急性腦卒中患者TGFBR2基因多態(tài)性與動態(tài)血壓指數(shù)的關(guān)聯(lián)研究

馬 琳,石樹君

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，呼和浩特 010050)

急性腦卒中患者TGFBR2基因多態(tài)性與動態(tài)血壓指數(shù)的關(guān)聯(lián)研究

馬 琳,石樹君△

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，呼和浩特 010050)

目的 探討腦卒中TFGBR2基因多肽性和患者動態(tài)血壓相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系。方法 選取2014年6月至2015年6月該院收治的急性腦卒中患者60例，其中腦出血患者32例(腦出血組)，腦梗死患者28例(腦梗死組)；另選取60例體檢健康者為對照組。采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)法檢測患者TGFBR2基因rs6785358片段多態(tài)性，所有患者均行動態(tài)血壓檢測，分析患者TGFBR2基因多態(tài)性與腦卒中動態(tài)血壓的關(guān)系。結(jié)果 腦出血和腦梗死患者A/A基因型均占50.0%，高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；對照組患者G/G基因型比例(60.0%)高于腦卒中患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；有高血壓史和腦卒中史的患者A/A基因型分別占51.4%和60.0%，高于無高血壓史和無腦卒中史患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；A/A基因型的腦卒中患者24 h平均收縮壓、24 h平均舒張壓、24 h平均脈壓、24 h動態(tài)脈壓指數(shù)均高于基因型為A/G和G/G者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 腦卒中患者TGFBR2基因rs6785358基因型以A/A為主，且A/A基因型患者血壓波動性較大。

轉(zhuǎn)化生長因子β；基因多態(tài)性；卒中；動態(tài)血壓

腦卒中是導(dǎo)致我國居民死亡的重要疾病之一，大多數(shù)腦卒中患者因未得到及時救治而出現(xiàn)語言、運動功能障礙，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量，并對家庭和社會造成嚴(yán)重的醫(yī)療負(fù)擔(dān)，因此，減少腦卒中的發(fā)生是當(dāng)前醫(yī)學(xué)臨床研究的重要課題之一[1-2]。高血壓是腦卒中的重要危險因素，高血壓患者腦血管風(fēng)險事件是非高血壓患者的1.25倍[3]。轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-β)是重要的炎性因子，TGF-β信號通路參與多種疾病的病理生理過程。有研究提示，TGF-β基因多態(tài)性可能參與高血壓的發(fā)生、發(fā)展，而且可能與腦卒中的發(fā)生有密切關(guān)系[4]。而脈壓和脈壓指數(shù)是腦血管事件重要的預(yù)測指標(biāo)[5-6]。本研究通過對本院60例腦卒中患者的臨床資料進行分析，探討腦卒中患者TGF-β基因多態(tài)性與動態(tài)血壓相關(guān)指數(shù)之間的關(guān)聯(lián)，進一步了解TGF-β基因多態(tài)性在腦卒中患者中的重要意義，現(xiàn)將研究結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年6月至2015年6月在本院治療，經(jīng)顱腦CT或磁共振成像(MRI)和神經(jīng)系統(tǒng)體格檢查符合2010年中國急性缺血性腦卒中診治指南中腦卒中(腦出血、腦梗死)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]的60例患者作為研究對象，其中腦出血患者32例(腦出血組)，腦梗死患者28例(腦梗死組)。入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)起病1～3 d內(nèi)入住本院神經(jīng)內(nèi)科；(2)經(jīng)影像學(xué)確診為腦卒中，其中腦梗死32例，腦出血28例；排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在影響自主神經(jīng)的其他系統(tǒng)疾病，例如糖尿病、腎功能不全、慢性阻塞性肺疾病、電解質(zhì)紊亂；(2)合并有惡性腫瘤；(3)病例資料不完整；(4)不能完成隨訪；(5)既往發(fā)生過腦卒中，合并其他中樞系統(tǒng)疾病。本研究60例患者中男39例，女21例，平均年齡(54.6±12.5)歲。并以同期60例體檢健康者為對照組，男42例，女18例，平均年齡(54.7±12.8)歲。兩組患者性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)，所有患者均簽署知情同意書。本研究中腦卒中患者均參照2010年中華醫(yī)學(xué)會制定的急性腦卒中診治指南進行治療。

