分枝桿菌在疾病防治中應(yīng)用的研究進(jìn)展①

管清華 劉文賢 錢(qián)愛(ài)東

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)春130118)

分枝桿菌在疾病防治中應(yīng)用的研究進(jìn)展①

管清華 劉文賢 錢(qián)愛(ài)東

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)春130118)

分枝桿菌歸于古老的放線菌目，含分枝菌酸，分布于包括水和土壤在內(nèi)的各種生境，大多數(shù)成員可獨(dú)立生活，一般為無(wú)害的腐生菌，但也有一部分種類是病原菌。目前將已報(bào)道的分枝桿菌分為結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群(M.tuberculosiscomplex,MTC)、非結(jié)核分枝桿菌(Nontuberculosis mycobacteria,NTM)和麻風(fēng)分枝桿菌。因?yàn)榉种U菌含有糖脂、N-羥乙?；邗６?N-glycolyl muramyl dipeptide,N-glycolyl MDP)[1]、未甲基化寡聚脫氧核苷酸等能調(diào)節(jié)哺乳動(dòng)物免疫的活性成分，一些研究者將卡介苗和幾種非結(jié)核分枝桿菌用于結(jié)核病或癌癥等疾病的治療中，并取得了良好的效果。

1 卡介苗

世界范圍內(nèi)已接種卡介苗(Bacillus calmette-Guérin,BCG) 的人超過(guò)十億，此疫苗預(yù)防嬰兒和兒童的結(jié)核性腦膜炎和粟粒性結(jié)核病效果顯著[2]；同時(shí)，作為免疫調(diào)節(jié)劑被應(yīng)用于膀胱癌、肺癌、乳腺癌等多種疾病的治療已有40年的歷史，最近研究也發(fā)現(xiàn)針對(duì)非肌肉侵襲性膀胱癌(Non-muscle-invasive bladder cancer,NMIBC)，三周的持續(xù)治療效果更好[3]。但由于卡介苗是減毒的牛結(jié)核分枝桿菌活疫苗，會(huì)產(chǎn)生高熱、關(guān)節(jié)炎、全身不適等癥狀，大約8%的病人不得不停止治療[4,5]；同時(shí)，BCG還能引起HIV陽(yáng)性嬰兒嚴(yán)重的播散性感染，進(jìn)一步限制了其在肺結(jié)核患病率較高地區(qū)的應(yīng)用[6]，所以人們將研究重點(diǎn)逐漸轉(zhuǎn)向其有效成分及非結(jié)核分枝桿菌的開(kāi)發(fā)應(yīng)用。

卡介苗多糖核酸(Polysaccharide nucleic acid fraction of BCG,BCG-PSN)是主要的卡介苗衍生制劑，該物質(zhì)是將培養(yǎng)的BCG用熱酚法提取而制備。Li等[7]用BCG-PSN刺激分離自慢性蕁麻疹(CIU)病人的淋巴細(xì)胞，以健康捐贈(zèng)者的細(xì)胞做對(duì)照，免疫組化和ELISA檢測(cè)IL-2 和 IL-10的分泌量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CIU病人IL-2的分泌明顯低于健康對(duì)照者，但隨著 BCG-PSN應(yīng)用濃度的增加，IL-2的分泌逐漸增多；CIU病人IL-10的產(chǎn)量較對(duì)照組高，隨著B(niǎo)CG-PSN應(yīng)用濃度的增加，IL-10的分泌逐漸減少，說(shuō)明BCG-PSN可促進(jìn)CIU病人的康復(fù)。Xu等[8]應(yīng)用DEAE-52和Sephadex G-200從BCG-PSN中獲得了分子量為2.10×104Da的水溶性葡聚糖 BCG-PASW，用氣相色譜、紅外光譜、1D 和 2D核磁共振光譜技術(shù)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)BCG-PASW是一種α-D-葡聚糖，可能的結(jié)構(gòu)見(jiàn)圖1。經(jīng)MTS法分析，它的抗腫瘤活性被硫化物替代率為0.59，可明顯抑制C666-1鼻咽癌細(xì)胞生長(zhǎng)，推測(cè)硫化物成分在其生物活性中扮演決定性角色。

