jié)核病的出現(xiàn)及流行，加上抗結(jié)核新藥開發(fā)進(jìn)度緩慢，抗結(jié)核化療出現(xiàn)了瓶頸。在探索抗結(jié)核藥物治療方案的道路上，人類逐漸認(rèn)識到免疫治療的重要性，近年來間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)在急性炎癥和細(xì)菌性肺炎中的免疫調(diào)節(jié)作用得到了認(rèn)可。有研究表明，間充質(zhì)干細(xì)胞對于結(jié)核病有潛在的治療作用。作者對MSCs輔助治療耐多藥結(jié)核病(MDR-TB)的進(jìn)展進(jìn)行綜述。

間質(zhì)干細(xì)胞； 結(jié)核, 抗多種藥物性； 免疫調(diào)節(jié)； 治療, 臨床研究性； 綜述

全球約1/3的人口感染結(jié)核分枝桿菌(MTB)，其中1/10可能發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核病[1]。盡管人類已經(jīng)接種結(jié)核病疫苗(卡介苗)100多年了，但結(jié)核病仍然是當(dāng)今世界上排名第二位的致死性傳染病。近年來，隨著艾滋病、糖尿病等并發(fā)疾病的流行及抗生素的濫用，全球耐多藥結(jié)核病(multidrug-resistant tuberculosis,MDR-TB)和廣泛耐藥結(jié)核病(extensively drug-resistant tuberculosis,XDR-TB)患者明顯增多。WHO結(jié)核病報(bào)告(2015年)顯示，2014年全球3.3%的新發(fā)結(jié)核病和20.5%復(fù)治結(jié)核病為MDR-TB，約有48萬例MDR-TB新發(fā)患者，其中9.7%為XDR-TB[2]。目前，MDR-TB的治療成功率不高，且二線抗結(jié)核藥物價(jià)格高昂、不良反應(yīng)大，患者耐受性差，部分藥物還可誘導(dǎo)MTB產(chǎn)生耐藥的風(fēng)險(xiǎn)，迫切需要新的藥物來改善現(xiàn)狀；盡管氯法齊明、德拉馬尼、貝達(dá)喹啉等已經(jīng)被納入MDR-TB化療方案中，但最終療效并不樂觀[3-4]，人類仍在尋找更有效的治療手段。在抗生素出現(xiàn)之前，約30%的菌陽肺結(jié)核患者可依靠自身免疫力獲得痊愈[5]，提示免疫治療可能為耐藥結(jié)核病的治愈帶來新的希望。當(dāng)前，間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells, MSCs)輔助治療MDR-TB、XDR-TB、膿腫分枝桿菌等的研究嘗試取得了一定療效，筆者對MSCs輔助治療MDR-TB的進(jìn)展進(jìn)行綜述如下。

MSCs的免疫調(diào)節(jié)作用和對結(jié)核病的作用

一、免疫調(diào)節(jié)

吞噬細(xì)胞是固有免疫系統(tǒng)的重要組成成分，MTB進(jìn)入肺泡后首先被肺泡巨噬細(xì)胞吞噬，被胞內(nèi)溶體酶殺滅；但當(dāng)入侵的菌量較多或毒力較強(qiáng)時(shí)，部分MTB僥幸存活，繼而感染肺定植巨噬細(xì)胞，分泌細(xì)胞因子、趨化因子，導(dǎo)致大量外周血單核細(xì)胞、T細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等至感染部位，啟動(dòng)適應(yīng)性免疫應(yīng)答[6]。研究認(rèn)為，MSCs可直接或間接地下調(diào)白細(xì)胞介素-10(IL-10)、IL-6等炎癥相關(guān)基因表達(dá)，促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬病原體[7]，并分泌前列腺素E2(PGE2)促進(jìn)感染了MTB的巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄因子蛋白(NF-κB)信號通路活化，增加自由基(如NO)的產(chǎn)量，抑制胞內(nèi)MTB的生長[8]。同時(shí)，MSCs可以利用細(xì)胞膜表面清道夫受體介導(dǎo)MTB內(nèi)吞作用，抑制MTB的生長；雷帕霉素可誘導(dǎo)激活MSCs，強(qiáng)化其對MTB的吞噬殺傷作用[9]。另外,人們還發(fā)現(xiàn)γ干擾素(INF-γ)可以誘導(dǎo)MSCs呈現(xiàn)出主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ(MHC-Ⅱ)分子介導(dǎo)的胞內(nèi)抗原提呈作用，以及MHC-Ⅰ分子介導(dǎo)的胞外可溶性抗原提呈作用[10]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)INF-γ水平低下時(shí)，MSCs細(xì)胞表達(dá)MHC-Ⅱ分子增加，具有類似抗原提呈細(xì)胞(APC)的作用；INF-γ水平升高時(shí)，MHC-Ⅱ表達(dá)下降，MSCs失去APC細(xì)胞性能[11]。

