HFE基因C282Y與H63D突變型與肝癌相關(guān)性的Meta分析

李 佟，李時(shí)孟，劉 碩，謝 風(fēng)，丁 軍*

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院新民院區(qū) 放射線科,吉林 長(zhǎng)春130021；2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 檢驗(yàn)科,吉林 長(zhǎng)春130033)

*通訊作者

HFE基因C282Y與H63D突變型與肝癌相關(guān)性的Meta分析

李 佟1，李時(shí)孟2，劉 碩1，謝 風(fēng)2，丁 軍1*

(1.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院新民院區(qū) 放射線科,吉林 長(zhǎng)春130021；2.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院 檢驗(yàn)科,吉林 長(zhǎng)春130033)

目的 采用Meta分析方法評(píng)價(jià)HFE基因C28Y與H63D突變型與肝癌發(fā)生的相關(guān)性。方法 計(jì)算機(jī)檢索PubMed、CNKI、中國(guó)知網(wǎng)和萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)HFE基因型與肝癌發(fā)生相關(guān)的病例對(duì)照研究，相關(guān)文獻(xiàn)的查找采用文獻(xiàn)追溯方法。檢索時(shí)限是從建庫(kù)至2016年1月。按照納入和排除標(biāo)準(zhǔn)選擇文獻(xiàn)，并進(jìn)行提取資料和評(píng)價(jià)質(zhì)量，用RevMan 5.0軟件進(jìn)行Meta分析及評(píng)估文獻(xiàn)的發(fā)表偏倚。結(jié)果 最終納入14篇文章，C282Y研究組共納入病例組2418人，對(duì)照組9022人；H63D研究組病例組2208人，對(duì)照組6170人。Meta分析結(jié)果顯示，C282Y研究組等位基因(C vs Y)Y基因的表達(dá)為肝癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素[OR=1.58,95%CI(1.06,2.33)]，對(duì)基因分型進(jìn)行的分層研究，結(jié)果表明與攜帶CC基因型人群相比，攜帶YY基因型(YY vs CC)患腫瘤風(fēng)險(xiǎn)增高[OR= 5.71,95%CI(2.81,11.62)]。攜帶隱性基因型YY與另外兩種基因型(YY vs CC+CY)同樣增高患腫瘤的風(fēng)險(xiǎn) [OR=5.71,95%CI(2.81,11.38)]。結(jié)論 HFE基因型C282Y突變基因的表達(dá)是肝癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素。

肝癌；HFE基因；病例對(duì)照；Meta分析

(ChinJLabDiagn,2016,20:2020)

據(jù)報(bào)道,全世界范圍內(nèi)每年大約有1270萬(wàn)新增癌癥病例，而肝癌在癌癥相關(guān)死因中位居第三位，每年因肝癌死亡人數(shù)約為60萬(wàn)人。然而肝癌的潛在發(fā)生機(jī)制目前尚未完全知曉，可行的治療手段也很局限。

鐵是人體代謝必須的微量元素，參與多種體內(nèi)生物學(xué)過(guò)程，體內(nèi)鐵過(guò)載時(shí)可引起氧化應(yīng)激導(dǎo)致細(xì)胞的凋亡及損傷[1]，有研究表明鐵過(guò)載可能會(huì)增加患癌癥的風(fēng)險(xiǎn)和死亡率[2,3]。HFE與細(xì)胞鐵的攝取關(guān)系密切，如果表達(dá)異常，細(xì)胞鐵蓄積，可能與腫瘤的發(fā)生有關(guān)。HFE基因有兩種錯(cuò)義突變，即C282Y、H63D，對(duì)于HFE 基因突變是否增加肝細(xì)胞癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的研究意見(jiàn)并不一致，一部分研究認(rèn)為HFE 基因錯(cuò)義突變?cè)黾痈渭?xì)胞癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，但也有研究認(rèn)為HFE基因錯(cuò)義突變不增加肝細(xì)胞癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。綜上，本文以HFE為切入點(diǎn)，對(duì)HFE錯(cuò)義突變基因與肝癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行Meta分析，從而評(píng)估二者之間的具體關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ①文獻(xiàn)的內(nèi)容是關(guān)于HFE基因C28Y與H63D位點(diǎn)突變與肝癌相關(guān)性的病例對(duì)照研究；②能夠從病例組和對(duì)照組得到基因型頻率的細(xì)節(jié)，或者能夠通過(guò)提供的信息計(jì)算它；③研究目的明確，有研究開(kāi)展的具體年限，所有的病例均診斷明確，病例組與對(duì)照組均采用成組或個(gè)體匹配。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①資料單一、抽象、重復(fù)發(fā)表；②未提供充分原始數(shù)據(jù)且索取無(wú)果，無(wú)法得到有效的基因型頻率數(shù)據(jù)；③資料研究涉及動(dòng)物的研究、摘要或綜述。