2 母牛分枝桿菌

母牛分枝桿菌(M.Vaccae)是一種見(jiàn)光產(chǎn)色素的快生長(zhǎng)腐生無(wú)致病性NTM。熱滅活母牛分枝桿菌的商品名為微卡，是雙向免疫調(diào)節(jié)制劑，國(guó)內(nèi)某公司的該產(chǎn)品已于2012年獲得國(guó)家藥監(jiān)局“藥物臨床試驗(yàn)批件”；Butov等[9]的研究也表明，熱滅活的母牛分枝桿菌是安全的，可以縮短結(jié)核病化學(xué)藥物治療的進(jìn)程，提高治療效率。Dlugovitzky等[10]應(yīng)用微卡治療結(jié)核病患者，發(fā)現(xiàn)其可通過(guò)增強(qiáng)Th1免疫并下調(diào)造成組織損傷的Th2免疫而發(fā)揮治療作用，加快臨床癥狀改善，尤其是治療6個(gè)月以上時(shí)，痰菌陰轉(zhuǎn)率與對(duì)照組差異顯著；Yang等[11]的meta分析也證明了這一點(diǎn)。另外，有研究表明，母牛分枝桿菌細(xì)胞壁的骨架成分較完整的熱滅活菌體有更好的免疫效果[12,13]。Stanford等[14]的研究表明，用母牛分枝桿菌(SRL172)輔助治療腺瘤可使患者的存活時(shí)間平均延長(zhǎng)135天，而對(duì)鱗狀上皮癌患者治療作用不明顯。

圖1 BCG-PASW的可能結(jié)構(gòu)Fig.1 Possible structure of BCG-PSAW

3 草分枝桿菌

草分枝桿菌(M.phlei)是快生長(zhǎng)的腐生罕見(jiàn)致病性NTM。滅活該菌制備的制劑，商品名為烏體林斯。Ming等[15]對(duì)患有中度、持續(xù)性哮喘的兒童吸入滅活草分枝桿菌治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其改善了肺功能，降低支氣管高反應(yīng)性和血清的總IgE，與平喘藥舒利迭的作用相近。Morales等[16]的研究表明，對(duì)于那些拒絕或不適宜進(jìn)行膀胱切除術(shù)的膀胱癌患者尤其是僅為乳頭瘤感染及BCG治療后復(fù)發(fā)的患者，草分枝桿菌細(xì)胞壁核酸復(fù)合物(Mycobacteriumphleicell wall-nucleic acid complex,MCNA)治療后的1、2年無(wú)病生存率分別為35.1%和 32.2%。

草分枝桿菌制劑不僅在防治人類相關(guān)疾病中有很好的效果，也引起了動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究者的關(guān)注。劉安石等[17]在豬日糧中添加0.1%、0.2%和0.5%的草分枝桿菌，血清抗體檢測(cè)結(jié)果顯示與未添加草分枝桿菌的對(duì)照組相比，添加0.2%及以上草分枝桿菌組豬繁殖與呼吸綜合征抗體水平更高，說(shuō)明其可調(diào)節(jié)動(dòng)物的體液免疫應(yīng)答。

4 恥垢分枝桿菌

Borrero等[18]用含有恥垢分枝桿菌(M.Smegm-atis)糖脂成分的脂質(zhì)體免疫BALB/c小鼠，誘導(dǎo)鼠產(chǎn)生特異性的IgG抗體能識(shí)別MTB的表面抗原，證實(shí)了恥垢分枝桿菌有免疫原性糖脂的存在，推測(cè)其可能會(huì)提高抗結(jié)核亞單位疫苗的保護(hù)作用。Maria等[19]制備了恥垢分枝桿菌的脂類制劑，評(píng)價(jià)了其保護(hù)BALB/c鼠抗結(jié)核桿菌H37Rv感染的能力，結(jié)果，加入明礬佐劑或不加佐劑的該制劑均能明顯降低荷菌量，肺炎區(qū)域也比對(duì)照PBS組小，與BCG有同樣的保護(hù)效果，推測(cè)其可以作為抗結(jié)核的疫苗候選者。