1.2 方法

1.2.1 動態(tài)血壓檢測 采用DS-250型全自動血壓檢測儀(日本NISSEI公司)進行血壓監(jiān)測，將血壓監(jiān)測儀袖帶固定于患者左側(cè)手臂，并對患者進行動態(tài)血壓相關(guān)知識的宣教。24 h動態(tài)血壓監(jiān)測分為白晝血壓和夜間血壓監(jiān)測，白晝時間為6：00～22：00，夜間時間為22：00至次日6：00，均為每隔20 min或30 min測量1次血壓，收集24 h動態(tài)血壓結(jié)果，血壓測量有效率需達到80%以上(有效數(shù)據(jù)定義為測量結(jié)果在患者實際血壓的合理范圍內(nèi))，由動態(tài)血壓檢測儀連接計算器直接計算24 h平均收縮壓(24 h MSBP)、24 h平均舒張壓(24 h MDBP)，24 h平均脈壓(PP)=24 h MSBP-24 h MDBP，動態(tài)脈壓指數(shù)(PPI)=PP/24 h MSBP。

1.2.2 基因多態(tài)性檢測 采集觀察組患者血液標(biāo)本DNA使用Promega公司試劑盒及Eppendorf核酸定量儀測定白細(xì)胞中DNA載量，進一步使用ABI-2700型測序級擴增儀擴增TGFBR2基因rs6785358基因片段，對其進行測序和純化，最后使用反向引物進行反向測序，進一步對rs6785358基因進行位點分析。rs6785358上游引物：5′-GAA CT G CAA ACA AGA GAA TGG AT-3′；下游引物：5′-TTA GAA TTC TAC CCT AAT GAT TGT AAG G-3′。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RFLP)法反應(yīng)條件及具體操作步驟參照說明書進行。

2 結(jié) 果

2.1TGFBR2基因rs6785358片段多態(tài)性與急性腦卒中的關(guān)系 腦出血、腦梗死患者A/A基因型比例均為50.0%，高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值分別為0.034、0.045)；腦出血、腦梗死患者A/G基因型比例也高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值分別為0.026、0.027)；腦出血、腦梗死患者G/G型基因比例低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值分別為0.003、0.034)，見表1。

表1 TGFBR2基因rs6785358基因片段多態(tài)性與急性腦卒中的關(guān)系[n(%)]

*：P<0.05，與對照組比較。

2.2 高血壓及腦卒中家族史與TGFBR2基因rs6785358片段多態(tài)性的關(guān)系 有高血壓史和腦卒中史的患者A/A型基因比例分別為51.4%和60.0%，高于無高血壓史和無腦卒中史的患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值分別為0.007、0.003)；無高血壓史和無腦卒中史的患者G/G型基因比例高于有高血壓史和有腦卒中史的患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值分別為0.002、0.005)，見表2。

表2 高血壓及腦卒中家族史與TGFBR2基因rs6785358片段多態(tài)性的關(guān)系[n(%)]

*：P<0.05，與無高血壓史患者比較；#：P<0.05，與無腦卒中史患者比較。

2.3 腦卒中患者TGFBR2基因rs6785358片段多態(tài)性與動態(tài)血壓的關(guān)系A(chǔ)/A基因型腦卒中患者24hMSBP、24hMDBP、24hPP、24hPPI均高于A/G基因型患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值分別為0.017、0.020，0.002、0.030)；A/A基因型腦卒中患者24hMSBP、24hMDBP、24hPP、24hPPI均高于G/G基因型患者，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P值分別為0.014、0.030、0.026、0.037)，見表3。

表3 腦卒中患者TGFBR2基因rs6785358片段多態(tài)性與動態(tài)血壓的關(guān)系

*：P<0.05，與基因型為A/A的患者比較。

3 討 論

TGF-β基因活化可使細(xì)胞外信號被傳導(dǎo)至細(xì)胞核，最終引起細(xì)胞增殖、分化、遷移、凋亡[8-9]?；罨腡GF-β可以影響細(xì)胞運動性、細(xì)胞黏附、浸潤、生存及血管生成[10]。TGFBR2的單核甘酸基因位點改變可能通過激活該基因的下游信號，影響轉(zhuǎn)錄、翻譯過程進而影響細(xì)胞的功能[11]。TGF-β是多種信號通路上重要的作用位點，TGF-β參與細(xì)胞增殖、凋亡、遷移等多種病理、生理過程[12]。眾多研究提示，腦卒中患者血清TGF-β水平上升，并參與患者疾病的發(fā)展，TGFBR2是TGF-β信號通路上重要的組成部分，參與TGF-β信號通路的調(diào)控[13]。目前研究發(fā)現(xiàn)，TGF基因多態(tài)性參與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展，包括高血壓、冠心病、糖尿病等。高血壓患者舒張壓水平與TGFBBR1基因多態(tài)性及患者血清中TGF-β水平密切相關(guān)，而高血壓又是腦卒中發(fā)生的重要風(fēng)險因素，因此作者設(shè)想TGF-β基因多態(tài)性可能與腦卒中的發(fā)生存在一定的內(nèi)在關(guān)聯(lián)。