適應(yīng)性免疫是人類抵抗MTB感染的關(guān)鍵。肉芽腫的形成是適應(yīng)性免疫應(yīng)答的形式之一，肉芽腫主要由吞噬有MTB的巨噬細(xì)胞等組成，限制MTB的活動(dòng)和炎癥損傷[12]。研究發(fā)現(xiàn)，MSCs聚集于肉芽腫的邊緣，可能在肉芽腫的形成過程中有重要輔助作用[13]；細(xì)胞免疫的激活是適應(yīng)性免疫應(yīng)答的另一表現(xiàn)，較弱的免疫反應(yīng)不能有效地限制MTB的生長繁殖，較強(qiáng)的免疫反應(yīng)會(huì)對機(jī)體產(chǎn)生免疫損傷[5]。Shahemabadi等[14]研究發(fā)現(xiàn),來源于藥物敏感結(jié)核病(drug-sensitivity tuberculosis，DS-TB)和MDR-TB的CD4+T細(xì)胞受到MTB脂抗原刺激后，增殖及分泌INF-γ均較健康人明顯減少，分泌IL-4增加[14]；Tan等[15]研究顯示，DS-TB或MDR-TB感染均可抑制輔助性T細(xì)胞(Th1、Th2)活化，下調(diào)INF-γ、IL-2，上調(diào)IL-4、IL-6、促炎性細(xì)胞因子[如腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]的表達(dá)。但Lim等[16]研究指出，在DS-TB和MDR-TB患者中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)水平均較正常人群增高；Fan等[17]的研究也指出，MDR-TB患者外周血中Treg水平明顯增加，且自然殺傷細(xì)胞(NK)活性減低。

Raghuvanshi等[18]研究認(rèn)為，MTB的侵襲招募MSCs至感染部位，MSCs在INF-γ的作用下分泌NO抑制T淋巴細(xì)胞免疫增殖；但Li等[19]研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)INF-γ水平低下，不能誘導(dǎo)MSCs產(chǎn)生足夠的NO時(shí)，MSCs可分泌化學(xué)因子促進(jìn)T細(xì)胞增殖；祝秉東等[20]用MTB抗原持續(xù)刺激小鼠造成T細(xì)胞功能“耗竭”，INF-γ、IL-2水平降低，此時(shí)用MSCs干預(yù)治療，但未能恢復(fù)T細(xì)胞功能；Kim等[8]研究發(fā)現(xiàn)，MSCs能夠提高M(jìn)DR-TB小鼠外周血IFN-γ、TNF-α、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)、NO和PGE2等細(xì)胞因子水平，促進(jìn)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、CD4+T淋巴細(xì)胞、CD8+T淋巴細(xì)胞在肺部感染病灶聚集。

Sun等[21]研究發(fā)現(xiàn)，MSCs可通過分泌細(xì)胞因子促進(jìn)Treg細(xì)胞的增殖、T細(xì)胞向Th1表型分化、抑制過度炎癥反應(yīng)和組織損傷。另外，在細(xì)胞免疫低下時(shí)，NK細(xì)胞分泌微量的INF-γ即可促進(jìn)MSCs合成大量CC趨化因子配體2(CCL2)，CCL2反過來和IL-12、IL-18共同促進(jìn)NK細(xì)胞分泌大量INF-γ，形成正反饋循環(huán)，強(qiáng)化NK細(xì)胞的免疫應(yīng)答[22]，增強(qiáng)其對MTB的殺傷作用。

二、組織修復(fù)和抗菌作用

MSCs的自我更新和多向分化潛能，使其具備了再生和組織修復(fù)的能力。外源性輸入的MSCs可在多種炎癥因子的誘導(dǎo)下遷移到肺組織，在損傷部位聚集，分化成肺泡細(xì)胞和毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞等修復(fù)受損組織[23]；同時(shí)可能通過表達(dá)IL-1R拮抗劑，減少中性粒細(xì)胞、炎癥因子、巨噬細(xì)胞炎癥蛋白2(MIP-2)的產(chǎn)生，發(fā)揮抗炎、抗纖維化作用[24]。

