內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參與調(diào)節(jié)心肌缺血/再灌注損傷研究的新進(jìn)展

朱平均，周 浩，胡舜英，陳韻岱

(解放軍總醫(yī)院心血管內(nèi)科，北京 100853)

對(duì)于急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)患者，及時(shí)恢復(fù)缺血心肌的血流量(再灌注治療)是標(biāo)準(zhǔn)治療方法。再灌注治療可以迅速限制梗死面積，改善長(zhǎng)期心肌功能，改變梗死區(qū)的愈合模式，更重要的是可降低死亡率。但是，大量的實(shí)驗(yàn)和臨床證據(jù)證實(shí)再灌注也會(huì)誘導(dǎo)對(duì)心肌的額外損傷，稱為缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion injury，IRI)[1]。IRI發(fā)生機(jī)制復(fù)雜，包括炎癥、氧化應(yīng)激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)和線粒體功能障礙等，它們?cè)贗RI的發(fā)生發(fā)展過程中都發(fā)揮著重要的作用[2]。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum，ER)是參與調(diào)節(jié)細(xì)胞鈣穩(wěn)態(tài)、蛋白質(zhì)折疊和脂質(zhì)合成的重要細(xì)胞器[3]，擾亂其正常功能會(huì)導(dǎo)致ERS。發(fā)生ERS時(shí)，細(xì)胞通過啟動(dòng)未折疊蛋白反應(yīng)(unfolded protein response，UPR)展開防御，包括促進(jìn)細(xì)胞適應(yīng)和存活的機(jī)制；過度刺激則會(huì)啟動(dòng)細(xì)胞死亡程序。大量的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明ERS在IRI中發(fā)揮重要的作用。

1 ERS

1.1 概述

ER是真核細(xì)胞內(nèi)的重要細(xì)胞器，根據(jù)其結(jié)構(gòu)和功能的不同主要分為兩種形式：粗面ER和滑面ER。粗面ER散布著豐富的核糖體，主要負(fù)責(zé)蛋白質(zhì)折疊和翻譯后修飾；滑面ER不具有核糖體，主要負(fù)責(zé)脂質(zhì)和類固醇的生物合成以及Ca2+儲(chǔ)存[4]。ERS是外界有害刺激破壞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)導(dǎo)致未折疊或錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)在ER管腔中蓄積的狀態(tài)[5]。Ca2+平衡紊亂[6]及脂質(zhì)和類固醇生物合成異常[7]均可能進(jìn)一步損害ER功能。ERS可由多種生理和病理因素引起，例如營(yíng)養(yǎng)缺乏、鈣消耗、氧化應(yīng)激、DNA損傷等[8]。發(fā)生ERS時(shí)，細(xì)胞一方面減少蛋白質(zhì)的合成、促進(jìn)錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)降解，另一方面通過上調(diào)分子伴侶的表達(dá)來提高ER蛋白折疊能力，以提高細(xì)胞對(duì)外環(huán)境變化的適應(yīng)能力，保證細(xì)胞存活。在持續(xù)嚴(yán)重的刺激下，ERS就會(huì)啟動(dòng)細(xì)胞死亡程序[9]。