本研究中rs6785358基因多態(tài)性結(jié)果提示，50.0%的腦出血患者基因型為A/A，基因型為A/A的患者發(fā)生腦出血和腦卒中的概率明顯高于基因型為G/G和A/G的患者。進一步分析患者基因分型與高血壓病史的關(guān)系，有高血壓和腦卒中疾病史的患者rs6785358基因型以A/A為主，分別占51.4%和60.0%，而無高血壓和腦卒中病史的患者基因型以G/G為主，分別占47.8%和62.2%。這進一步證實了基因型為A/A的患者更容易發(fā)生腦血管事件。作者還對腦卒中患者進行了動態(tài)血壓檢測，深入研究不同基因型患者血壓的節(jié)律性變化。動態(tài)血壓監(jiān)測有助于腦卒中患者血壓管理，近年來眾多學(xué)者建議將脈壓和脈壓指數(shù)納入高血壓管理的指標(biāo)中[14]，兩項指標(biāo)與腦血管事件均有較好的相關(guān)性，而本研究結(jié)果提示基因型為A/A的腦卒中患者，24hPP和24hPPI分別為(78.2±11.5)和(0.59±0.06)，均明顯高于其他基因型患者。既往研究提示，PP和PPI均可以作為預(yù)測腦血管事件的重要指標(biāo)，PPI和PP越高，患者發(fā)生腦血管風(fēng)險事件的概率越大。而本研究結(jié)果提示，基因型為A/A的患者具有較高的血壓異常風(fēng)險，這可能是A/A型患者容易出現(xiàn)腦卒中的原因。

TGFBR2是TGF-β信號通路的重要組成部分，參與TGF-β信號通路的調(diào)控，與多種疾病模型有關(guān)。本研究結(jié)果提示，TGFBR2基因rs6785358片段多態(tài)性與腦卒中的發(fā)生具有明顯的相關(guān)性。目前國內(nèi)尚缺乏有關(guān)TGFBR2基因rs6785358片段多態(tài)性與腦卒中發(fā)生相關(guān)性的研究，并且關(guān)于TGFBR2基因rs6785358片段多態(tài)性與動態(tài)血壓相關(guān)性的研究也較少。本研究結(jié)果表明，腦卒中患者基因型以A/A型為主，還未證實A/A基因型為腦卒中發(fā)生的獨立風(fēng)險因素。

綜上所述，TGFBR2rs6785358基因型為A/A可能是腦卒中的易感因素，而且基因型為A/A的腦卒中患者有較高的腦卒中再發(fā)風(fēng)險。為了控制腦卒中的發(fā)生率，早期發(fā)現(xiàn)高危易感人群，進行TGFBR2基因型篩選有重要意義，對于基因型為A/A的TGFBR2的患者可以早期預(yù)防腦卒中的發(fā)生。但是，本研究并未對腦卒中患者風(fēng)險因素進行探討，未證實A/A為腦卒中的獨立風(fēng)險因素，仍然需要大樣本、多中心的研究證實TGFBR2rs6785358的A/A基因型在腦卒中發(fā)病中的重要意義。

[1]趙賢武，陳曉輝，田朝偉，等．急診科腦卒中的現(xiàn)狀調(diào)查及其與紅細(xì)胞分布寬度的關(guān)系[J]．廣東醫(yī)學(xué)，2013，34(5)：700-703．

[2]武海濱，龔巍巍，潘勁，等．首次腦卒中患者生存率和死亡影響因素的研究[J]．中華流行病學(xué)雜志，2014，35(7)：812-816．

[3]石國美，張穎冬，周俊山，等．急性缺血性腦卒中的血壓管理[J]．中國神經(jīng)精神疾病雜志，2015，41(6)：383-385．

[4]ZhengW，YanC，WangX，etal．TheTGFB1functionalpolymorphismrs1800469andsusceptibilitytoatrialfibrillationintwoChineseHanpopulations[J]．PLoSOne，2013，8(12)：e83033.

