干酪乳桿菌對(duì)早期斷奶仔豬生長性能及抗氧化能力的影響

■白秀梅 解林奇 范 彧 王安如

（飼用微生物工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100192）

仔豬早期斷奶表現(xiàn)為食欲差、消化功能紊亂、腹瀉、飼料利用率低等“仔豬早期斷奶綜合征”，嚴(yán)重影響了養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展。研究也發(fā)現(xiàn)，早期斷奶會(huì)引起仔豬腸道屏障功能的退化，體內(nèi)自由基增加，抗氧化能力降低，從而導(dǎo)致仔豬氧化應(yīng)激的產(chǎn)生[1]。益生菌可通過調(diào)整仔豬腸道內(nèi)環(huán)境，抑制或殺滅病原微生物，維持腸道菌群平衡，進(jìn)而提高機(jī)體的免疫功能，減少仔豬因斷奶而引發(fā)的疾病[2-4]。另外，研究表明[5-6]，益生菌還具有較好的抗氧化功能，利用益生菌的抗氧化活性來達(dá)到清除體內(nèi)有害的脂質(zhì)過氧化物也是一種預(yù)防疾病的方法，降低早期斷奶引起的氧化應(yīng)激，改善仔豬早期斷奶綜合征。干酪乳桿菌作為重要的乳酸菌類益生菌，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、防治腹瀉等腸道疾病的益生功能[7-9]。然而，有關(guān)干酪乳桿菌對(duì)早期斷奶仔豬抗氧化能力的影響鮮有報(bào)道。因此，本試驗(yàn)在仔豬日糧中添加不同水平的干酪乳桿菌，研究其對(duì)斷奶仔豬生長性能及抗氧化能力的影響，為益生菌在養(yǎng)豬業(yè)中的進(jìn)一步應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)設(shè)計(jì)

從母豬胎次一致、產(chǎn)期相同的20窩仔豬中選取體重相似、健康狀況良好的14日齡杜×長×大三元雜交健康斷奶公豬96頭，按照窩別和體重隨機(jī)分成4個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6頭豬，每個(gè)欄作為1個(gè)重復(fù)，試驗(yàn)進(jìn)行28 d。

1.2 試驗(yàn)日糧

試驗(yàn)日糧參照NRC（2012）5～7 kg仔豬營養(yǎng)需要進(jìn)行配制，基礎(chǔ)日糧和營養(yǎng)水平見表1。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)日糧中添加106、107CFU/g和108CFU/g干酪乳桿菌菌粉。干酪乳桿菌菌粉由飼用微生物工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供，干酪乳桿菌含量為2×1010CFU/g。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)豬飼養(yǎng)于仔豬舍中，早中晚各加一次料。觀察各欄仔豬采食量，采取區(qū)別加料的策略，保證各種采食量的仔豬都能完全自由采食和飲水。

1.4 測定指標(biāo)與方法

1.4.1 生長性能

以欄為單位記錄每天采食量，并在試驗(yàn)開始和試驗(yàn)?zāi)┮詸跒閱挝粚?duì)試驗(yàn)豬進(jìn)行空腹稱重，由此計(jì)算出平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)和料重比(F/G)。

腹瀉率的統(tǒng)計(jì)方法：每天記錄每個(gè)重復(fù)中腹瀉的豬只數(shù)，求出該重復(fù)的總腹瀉頭次數(shù)，將其除以該重復(fù)的總飼養(yǎng)頭次數(shù)，即得出該重復(fù)的腹瀉率。最后算出該處理各重復(fù)腹瀉率的平均值。腹瀉的標(biāo)準(zhǔn)是，糞便不形成穩(wěn)定固體，有明顯的肛尾粘著現(xiàn)象。

腹瀉率(%)=每欄總腹瀉頭日次數(shù)/[每欄仔豬頭數(shù)×飼養(yǎng)天數(shù)(d)]×100。

表1 基礎(chǔ)日糧組成和營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4.2 血液和肝臟的收集與處理

試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇1頭仔豬，空腹前腔靜脈采血約10 ml，置于離心管中，靜置1 h，4 000 r/min離心15 min分離制備血清，-20℃保存待測。屠宰后取肝臟樣品，-20℃保存。

1.4.3 血清和肝臟抗氧化指標(biāo)的測定

血清解凍后直接使用。肝組織勻漿后離心，取上清液分裝成小管待測。

超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA）指標(biāo)采用試劑盒方法測定，試劑盒為南京建成生物有限公司提供。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)采用SAS 8.0程序GLM過程進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多重比較用鄧肯法（Duncan's），以P＜0.05為顯著水平，P＜0.01為極顯著水平。