1.2 檢索方法及資料提取

計(jì)算機(jī)檢索PubMed、CNKI、中國(guó)知網(wǎng)和萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)，檢索時(shí)限均從建庫(kù)至2016年1月，納入已發(fā)表的關(guān)于HFE基因C28Y與H63D位點(diǎn)突變與肝癌的病例對(duì)照研究，檢索語(yǔ)種為中文和英文。中文檢索詞或關(guān)鍵詞為“HFE基因”、“肝癌”、“病例對(duì)照”。英文檢索詞為“hemochromatosis gene”或“ HFE”、“polymorphism”或“variant”或“mutation”、“l(fā)iver cancer”或“carcinoma liver” 。

1.3 文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)

兩位評(píng)價(jià)者采用卡斯?fàn)?渥太華量表(The Newcastle-Ottawa scale,NOS)對(duì)納入文獻(xiàn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià),如有異議，討論解決。分別針對(duì)研究人群選擇、組間可比性和暴露因素這三方面進(jìn)行評(píng)分，評(píng)分大于6分為高質(zhì)量文獻(xiàn)(見(jiàn)表3)。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

應(yīng)用RevMan 5.0軟件對(duì)HFE基因突變與肝癌的關(guān)系進(jìn)行Meta分析，以比值比(OR)為效應(yīng)指標(biāo)，計(jì)算OR的合并值及95%可信區(qū)間。對(duì)各個(gè)獨(dú)立研究的OR進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，各研究間具有同質(zhì)性，應(yīng)用固定效應(yīng)模型進(jìn)行合并分析；反之用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行合并分析。由RevMan 5.0軟件自動(dòng)生成倒漏斗圖，研究文獻(xiàn)的發(fā)表偏倚，若漏斗圖對(duì)稱說(shuō)明發(fā)表偏倚可能性較小。所有數(shù)據(jù)均為雙側(cè)檢驗(yàn)，P<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)檢索結(jié)果及納入研究的基本特征

按照檢索策略中的關(guān)鍵詞檢索出106篇文章，通過(guò)評(píng)估文獻(xiàn)全文，最終有14篇文獻(xiàn)符合入選標(biāo)準(zhǔn)。納入文獻(xiàn)均為病例對(duì)照研究，C282Y研究組共納入病例組2418人，對(duì)照組9022人,將YY定義為突變型純合子，CC定義為野生型純合子，CY為突變型雜合子；H63D研究組病例組2208人，對(duì)照組6170人，將DD定義為突變型純合子，HH定義為野生型純合子，HD為突變型雜合子。納入研究基本特征見(jiàn)表1、表2。此外，納入文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果多為9分和8分，有3篇文獻(xiàn)為7分，都大于6分，均為高質(zhì)量文獻(xiàn)。

表1 C282Y研究組納入研究的基本特征

2.2 Meta分析結(jié)果

C282Y研究組中等位基因(C vs Y)OR合并值為1.58,95%CI(1.06,2.33)，見(jiàn)圖1。同時(shí)納入的14篇文獻(xiàn)均對(duì)基因分型進(jìn)行了分層研究，對(duì)數(shù)據(jù)合并后進(jìn)行Meta分析，結(jié)果表明與攜帶CC基因型人群相比，攜帶YY基因型(YY vs CC)的OR合并值為5.71,95%CI(2.81,11.62)，見(jiàn)圖2，攜帶CY基因型(CY vs CC)的OR合并值為1.33,95%CI(0.91,1.96)，攜帶YY或CY基因型(CY+YY vs CC)的OR合并值為1.49,95%CI(1.00,2.20)。攜帶隱性基因型YY與另外兩種基因型(YY vs CC+CY)相比，OR合并值為5.71,95%CI(2.81,11.38)，圖略。在H63D研究組中，對(duì)等位基因進(jìn)行的Meta分析中(D vs H)OR合并值為1.22,95%CI(0.94,1.58)。對(duì)基因型進(jìn)行的亞組分析中突變純合子與野生型相比(DD vs HH)OR為1.66,95%CI(0.81,3.40)，突變雜合子與野生型相比(DH vs HH)OR為1.28,95%CI(0.99,1.67)，突變基因型與野生型相比(DD+DH vs HH)OR為突變純合子與野生型相比(DD vs HH)OR為1.26,95%CI(0.95,1.68)，隱性基因型DD與其他兩型相比(DD vs DH+HH)OR為1.55,95%CI(0.80,3.02)。結(jié)果表明C282Y研究組中，突變基因的表達(dá)是肝癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素，隱性基因型YY的表達(dá)也大大增加了肝癌發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。