1.2 UPR

ERS激活的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑統(tǒng)稱為UPR[10]，如果沒有特殊說明，通常所說的ERS就是指UPR[11]。URP由3種ER跨膜蛋白介導(dǎo)激活：肌醇必須酶-1α(inositol-requiring enzyme 1α，IRE1α)、活化轉(zhuǎn)錄因子-6(activating transcription factor 6，ATF6)和蛋白激酶R樣ER激酶(protein kinase R-like ER kinase，PERK)。在正常情況下，IRE1α、AFT6和PERK的腔結(jié)構(gòu)域會(huì)與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶葡萄糖調(diào)節(jié)78/免疫球蛋白結(jié)合蛋白(glucose-regulated protein 78/binding immunoglobulin protein，GRP78/BiP)結(jié)合形成復(fù)合物而處于無活性狀態(tài)[12]。發(fā)生ERS時(shí)，管腔內(nèi)增多的未折疊蛋白會(huì)導(dǎo)致GRP78與ATF6和PERK解離，進(jìn)而激活下游信號(hào)通路發(fā)生UPR[13]。與ATF6和PERK不同的是，IRE1α是由ER內(nèi)聚集的未折疊蛋白直接激活[14]。URP分為早期、中期和晚期3個(gè)階段[15]。早期URP的特征主要是蛋白酶體相關(guān)降解增加，總蛋白表達(dá)量下調(diào)，分子伴侶、X盒結(jié)合蛋白1(X box-binding protein-1，XBP-1)和活化轉(zhuǎn)錄因子-4(activating transcription factor 4，ATF4)表達(dá)上調(diào)[16]，通過減少ER的未折疊或錯(cuò)誤折疊蛋白負(fù)荷來緩解ERS。在中期階段，通過激活NF-κB和c-Jun N-末端激酶(Jun-N-terminal kinase，JNK)途徑激活細(xì)胞炎癥反應(yīng)。早中期UPR本質(zhì)上是一種適應(yīng)性應(yīng)答反應(yīng)，通過維持ER內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，提高細(xì)胞對(duì)外界有害刺激的抵抗能力。Vitadello等[17]首先發(fā)現(xiàn)糖調(diào)節(jié)蛋白-94(glucose regulate protein 94，GRP94)的過表達(dá)可以減少缺血心肌細(xì)胞的死亡，證實(shí)了UPR在保護(hù)心肌細(xì)胞中發(fā)揮重要作用。如果外界有害的刺激持續(xù)存在，早中期的UPR不足以緩解未折疊蛋白的負(fù)荷，ERS便會(huì)啟動(dòng)細(xì)胞死亡通路誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。

2 ERS與IRI的關(guān)系

心肌細(xì)胞是一種無再生能力的終末分化細(xì)胞，心肌再灌注治療后，由于IRI的存在，導(dǎo)致原本存活的心肌細(xì)胞死亡，心肌細(xì)胞進(jìn)一步減少，心肌梗死面積進(jìn)一步擴(kuò)大，加重了心功能不全。IRI過程中涉及的程序性細(xì)胞死亡方式主要包括凋亡、自噬和壞死性凋亡。

2.1 ERS與心肌細(xì)胞凋亡的關(guān)系

一旦UPR未能控制未折疊或錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的水平，ERS便會(huì)啟動(dòng)細(xì)胞凋亡信號(hào)通路。目前認(rèn)為ERS引起心肌細(xì)胞凋亡主要包括以下3種途徑。

2.1.1 C/EBP同源蛋白通路 C/EBP同源蛋白(C/EBP homology protein，CHOP)是真核細(xì)胞內(nèi)的一種轉(zhuǎn)錄因子，屬于C/EBP家族成員。正常情況下，CHOP蛋白的表達(dá)量非常低，ERS的3種啟動(dòng)蛋白(IRE1α、ATF6和PERK)均可上調(diào)CHOP的表達(dá)。大量研究也表明CHOP蛋白在ERS誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡中發(fā)揮關(guān)鍵作用[18]。IRI可以通過激活ERS，上調(diào)CHOP蛋白的表達(dá)，促進(jìn)心肌細(xì)胞的凋亡[19]。CHOP的過表達(dá)可以調(diào)節(jié)多種下游促調(diào)亡和抗凋亡基因的表達(dá)，如在Bcl-2家族蛋白中下調(diào)Bcl-2，上調(diào)BAX、Bim和Puma；增加生長(zhǎng)停滯與 DNA 損害可誘導(dǎo)蛋白34(growth arrest and DNA damage-inducible protein 34，GADD34)、ER氧化還原酶-1α(endoplasmic reticulum oxidoreductase-1α，ERO1α)、死亡受體5(death receptor 5，DR5)等的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞的凋亡。CHOP介導(dǎo)的GADD34的活化可以上調(diào)蛋白磷酸酶-1(protein phosphatase 1，PP1)的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)真核細(xì)胞翻譯起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α，elF2α) 的去磷酸化，解除對(duì)蛋白翻譯的抑制作用，導(dǎo)致更多的未折疊的蛋白質(zhì)在ER中積累，并且同時(shí)上調(diào)mRNA編碼的促凋亡蛋白的表達(dá)[20]。ERO1α的過表達(dá)可以通過肌醇三磷酸受體(inositol triphosphate receptor，IP3R)促進(jìn)ER中Ca2+的釋放，通過不同的機(jī)制觸發(fā)細(xì)胞凋亡[9]。DR5則可以通過caspase-8誘發(fā)細(xì)胞凋亡[21]。有研究表明[22,23]，經(jīng)由CHOP蛋白調(diào)節(jié)的miR-221 和miR-708在調(diào)控細(xì)胞凋亡的進(jìn)程中也發(fā)揮著重要作用。