重組恥垢分枝桿菌活疫苗用于治療結(jié)核病主要是促進(jìn)T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子，增加單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生H2O2和NO的能力；激活局部NK細(xì)胞的活性，誘導(dǎo)Th1優(yōu)勢(shì)應(yīng)答，同時(shí)抑制Th2類細(xì)胞因子，增強(qiáng)機(jī)體免疫能力從而有助于機(jī)體快速殺滅病原菌[20]。Ana等[21]將含有結(jié)核桿菌Ag85c、MPT51、HspX (CMX)基因的部分序列的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化入恥垢分枝桿菌中，構(gòu)建了重組菌mc2-CMX，用小鼠感染模型檢測(cè)了mc2-CMX的效果，結(jié)果，該菌誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生了針對(duì)CMX的特異性IgG1或IgG2a，能使體外培養(yǎng)的肺和脾來(lái)源的CD4+和CD8+T細(xì)胞產(chǎn)生IFN-γ、IL-17、TNF-α、IL-2，在鼠體內(nèi)也產(chǎn)生了有效的免疫應(yīng)答，接種mc2-CMX菌的小鼠產(chǎn)生了針對(duì)結(jié)核桿菌的良好保護(hù)作用，效果好于野生恥垢分枝桿菌和BCG。為了增加CMX抗原的安全性和免疫原性，作者對(duì)重組菌株進(jìn)行免疫殺傷逃避(Immune killing evasion,IKE)處理，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，處理后的重組菌株 IKE-CMX較mc2-CMX能誘導(dǎo)更好的保護(hù)性應(yīng)答。另外，恥垢分枝桿菌還為研究分枝桿菌的生物學(xué)特點(diǎn)和致病機(jī)制以及發(fā)展新的診斷和治療制劑提供了有效的表達(dá)平臺(tái)[22]，也廣泛用于分枝桿菌感染模型[23]。

5 大府分枝桿菌

近幾年大府分枝桿菌(M.Obuense)作為抗癌的免疫治療劑而被關(guān)注，在治療黑色素瘤中表現(xiàn)出了安全性和良好的耐受性[24]，該功能由1型髓樣DCs釋放細(xì)胞因子提高γδT細(xì)胞的活性而實(shí)現(xiàn)[25]。最近的研究表明，3 μg/ml熱滅活的大府分枝桿菌刺激的健康志愿者外周血細(xì)胞有明顯的特異性增殖應(yīng)答；300 μg/L的大府分枝桿菌刺激3 h的單核細(xì)胞分泌的CD18、CD54、CD45、CD80、HLA-DP,DQ,DR、CD206、CD11b、CD11c、CD35、CD132以及中性粒細(xì)胞的CD45、CD11b、CD35等表面受體的表達(dá)均明顯上調(diào)[26]。

6 Mycobacterium indicus pranii

Mycobacteriumindicuspranii(MIP)曾被稱為Mycobacterium w (M.w)，Jaya 等[27]在2011年發(fā)現(xiàn)，皮下注射1×107CFU的M.w能輔助化學(xué)治療藥物顯著降低實(shí)驗(yàn)用BALB/c鼠的肺、脾中結(jié)核桿菌的載量。2012年，Gupta等[28]用MIP經(jīng)氣溶膠途徑免疫豚鼠，檢測(cè)豚鼠肺部的免疫應(yīng)答，發(fā)現(xiàn)與BCG免疫組相比，MIP免疫組荷菌量更少，病理學(xué)和組織肉芽腫反應(yīng)得以改善，說(shuō)明MIP免疫的豚鼠獲得了更高的Th1型免疫應(yīng)答，MIP免疫豚鼠的肉芽腫和肺部細(xì)胞懸液也表現(xiàn)出了更高的抗原遞呈細(xì)胞的功能；研究同時(shí)表明，MIP也會(huì)快速?gòu)捏w內(nèi)被清除而不引起不良反應(yīng)。Pawan等[29]的進(jìn)一步研究表明，與BCG相比，MIP刺激的巨噬細(xì)胞能產(chǎn)生更多的TNF-α和IL-12p40、IL-6和NO，共刺激分子CD40、CD80和CD86的表達(dá)量也明顯上調(diào)；而對(duì)于MyD88缺陷型的巨噬細(xì)胞，MIP和BCG刺激均缺少這種應(yīng)答。MIP刺激過(guò)的巨噬細(xì)胞MyD88信號(hào)通路中NF-κB/AP-1的活性也更高。此外，MIP作為激活劑激活HEK293細(xì)胞表達(dá)的以同型二聚體或異型二聚體形式存在的TLR2 的活性也高于BCG；進(jìn)一步的試驗(yàn)表明，MIP暴露TLR2配體的能力也較BCG更強(qiáng)，表明MIP較BCG有更高的激活巨噬細(xì)胞的潛能。

