設(shè)施條件下白靈菇品質(zhì)影響因子研究

張紅剛，張勇，肖晉川，郭尚，劉欣，南曉潔

（山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所，山西太原030031）

設(shè)施條件下白靈菇品質(zhì)影響因子研究

張紅剛，張勇，肖晉川，郭尚，劉欣，南曉潔

（山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所，山西太原030031）

研究了設(shè)施條件下不同pH值和不同培養(yǎng)料配方2種因素對白靈菇菌絲和子實體生長的影響，通過對菌絲的生長以菌餅萌生天數(shù)、平均每日菌絲生長長度、菌絲長勢進(jìn)行多重比較，子實體則以菌蓋厚度、菌蓋直徑、菌柄長度進(jìn)行比較，以篩選出最適宜白靈菇菌絲和子實體生長的pH值范圍和培養(yǎng)料配方。結(jié)果表明，pH值在6.5～7.5均適宜白靈菇菌絲和子實體的生長，白靈菇菌絲和子實體在培養(yǎng)料以棉籽殼為主料的配方中生長較好。

白靈菇；溫室；pH值；栽培料；品質(zhì)

白靈菇屬于真菌門擔(dān)子菌綱傘菌目側(cè)耳科側(cè)耳屬，由于其形狀近似靈芝，子實體為純白色，所以被稱為白靈菇[1]。白靈菇菌絲生長階段周期短、可控性較強(qiáng)且容易操作和觀察，因此，目前對白靈菇菌絲生長條件的研究比較深入。其碳氮、pH值及無機(jī)鹽的最佳應(yīng)用研究等均有報道，但設(shè)施條件下白靈菇品質(zhì)影響因子的相關(guān)性研究報道則較少[2]。影響白靈菇菌絲和子實體生長發(fā)育的有溫度、濕度、酸堿度、空氣、光線等因子[3]，菌絲的培養(yǎng)是獲得子實體高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的基礎(chǔ)，而人們往往在實際培養(yǎng)過程中容易忽視菌絲的培養(yǎng)環(huán)境[4]，常常導(dǎo)致栽培失敗。近年來，在山西省部分地區(qū)充分利用玉米芯資源豐富的優(yōu)勢，大力新建和改造日光溫室，用以栽培白靈菇，這為發(fā)展地區(qū)經(jīng)濟(jì)、增加農(nóng)民收入作出了積極和巨大的貢獻(xiàn)[5]。

本試驗于2015年在山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所實驗室及榆次區(qū)莊子鎮(zhèn)試驗基地日光溫室，采用不同pH值和栽培料配方對白玉1號菌株菌絲和子實體生長的情況進(jìn)行了研究，以篩選出適宜白靈菇菌絲和子實體生長的pH值范圍和培養(yǎng)料配方，為設(shè)施條件下科學(xué)栽培白靈菇提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株白玉1號，由山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所提供。

1.1.2 基礎(chǔ)培養(yǎng)基馬鈴薯200 g，胡蘿卜20 g，葡萄糖5 g，麥芽糖10 g，蔗糖10 g，蛋白胨3 g，酵母膏3 g，瓊脂15 g，磷酸二氫鉀2 g，硫酸鎂1 g，純凈水1 L，pH值自然。

1.1.3 栽培種配方麥粒800 g，木屑200 g，石膏120 g，碳酸鈣30 g，水1 L[6]。

1.1.4 培養(yǎng)料配方配方1.棉籽殼56%，麩皮30%，玉米粉12%，石灰1%，石膏1%；配方2.玉米芯80%，麩皮14%，豆餅4%，石灰1%，石膏1%；配方3.木屑75%，麩皮18%，玉米粉5%，石灰1%，石膏1%；配方4.棉籽殼45%，玉米芯45%，麩皮5%，豆餅粉3%，石灰1%，石膏1%；配方5.棉籽殼45%，木屑30%，麩皮18%，玉米粉5%，石灰1%，石膏1%；配方6.玉米芯45%，木屑30%，麩皮18%，豆餅粉5%，石灰1%，石膏1%[7]。

1.1.5 儀器pH計、培養(yǎng)皿、電子天平、高壓滅菌鍋、恒溫箱等。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)基不同pH值對白靈菇菌絲和子實體生長的影響