MSCs在病原體的刺激下能夠直接分泌人抗菌肽-37(LL-37)[25]，LL-37是人類抗菌肽家族的唯一成員，具有微弱的抗菌活性，能夠調(diào)節(jié)感染了MTB的巨噬細(xì)胞的免疫活性，調(diào)控抗炎和促炎細(xì)胞因子的分泌[26]。Sisto等[27]研究發(fā)現(xiàn),MSCs能夠攝取環(huán)丙沙星(INN)，并在條件培養(yǎng)內(nèi)釋放，被釋放的INN經(jīng)測試仍具有抗菌活性，因此MSCs可能作為INN或其他抗生素的運(yùn)載工具，依靠“歸巢活動(dòng)”，將抗生素釋放到骨髓、內(nèi)臟等深部組織，殺滅深部MTB。

MSCs在臨床治療其他疾病上取得的效果

移植物抗宿主病(graft-versus-host disease，GVHD)是MSCs治療免疫相關(guān)疾病的典型代表。2002年報(bào)道了首例聯(lián)合輸注人類白細(xì)胞抗原(HLA)單倍體相合的MSCs和肝星狀細(xì)胞(HSC)治療20歲女性急性骨髓性白血病(AML)，移植物迅速存活且未發(fā)生GVHD，隨訪3年無病生存[28]。 Baron等[29]在造血干細(xì)胞移植前0.5～2 h輸注第三方MSCs治療惡性血液性疾病,成功降低了急慢性GVHD的發(fā)生率，對于已經(jīng)發(fā)生GHVD的患者有治療緩解作用。Muroi等[30]進(jìn)行一項(xiàng)多中心Ⅰ/Ⅱ期臨床研究，用第三方無關(guān)供者的骨髓MSCs治療急性激素難治性GHVD，共納入14例惡性血液病患者，9例系Ⅱ級急性GHVD，5例系Ⅲ級急性GHVD；10例累及胃腸道，9例累及皮膚，3例累及肝臟，7例累及2個(gè)臟器；給予MSCs靜脈滴注2次/周，2×106個(gè)·kg-1·次-1，連續(xù)4周，必要時(shí)再繼續(xù)給予4周；4周末，13例患者對治療有反應(yīng)，8例癥狀完全緩解，5例部分緩解；隨訪24周末，11例存活，其中10例完全緩解，1例部分緩解；96周末，8例完全緩解者存活， 6例死亡，死亡者中僅2例系GHVD復(fù)發(fā)；所有患者治療過程中未見明顯MSCs注射相關(guān)不良反應(yīng)。

糖尿病(DM)為當(dāng)今社會(huì)的常見病、高發(fā)病，對人類生命安全有極大威脅，免疫紊亂、胰島細(xì)胞損傷可能是其病因，MSCs為糖尿病的治療提供了新的手段。于文龍等[31]用自體MSCs聯(lián)合胰島素治療6例新發(fā)1型糖尿病，對照組單用胰島素控制血糖，9個(gè)月后治療組空腹血糖、糖化血紅蛋白及C肽均較治療前明顯改善，對照組變化不明顯；即使并發(fā)有酮癥酸中毒的嚴(yán)重1型糖尿病，靜脈滴注MSCs也能獲益[32]；Guan等[33]納入不同醫(yī)院的6名胰島素治療控制不佳的2型糖尿病，給予臍帶血提取的MSCs移植術(shù)，隨訪2年后空腹血糖及餐后2 h血糖均較穩(wěn)定，3例脫離胰島素治療，另外3例胰島素使用劑量減少；Hu等[34]用臍帶血MSCs輔助30例2型糖尿病患者進(jìn)行基礎(chǔ)治療，對照組30例僅用基礎(chǔ)降糖方案，隨訪超過2年，不僅明顯改善患者胰腺功能、減少并發(fā)癥，且未見明顯急慢性不良反應(yīng)。

