Livin在肺癌中的表達及臨床意義

摘要：目的 通過檢測凋亡抑制因子Livin在肺癌患者、肺良性病患者及健康者血清中的表達情況，探討Livin對于診斷肺癌及預(yù)后的臨床意義。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗對32例肺癌患者、15例肺良性病患者、15名正常健康人血清Livin水平進行檢測。結(jié)果 肺癌組血清Livin水平表達最高，明顯高于肺良性病組和健康對照組最，三組間具有顯著差異（P<0.05）。血清Livin濃度與肺癌的分期成正相關(guān)，Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者高于Ⅰ～Ⅱ期患者（P<0.05）。結(jié)論 血清Livin水平對肺癌的診斷及判斷患者預(yù)后具有一定的臨床價值，可能成為肺癌診斷的參考指標。

關(guān)鍵詞：凋亡抑制因子；Livin；肺癌

凋亡抑制蛋白在抑制凋亡和促進腫瘤細胞增生中起著重要的作用。近來被發(fā)現(xiàn)的一種新的凋亡抑制蛋白家族成員Livin，通過阻礙線粒體途徑和死亡受體途徑的下游元件，直接阻止末端效應(yīng)因子caspase-9，caspase-7，caspase-3的活性而發(fā)揮作用，在許多腫瘤中發(fā)現(xiàn)表達上調(diào)，很有可能成為腫瘤診斷和治療的新的靶點[1，2]。本實驗通過測定血清中l(wèi)ivin水平，探討血清livin檢測在肺癌診斷中的價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2009年10月～2010年10月在哈爾濱醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院腫瘤內(nèi)科的肺癌患者共32 例（肺癌組）。其中男18例，女14例，36～72歲，平均60.6歲，所有病例均經(jīng)支氣管鏡或手術(shù)獲取病理組織，有明確的病理組織學診斷結(jié)論，其中小細胞肺癌9例，非小細胞肺癌23例。患者均未接受過化療、手術(shù)或放療。肺癌分期依據(jù)WHO制定的TNM分類法：肺良性病組15例，其中肺炎10例，炎性假瘤5例，其中男性9例，女性6例，年齡在22～87歲，平均55.3歲。對照組收集本院健康體檢人群共15例，其中男8例，女7例，32～66歲，平均59.7歲?；颊呒敖】抵驹刚呔栽负炇饦吮静杉橥鈺?/p>

1.2 方法

1.2.1標本收集 所有血清均是清晨空腹采取靜脈血3ml，以3000r/min常溫下離心10min后，分離血清，-80℃冰凍保存，待成批測定。

1.2.2檢測方法 血清livin濃度測定采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法（EIISA），450nm光波檢測吸光度。試劑盒購自藍基生物工程有限公司。嚴格按照說明書操作。

1.3統(tǒng)計學處理 三組數(shù)據(jù)的一般情況描述，連續(xù)型變量服從正態(tài)分布，采用（x±s），連續(xù)型變量多組分析，采用非參數(shù)Kruskal-Wallis檢驗；任意兩組間的比較采用Mann-Whitney檢驗；計數(shù)資料采用R*C列表χ2檢驗。肺癌組的Livin水平在不同性別、腫瘤是否轉(zhuǎn)移、腫瘤分期和病理類型比較，采用兩獨立樣本t檢驗。所有數(shù)據(jù)采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件處理，雙側(cè)檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1三組血清livin水平的表達 肺癌組、肺良性病組及對照組之間具有可比性。肺癌組的Livin水平高于肺炎組和對照組，肺炎組的Livin水平高于對照組（P<0.01），三組Livin水平比較差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.001）；見表1。

2.2臨床病理因素與血清Livin 水平的關(guān)系 Livin水平與患者的年齡、性別及病理類型無關(guān)。血清Livin濃度隨著分期而升高，Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者livin表達水平高于I～Ⅱ期的患者（P<0.05）。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組血清Livin水平高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（P<0.05）。在小細胞肺癌，鱗癌與腺癌間表達無明顯差異（P>0.05），見表2。

3討論

細胞凋亡是機體維持平衡的重要機制，凋亡抑制蛋白是一類新的獨立于Bcl-2的抗凋亡蛋白，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。Livin是人類凋亡抑制蛋白家族的新成員[3]，主要通過抑制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶、激活絲裂原激活蛋白激酶等途徑參與細胞凋亡的調(diào)節(jié)。

研究表明，livin在正常成人組織中不表達或低表達[2]，在多數(shù)腫瘤中如黑色素瘤﹑胃癌﹑膀胱癌﹑肺癌等高表達[4]。Tanabe等[5]對15例正常肺組織和38例NSCLC組織作對比研究，發(fā)現(xiàn)Livin mRNA在NSCLC組織陽性率為73.6%，正常肺組織為6.7%，顯示Livin基因在NSCLC中呈高表達。Hariu等[6]用RT-PCR方法檢測肺腺癌、鱗癌、大細胞癌組織中Livin的陽性率分別為75%、70%、100%，而在正常肺癌組織未見表達， 提示Livin有可能作為肺癌的腫瘤標記物.然而，目前國內(nèi)外關(guān)于livin在肺癌患者血清中表達情況的研究甚少，Yagihashi等[7]用EIISA法檢測肺癌血清中Livin抗體濃度，發(fā)現(xiàn)Iivin抗體的陽性表達率為58%，認為檢測血清Livin可作為診斷肺癌的一種輔助手段。本實驗通過檢測32例肺癌患者、15例肺良性病患者、15名正常健康人血清Livin水平，結(jié)果顯示livin在肺癌患者血清中表達異常增高，與肺良性病組、健康對照組有明顯差異（P<0.001）。因此，本研究認為檢測血清中Livin抗體也可以作為診斷肺癌的一種輔助手段，為我們早期發(fā)現(xiàn)腫瘤提供依據(jù)。這與Yagihashi等的研究結(jié)論一致。而且，我們還對肺癌血清中Livin表達陽性率與其臨床病理特征的關(guān)系進行了分析，結(jié)果顯示livin水平與患者的性別、年齡及腫瘤病理類型無相關(guān)性（P>0.05），但Livin的表達水平與患者臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)（P< 0.05）。血清Livin濃度隨著肺癌臨床病理學分期升高而升高，Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者血清Livin水平高于I～Ⅱ期患者（P<0.05），提示Livin對評估肺癌患者的預(yù)后具有重要意義。但是由于本實驗樣本量相對有限，尚需要大樣本的臨床研究。

目前肺癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一，約占癌癥死亡的1/3，人們一直在積極尋找敏感的腫瘤標志物，以提高肺癌早期的診斷率，并監(jiān)測患者的療效、預(yù)后及轉(zhuǎn)移情況。Livin作為一種腫瘤相關(guān)性抗原，在患者血清中檢測到相應(yīng)的抗體，為肺癌的早期診斷提供了一種簡單、經(jīng)濟的手段。

參考文獻：

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[5]Tanabe H，Yagihashi A，Tsuji N，et a1.Expression of survivin mRNA and livin mRNA in non-small cell lung cancer[J].Lung Cancer，2004，46：299-304.

[6]Hariu H，Hirohashi Y，Torigoe T，et al.Aberrant expression and potency as a cancer immunotherapy target of inhibitor of apoptosis protein family，Livin/ML-IAP in lung cancer[J].Clin Cancer Res，2005，11（3）；1000-1009.

[7]Yagihashi A，Asanuma K，Kobayashi D，et al.Detection of autoantibodies to livin and survivin in Sera from lung cancer patients[J].Lung Cancer，2005，48：217-221.編輯/成森