1.2.1.1 培養(yǎng)基pH值梯度的設(shè)定pH值設(shè)4.0，4.5，5.0，5.5，6.0，6.5，7.0，7.5，8.0等9個梯度，分別用0.1 mol/L的HCl和NaOH溶液調(diào)節(jié)，用酸度儀定準(zhǔn)[8]。

1.2.1.2 培養(yǎng)基制作及pH值調(diào)節(jié)將馬鈴薯表面的泥土沖洗干凈，用刮皮刀去皮，挖去已經(jīng)發(fā)芽的芽眼，切成厚度約為2 mm的薄片，稱取200 g[9]。洗凈去皮的胡蘿卜，同樣切成2 mm薄片，稱取20 g。然后與切好的土豆薄片同放入1 L水中，煮沸15～20 min，至馬鈴薯和胡蘿卜同時酥而不爛時，用8層紗布過濾。濾渣倒掉，將濾液重新放入鍋中加熱，添加水使之保持在1 L。加入酵母膏3 g，用玻璃棒攪拌至溶化，隨后依次加入葡萄糖5 g、麥芽糖10 g、蔗糖10 g，待其溶化后加入瓊脂粉20 g，攪拌至其溶化，再加入磷酸二氫鉀2 g和硫酸鎂1 g，完全溶解后平均灌入9個500mL的錐形瓶中。分別用0.1mol/L的HCl和NaOH溶液調(diào)節(jié)pH值為4.0，4.5，5.0，5.5，6.0，6.5，7.0，7.5，8.0等9個梯度，用酸度儀定準(zhǔn)，最后加硅膠塞（用報紙包裹硅膠塞一端[10]）。

標(biāo)記好每個錐形瓶的培養(yǎng)基名稱、pH值和制作日期。于高溫滅菌鍋121.6℃中滅菌30～45 min，滅菌后用HANNA pH211型測定儀再次分別測定培養(yǎng)基pH值[11]，移入超凈工作臺上。

1.2.1.3 平板制作倒平板并依次編號，每個pH值做3個重復(fù)的平板，平板于25～30℃環(huán)境下放置24 h，確認(rèn)無污染后接入等體積的母種菌塊，并按操作規(guī)定放在培養(yǎng)皿中間。接種后放置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，觀察并記錄不同培養(yǎng)皿內(nèi)菌絲生長情況。

1.2.1.4 菌絲生長速率的測定在白靈菇菌絲生長階段，觀察菌絲的生長天數(shù)，每隔1 d測定1次菌絲長度，菌絲生長速度=菌絲總生長長度/天數(shù)。生長勢按情況分為4級，分別用“+”（菌絲長勢較弱、稀疏）、“++”（菌絲長勢一般、略密）、“+++”（菌絲長勢較好、稍壯、稠密）、“++++”（菌絲長勢很旺盛、粗壯、稠密）表示[12]。

1.2.2 不同培養(yǎng)料配方對白靈菇菌絲及子實體生長的影響

1.2.2.1 菌種培養(yǎng)母種培養(yǎng)：方法同平板培養(yǎng)基制作，將基礎(chǔ)培養(yǎng)基配制溶解后灌入180 mm× 180 mm的玻璃試管中，約為試管容積的1/3，加硅膠塞，每7支扎成一捆，用報紙包裹硅膠塞一端，豎直放入高壓鍋中滅菌[13]。121.6℃條件下，壓力升到0.15 MPa時滅菌30 min。當(dāng)壓力表降至0時，打開鍋蓋，趁瓊脂未凝固時擺成斜面。將試管在25～30℃條件下培養(yǎng)24 h，確認(rèn)無污染時即可使用。

將制好的斜面放入接種箱，用酒精消毒后進(jìn)行無菌接種，接完一個品種后立即貼上標(biāo)簽，于溫度25～27℃、濕度50%的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

原種培養(yǎng)：栽培種培養(yǎng)基按麥粒1 000 g，石膏120g，碳酸鈣30g，水1L的比例配制后裝于17cm× 35cm×0.05cm的聚丙烯塑料袋，于0.12～0.14MPa條件下滅菌1.5 h后，冷卻至25℃，于接種箱內(nèi)兩端袋口接種母種，移至潔凈、通風(fēng)的培養(yǎng)室內(nèi)避光培養(yǎng)[14]。菌絲長滿袋后，在溫度為20～25℃、相對濕度70%～75%的環(huán)境下繼續(xù)培養(yǎng)7 d，即可接種使用。