MSCs治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、多發(fā)性硬化癥(MS)等自身免疫性疾病的效果也得到肯定，Wang等[35]對87例接受MSCs移植的重癥、難治性SLE患者隨訪4年，總存活率達(dá)94%，總康復(fù)率50%，復(fù)發(fā)率23%。Llufriu等[36]進(jìn)行了一項(xiàng)隨機(jī)、雙盲、安慰劑對照的MS Ⅱ期患者臨床研究，9例常規(guī)藥物治療效果不佳的患者隨機(jī)分出5例接受MSCs治療，4例給予安慰劑對照，治療前兩組患者頭顱MRI增強(qiáng)顯示釓平均累計(jì)增強(qiáng)病灶數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，隨訪至6個(gè)月末時(shí)1例安慰劑組患者因病情反復(fù)退出，其余患者進(jìn)行頭顱MRI增強(qiáng)顯示：治療組病灶處對比劑釓平均累計(jì)增強(qiáng)病灶數(shù)較對照組降低(3.1個(gè),95%CI=1.1～8.8； 12.3個(gè),95%CI=4.4～32.5)；隨后兩組治療方案對調(diào)，繼續(xù)隨訪6個(gè)月，復(fù)查增強(qiáng)MRI顯示，兩組釓平均累計(jì)增強(qiáng)病灶數(shù)均較治療前降低。

有報(bào)道指出，MSCs在治療克羅恩病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性硬化等疾病均有涉及[37]，MSCs對免疫紊亂性疾病的療效越來越得到廣泛認(rèn)可，間接說明了MSCs的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制的通用性可能。

間充質(zhì)干細(xì)胞用于治療結(jié)核病的研究

MSCs在多種疾病中的療效啟發(fā)人們探索其治療肺部疾病的可能。Guan等[38]研究發(fā)現(xiàn)，MSCs能夠下調(diào)肺損傷小鼠肺部TNF-α、IL-1β、MCP-1、IL-6和基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)9、MMP12，上調(diào)血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體2(VEGFR2)和轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β1，減少肺組織細(xì)胞壞死，改善肺氣腫和肺功能。郝昱芳和耿立霞[39]用骨髓MSCs靜脈注射治療膿毒敗血癥大鼠，對照組靜脈注射等量磷酸緩沖鹽(PBS)；結(jié)果顯示，治療組大鼠存活率明顯高于對照組，肺部組織病變程度、IL-6、IL-17、TNF-α、CCL2等炎癥因子的mRNA和蛋白表達(dá)較對照組均明顯降低。Mao等[40]分別用高劑量、低劑量和PBS治療銅綠假單胞菌感染的小鼠，結(jié)果顯示高劑量MSCs可明顯降低肺部、肺泡灌洗液及血液中的細(xì)菌載量，且肺泡灌洗液中中性粒細(xì)胞、髓過氧化物酶、巨噬細(xì)胞炎性蛋白和總蛋白濃度也明顯減少。

MSCs在急性肺損傷、肺部感染方面的作用體現(xiàn)了MSCs的免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)和抗菌作用，那么它在結(jié)核病中的療效如何呢？2008年，Erokhin等[41]進(jìn)行一項(xiàng)歷時(shí)3年的前瞻性研究，納入15例MDR-TB和12例XDR-TB患者，所有患者均為播散性肺結(jié)核，長期抗結(jié)核藥物治療效果不佳，其中17例并發(fā)慢性纖維性空洞，均進(jìn)行自體MSCs全身移植輔助化療；結(jié)果顯示，所有患者臨床癥狀均改善，20例患者治療3～4個(gè)月后痰菌陰轉(zhuǎn)，6例肺部纖維性空洞消失，9例長期隨訪無復(fù)發(fā)。2012年Skrahina等[42]用患者自體MSCs全身移植治療MDR-TB，發(fā)現(xiàn)患者肺部空洞縮小甚至閉合；后于2014年納入60例MDR-TB患者，進(jìn)行MSCs輔助抗MDR-TB治療的安全性和有效性的Ⅰ期臨床研究，將30例化療后4周內(nèi)接受單劑量MSCs注射治療的患者作為實(shí)驗(yàn)組，將30例只接受化學(xué)治療的患者作為對照組；結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組治愈率(53.3%,16/30)是對照組(16.7%,5/30)的近3倍，且安全性、耐受性較好，無注射相關(guān)不良反應(yīng)(血膽固醇升高、惡心、淋巴細(xì)胞減少、貧血、一過性血鉀及γ-谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶升高等)[43]。2016年韓國的一項(xiàng)研究采用膿腫分枝桿菌感染小鼠模擬MDR-TB小鼠(取等量小鼠隨機(jī)分為兩組，即實(shí)驗(yàn)組和對照組)，并予以實(shí)驗(yàn)組MSCs[MSCs 2.5×105個(gè)/只、MSCs 1.0×105個(gè)/只]干預(yù)治療和對照組靜脈注射PBS；結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組小鼠肺部和脾臟載菌量較對照組明顯降低；注射了MSCs的小鼠存活>15 d的概率較高，且劑量越大，存活率越高[8]。雖然目前可獲得的MSCs輔助治療結(jié)核病的相關(guān)研究的文獻(xiàn)有限，但上述文獻(xiàn)科學(xué)性較好、證據(jù)級別較高，對臨床治療結(jié)核病有一定的指導(dǎo)意義。

