與銀屑病相關(guān)的T輔助細(xì)胞研究進(jìn)展

曾亞軍，李玲玲，段行武，張潤(rùn)田，陳廣山

（北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院，北京 100007）

與銀屑病相關(guān)的T輔助細(xì)胞研究進(jìn)展

曾亞軍，李玲玲，段行武，張潤(rùn)田，陳廣山

（北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院，北京 100007）

銀屑病是一種由多種免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子介導(dǎo)參與的慢性炎癥性免疫性疾病。關(guān)于銀屑病的確切發(fā)病機(jī)制尚未闡明，研究發(fā)現(xiàn)可能與Th1、Th2、Th17、調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(Treg)細(xì)胞、Th22細(xì)胞及Th9細(xì)胞的異常活化并釋放大量細(xì)胞因子有關(guān)。該文圍繞這些免疫細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子主要從近年所發(fā)現(xiàn)的Th細(xì)胞亞群及其相關(guān)細(xì)胞因子角度綜述了近年來與銀屑病T輔助細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展，闡述各個(gè)輔助細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子在銀屑病發(fā)病過程中的作用及關(guān)聯(lián)機(jī)制，以期能幫助筆者更深入地了解銀屑病的發(fā)病機(jī)制并為今后的實(shí)驗(yàn)研究提供依據(jù)。

銀屑??；T輔助細(xì)胞；細(xì)胞因子；作用機(jī)制

T淋巴細(xì)胞根據(jù)表面的分化抗原可分為T輔助細(xì)胞（CD3+CD4+）及細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞（CD3+CD8+），初始CD4+T淋巴細(xì)胞接受抗原刺激的信號(hào)，在不同的條件下可分化成不同的T淋巴細(xì)胞亞群，包括Th1型、Th2型、Th17型、Treg型、Th22型、Th9型，這些細(xì)胞各自具有不同的生物學(xué)功能。銀屑病患者的皮損和外周血中發(fā)現(xiàn)這些T輔助細(xì)胞都有不同程度的改變，而這種改變構(gòu)成了銀屑病免疫紊亂的主要元素。

1 T淋巴細(xì)胞在銀屑病發(fā)病機(jī)制中的作用

1.1 Th1/Th2細(xì)胞 正常機(jī)體內(nèi)，Th1/Th2維持著動(dòng)態(tài)平衡，當(dāng)Th1/Th2平衡失調(diào)時(shí)，即某一細(xì)胞群功能增強(qiáng)，另一方功能受到抑制時(shí)，則稱為“Th1/Th2漂移”。Th1/Th2漂移理論是銀屑病免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制的傳統(tǒng)觀點(diǎn)。以往研究證實(shí)尋常型銀屑病存在Th1分化增強(qiáng)，是典型的Th1漂移性疾病，把細(xì)胞因子環(huán)境從Th1向Th2推動(dòng)會(huì)改善銀屑病炎癥的反應(yīng)[1]。

1.2 Th17細(xì)胞 Th17細(xì)胞是一種新發(fā)現(xiàn)的Th細(xì)胞亞群，因分泌白細(xì)胞介素（IL）-17而得名。20世紀(jì) 90年代單克隆抗體 Stelara（優(yōu)特克單抗Ustekinumab)用于臨床治療銀屑病療效顯著，后來Lee等[2]發(fā)現(xiàn)在銀屑病患者病灶部位高表達(dá)的不是IL-12而是IL-23，因此其提出Stelara之所以能有效治療銀屑病皮損的原因是由于其能抗IL-23。而IL-23與Th17細(xì)胞的分化及增殖密切相關(guān)，Lee等[2]又重新分析了銀屑病患者病灶部位皮膚中T細(xì)胞的分布。研究表明Th17細(xì)胞由IL-6和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGF－β）聯(lián)合誘導(dǎo)分化而來[3]。Kagami等[4]研究發(fā)現(xiàn)維甲酸相關(guān)孤核受體γt(RORγt)、STAT等細(xì)胞內(nèi)信號(hào)與TGF-β1等細(xì)胞外細(xì)胞因子共同作用，能夠誘導(dǎo)Th17細(xì)胞的分化。Th17細(xì)胞表達(dá)IL-23R，能迅速引起Th17細(xì)胞對(duì)由角質(zhì)形成細(xì)胞及DC等細(xì)胞分泌的IL-23的反應(yīng)，從而使活化的Th17細(xì)胞存活并增殖，且大量產(chǎn)生的IL-23與Th17細(xì)胞表達(dá)的IL-23R結(jié)合來維持Th17細(xì)胞存活并大量增殖且同時(shí)分泌促炎性細(xì)胞因子[5]。