2.1.2 IRE1α-凋亡信號(hào)激酶1-JNK通路 IRE1α作為UPR的啟動(dòng)蛋白之一，是哺乳動(dòng)物UPR中最保守的分支通路，具有兩種酶活性結(jié)構(gòu)域：絲氨酸/蘇氨酸激酶結(jié)構(gòu)域和內(nèi)切核糖核酸酶(RNase)結(jié)構(gòu)域[24]。發(fā)生ERS時(shí)，管腔內(nèi)的未折疊或錯(cuò)誤折疊蛋白直接結(jié)合并活化IRE1α，活化的IRE1α通過募集腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子-2(tumor necrosis factor receptor associated factor 2，TRAF2)和凋亡信號(hào)激酶-1(apoptotic-signaling kinase-1，ASK1)，由IRE1-TRAF2-ASK1復(fù)活物激活JNK[25]。在IRI中，活化的JNK可以促進(jìn)心肌細(xì)胞凋亡發(fā)生[26]?；罨腏NK與Bcl-2家族的各種成員的磷酸化相關(guān)聯(lián)，例如通過磷酸化抑制Bcl-2 和Bcl-XL的活性，上調(diào)Bim和Bid的活性，最終促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

2.1.3 caspase-12通路 caspase-12屬于半胱天冬酶家族，caspase-12通路被認(rèn)為是一種ER特異性、非線粒體依賴途徑的凋亡通路，在ERS誘發(fā)的心肌細(xì)胞凋亡中也發(fā)揮著重要作用[26]。在正常情況下，caspase-12與ER膜結(jié)合或與TRAF2形成復(fù)合物而處于無活性狀態(tài)。嚴(yán)重ERS可以直接誘導(dǎo)caspase-12從ER膜上解離并激活[27]，也可以通過Ca2+/鈣蛋白酶(calpain)的方式激活caspase-12，還可以通過IRE1s-TRAF2 復(fù)合物介導(dǎo)的通路激活caspase-12[28]?；罨腸aspase-12會(huì)裂解活化caspase-9，進(jìn)而裂解活化caspase-3促進(jìn)細(xì)胞凋亡[29]。

ERS誘發(fā)凋亡的3條通路既可以獨(dú)立發(fā)揮作用，也存在交互促進(jìn)作用。在IRI中，針對(duì)ERS誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡進(jìn)行了大量的藥物實(shí)驗(yàn)，近年研究發(fā)現(xiàn)：骨化三醇、22(R)-羥基膽固醇、丙泊酚、阿托伐他汀、Apelin-13等通過降低CHOP、caspase-12、GRP78等蛋白的表達(dá)，抑制ERS和ERS相關(guān)凋亡通路，減少心肌細(xì)胞凋亡，為改善IRI提供了新的治療途徑[5,26,30,31]。

2.2 ERS與自噬的關(guān)系

自噬是將細(xì)胞大分子和細(xì)胞器成分螯合在雙膜囊泡內(nèi)并遞送至溶酶體用于降解和再循環(huán)的過程，是正常生理過程和防御機(jī)制。生理?xiàng)l件下，自噬活性處于較低水平，主要用以維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)。自噬是在研究酵母菌的過程發(fā)現(xiàn)的，隨后在哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)也發(fā)現(xiàn)了自噬[32]。自噬同凋亡一樣，在維持心肌細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)方面都發(fā)揮著重要的作用。在IRI中，自噬會(huì)被激活上調(diào)[33]。在缺血期，自噬可以清除損傷的細(xì)胞器和促進(jìn)再循環(huán)，因此自噬水平增加可以促進(jìn)細(xì)胞存活；然而在再灌注期，自噬水平持續(xù)增加可以導(dǎo)致心肌細(xì)胞的死亡。因此自噬對(duì)于心肌細(xì)胞的存活發(fā)揮著雙重作用。ERS會(huì)導(dǎo)致兩種蛋白質(zhì)降解途徑，經(jīng)由ER相關(guān)降解(ER-associated degradation，ERAD)介導(dǎo)的泛素-蛋白酶體的激活和通過自噬介導(dǎo)的溶酶體蛋白降解[34]。ERAD是將未折疊或錯(cuò)誤折疊的蛋白逆轉(zhuǎn)運(yùn)至胞質(zhì)，然后被蛋白酶體泛素化和降解。當(dāng)未折疊或錯(cuò)誤折疊的蛋白超過ER的處理能力，自噬就會(huì)被誘導(dǎo)激活，作為次級(jí)反應(yīng)降解累積的蛋白質(zhì)，從而減輕ER的負(fù)荷。雖然ERAD被認(rèn)為是在ERS的背景下去除未折疊或錯(cuò)誤折疊蛋白質(zhì)的主要機(jī)制，許多研究也表明ERS同樣可以激活自噬。