MSCs治療結(jié)核病面臨的問題

MSCs的低免疫源性及容易獲得性使其廣泛用于臨床。近年來，人們看到其在結(jié)核病治療方面的可能前景，但成為一項(xiàng)成熟的臨床治療技術(shù)仍面臨很多困難。

一、缺乏國內(nèi)研究數(shù)據(jù)的支持

由于國內(nèi)外人群體質(zhì)或所感染菌種的差別，任何治療手段在擬引入國內(nèi)時(shí)都需再次進(jìn)行各種基礎(chǔ)、臨床前研究，我國關(guān)于MSCs治療結(jié)核病的研究極少，需要大量相關(guān)試驗(yàn)填補(bǔ)空白，完善國內(nèi)數(shù)據(jù)。

二、自體骨髓MSCs移植的隱患

無論自體還是異體，骨髓可能是MSCs最容易獲得的途徑，但多項(xiàng)研究注意到骨髓MSCs可能攜帶MTB。Beamer等[44]指出受氣溶膠攻擊的小鼠肺部MTB可迅速播散到骨髓，并可較長時(shí)間維持高載菌量；在抗結(jié)核藥物治療后，因大部分活性菌存在于MSCs豐富的組織，使得MTB仍可低濃度存在于骨髓。Das等[45]研究發(fā)現(xiàn)，即使治療成功的結(jié)核病患者，其骨髓MSCs中仍可檢測到有活性的MTB；Garhyan等[46]用治愈后的結(jié)核病小鼠的骨髓MSCs注入健康小鼠體內(nèi)，可致其發(fā)生活動(dòng)性肺結(jié)核，可見骨髓MSCs可能為MTB提供了一個(gè)逃避免疫和藥物殺傷的庇護(hù)所，可能是結(jié)核病復(fù)發(fā)或播散的源頭。有研究指出,無論小鼠還是人類，MTB優(yōu)先感染并持續(xù)潛伏于骨髓中表達(dá)神經(jīng)生長因子受體CD271的特定MSCs[45]，從骨髓MSCs中經(jīng)細(xì)胞分離復(fù)蘇MTB，大部分也是來源于CD271富集的細(xì)胞[44]；因此對于自體骨髓MSCs移植是否有必要純化去除CD271+MSCs,篩除CD271+MSCs是否影響療效等問題都需要進(jìn)一步探究。

三、MSCs治療結(jié)核病的適應(yīng)證

目前,MSCs只是作為難治性MDR-TB或XDR-TB的補(bǔ)救措施，由于部分MDR-TB或XDR-TB特別是初治MDR-TB或XDR-TB對化學(xué)治療仍較敏感，建議首選抗結(jié)核藥物治療。難治性MDR-TB或許有一定的免疫特征，闡明難治性MDR-TB的免疫調(diào)控機(jī)制有助于早期有效的免疫干預(yù)。

四、MSCs治療、管理缺乏規(guī)范

無論結(jié)核病還是非結(jié)核病，MSCs治療最佳切入時(shí)間點(diǎn)、劑量、頻次、途徑、療程等均尚未達(dá)成統(tǒng)一共識，或許不同疾病有不同的最佳治療方案。MSCs干預(yù)治療結(jié)核病領(lǐng)域尚未深入，需要更多高質(zhì)量的研究去明確。另外，MSCs的最佳制劑條件、儲(chǔ)藏、運(yùn)輸?shù)葐栴}也尚未完全解決。

五、MSCs的雙面作用

隨著對結(jié)核病研究的增加、認(rèn)知的完善，結(jié)核感染所形成的肉芽腫不再被單純地視為機(jī)體的免疫保護(hù)機(jī)制。近年來，多項(xiàng)研究認(rèn)為MSCs治療形成的肉芽腫，一方面限制了MTB的活動(dòng)，另一方面也抑制了T細(xì)胞的免疫活性，可能協(xié)助了MTB的免疫逃逸和長期潛伏，為結(jié)核病復(fù)發(fā)留下隱患；且在感染器官形成免疫抑制性微環(huán)境，增加對病原微生物的易感性[13, 47]。另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，大部分含有MTB的MSCs被證實(shí)具有抗酸性，肺結(jié)核患者的淋巴結(jié)切片內(nèi)也存在抗酸染色陽性的MTB,不排除MSCs作為MTB播散的媒介，導(dǎo)致肺外結(jié)核的發(fā)生[9]。