表2 H63D研究組納入研究的基本特征

圖1 C282Y 等位基因與肝癌的關(guān)聯(lián)性分析(等位基因 Y vs C)

圖2 C282Y 基因型與肝癌的關(guān)聯(lián)性分析(純合子基因型 YY vs CC)

2.3 發(fā)表偏移與漏斗圖分析

應(yīng)用RevMan 5.0軟件進(jìn)行漏斗圖分析，各漏斗圖大致對(duì)稱，各對(duì)應(yīng)點(diǎn)位于95%CI內(nèi)，未見(jiàn)明顯發(fā)表偏倚。

3 討論

HFE主要在肝臟中表達(dá)，通過(guò)編碼細(xì)胞膜蛋白調(diào)節(jié)鐵蛋白與轉(zhuǎn)鐵蛋白受體進(jìn)而調(diào)節(jié)鐵的吸收，當(dāng)血漿鐵水平比較低的時(shí)候，HFE與轉(zhuǎn)鐵蛋白競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1(TfR1) ，使細(xì)胞攝取鐵的水平下降 。相反，當(dāng)轉(zhuǎn)鐵蛋白飽和度增加時(shí)，HFE競(jìng)爭(zhēng)TfR1的能力下降，從而穩(wěn)定TfR2[18-20]。此時(shí)，TfR1與血漿中轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合，促進(jìn)鐵的攝取，當(dāng)轉(zhuǎn)鐵蛋白與TfR1結(jié)合的同時(shí)釋放出的HFE與 TfR2結(jié)合，從而增加肝鐵調(diào)素轉(zhuǎn)錄合成與分泌，負(fù)性調(diào)節(jié)小腸鐵的吸收[21]。研究表明鐵作為一種流行因素的致癌作用存在兩種機(jī)制，一種為鐵誘導(dǎo)氧化應(yīng)激，另一種為在癌癥細(xì)胞的增長(zhǎng)過(guò)程中，鐵是一個(gè)重要的輔助因子。對(duì)于HFE基因突變是否增加肝細(xì)胞癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的研究存在爭(zhēng)議，分析原因可能是樣本容量過(guò)小，因此我們通過(guò)文獻(xiàn)檢索進(jìn)行Meta分析，比較全面的分析HFE基因與肝癌的關(guān)系。

本次Meta分析表明，攜帶C282Y純合子基因型YY的個(gè)體患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)是攜帶野生型CC的5.71倍,隱性基因Y的表達(dá)增加患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)，而攜帶H63D純合子基因型、雜合子基因型或者C282Y雜合子基因型的個(gè)體患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)都沒(méi)有明顯增加。這可能與C282Y和H63D對(duì)鐵吸收的調(diào)控作用不同有關(guān)。H63D可以與TfR1結(jié)合，但是對(duì)轉(zhuǎn)鐵蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的親和力沒(méi)有顯著的影響 ，而C282Y則既可與TfR1結(jié)合，又能影響轉(zhuǎn)鐵蛋白和轉(zhuǎn)鐵蛋白受體的親和力。綜上研究結(jié)果提示，肝癌發(fā)病與HFE基因上的C282Y突變密切相關(guān)，而二者之間的關(guān)聯(lián)可能是由于鐵過(guò)載引起的，即可能存在這樣的鏈?zhǔn)椒磻?yīng)：C282Y突變—鐵吸收增加—鐵過(guò)載—肝癌。

盡管我們比較全面的分析了HFE基因突變與肝癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系，但是研究還是存在一定的局限性及不足。首先本次研究大多涉及的是歐洲的白種人，而包含的亞洲人較少，因此本次分析采用的人群遺傳背景相對(duì)單一，其次大多數(shù)研究涉及到原始資料如吸煙、飲酒頻率，居住環(huán)境等相對(duì)較少，因此我們不能評(píng)估基因與基因或基因與環(huán)境間的協(xié)同效應(yīng)。所以在今后還需要更多的臨床研究加以證實(shí)，以期得到更具有說(shuō)服力的結(jié)果。

[1]王玉平,成建國(guó),孫蔚明,等.遺傳性血色病突變基因與糖代謝紊亂的關(guān)系研究[J].蘭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版),2015,41(1):29.

[2]Weinberg ED.The role of iron in cancer[J].Eur J Cancer Prev,1996,5:19.

[3]Okada S.Iron-induced tissue damage and cancer:therole of reactive oxygen species-free radicals[J].Pathol Int,1996,46:311.

[4]Racchi O,Mangerini R,Rapezzi D,et al.Mutations of the HFE gene and the risk of hepatocellular carcinoma[J].Blood Cells,Molecules,and Diseases,1999,25(5-6):350.

[5]Beckman L E,Hagerstrand I,Stenling R,et al.Interaction between haemochromatosis and transferrin receptor genes in hepatocellular carcinoma[J].Oncology,2000,59(4):317.