1.2.2.2 栽培袋的制作按照1.1.2中各培養(yǎng)料配方，將培養(yǎng)料加水拌勻（含水量60%～65%）后裝入17 cm×35 cm×0.05 cm的聚丙烯塑料袋[15]，設(shè)20袋為一個處理，3次重復(fù)。每個袋裝料1 300 g。菌袋于0.12～0.14 MPa條件下滅菌1.5 h后，冷卻至25℃左右，于接種箱內(nèi)兩端袋口接種，潔凈通風(fēng)的培養(yǎng)室（溫度23℃左右，空氣濕度70%左右）內(nèi)避光培養(yǎng)；菌絲長滿袋后，在溫度20～25℃、濕度70%～75%的環(huán)境下繼續(xù)培養(yǎng)30～40 d，達(dá)到生理成熟后，將菌袋移入出菇室培養(yǎng)出菇[16]。

1.2.2.3 出菇管理和采收本試驗出菇在設(shè)施大棚內(nèi)進(jìn)行，溫、光、濕等環(huán)境條件可控，標(biāo)記并隨機(jī)擺于正常出菇架，采取常規(guī)出菇管理方法[17]。待原基形成蠶豆大小時應(yīng)及時進(jìn)行疏蕾，每個菌袋留1～2個比較健壯的菇蕾。當(dāng)菇蕾長到乒乓球大小時，將塑料袋口折至料面以下，培養(yǎng)條件調(diào)整為溫度13～17℃，空氣相對濕度85%左右，光照強(qiáng)度300～1 000 lx，每天通風(fēng)2次，每次30 min。采收標(biāo)準(zhǔn)是菌蓋開始平展，邊緣內(nèi)卷。

1.2.2.4 菌絲及子實體評定標(biāo)準(zhǔn)記錄測定6個栽培料配方中白靈菇菌絲的生長速度、長勢、接種至長滿袋時間以及白靈菇子實體菌蓋橫徑、菌蓋縱徑、菌蓋厚度、菌柄粗度、平均單菇質(zhì)量、子實體產(chǎn)量等。

1.2.3 培養(yǎng)料不同pH值對白靈菇子實體生長的影響

1.2.3.1 培養(yǎng)料pH值梯度的設(shè)定培養(yǎng)料pH值設(shè)5.5，6.0，6.5，7.0，7.5，8.0共6個梯度，分別用石灰水和醋酸溶液調(diào)節(jié)，用酸度儀定準(zhǔn)。

1.2.3.2 培養(yǎng)料制作根據(jù)1.2.2中不同培養(yǎng)料配方對白靈菇菌絲及子實體生長的影響試驗中的最佳培養(yǎng)料配方來配制試驗配方。

培養(yǎng)料配制參照1.2.2中栽培袋制作方法，通過在培養(yǎng)料制作過程中添加石灰水和醋酸溶液來調(diào)節(jié)培養(yǎng)料pH值，用酸度儀定準(zhǔn)。設(shè)10袋為一個處理，3次重復(fù)。

1.2.3.3 子實體生長情況測定在白靈菇子實體生長期間，觀察子實體生長的天數(shù)及色澤，用游標(biāo)卡尺每天測一次子實體的菌蓋厚度、菌蓋直徑、菌柄長度、菌柄直徑，并記錄下來。最后計算出白靈菇子實體每個pH值10個菇袋的子實體各項目的平均值。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2003，SPSS軟件，對試驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計處理與分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 培養(yǎng)基不同pH值對白靈菇菌絲和子實體生長的影響

由表1可知，pH值在6.5～7.5時菌餅生長較快，其中，當(dāng)pH值為7時用時最短，在此區(qū)間菌絲生長也較快、長勢較好；在pH值分別為7.5，7.0時，菌絲的日生長量較大，菌絲長勢較好。由此得出，pH值在6.5～7.5時最適宜白靈菇菌絲生長。

表1 培養(yǎng)基不同pH值對白靈菇菌絲生長的影響

由表2可知，pH值在6.5～7.5時白靈菇子實體色澤好、菇形優(yōu)，產(chǎn)量高、菇質(zhì)厚。在每個pH值梯度10個栽培袋長出的白靈菇子實體中，當(dāng)pH值為7.5時，菌蓋厚度、菌柄長度、菌柄直徑及產(chǎn)量最大。當(dāng)pH值為7時，菌蓋橫徑及縱徑、菌柄直徑均最大，色澤最好。由此得出，當(dāng)pH值在6.5～7.5時較適宜白靈菇子實體生長。