[5]彭鵬忠．降壓治療對老年高血壓、高血壓合并腦卒中患者動態(tài)血壓指標(biāo)的影響[J]．深圳中西醫(yī)結(jié)合雜志，2015，25(10)：28-29．

[6]陳爾秀，高珩，古長維，等．腦卒中急性期動態(tài)血壓變化、血壓與預(yù)后關(guān)系研究[J]．陜西醫(yī)學(xué)雜志，2013(11)：1468-1471，1472．

[7] 中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會腦血管病學(xué)組急性缺血性腦卒中診治指南撰寫組．中國急性缺血性腦卒中診治指南2010[J/CD]．中國醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版)，2010，2(4)：16-19．

[8]鄒邵敏，岑錦明，楊希立，等．轉(zhuǎn)化生長因子β1-509C/T基因多態(tài)性與冠心病遺傳易感的相關(guān)性分析[J]．中華老年心腦血管病雜志，2013，15(4)：361-364．

[9]牟新，劉穎慧，周迪夷，等．基于TGF-β1基因T869C中CC/CT基因型糖尿病腎病患者危險因素生存分析[J]．中華全科醫(yī)學(xué)，2015，13(10)：1567-1569，1613．

[10]HidakaH，NakazawaT，ShibuyaA，etal．Effectsof1-yearadministrationofolmesartanonportalpressureandTGF-beta1inselectedpatientswithcirrhosis:arandomizedcontrolledtrial[J]．JGastroenterol，2011，46(11)：1316-1323．

[11]盧昌均，曾鑒源．TGF-β與缺血性腦卒中[J]．中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2014，8(8)：240-241.

[12]沈沖，趙海龍，文進博，等．轉(zhuǎn)化生長因子β1在原發(fā)性高血壓患者和腦卒中患者中的表達水平比較及相關(guān)因素分析[J]．中國循環(huán)雜志，2015(z1)：9．

[13]彭忠興，黃旭明，余青云，等．一氧化氮和TGF-β1的血漿水平與進展性腦卒中的關(guān)系[J]．卒中與神經(jīng)疾病，2010，17(1)：16-19．

[14]楊靜，余朝萍，陳蓉．24h動態(tài)血壓和腦卒中、認(rèn)知功能的關(guān)系[J]．中外醫(yī)學(xué)研究，2014，12(24)：154-156．

Association of TGFBR2 gene polymorphism with ambulatory blood pressure index in patients with acute stroke

MaLin，ShiShujun△

(DepartmentofNeurology,AffiliatedHospitalofInnerMongoliaMedicalUniversity,Hohhot,InnerMongolia010050,China)

Objective To explore the relationship between the TFGBR2 gene polymorphism and the indexes of ambulatory blood pressure in patients with stroke.Methods A total of 60 cases of patients diagnosed with stroke,including 32 cases of patients with cerebral hemorrhage(cerebral hemorrhage group) and 28 cases of patients with cerebral infarction(cerebral infarction group),were selected in our hospital from June 2014 to June 2015.Another 60 cases of healthy individuals were allocated to the control group.The PCR-RFLP method was used to determine TGFBR2 rs6785358 gene polymorphism，and all patients were given ambulatory blood pressure monitoring.The relationship between the TFGBR2 gene polymorphism and the indexes of ambulatory blood pressure in patients with stroke were analysed.Results The A/A genotype accounted for 50.0% of rs6785358 gene in patients with cerebral hemorrhage and patients with cerebral infarction,which was higher than that in the control group,there was statistically significant difference(P<0.05).The ratio of G/G genotype(60.0%) in the control group was higher than that of patients with stroke,there was statistically significant difference(P<0.05).The A/A genotype accounted for 51.4% and 60.0% of rs6785358 gene in patients with stroke who had hypertension history and those had stroke history,which was significantly higher than that in patients without hypertension history and stroke history,respectively.The 24 h MSBP,24 h MDBP,24 h PP and 24 h PPI in patients with cerebral stroke carrying A/A genotype of rs6785358 gene were higher than those in patients with cerebral stroke carrying A/G or G/G genotype of rs6785358 gene,there were statistically significant differences(P<0.05).Conclusion The A/A is the major genotype of TGFBR2 rs6785358,and patients with stroke carrying the A/A genotype have significant blood pressure fluctuations.

transforming growth factor beta；gene polymorphism；stroke；ambulatory blood pressure

馬琳(1980-)，主治醫(yī)師，碩士，主要從事神經(jīng)內(nèi)科研究?！?/p>

??·臨床研究

10.3969/j.issn.1671-8348.2016.35.026

R743.3

A

1671-8348(2016)35-4983-03

2016-05-23

2016-08-11)