[6]Campo S,Restuccia T,Villari D,et al.Analysis of haemochromatosis gene mutations in a population from the Mediterranean Basin[J].Liver,2001,21(4):233.

[7]Lauret E,Rodriguez M,Gonzalez S,et al.HFE gene mutations in alcoholic and virus-related cirrhotic patients with hepatocellular carcinoma[J].American Journal of Gastroenterology,2002,97(4):1016.

[8]Cauza E,Peck-Radosavljevic M,Ulrich-Pur H,et al.Mutations of the HFE gene in patients with hepatocellular carcinoma[J].American Journal of Gastroenterology，2003,98(2):442.

[9]Boige V,Castera L,de Roux N,et al.Lack of association between HFE gene mutationsand hepatocellular carcinoma in patients with cirrhosis[J].Gut,2003,52(8):1178.

[10]Hellerbrand C,Poppl A,Hartmann A,et al.HFE C282Y heterozygosity in hepatocellular carcinoma:Evidence for an increased prevalence[J].Clinical Gastroenterology and Hepatology,2003,1(4):279.

[11]Shi W J,Chen H,Zhou B,et al.Association of mutations of HFE gene and hepatocellular carcinoma following chronic hepatitis[J].Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi 2005,13(9):682.

[12]Willis G,Bardsley V,Fellows I W,et al.Hepatocellular carcinoma and the penetrance of HFE C282Y mutations:A cross sectionals study[J].BMC Gastroenterology,2005,5(7):1.

[13]Ropero P,Briceno O,Lopez Alonso G,et al.The H63D mutation of the HFE gene is related to the risk of hepatocellular carcinoma[J].Revista Espanola de Enfermedades Digestivas,2007,99(7):376.

[14]Yonal O,Hatirnaz O,Akyuz F,et al.HFE gene mutation,chronic liver disease,and iron overload in Turkey[J].Digestive Diseases and Sciences,2007,52(11):3298.

[15]Ezzikouri S,El Feydi A E,El Kihal L,et al.Prevalence of Common HFE and SERPINA1 Mutations in Patients with Hepatocellular Carcinoma in a Moroccan Population[J].Archives of Medical Research,2008,39(2):236.

[16]Amal F Gharib,Rehab A Karam,Heba F Pasha,et al.Polymorphisms of hemochromatosis,and alpha-1 antitrypsin genes in Egyptian HCV patients with and without hepatocellular carcinoma[J].Gene,2011,489:98.

[17]Tarek Kamal Motawi,Olfat Gamil Shaker,Manal Fouad Ismail,et al.Genetic variants associated with the progression of hepatocellular carcinoma in hepatitis C Egyptian patients[J].Gene,2013:516.

[18]Giannetti AM,Bjorkman PJ.HFE and transferrin directly compete for transferrin receptor in solution and at the cell surface[J].Biol Chem,2004,279:25866.

[19]Johnson MB,Enns CA.Diferric transferrin regulates transferrin receptor 2 protein stability[J].Blood,2004,104:4287.

[20]Robb A,Wessling-Resnick M.Regulation of transferrin receptor 2 protein levels by transferrin[J].Blood,104:4294.

[21]Andrews N C,Schmidt P J.Iron homeostasis[J].Annu Rev Physiol,2007,69:69.

Association between C282Y and H63D Polymorphisms in HFE and liver cancer:A Meta-Analysis

LITong,LIShi-meng,LIUShuo,etal.

(China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity,Changchun130033,China)

Objective To explore the association between C282Y and H63D Polymorphisms in HFE and liver cancer.Methods PubMed,CNKI and WanFang database were searched for all eligible studies up to January,2016.In accordance with the inclusion and exclusion criteria,we screened the articles,extracted the data and evaluated the quality.All the statistical analysis was conducted by RevMan 5.0.Results Finally 14 publications were included.There are 2,481 cases and 9,022 controls for HFE-C282Y polymorphism and 2,208 cases and 6,170 controls for HFE-H63D polymorphism .The meta-analysis showed that,An increased risk for liver cancer risk was identified in HFE-H63D polymorphism under allele contrast(C vs Y) :OR=1.58,95%CI(1.06,2.33).Then we made subgroup analyses about genotype,Comprising with wild type(CC),homozygotes led to increased tumor risk (YY vs CC):OR= 5.71,95%CI(2.81,11.62).Moreover,reccesive model is also an risk factor for liver cancer (YY vs CC+CY) :OR=5.71,95%CI(2.81,11.38).Conclusion Present study suggested that C282Y polymorphisms associated with an increased risk of liver cancer.

liver cancer;HFE;case-control study;Meta-analysis

1007-4287(2016)12-2020-05

R735.7

A

2016-04-18)