7 Mycobacterium habana

Mycobacteriumhabana(M.habana)于1971年分離自古巴地區(qū)，之后被證明在分枝桿菌感染中具有保護(hù)能力。2012年Valdés[30]發(fā)現(xiàn)，給BALB/c小鼠皮下接種M.habanaTMC-5135株，用Ag85b或培養(yǎng)濾液抗原(CFA)刺激肺、脾、淋巴結(jié)細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)該組小鼠細(xì)胞懸液中產(chǎn)生的IFN-γ多于BCG接種組。2014年Valdés等[31]又研究了3株M.habana菌的毒力、免疫原性和效力。經(jīng)氣管給BALB/c小鼠接種高劑量的 TMC 5135 或 IPK-337時(shí)，實(shí)驗(yàn)鼠100%存活，但有一定的組織損傷，而 IPK-220株的毒力略高于二者。然后作者將2株菌經(jīng)皮下接種裸鼠，并與BCG比較，發(fā)現(xiàn)TMC5135株免疫的裸鼠較BCG組存活時(shí)間更長(zhǎng)，用H37Rv株攻毒后4個(gè)月，TMC5135株和BCG接種組全部小鼠存活，IPK-337接種小鼠有60%存活。說(shuō)明M.habana雖然不能阻止小鼠感染結(jié)核菌，但可以避免實(shí)驗(yàn)性疾病的進(jìn)程，而菌株TMC5135對(duì)機(jī)體保護(hù)水平與BCG相近。

8 結(jié)語(yǔ)

結(jié)核病已困擾人類上千年，現(xiàn)今依然是嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題，耐多藥結(jié)核病的出現(xiàn)又增加了該病的治療難度；同時(shí)，一些非結(jié)核分枝桿菌感染人、動(dòng)物的報(bào)道也日漸增多；癌癥更是人類健康的殺手。本文所述幾種分枝桿菌的研究與開(kāi)發(fā)應(yīng)用為人類通過(guò)生物手段防控分枝桿菌病和癌癥提供了非常好的借鑒和思路。針對(duì)分枝桿菌雙向調(diào)節(jié)的免疫機(jī)制，有研究者提出訓(xùn)練的(先天性)免疫[Trained (innate) immunity,TI)]這一術(shù)語(yǔ)，此免疫可以被各種刺激誘導(dǎo)，分枝桿菌接種試驗(yàn)使機(jī)體獲得的非特異性保護(hù)作用也許是由于TI，使先天性免疫細(xì)胞中的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞被訓(xùn)練；該文作者還發(fā)現(xiàn)BCG經(jīng)過(guò)NOD2傳遞信號(hào)誘導(dǎo)遺傳外重新編程，尤其是組蛋白H3K4的三甲基化，這些表觀遺傳變異導(dǎo)致細(xì)胞激活，促進(jìn)細(xì)胞因子的產(chǎn)生，使細(xì)胞代謝從氧化磷酸化向有氧酵解狀態(tài)轉(zhuǎn)變[32]。分枝桿菌的N-羥乙?；鵐DP可通過(guò)NOD2 活化激酶RIP2，然后由泛素(Ub)激活NF-κB 和IRF-5，以引起編碼炎癥和Ⅰ型干擾素的基因表達(dá)，介導(dǎo)先天性和獲得性免疫，而NOD2對(duì)N-羥乙?；鵐DP極敏感，此作用較其他細(xì)菌，如單核細(xì)胞增生性李斯特菌含有的N-乙?；?MDP對(duì)機(jī)體的保護(hù)作用更有效?？梢?jiàn)隨著對(duì)此類問(wèn)題的深入研究，其作用機(jī)制也會(huì)越來(lái)越明了，給其應(yīng)用提供更好的依據(jù)，使分枝桿菌更多地應(yīng)用于疾病的防治中。

[1] Behr MA，Divangahi M.Freund′s adjuvant,NOD2 and mycobacteria[J].Curr Opin Microbiol，2015，23(2)：126-132.