Th17細(xì)胞及其分泌的IL-12、IL-22、IL-21、IL-17、TNF-α在銀屑病的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮重要的免疫炎癥作用。Kagami等[4]檢測(cè)發(fā)現(xiàn)銀屑病患者外周血中的Th17細(xì)胞比例較正常人升高，而接受英利昔單抗或依那西普治療的銀屑病患者外周血中的Th17細(xì)胞比例及血清中IL-17水平出現(xiàn)降低。因此Th17細(xì)胞的發(fā)現(xiàn)是銀屑病科學(xué)研究領(lǐng)域中的又一成就，也是當(dāng)代生物制劑研究的里程碑。另外研究發(fā)現(xiàn)IL-23和Th17細(xì)胞形成的IL-23/IL-17軸促進(jìn)了銀屑病的發(fā)生發(fā)展，并對(duì)銀屑病的嚴(yán)重程度起著一定的提示作用[6]。

1.3 Treg細(xì)胞 Treg細(xì)胞是另一類近年來研究發(fā)現(xiàn)的新型的抑制炎癥的Th細(xì)胞亞群。TGF-β可促使初始T淋巴細(xì)胞分化為Treg細(xì)胞，其主要分泌IL-10和TGF-β[3]。Treg細(xì)胞是一組具有免疫抑制作用的細(xì)胞群，表現(xiàn)在Treg細(xì)胞經(jīng)T淋巴細(xì)胞抗原（TCR）刺激活化后，抑制CD4+T和CD8+T淋巴細(xì)胞的增生。Treg對(duì)Th1及Th2細(xì)胞均有抑制作用，但是對(duì)Th1的抑制更加明顯[7]。

Treg細(xì)胞與Th17細(xì)胞都由初始CD4+T淋巴細(xì)胞分化而來,兩者的功能和分化過程相互對(duì)抗，在正常情況下兩者保持平衡。Th17/Treg平衡對(duì)維持機(jī)體免疫平衡至關(guān)重要，其失衡是導(dǎo)致自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制之一[8]。研究發(fā)現(xiàn)在銀屑病患者的皮損中Foxp3+Treg細(xì)胞很容易分化為分泌IL17A的細(xì)胞（Th17）[9]。

張力文等[10]研究表明發(fā)現(xiàn)銀屑病患者的皮損處及外周血的Treg細(xì)胞數(shù)目降低，因此推測(cè)銀屑病患者皮損處和外周血的Treg細(xì)胞受損從而使其自身免疫調(diào)控作用和對(duì)效應(yīng)型T淋巴細(xì)胞的抑制能力下降。另外銀屑病患者的皮損外以及外周血中Th17和Treg細(xì)胞都有所增加，且和疾病的嚴(yán)重程度正相關(guān)，盡管Treg細(xì)胞可以明顯抑制CD4+細(xì)胞的增生和IFN-γ的產(chǎn)生，但CD4+T淋巴細(xì)胞分泌IL-17不受Treg細(xì)胞調(diào)節(jié)[11]。

1.4 Th22細(xì)胞 Th22細(xì)胞是采用流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)的一群獨(dú)立的CD4+記憶性T淋巴細(xì)胞亞群，當(dāng)機(jī)體感染病毒或細(xì)菌等病原體后，能夠激活其他免疫細(xì)胞，幫助機(jī)體控制炎癥對(duì)抗感染，在監(jiān)督和協(xié)調(diào)引起炎癥的免疫細(xì)胞過程中具有重要意義。IL-6和TNF-α可以誘導(dǎo)人初始CD4+T淋巴細(xì)胞向Th22分化。Th22細(xì)胞主要分泌IL-22、TNF-α,還可少量分泌IL-13、IL-10等，其中參與免疫調(diào)節(jié)的主要IL-22，并通過IL-22體現(xiàn)其生物學(xué)特性[12]。

銀屑病患者外周血或者皮損中Th22的含量及比例在皮損中的含量較外周明顯增多，阻斷信號(hào)傳導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄因子3（STAT3）和核轉(zhuǎn)錄因子kappa B（NF－κB）細(xì)胞通路能有效阻止IL-22的分泌[13]。此外還有研究報(bào)道銀屑病患者外周血中的IL-22水平較正常人明顯升高，且與銀屑病病情的嚴(yán)重程度密切相關(guān)[14]。