IRI過程中，ERS激活誘導(dǎo)自噬的機(jī)制非常復(fù)雜，主要包括以下幾種。(1)Ca2+途徑。ERS時(shí)從ER釋放的Ca2+可以通過刺激CamKK/AMPK通路抑制mTOR，從而誘導(dǎo)自噬[35]，也可以通過激活蛋白激酶C(protein kinase C，PKC)以mTOR非依賴性通路誘導(dǎo)自噬[36]。(2)IRE1α通路。IRE1α通過聯(lián)合TRAF2活化JNK，活化的JNK可以磷酸化Bcl-2，進(jìn)而釋放Beclin-1誘導(dǎo)自噬[37]。經(jīng)由活化的IRE1α剪切過的XBP1 mRNA可以觸發(fā)Beclin-1的轉(zhuǎn)錄激活，從而誘導(dǎo)自噬[38]。(3)PERK途徑。PERK-eIF2α途徑可以直接上調(diào)Atg12的表達(dá)調(diào)控自噬，也可以通過調(diào)節(jié)下游的轉(zhuǎn)錄因子ATF4和CHOP的表達(dá)調(diào)控自噬，其中ATF4上調(diào)LC3和ATG基因的表達(dá)，CHOP蛋白上調(diào)Atg-2的表達(dá)[39,40]。在IRI中，自噬對(duì)于心肌細(xì)胞死亡的調(diào)控并非簡(jiǎn)單的“開”和“關(guān)”的關(guān)系，自噬水平不同發(fā)揮的細(xì)胞效應(yīng)也不同，對(duì)于自噬干預(yù)的時(shí)機(jī)可能會(huì)影響最終的效果。目前，關(guān)于IRI時(shí)自噬機(jī)制的研究已經(jīng)取得了很大的進(jìn)展，未來的研究可能需要我們?nèi)ふ液线m的干預(yù)靶點(diǎn)和藥物。

2.3 ERS與壞死性凋亡的關(guān)系

壞死性凋亡是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞死亡方式，是由受體相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting protein kinase 1，RIPK1)、PIPK3和混合譜系激酶域樣蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein，MLKL)共同作用的非caspase依賴途徑的程序性細(xì)胞死亡[41]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)壞死性凋亡在心肌IRI中也發(fā)揮著重要的作用，壞死性凋亡的特異性阻斷劑Nec-1可以明顯減小再灌注治療后的心肌梗死面積[42]和血漿乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)的相對(duì)水平，提高心臟射血分?jǐn)?shù)(ejection fractions，EF)[41]。ERS除了可以誘發(fā)細(xì)胞發(fā)生凋亡外、還可以誘發(fā)細(xì)胞發(fā)生壞死性凋亡。Saveljeva等[43]研究發(fā)現(xiàn)ERS可以通過TNFR1依賴途徑誘導(dǎo)H929細(xì)胞發(fā)生壞死性凋亡。Zhao等[44]研究發(fā)現(xiàn)，在肥厚性心肌病模型中，ERS和壞死性凋亡之間存在交互促進(jìn)作用，在大鼠心肌細(xì)胞中抑制ERS可以減少RIPKs的表達(dá)，同時(shí)，抑制壞死性凋亡也會(huì)下調(diào)ERS特異性蛋白GRP78的表達(dá)。研究證實(shí)，在人肺癌細(xì)胞A549中，利用CHOP蛋白的特異性激活劑LGH00168可以誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生壞死性凋亡。因此，CHOP蛋白可能在ERS和壞死性凋亡的相互作用中發(fā)揮著核心作用。但是，現(xiàn)階段針對(duì)ER和壞死性凋亡之間的研究仍然不足，盡管在其他研究中證實(shí)了壞死性凋亡對(duì)于凋亡的調(diào)節(jié)作用，但在心肌再灌注損傷中還是一片空白。因此，在未來研究中，聚焦于ERS條件下的壞死性凋亡和凋亡之間的交互作用可能為保護(hù)IRI提供重要的治療靶點(diǎn)。