[2] Taniguchi K，Takii T，Yamamoto S，etal.Reactivation of immune responses against Mycobacterium tuberculosis by boosting with the CpG oligomer in aged mice primarily vaccinated with Mycobacterium bovis BCG[J].Immun Ageing，2013，25(10)：1-6.

[3] Kamat AM，F(xiàn)laig TW，Grossman HB，etal.Expert consensus document:Consensus statement on best practice management regarding the use of intravesical immunotherapy with BCG for bladder cancer[J].Nat Rev Urol，2015，12(4)：225-235.

[4] Bernini L，Manzini CU，Giuggioli D，etal.Reactive arthritis induced by intravesical BCG therapy for bladder cancer:our clinical experience and systematic review of the literature[J].Autoimmun Rev，2013，12(12)：1150-1159.

[5] Decaestecker K，Oosterlinck W.Managing the adverse events of intravesical bacillus Calmette-Guérin therapy[J].Res Rep Urol，2015，7：157-163.

[6] Hesseling AC，Marais BJ，Gie RP，etal.The risk of disseminated bacille Calmette-Guerin (BCG) disease in HIV infected children[J].Vaccine，2007，25：14-18.

[7] Li N，Cao N，Niu YD，etal.Effects of the polysaccharide nucleic acid fraction of bacillus Calmette-Guérin on the production of interleukin-2 and interleukin-10 in the peripheral blood lymphocytes of patients with chronic idiopathic urticaria[J].Biomed Rep，2013，1(5)：713-718.

[8] Xu X， Gu Z， Liu S，etal.Purification and characterization of a glucan from Bacillus Calmette Guerin and the antitumor activity of its sulfated derivative[J].Carbohydr Polym，2015， 128(9)：138-146.

[9] Butov DA，Efremenko YV，Prihoda ND，etal.Randomized,placebo-controlled Phase II trial of heat-killed Mycobacterium vaccae (Immodulon batch) formulated as an oral pill (V7)[J].Immunotherapy，2013，5(10)：1047-1054.

[10] Dlugovitzky D，Stanford C，Stanford J.Immunological basis for the introduction of immunotherapy with Mycobacterium vaccae into the routine treatment of TB[J].Immunotherapy，2011，3(4)：557-568.

[11] Yang XY，Chen QF，Li YP，etal.Mycobacterium vaccae as adjuvant therapy to anti-tuberculosis chemotherapy in never-treated tuberculosis patients:a meta-analysis[J].PLoS One，2011，6(9)：e23826.

[12] Stanford JL，Stanford CA，O′Brien ME，etal.Successful immunotherapy with Mycobacterium vaccae in the treatment of adenocarcinoma of the lung [J].Eur J Cancer，2008，44(2)：224-227.

[13] Rodriguez-Guell E，Agusti G，Corominas M，etal.Mice with pulmonary tuberculosis treated with Mycobacterium vaccae develop strikingly enhanced recall gamma interferon responses to M.vaccae cell wall skeleton[J].Clin Vaccine Immunol，2008，15：893-896.

[14] Rodriguez-Guell E，Agusti G，Corominas M，etal.Impaired gamma interferon response to Mycobacterium vaccae antigens in patients with cavitary pulmonary tuberculosis[J].Clin Vaccine Immunol，2008，15(9)：1485-1488.

[15] Ming M，Li C，Luo Z，etal.Effect of inhaled inactivated Mycobacterium phlei in children with moderate asthma[J].Immunotherapy，2013，5(2)：191-197.

[16] Morales A，Herr H，Steinberg G，etal.Efficacy and safety of MCNA in patients with nonmuscle invasive bladder cancer at high risk for recurrence and progression after failed treatment with bacillus Calmette-Guérin[J].J Urol，2015，193(4)：1135-1143.

[17] 劉安石，鐘蘭蘭，楊 亞，等.草分枝桿菌對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征免疫抗體水平的影響[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，2013，49(5)：42-44.