表2 培養(yǎng)料不同pH值對白靈菇子實體生長的影響

2.2 使用不同的栽培料配方對白靈菇菌絲和子實體生長的影響

從表3可以看出，不同配方培養(yǎng)料的白靈菇菌絲生長速度間差異達(dá)極顯著水平。進(jìn)一步作新復(fù)極差測驗，配方1培養(yǎng)料的菌絲生長速度較快，配方4和配方5次之，配方2和配方3較慢；配方1培養(yǎng)料栽培的白靈菇菌絲較濃密、粗壯，菌絲先端生長整齊，生長勢較強(qiáng)；其次為配方配方4和配方5；配方2，配方3菌絲生長較弱。這是由于菌絲生長與培養(yǎng)料的養(yǎng)分及透氣性好壞有很大關(guān)系[18]。

由表4可知，使用不同配方培養(yǎng)料栽培的白靈菇子實體性狀明顯不同。使用配方1的白靈菇子實體菌蓋橫徑和縱徑都較大、菌蓋也較厚、菌柄較短；配方4和配方5次之；配方2、配方3和配方6子實體菌蓋直徑較小、菌蓋薄、菌柄稍長。綜合分析子實體性狀，配方1為栽培白靈菇較理想的配方，其次為配方4和配方5。這是由于主料棉籽殼具有營養(yǎng)豐富、C/N較適宜和營養(yǎng)物質(zhì)易被白靈菇吸收利用等優(yōu)點[19]。

3 討論

本試驗結(jié)果表明，不同pH值對白靈菇菌絲生長速度、菌絲長勢和子實體菌蓋、菌柄、色澤都有影響。其中，pH值在6.5～7.5時白靈菇菌絲生長速度較快，長勢較為濃密，子實體較大，菌蓋菌柄均大，色澤較好。以棉籽殼為主料栽培的白靈菇，菌絲生長勢強(qiáng)，出菇快，品質(zhì)較好，主要表現(xiàn)為子實體大，菌肉厚，產(chǎn)量高；其次是棉籽殼、玉米芯和木屑的混合料配方，菌絲生長較快，主要表現(xiàn)為子實體中等，菌肉硬度大，產(chǎn)量也較高；以純木屑或玉米芯為栽培主料，白靈菇菌絲生長速度較慢，出菇較晚，生物轉(zhuǎn)化率也較低。配方1的培養(yǎng)料組合栽培白靈菇效果佳，可能是由于該配方中棉籽殼顆粒大、結(jié)構(gòu)疏松、透氣性好、營養(yǎng)豐富，營養(yǎng)物質(zhì)易被白靈菇吸收利用；棉籽殼和玉米芯、木屑原料混合配制的培養(yǎng)料，結(jié)構(gòu)也較疏松、營養(yǎng)比較全面，也較適宜白靈菇菌絲和子實體的生長。在不同栽培料配方的試驗中，以棉籽殼為主料的配方白靈菇菌絲和子實體生長狀況較好。但是在以不同培養(yǎng)料、不同比例栽培白靈菇的試驗中，發(fā)現(xiàn)以棉稈替代部分棉籽殼，可降低生產(chǎn)成本，增加生產(chǎn)者的經(jīng)濟(jì)效益。

白靈菇營養(yǎng)豐富，香味濃郁，藥用價值也非常高，其人工栽培的菇品在國內(nèi)外市場很受消費者歡迎。其開發(fā)前景廣闊，但商業(yè)化生產(chǎn)規(guī)模一直處于較低水平，且栽培產(chǎn)量和品質(zhì)不穩(wěn)定[20]。希望本研究能夠?qū)Π嘴`菇在生產(chǎn)上有所指導(dǎo)。白靈菇大規(guī)模產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)是其發(fā)展的必然趨勢，因此，高效白靈菇栽培技術(shù)的進(jìn)一步研究和推廣工作意義重大[21]。

［1］林春，陳保生，李榮春.白靈菇研究進(jìn)展[J].微生物學(xué)雜志，2004，24（3）：46-49.

［2］劉平挺，樊衛(wèi)國，徐彥軍，等.白靈菇研究進(jìn)展[J].種子，2007，26（5）：55-58.

［3］黃志龍.白靈菇菌絲生長因子的研究[J].福建林業(yè)科技，2008，35（1）：49-50，111.