小 結(jié)

綜上所述，MDR-TB預(yù)后較差，新藥開發(fā)進(jìn)度緩慢，MSCs為難治性結(jié)核病的治療帶來了希望。雖然研究發(fā)現(xiàn)，骨髓MSCs內(nèi)有MTB潛伏，具有免疫抑制性作用，但仍被證實(shí)臨床治療有效，可以提高M(jìn)DR-TB患者生存率、痰菌陰轉(zhuǎn)率，以及促進(jìn)肺部病灶吸收等，但尚未能完全闡明其免疫調(diào)節(jié)機(jī)制，需要未來更多的研究進(jìn)一步證明。期待隨著國內(nèi)外對MSCs治療結(jié)核病研究的深入，結(jié)核病所面臨的問題得以攻破，讓MSCs真正成為治愈耐藥結(jié)核病的強(qiáng)大武器。

[1] Joshi L, Chelluri LK, Gaddam S. Mesenchymal stromal cell therapy in MDR/XDR tuberculosis: a concise review. Arch Immunol Ther Exp (Warsz), 2015,63(6):427-433.

[2] World Health Organization. WHO global tuberculosis report 2015.Geneva: World Health Organization,2015.

[3] Hoagland DT, Liu J, Lee RB, et al. New agents for the treatment of drug-resistantMycobacteriumtuberculosis. Adv Drug Deliv Rev, 2016,102:55-72.

[4] World Health Organization. WHO treatment guidelines for drug-resistant tuberculosis. Geneva: World Health Organization,2016.

[5] Parida SK, Poiret T, Zhenjiang L, et al. T-cell therapy: options for infectious diseases: table 1. Clin Infect Dis, 2015,61(Suppl 3):S217-S224.

[6] Choi HG, Choi S, Back YW, et al.MycobacteriumtuberculosisRv2882c protein induces activation of macrophages through TLR4 and exhibits vaccine potential. PLoS One, 2016,11(10):e0164458.

[7] Mei SH, Haitsma JJ, Dos Santos CC, et al. Mesenchymal stem cells reduce inflammation while enhancing bacterial clearance and improving survival in sepsis. Am J Respir Crit Care Med, 2010,182(8):1047-1057.

[8] Kim JS, Cha SH, Kim WS, et al. A novel therapeutic approach using mesenchymal stem cells to protect against Mycobacterium abscessus. Stem Cells, 2016,34(7):1957-1970.

[9] Khan A, Hunter RL, Jagannath C. Emerging role of mesenchymal stem cells during tuberculosis: the fifth element in cell mediated immunity. Tuberculosis(Edinb), 2016: 101S:S45-S52.

[10] Hoogduijn MJ. Are mesenchymal stromal cells immune cells. Arthritis Res Ther, 2015,17:88.

[11] Zachar L, Bacˇenková D, Rosocha J. Activation, homing, and role of the mesenchymal stem cells in the inflammatory environment. J Inflamm Res,2016, 9:231-240.

[12] Mattila JT, Ojo OO, Kepka-Lenhart D, et al. Microenvironments in tuberculous granulomas are delineated by distinct populations of macrophage subsets and expression of nitric oxi-de synthase and arginase isoforms. J Immunol, 2013,191(2):773-784.

[13] 黃藝, 袁俐. 間充質(zhì)干細(xì)胞在結(jié)核分枝桿菌感染免疫反應(yīng)中的作用研究進(jìn)展. 中國病原生物學(xué)雜志, 2012,7(8):629-631.

[14] Shahemabadi AS, Hosseini AZ, Shaghsempour S, et al. Eva-luation of T cell immune responses in multi-drug-resistant tuberculosis (MDR-TB) patients toMycobacteriumtuberculosistotal lipid antigens. Clin Exp Immunol, 2007,149(2):285-294.

[15] Tan Q, Xie WP, Min R, et al. Characterization of Th1- and Th2-type immune response in human multidrug-resistant tuberculosis. Eur J Clin Microbiol Infect Dis, 2012,31(6):1233-1242.

[16] Lim HJ, Park JS, Cho YJ, et al. CD4+FoxP3+T regulatory cells in drug-susceptible and multidrug-resistant tuberculosis. Tuberculosis(Edinb), 2013,93(5):523-528.

[17] Fan R, Xiang Y, Yang L, et al. Impaired NK cells’ activity and increased numbers of CD4+CD25+regulatory T cells in multidrug-resistantMycobacteriumtuberculosispatients. Tuberculosis(Edinb), 2016,98:13-20.