3 小 結(jié)

ERS通過調(diào)節(jié)多種下游信號(hào)通路的蛋白表達(dá)，最終決定細(xì)胞的生存狀態(tài)，在IRI中發(fā)揮重要的作用。關(guān)于ERS和IRI之間關(guān)系的研究較多，但這仍然是一個(gè)有爭(zhēng)議的話題。大多數(shù)研究是在動(dòng)物或者細(xì)胞的模型中進(jìn)行，不能完全代表人類。盡管發(fā)現(xiàn)了調(diào)節(jié)ERS以控制IRI的藥物，但仍需要進(jìn)一步的研究來確定ERS是否是治療IRI的準(zhǔn)確途徑。更好地理解參與IRI的ERS蛋白通路可以為IRI的治療提供潛在靶點(diǎn)。

【參考文獻(xiàn)】

[2] Kim I, Xu W, Reed JC. Cell death and endoplasmic reticulum stress: disease relevance and therapeutic opportunities[J]. Nat Rev Drug Discov, 2008, 7(12): 1013-1030. DOI: 10.1038/nrd2755.

[3] 沈明志, 李冬云, 范 利, 等. 銀杏葉提取物通過Wnt減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞損傷[J]. 中華老年多器官疾病雜志, 2015, 14(3): 220-224. DOI: 10.11915/j.issn.1671-5403.2015.03.050.

Shen MZ, Li DY, Fan L,etal. EGB attenuates endoplasmic reti-culum stress-induced injury in cultured rat neonatal cardiomyocytes through Wnt signal pathway[J]. Chin J Mult Organ Dis Elderly, 2015, 14(3): 220-224. DOI: 10.11915/j.issn.1671-5403.2015.03.050.

[4] Huang N, Yu Y, Qiao J. Dual role for the unfolded protein response in the ovary: adaption and apoptosis[J]. Protein Cell, 2016[Epub ahead of print].DOI:10.1007/s13238-016-0312-3.

[5] Liu MQ, Chen Z, Chen LX. Endoplasmic reticulum stress: a novel mechanism and therapeutic target for cardiovascular diseases[J]. Acta Pharmacol Sin, 2016, 37(4): 425-443. DOI: 10.1038/aps.2015.145.

[6] Zhou Y, Sun P, Wang T,etal. Inhibition of calcium influx reduces dysfunction and apoptosis in lipotoxic pancreatic β-Cellsviaregulation of endoplasmic reticulum stress[J]. PLoS One, 2015, 10(7): e0132411. DOI: 10.1371/journal.pone.0132411.

[7] Cui W, Ma J, Wang X,etal. Free fatty acid induces endoplasmic reticulum stress and apoptosis of β-cells by Ca2+/calpain-2 pathways[J]. PLoS One, 2013, 8(3): e59921. DOI: 10.1371/journal.pone.0059921.

[8] Kaufman RJ. Orchestrating the unfolded protein response in health and disease[J]. J Clin Invest, 2002, 110(10): 1389-1398. DOI: 10.1172/JCI16886.

[9] Sano R, Reed JC. ER stress-induced cell death mechanisms[J]. Biochim Biophys Acta, 2013, 1833(12): 3460-3470.DOI: 10.1016/j.bbamcr.2013.06.028.

[10] Díaz-Villanueva JF, Díaz-Molina R, García-González V. Protein folding and mechanisms of proteostasis[J]. Int J Mol Sci, 2015, 16(8): 17193-17230. DOI: 10.3390/ijms160817193.

[11] 劉寶琴, 王華芹. 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與未折疊蛋白反應(yīng)的研究進(jìn)展[J]. 中華腫瘤防治雜志, 2010, 17(11): 869-872.

Liu BQ, Wang HQ. Endoplasmic reticulum and unfolded protein response[J]. Chin J Cancer Prev Treat, 2010, 17(11): 869-872.