［4］趙占軍，張勇，李毅，等.白靈菇生理生化研究進(jìn)展[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（3）：292-294.

［5］索好飛.不同配方培養(yǎng)料對白靈菇生長發(fā)育、產(chǎn)量及品質(zhì)的影響[D].蘭州：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

［6］馬瑞霞.不同配方培養(yǎng)料對白靈菇生長發(fā)育和產(chǎn)量的影響[J].食用菌學(xué)報，2007，14（3）：73-76.

［7］王蘭青，劉宇，王守現(xiàn)，等.工廠化栽培白靈菇配方篩選試驗[J].北方園藝，2012（1）：156-158.

［8］張長青，范謀春.不同培養(yǎng)基中白靈菇的菌絲生長特性[J].青海大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2004，22（8）：39-40.

［9］陳斌，郭愛珍，趙毅，等.不同氮源對白靈菇菌絲生長的影響[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2015，43（1）：28-30，49.

［10］王桂芹，陳壽成.白靈菇菌絲生長條件的研究[J].中國食用菌，2007，26（2）：37-40.

［11］劉宇，王蘭青，王守現(xiàn)，等.棉柴栽培白靈菇試驗[J].北方園藝，2013（17）：148-150.

［12］單洪濤，黃春燕，萬魯長，等.不同環(huán)境條件對白靈側(cè)耳菌絲生長的影響[J].菌物研究，2005，3（4）：19-22.

［13］姚太梅，李明，李守勉，等.溫度和pH值對白靈菇菌絲生長的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（4）：1414，1446.

［14］王耀榮，徐全飛，韓曉芳，等.白靈菇工廠化栽培培養(yǎng)料篩選及栽培工藝的研究[J].天津農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，17（3）：118-121.

［15］初洋，倪新江.棉籽殼制作母種培養(yǎng)基試驗[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（2）：371-372.

［16］吳鄭武，胡清秀，夏志蘭，等.白靈菇新型栽培基質(zhì)配方研究[J].中國農(nóng)學(xué)通報，2012，28（4）：245-249.

［17］馮景剛，張曉燕，王丹.不同培養(yǎng)料配方對白靈菇生長的影響[J].遼寧林業(yè)科技，2006（4）：16-17.

［18］池慧容，高春燕，王朝江.不同配方培養(yǎng)料對白靈菇生長發(fā)育、產(chǎn)量和商品性狀的影響[J].河北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2004，8（2）：70-72.

［19］Sibel S Kahraman，Ismail H Gurdal.Effect of synthetic and culture media on laccase production by white rot fungi[J].Bioresource Technology，2002，82：215-217.

［20］徐彥軍，樊衛(wèi)國，劉碧榮，等.白靈菇栽培研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35（4）：1024-1025.

［21］彭強(qiáng).黑木耳培養(yǎng)料及營養(yǎng)生理特性研究[D].哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2007.

Study on the Influence Factors of the Quality ofPleurotus nebrodensisunder the Facility Condition

ZHANGHong-gang，ZHANGYong，XIAOJin-chuan，GUOShang，LIUXin，NANXiao-jie
（Institute ofEdible Fungi，Shanxi AcademyofAgricultural Sciences，Taiyuan 030031，China）

This paper studied the effect of two factors of the different pH value and different substrates formula on the Pleurotus nebrodensis mushroom mycelia and fruit body growth under the facility condition.Multiple comparisons was conducted on the mycelial growth of fungus cake initiation days,average daily mycelial growth length,hyphal growth,fruiting body was compared from pileus thickness,pileus diameter,stipe length,to screen out the most suitable for Pleurotus nebrodensis mushroom mycelia and fruit body growth pH range and substrates formula.The result showed that the pH was suitable for Pleurotus nebrodensis mycelium and fruiting body growth between 6.5-7.5,and Pleurotus nebrodensis lanzi mycelium and fruiting body growth with cottonseed shell as the main ingredient formula were better.

Pleurotus nebrodensis;greenhouse;pH value;cultivation material;quality

S646.1

A

1002-2481（2016）04-0502-04

10.3969/j.issn.1002-2481.2016.04.20

2015-12-04

2014年度山西省煤基重點科技攻關(guān)項目（FT2014-03）

張紅剛（1985-），男，山西曲沃人，助理研究員，碩士，主要從事食用菌育種及栽培技術(shù)研究工作。