[18] Raghuvanshi S, Sharma P, Singh S, et al.Mycobacteriumtuberculosisevades host immunity by recruiting mesenchymal stem cells. Proc Natl Acad Sci USA, 2010,107(50):21653-21658.

[19] Li W, Ren G, Huang Y, et al. Mesenchymal stem cells: a double-edged sword in regulating immune responses. Cell Death Differ, 2012,19(9):1505-1513.

[20] 祝秉東, 劉勛, 李小平, 等. 結(jié)核分枝桿菌持續(xù)大量刺激致免疫功能低下的臨床觀察和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究//中國免疫學(xué)會(huì).第十屆全國免疫學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)匯編，北京，2015.北京：中國免疫學(xué)會(huì)，2015：81-82.

[21] Sun J, Han ZB, Liao W, et al. Intrapulmonary delivery of human umbilical cord mesenchymal stem cells attenuates acute lung injury by expanding CD4+CD25+Forkhead Boxp3 (FOXP3)+ regulatory T cells and balancing anti- and pro-inflammatory factors. Cell Physiol Biochem, 2011,27(5):587-596.

[22] Cui R, Rekasi H, Hepner-Schefczyk M, et al. Human mesenchymal stromal/stem cells acquire immunostimulatory capacity upon cross-talk with natural killer cells and might improve the NK cell function of immunocompromised patients. Stem Cell Res Ther, 2016,7(1):88.

[23] Wang YY, Li XZ, Wang LB. Therapeutic implications of mesen-chymal stem cells in acute lung injury/acute respiratory distress syndrome. Stem Cell Res Ther, 2013,4(3):45.

[24] Martínez-González I, Roca O, Masclans JR, et al. Human mesenchymal stem cells overexpressing the IL-33 antagonist soluble IL-1 receptor-like-1 attenuate endotoxin-induced acute lung injury. Am J Respir Cell Mol Biol, 2013,49(4):552-562.

[25] Krasnodembskaya A, Song Y, Fang X, et al. Antibacterial effect of human mesenchymal stem cells is mediated in part from secretion of the antimicrobial peptide LL-37. Stem Cells, 2010,28(12):2229-2238.

[26] Torres-Juarez F, Cardenas-Vargas A, Montoya-Rosales A, et al. LL-37 immunomodulatory activity duringMycobacteriumtuberculosisinfection in macrophages. Infect Immun, 2015,83(12):4495-4503.

[27] Sisto F, Bonomi A, Cavicchini L, et al. Human mesenchymal stromal cells can uptake and release ciprofloxacin, acquiring in vitro anti-bacterial activity. Cytotherapy, 2014,16(2):181-190.

[28] 陳偉. 間充質(zhì)干細(xì)胞防治移植物抗宿主病的研究進(jìn)展.國際輸血及血液學(xué)雜志, 2013,36(6):510-513.

[29] Baron F, Lechanteur C, Willems E, et al. Cotransplantation of mesenchymal stem cells might prevent death from graft-versus-host disease (GVHD) without abrogating graft-versus-tumor effects after HLA-mismatched allogeneic transplantation following nonmyeloablative conditioning. Biol Blood Marrow Transplant, 2010,16(6):838-847.

[30] Muroi K, Miyamura K, Ohashi K, et al. Unrelated allogeneic bone marrow-derived mesenchymal stem cells for steroid-refractory acute graft-versus-host disease: a phase I/II study. Int J Hematol, 2013,98(2):206-213.

[31] 于文龍, 高宏, 余霄龍, 等. 臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療初發(fā)1型糖尿病. 中國組織工程研究與臨床康復(fù), 2011,15(23):4363-4366.

[32] Li L, Hui H, Jia X, et al. Infusion with human bone marrow-derived mesenchymal stem cells improves β-cell function in patients and non-obese mice with severe diabetes. Sci Rep, 2016,6:37894.

[33] Guan LX, Guan H, Li HB, et al. Therapeutic efficacy of umbilical cord-derived mesenchymal stem cells in patients with type 2 diabetes. Exp Ther Med, 2015,9(5):1623-1630.

[34] Hu J, Wang Y, Gong H, et al. Long term effect and safety of Wharton’s jelly-derived mesenchymal stem cells on type 2 diabetes. Exp Ther Med, 2016,12(3):1857-1866.