1.5 Th9細(xì)胞 Veldhoen在2008年通過聚合酶鏈反應(yīng)（Polymerase c hain r eaction，PCR）及細(xì)胞內(nèi)染色等研究手段發(fā)現(xiàn)新型Th細(xì)胞亞群—Th9亞群[15]。Wong等[16]研究證實(shí)TGF-β和IL-4可以促使CD4+T淋巴細(xì)胞分化成Th9細(xì)胞。另外，在Th9細(xì)胞分化過程中干擾素調(diào)節(jié)因子4（Interferon regulatory factor 4，IRF4）也起著重要的作用，IRF4被發(fā)現(xiàn)可直接綁定到IL9啟動(dòng)子[17]。Th9細(xì)胞主要分泌IL-9并通過IL-9來發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)[16]。

Th9細(xì)胞產(chǎn)生的IL-9能增加銀屑病患者皮膚損傷，部分學(xué)者認(rèn)為其通過自身的自分泌和旁分泌的活動(dòng)來影響銀屑病的發(fā)生和發(fā)展[18]。不過Th9細(xì)胞在銀屑病患者外周血中的表達(dá)含量低，其具體的作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

2 Th細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子與銀屑病發(fā)病的關(guān)系

IL-6和TGF-β是誘導(dǎo)初始化CD4+T淋巴細(xì)胞分化的關(guān)鍵因子。TGF-β可誘導(dǎo)Treg的產(chǎn)生，并維持外周Treg細(xì)胞的數(shù)量、功能及表達(dá)，發(fā)揮抑制炎癥作用。但在IL-6存在的情況下，TGF-β一方面促進(jìn)幼稚T淋巴細(xì)胞分化為Th17細(xì)胞，分泌前炎癥因子IL-17；另一方面TGF-β可通過上調(diào)IL-23R的表達(dá)促進(jìn)Th17細(xì)胞發(fā)育成熟，促進(jìn)自身免疫和炎癥的發(fā)生[19]。Treg細(xì)胞與Th17細(xì)胞的轉(zhuǎn)化是機(jī)體的一種生理性調(diào)節(jié)機(jī)制，當(dāng)人體發(fā)生感染時(shí)，抗原呈遞細(xì)胞被抗原活化，隨后其分泌的一系列炎性細(xì)胞因子IL-6及IL-lβ等，可不斷誘導(dǎo)Treg細(xì)胞轉(zhuǎn)化為Th17細(xì)胞，為清除感染產(chǎn)生必需的免疫應(yīng)答。IL-6是維持Th17/Treg平衡的關(guān)鍵細(xì)胞因子，IL-6可使天然型Treg細(xì)胞（nTreg）轉(zhuǎn)化為Th17細(xì)胞，但拮抗誘導(dǎo)型Treg細(xì)胞（iTreg）的分化[20]。

IL-8屬于Cxc類趨化因子，對(duì)中性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞等具有強(qiáng)烈的趨化作用，同時(shí)IL-8還可作為有絲分裂原，通過自分泌或旁分泌方式刺激角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖和分化，在銀屑病的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用[21]。

IL-9主要來源于Th9細(xì)胞，其他CD4+T淋巴細(xì)胞亞群也可分泌。IL-9主要在炎癥反應(yīng)中起到刺激細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)抗凋亡機(jī)制，另外其還具有免疫調(diào)節(jié)功能，IL-9能夠通過肥大細(xì)胞加強(qiáng)Treg細(xì)胞免疫抑制功能，誘導(dǎo)外周免疫耐受[22]。Singh等[23]研究發(fā)現(xiàn)IL-9顯著增強(qiáng)銀屑病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞或CD4+T淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生，推測(cè)IL-9可能主要通過Th17細(xì)胞在銀屑病的炎癥反應(yīng)中起作用。

IL-10是一種由Treg細(xì)胞及Th2分泌的多效抗炎細(xì)胞因子，其具有多效免疫抗炎及調(diào)節(jié)功能，處于免疫調(diào)節(jié)的中心環(huán)節(jié)[24]。尋常型銀屑病患者外周血中Treg細(xì)胞及IL-10數(shù)量較正常人者明顯減少，且進(jìn)行期低于靜止期，而且患者PASI評(píng)分與外周血Treg細(xì)胞比例和IL-10水平均呈現(xiàn)負(fù)性相關(guān)[10]。