2 結(jié)果與分析

2.1 干酪乳桿菌對(duì)早期斷奶仔豬生長性能和腹瀉率的影響（見表2）

表2 不同水平干酪乳桿菌對(duì)早期斷奶仔豬生長性能和腹瀉率的影響

由表2可知，與對(duì)照組相比，日糧中添加干酪乳桿菌對(duì)早期斷奶仔豬ADG、ADFI和F/G沒有影響。107CFU/g和108CFU/g干酪乳桿菌組的仔豬腹瀉率顯著低于對(duì)照組和106CFU/g干酪乳桿菌組（P＜0.05），但107CFU/g與108CFU/g干酪乳桿菌組差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 干酪乳桿菌對(duì)早期斷奶仔豬血清抗氧化能力的影響（見表3）

表3 不同水平干酪乳桿菌對(duì)早期斷奶仔豬血清抗氧化能力的影響

由表3可知，與對(duì)照組相比，107CFU/g干酪乳桿菌組顯著提高了仔豬血清SOD的活性（P＜0.01），并且顯著降低了MDA的含量（P＜0.05）。

2.3 干酪乳桿菌對(duì)早期斷奶仔豬肝臟抗氧化能力的影響（見表4）

由表4可知，與對(duì)照組相比，107CFU/g干酪乳桿菌組顯著提高了仔豬肝臟SOD的活性（P＜0.05），并且顯著降低了MDA的含量（P＜0.05）。

表4 不同水平干酪乳桿菌對(duì)早期斷奶仔豬肝臟抗氧化能力的影響

3 討論

3.1 干酪乳桿菌對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響

許多研究表明，在日糧中添加益生菌能夠改善動(dòng)物的生長性能[2-4,10-11]。本試驗(yàn)將干酪乳桿菌以活菌制劑的形式分高、中、低三個(gè)劑量飼喂早期斷奶仔豬，研究其對(duì)斷奶仔豬生長性能及抗氧化能力的影響，發(fā)現(xiàn)添加干酪乳桿菌對(duì)仔豬的平均日增重、平均日采食量和料重比沒有影響，但107CFU/g和108CFU/g干酪乳桿菌組的仔豬腹瀉率顯著低于對(duì)照組。有研究結(jié)果表明，益生菌對(duì)仔豬日增重?zé)o明顯改善，但能顯著降低腹瀉率[12]，這與本試驗(yàn)研究結(jié)果一致。由于不同益生菌的菌種特性、組成及含量不同，而且動(dòng)物的生理狀態(tài)、環(huán)境因素、營養(yǎng)水平等不同都會(huì)影響益生菌的添加水平和應(yīng)用效果，所以益生菌對(duì)仔豬生長性能影響的結(jié)果都不太一致。

3.2 干酪乳桿菌對(duì)斷奶仔豬抗氧化能力的影響

斷奶應(yīng)激誘導(dǎo)體內(nèi)產(chǎn)生大量的自由基，產(chǎn)生各種有害的影響[13]。自由基可以被生物抗氧化劑GSH-Px和SOD清除，當(dāng)過量的自由基數(shù)量超過抗氧化體系的還原能力，機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，顯示出對(duì)機(jī)體極大的損害作用。有研究報(bào)道，應(yīng)激引起的氧化應(yīng)激，造成組織和血液中MDA的大量生成，SOD活性降低[14-15]。如果過量的自由基不能被及時(shí)清除，可能會(huì)損傷組織細(xì)胞膜。本試驗(yàn)中，飼喂干酪乳桿菌顯著地提高了斷奶仔豬血清和肝臟中SOD的活性，并且降低了MDA的含量，阻止了自由基的生成，減輕了對(duì)細(xì)胞的損傷。SOD和GSH-Px活性的高低可間接反映機(jī)體清除氧自由基的能力和機(jī)體的抗氧化能力[16-17]，而MDA作為體內(nèi)主要的脂質(zhì)氧化產(chǎn)物，其含量可以反映體內(nèi)氧自由基水平和脂質(zhì)過氧化的程度，可以預(yù)示體內(nèi)抗氧化酶CuZnSOD、CAT和GSH-Px的水平。本試驗(yàn)添加干酪乳桿菌提高了仔豬血清和肝臟中SOD的活性，降低了MDA的水平，表明飼喂仔豬干酪乳桿菌可以改善斷奶仔豬的脂質(zhì)狀態(tài)，降低早期斷奶引起的氧化應(yīng)激，從而改善了仔豬早期斷奶綜合征。

4 結(jié)論

日糧中添加干酪乳桿菌對(duì)早期斷奶仔豬平均日增重、平均日采食量和料重比沒有影響。107CFU/g干酪乳桿菌在降低仔豬腹瀉率和提高抗氧化能力方面效果最好。