[12] Braakman I, Hebert DN. Protein folding in the endoplasmic reticulum[J]. Cold Spring Harb Perspect Biol, 2013, 5(5): a013201. DOI: 10.1101/cshperspect.a013201.

[13] Tabas I, Ron D. Integrating the mechanisms of apoptosis induced by endoplasmic reticulum stress[J]. Nat Cell Biol, 2011, 13(3): 184-190. DOI: 10.1038/ncb0311-184.

[14] Gardner BM, Walter P. Unfolded proteins are ire1-activating ligands that directly induce the unfolded protein response[J]. Science, 2011, 333(6051): 1891-1894. DOI: 10.1126/science.1209126.

[15] Hotamisligil GS, Davis RJ. Cell signaling and stress responses[J]. Cold Spring Harb Perspect Biol, 2016, 8(10). pii: a006072. DOI: 10.1101/cshperspect.a006072.

[16] Oslowski CM, Urano F. Measuring ER stress and the unfolded protein response using mammalian tissue culture system[J]. Methods Enzymol, 2011, 490: 71-92. DOI: 10.1016/b978-0-12-385114-7.00004-0.

[17] Vitadello M, Penzo D, Petronilli V,etal. Overexpression of the stress protein Grp94 reduces cardiomyocyte necrosis due to calcium overload and simulated ischemia[J]. FASEB J, 2003, 17(8): 923-925. DOI: 10.1096/fj.02-0644fje.

[18] Ron D, Walter P. Signal integration in the endoplasmic reticulum unfolded protein response[J]. Nat Rev Mol Cell Biol, 2007, 8(7): 519-529. DOI: 10.1038/nrm2199.

[19] Guo J, Bian Y, Bai R,etal. Globular adiponectin attenuates myocardial ischemia/reperfusion injury by upregulating endoplasmic reticulum Ca2+-ATPase activity and inhibiting endoplasmic reticulum stress[J]. J Cardiovasc Pharmacol, 2013, 62(2): 143-153. DOI: 10.1097/FJC.0b013e31829521af.

[20] Novoa I, Zeng H, Harding HP,etal. Feedback inhibition of the unfolded protein response by GADD34-mediated dephosphorylation of eIF2α[J]. J Cell Biol, 2001, 153(5): 1011-1022.

[21] Lu M, Lawrence DA, Marsters S,etal. Opposing unfolded-protein-response signals converge on death receptor 5 to control apoptosis[J]. Science, 2014, 345(6192): 98-101. DOI: 10.1126/science.1254312.

[22] Chitnis NS, Pytel D, Bobrovnikova-Marjon E,etal. miR-211 is a prosurvival microRNA that regulates chop expression in a PERK-dependent manner[J]. Mol Cell, 2012, 48(3): 353-364. DOI: 10.1016/j.molcel.2012.08.025.

[23] Behrman S, Acostaalvear D, Walter P. A CHOP-regulated microRNA controls rhodopsin expression[J]. J Cell Biol, 2011, 192(6): 919-927. DOI: 10.1083/jcb.201010055.

[24] Patil C, Walter P. Intracellular signaling from the endoplasmic reticulum to the nucleus: the unfolded protein response in yeast and mammals[J]. Curr Opin Cell Biol, 2001, 13(3): 349-355.

[25] Sekine Y, Takeda K, Ichijo H. The ASK1-MAP kinase signaling in ER stress and neurodegenerative diseases[J]. Curr Mol Med, 2006, 6(1): 87-97.

[26] Tao J, Zhu W, Li Y,etal. Apelin-13 protects the heart against ischemia-reperfusion injury through inhibition of ER-dependent apoptotic pathways in a time-dependent fashion[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2011, 301(4): H1471-H1486. DOI: 10.1152/ajpheart.00097.2011.

[27] Liu H, Wang Z, Nowicki MJ. Caspase-12 mediates carbon tetrachloride-induced hepatocyte apoptosis in mice[J]. World J Gastroenterol, 2014, 20(48): 18189-18198. DOI: 10.3748/wjg.v20.i48.18189.

[28] Yoneda T, Imaizumi K, Oono K,etal. Activation of caspase-12, an endoplastic reticulum (ER) resident caspase, through tumor necrosis factor receptor-associated factor 2-dependent mechanism in response to the ER stress[J]. J Biol Chem, 2001, 276(17): 13935-13940. DOI: 10.1074/jbc.M010677200.