[35] Wang D, Zhang H, Liang J, et al. Allogeneic mesenchymal stem cell transplantation in severe and refractory systemic lupus erythematosus: 4 years of experience. Cell Transplant, 2013,22(12):2267-2277.

[36] Llufriu S, Sepúlveda M, Blanco Y, et al. Randomized placebo-controlled phase II trial of autologous mesenchymal stem cells in multiple sclerosis. PLoS One, 2014,9(12):e113936.

[37] Wei X, Yang X, Han ZP, et al. Mesenchymal stem cells: a new trend for cell therapy. Acta Pharmacol Sin, 2013,34(6):747-754.

[38] Guan XJ, Song L, Han FF, et al. Mesenchymal stem cells protect cigarette smoke-damaged lung and pulmonary function partly via VEGF-VEGF receptors. J Cell Biochem, 2013,114(2):323-335.

[39] 郝昱芳, 耿立霞. 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞注射抑制敗血癥大鼠的炎癥反應(yīng). 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志, 2016,32(9):1158-1163.

[40] Mao YX, Xu JF, Seeley EJ, et al. Adipose tissue-derived mesenchymal stem cells attenuate pulmonary infection caused by pseudomonas aeruginosa via Inhibiting overproduction of prostaglandin E2. Stem Cells, 2015,33(7):2331-2342.

[41] Erokhin VV, Vasil’eva IA, Konopliannikov AG, et al.Systemic transplantation of autologous mesenchymal stem cells of the bone marrow in the treatment of patients with multidrug-resistant pulmonary tuberculosis. Probl Tuberk Bolezn Legk, 2008,(10):3-6.

[42] Skrahina A, Hurevich H, Zalutskaya A, et al. Alarming le-vels of drug-resistant tuberculosis in Belarus: results of a survey in Minsk. Eur Respir J, 2012,39(6):1425-1431.

[43] Skrahin A, Ahmed RK, Ferrara G, et al. Autologous mesenchymal stromal cell infusion as adjunct treatment in patients with multidrug and extensively drug-resistant tuberculosis: an open-label phase 1 safety trial. Lancet Respir Med, 2014,2(2):108-122.

[44] Beamer G, Major S, Das B, et al. Bone marrow mesenchymal stem cells provide an antibiotic-protective niche for persistent viableMycobacteriumtuberculosisthat survive antibiotic treatment. Am J Pathol, 2014,184(12):3170-3175.

[45] Das B, Kashino SS, Pulu I, et al. CD271+bone marrow me-senchymal stem cells may provide a niche for dormantMycobacteriumtuberculosis. Sci Transl Med, 2013,5(170): 170ra13.

[46] Garhyan J, Bhuyan S, Pulu I, et al. Preclinical and clinical evi-dence ofMycobacteriumtuberculosispersistence in the hypoxic niche of bone marrow mesenchymal stem cells after therapy. Am J Pathol, 2015,185(7):1924-1934.

[47] Ramakrishnan L.Revisiting the role of the granuloma in tuberculosis.Nat Rev Immunol, 2012,12(5):352-366.

(本文編輯：孟莉 范永德)

The research progress of mesenchymal stem cells as the adjuvant therapy of multidrug-resistant tuberculosis

SONGRui-juan,LIFeng,LUShui-hua.

DepartmentofTuberculosis,ShanghaiPublicHealthClinicalCenterAffiliatedFudanUniversity,Shanghai201508,China

Correspondingauthor:LUShui-hua,Email:tubercle@shaphc.org

Chemotherapy is the most important means for human to fight against tuberculosis in modern times. To a certain extent, anti-tuberculosis chemotherapy reduces the threat of tuberculosis to human beings. But with the prevalence of drug-resistant tuberculosis and the development of new drug slowly, anti-tuberculosis chemotherapy falled into a bottleneck. On the way of exploring anti-tuberculosis treatment in recent years, people gradually realized the importance of immunotherapy. The immunomodulation of mesenchymal stem cells (MSCs) in acute inflammation and bacterial pneumonia has been recognized. Several studies have indicated that MSCs may have the potential therapeutic effect for tuberculosis. In this article, the research progress of the adjuvant therapy multi-drug resistant tuberculosis (MDR-TB) of MSCs have been summarized.

Mesenchymal stem cells； Tuberculosis, multidrug-resistant； Immunomodulation； Therapies, investigational； Review

10.3969/j.issn.1000-6621.2017.03.019

201508 上海，復(fù)旦大學(xué)附屬公共衛(wèi)生臨床中心結(jié)核科

盧水華，Email：tubercle@shaphc.org

2016-09-08)