IL-17是Th17細(xì)胞產(chǎn)生的標(biāo)志性因子，也是Th17細(xì)胞的主要效應(yīng)因子。在銀屑病等自身免疫疾病的發(fā)展過程中IL-17作為重要的促炎介質(zhì)而發(fā)揮作用。IL-17家族包含IL-17A、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E（即IL－25）、IL-17F。IL-17A和IL-17F具有高度同源性，銀屑病患者皮損中IL-17A較正常人增高。研究發(fā)現(xiàn)IL-17F能誘導(dǎo)IL-8增高，這可能是IL-17F參與銀屑病發(fā)生和發(fā)展的機(jī)制之一[25]。

IL-22是Th17和Th22分泌的重要效應(yīng)因子，在多種炎癥性疾病中發(fā)揮重要作用，參與固有免疫和炎癥反應(yīng)。IL-22在銀屑病中主要作用于角質(zhì)形成細(xì)胞（Keratinocyte cell，KC），其主要生物學(xué)效應(yīng)是促進(jìn)上皮細(xì)胞的分化、增殖及遷移，促進(jìn)炎癥因子的生成，同時(shí)抑制影響上皮分化的相關(guān)蛋白[26]。Kagami等[27]發(fā)現(xiàn)銀屑病患者外周血及皮損中的IL-22水平顯著高于正常人，其含量與病情的嚴(yán)重程度密切相關(guān)，而其他細(xì)胞因子如IFN-γ、TNF-a和IL-17A與病情輕重并無明顯相關(guān)性，提示IL-22是銀屑病發(fā)病的重要致病因子。在重建人表皮模型及動(dòng)物模型中，給以IL-22刺激，均可觀測(cè)到類似于銀屑病的皮膚病理表現(xiàn)，可見到棘層增厚及顆粒層透明角質(zhì)顆粒消失[28]。

IL-23由DC和巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，可激活和Treg細(xì)胞誘導(dǎo)的自身免疫反應(yīng)和慢性炎癥反應(yīng)，是銀屑病重要的致炎因子。Tonel等[29]在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，注射IL-23單抗可以阻斷銀屑病的發(fā)展，證實(shí)IL-23可導(dǎo)致銀屑病的發(fā)展。IL-23不參與CD4+T淋巴細(xì)胞向Th17細(xì)胞分化，它主要是刺激Th17細(xì)胞分泌Th17相關(guān)細(xì)胞因子IL-17A和IL-17F等而發(fā)揮作用[30]。

TNF-α為多效細(xì)胞因子，已有較多研究證實(shí)TNF-α與銀屑病發(fā)病有關(guān)。TNF-α可通過IL-12、IL-23等直接或間接促進(jìn)IFN-γ的產(chǎn)生。TNF-α主要是通過刺激并誘導(dǎo)KC分泌了促炎因子IL-8、S100A7和IL-19等發(fā)揮作用，這些促炎因子已經(jīng)證實(shí)在銀屑病發(fā)病機(jī)制中有重要免疫作用，同時(shí)觀察到TNF-α和IL-17協(xié)同刺激KC，可使這種免疫效應(yīng)加倍[31]。

3 結(jié)語

銀屑病是一種由多種免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子介導(dǎo)參與的慢性炎癥性免疫性疾病。通過靶向p40阻止初始CD4+T淋巴細(xì)胞向Th1和Th17的分化，或通過IL-10使Th1免疫反應(yīng)轉(zhuǎn)向Th2免疫反應(yīng)，或抑制Th22細(xì)胞的活性等都可使銀屑病患者病情得到改善。對(duì)銀屑病中相關(guān)的免疫細(xì)胞和其相關(guān)細(xì)胞因子的深入研究可為臨床提供新的治療思路，同時(shí)也為臨床基因干預(yù)治療、疾病的早期干預(yù)及新藥研發(fā)開辟了新的道路。

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R758.63

A

1672－0709（2017）01-0084－04

2016-06-02）

段行武2012國(guó)家自然科學(xué)基金；李玲玲2014國(guó)家自然科學(xué)基金；張潤(rùn)田2014國(guó)家自然科學(xué)基金；陳廣山2015校自主課題；李玲玲杰出青年人才項(xiàng)目：2016-JYB-XJQ005；李玲玲北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院2016青苗人才計(jì)劃。

李玲玲，E-mail:abcling3238@sina.com