[29] Li X, Zhang X, Li F,etal. 14-3-3 mediates apelin-13-induced enhancement of adhesion of monocytes to human umbilical vein endothelial cells[J]. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai), 2010, 42(6): 403-409. DOI: 10.1093/abbs/gmq036.

[30] Shin IW, Jang IS, Lee SH,etal. Propofol has delayed myocardial protective effects after a regional ischemia/reperfusion injury in aninvivorat heart model[J]. Korean J Anesthesiol, 2010, 58(4): 378-382. DOI: 10.4097/kjae.2010.58.4.378.

[31] Song XJ, Yang CY, Liu B,etal. Atorvastatin inhibits myocardial cell apoptosis in a rat model with post-myocardial infarction heart failure by downregulating ER stress response[J]. Int J Med Sci, 2011, 8(7): 564-572.

[32] Mizushima N, Komatsu M. Autophagy: renovation of cells and tissues[J]. Cell, 2011, 147(4): 728-741. DOI: 10.1016/j.cell.2011.10.026.

[33] Gustafsson AB, Gottlieb RA. Eat your heart out: role of autophagy in myocardial ischemia/reperfusion[J]. Autophagy, 2008, 4(4): 416-421.

[34] Bernales S, McDonald KL, Walter P. Autophagy counterbalances endoplasmic reticulum expansion during the unfolded protein response[J]. PLoS Biol, 2006, 4(12): e423. DOI: 10.1371/journal.pbio.0040423.

[35] H?yer-Hansen M, Bastholm L, Szyniarowski P,etal. Control of macroautophagy by calcium, calmodulin-dependent kinase kinase-beta, and Bcl-2[J]. Mol Cell, 2007, 25(2): 193-205. DOI: 10.1016/j.molcel.2006.12.009.

[36] Sakaki K, Kaufman RJ. Regulation of ER stress-induced macroautophagy by protein kinase C[J]. Autophagy, 2008, 4(6): 841-843.

[37] Pattingre S, Tassa A, Qu X,etal. Bcl-2 antiapoptotic proteins inhibit beclin 1-dependent autophagy[J]. Cell, 2005, 122(6): 927-939. DOI: 10.1016/j.cell.2005.07.002.

[38] Margariti A, Li H, Chen T,etal. XBP1 mRNA splicing triggers an autophagic response in endothelial cells through BECLIN-1 transcriptional activation[J]. J Biol Chem, 2013, 288(2): 859-872. DOI: 10.1074/jbc.M112.412783.

[39] Kouroku Y, Fujita E, Ueno T,etal. ER stress (PERK/eIF2alpha phosphorylation) mediates the polyglutamine-induced LC3 conversion, an essential step for autophagy formation[J]. Cell Death Differ, 2007, 14(2): 230-239. DOI:10.1038/sj.cdd.4401984.

[40] Harding HP, Zhang Y, Bertolotti A,etal. Perk is essential for translational regulation and cell survival during the unfolded protein response[J]. Mol Cell, 2000, 5(5): 897-904.

[41] Oerlemans MI, Liu J, Arslan F,etal. Inhibition of RIP1-dependent necrosis prevents adverse cardiac remodeling after myocardial ischemia-reperfusioninvivo[J]. Basic Res Cardiol, 2012, 107(4): 270. DOI: 10.1007/s00395-012-0270-8.

[42] Koshinuma S, Miyamae M, Kaneda K,etal. Combination of necroptosis and apoptosis inhibition enhances cardioprotection against myocardial ischemia-reperfusion injury[J]. J Anesth, 2014, 28(2): 235-241. DOI: 10.1007/s00540-013-1716-3.

[43] Saveljeva S, Mc Laughlin SL, Vandenabeele P,etal. Endoplasmic reticulum stress induces ligand-independent TNFR1-mediated necroptosis in L929 cells[J]. Cell Death Dis, 2015, 6(1): e1587. DOI: 10.1038/cddis.2014.548.

[44] Zhao M, Lu L, Lei S,etal. Inhibition of receptor interacting protein kinases attenuates cardiomyocyte hypertrophy induced by palmitic acid[J]. Oxid Med Cell Longev, 2016, 2016: 1451676. DOI: 10.1155/2016/1451676.