[18] Borrero R，García ML，Canet L，etal.Evaluation of the humoral immune response and cross reactivity against Mycobacterium tuberculosis of mice immunized with liposomes containing glycolipids of Mycobacterium smegmatis[J].BMC Immunol，2013，14(1)：S13.

[19] García Mde L，Borrero R，Lanio ME，etal.Protective effect of a lipid-based preparation from mycobacterium smegmatis in a murine model of progressive pulmonary tuberculosis[J].Biomed Res Int，2014，273129：1-6.

[20] Faludi I，Szabo AM，Burian K，etal.Recombinant Mycobacterium smegmatis vaccine candidates[J].Acta Microbiol Immunol Hung，2011，58(1)：13-22.

[21] Junqueira-Kipnis AP，de Oliveira FM，Trentini MM，etal.Prime-boost with mycobacterium smegmatis recombinant vaccine improves protection in mice infected with mycobacterium tuberculosis[J].PLoS One，2013，8(11)：e78639.

[22] Bashiri G，Baker EN.Production of recombinant proteins in Mycobacterium smegmatis for structural and functional studies[J].Protein Sci，2015，24(1)：1-10.

[23] Fujiwara N，Ohara N，Ogawa M，etal.Glycopeptidolipid of Mycobacterium smegmatis J15cs affects morphology and survival in host cells[J].PLoS One，2015，10(5)：e0126813.

[24] Stebbing J，Dalgleish A，Gifford-Moore A，etal.An intra-patient placebo-controlled phase I trial to evaluate the safety and tolerability of intradermal IMM-101 in melanoma[J].Ann Oncol，2012，23(5)：1314-1319.

[25] Fowler DW，Copier J，Wilson N，etal.Mycobacteria activate gammadelta T-cell anti-tumour responses via cytokines from type 1 myeloid dendritic cells:a mechanism of action for cancerimmunotherapy[J].Cancer Immunol，2012，61(4)：535-547.

[26] Samer B，Helmout M，Satvinder M，etal.Analysis of the immunomodulatory properties of two heat-killed mycobacterial preparations in a human whole blood model[J].Immunobiology，2015，220(12)：1293-1304.

[27] Jaya F，Pushpa G，Mohan N，etal.Mycobacterium indicus pranii as stand-alone or adjunct immunotherapeutic in treatment of experimental animal tuberculosis[J].Indian J Med Res，2011，134(5)：696-703.

[28] Gupta A，Ahmad FJ，Ahmad F，etal.Protective efficacy of Mycobacterium indicus pranii against tuberculosis and underlying local lung immune responses in guinea pig model[J].Vaccine，2012，30(43)：6198-6209.

[29] Pawan K，Rohit T，Gobardhan D，etal.Mycobacterium indicus pranii and Mycobacterium bovis BCG lead to differential macrophage activation in Toll-like receptor-dependent manner[J].Immunology，2014，143(2)：258-268.

[30] Valdés HI，Montoro Cardoso CE，Hernández-Pando R.In vitro interferon gamma production in mice vaccinated with′Mycob-acterium habana′ against Mycobacterium tuberculosis antigens[J].Rev Cubana Med Trop，2012，64(3)：279-289.

[31] Valdés HI，Montoro E，Mata-Espinoza D，etal.Immunogenicity and protection conferred by Mycobacterium habana in a murine model of pulmonary tuberculosis[J].Tuberculosis，2014， 94(1)：65-72.

[32] van der Meer JW，Joosten LA，Riksen N，etal.Trained immunity:A smart way to enhance innate immune defence[J].Mol Immunol，2015，68(1)：40-44.

[收稿2015-12-24 修回2016-01-17]

(編輯 許四平)

10.3969/j.issn.1000-484X.2016.12.027

①本文受?chē)?guó)家自然科學(xué)基金(No. 31272566)和吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(20140204069NY)資助。

管清華(1970年-)，男，碩士，副教授，主要從事非結(jié)核分枝桿菌相關(guān)研究，E-mail:guanqinghua2000@126.com。

及指導(dǎo)教師：錢(qián)愛(ài)東(1960年-)，男，博士，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事動(dòng)物微生物與分子、免疫學(xué)的研究，E-mail:qianaidong0115@163.com。

Q939.93

A

1000-484X(2016)12-1846-04