兒童手足口病檢驗(yàn)淺談

摘要：兒童手足口病為急性傳染病，其主要病原為EV71 和CoxA16，由于該病癥的臨床并發(fā)癥發(fā)生率也死亡率較高，因此一直以來都是臨床關(guān)注的重點(diǎn)。在臨床檢驗(yàn)當(dāng)中，對兒童手足口病的主要檢驗(yàn)內(nèi)容為血常規(guī)、心肌酶、cTnI、CRP、血糖、乳酸、血?dú)夥治黾澳X脊液。為了更快、更準(zhǔn)確的確診兒童手足口病，臨床檢驗(yàn)技術(shù)也在不斷的發(fā)展，包括多種檢測設(shè)備，本次研究針對兒童手足口病的臨床檢驗(yàn)進(jìn)展進(jìn)行匯總分析，涵蓋臨床檢驗(yàn)中的檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)設(shè)備等內(nèi)容，為臨床兒童手足口病的檢驗(yàn)提供一定的參考。

關(guān)鍵詞：兒童手足口??；臨床檢驗(yàn)；檢驗(yàn)技術(shù)；進(jìn)展

手足口?。℉FMD）為腸道病毒（EV）引起的全球性急性傳染病，可引發(fā)手足口病的腸道病毒有20 多種。手足口病多發(fā)生于學(xué)齡前兒童，主要癥狀表現(xiàn)為手、足、口腔等部位的斑丘疹、皰疹。少數(shù)病例可出現(xiàn)腦膜炎、腦炎、腦脊髓炎、肺水腫、循環(huán)障礙等，多由EV71 感染引起，致死原因主要為腦干腦炎及神經(jīng)源性肺水腫。

1血液檢查

1.1 血常規(guī) 白細(xì)胞計數(shù)正?；蚪档?，病情危重者白細(xì)胞計數(shù)可明顯升高，重癥手足口病中WBC計數(shù)增高患兒占50.00%。

1.2肌鈣蛋白I （cTnI）檢查 cTnI 僅存于心臟，是心肌特異性抗原，當(dāng)受到病毒感染的心肌細(xì)胞發(fā)生變性壞死時，cTnI 通過破損的細(xì)胞膜釋放入血，于3～5 h 升高，24 h 達(dá)高峰。在血液中持續(xù)較長時間，反映心肌細(xì)胞損害的特異性高達(dá)97%～100%，是理想的心肌細(xì)胞特異性標(biāo)志物[4]。與心肌酶學(xué)聯(lián)合應(yīng)用，可以提高其檢出率。

1.3心肌酶檢查 部分病例可有谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）升高，尤其是重癥患兒，表明HFMD患者合并有心肌損傷。心肌炎是一種比較嚴(yán)重的并發(fā)癥，也是造成患兒死亡的主要原因。但是心肌酶活性增高幅度及比例都有明顯差異。CK-MB升高例數(shù)較cTnI 多，LDH、CK-MB、α-HBDH 升高比例均較大。陳大宇等報道CK-MB活性明顯升高。重視心肌酶的聯(lián)合檢查，能及早發(fā)現(xiàn)心肌損傷，給予相應(yīng)的治療。

1.4血糖 血糖一般偏低，可能與患者發(fā)熱以及口腔皰疹影響進(jìn)食等因素有關(guān)，但重癥患者可出現(xiàn)應(yīng)激性高血糖，最高達(dá)22.0 mmol/L，研究表明，HFMD患兒一旦血糖增高，肢體無力，常提示病變累及腦干，多病情危重，預(yù)后不佳。

1.5 C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP） CRP是一種敏感的急性炎性反應(yīng)標(biāo)志物，升高程度常與炎性反應(yīng)、組織損傷的程度呈正相關(guān)，急性細(xì)菌性感染時，CRP會升高或明顯升高，有些病毒感染造成較大的組織損傷時，可使CRP含量增高，HFMD患兒CRP一般不升高，但HFMD患兒HSCRP水平明顯升高，CRP檢測是有意義的。

1.6乳酸 實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果顯示危重癥患兒血乳酸明顯高于重癥患兒（P<0.05）。

1.7血?dú)夥治?呼吸系統(tǒng)受累時可有動脈血氧分壓降低、血氧飽和度下降，二氧化碳分壓升高，酸中毒。

2腦脊液檢查

HFMD患兒的腦脊液外觀清亮，壓力增高，白細(xì)胞計數(shù)增多，多以單核細(xì)胞為主，蛋白正?；蜉p度增多，糖和氯化物正常。錢瑛等報道重癥患兒腦脊液白細(xì)胞、多核細(xì)胞比例明顯升高，腦脊液胱抑素C濃度明顯降低。并發(fā)神經(jīng)系統(tǒng)感染患兒腦脊液細(xì)胞數(shù)均升高，其中以淋巴細(xì)胞升高為主。

2.1病原學(xué)檢查

2.2病毒分離培養(yǎng) 分離到病毒顆粒是確定診斷的最客觀依據(jù)。咽、氣道分泌物、皰疹液、糞便陽性率較高。分離出的腸道病毒大多來自咽拭子和糞便，腦脊液中未分離到病毒。腸道病毒（CoxA16、EV71等）特異性核酸檢測陽性，亦可確診

HFMD 。

2.3血清學(xué)檢測 急性期與恢復(fù)期血清CoxA16、EV71 等腸道病毒中和抗體有4 倍以上的升高，該方法精確且具有特異性，但不適用于早期診斷，可作為回顧性診斷，且由于腸道病毒血清型別眾多，臨床使用檢測價值有限，而多為流行病學(xué)采用。

2.3.1聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)檢測

2.3.2逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR） 該方法檢測標(biāo)本中的EV71 快速、簡單、敏感性高，適用于咽拭子、糞便、各種體液及組織中EV71 RNA的檢測，是診斷EV71 感染的有效方法。但此法PCR 后仍需進(jìn)行凝膠電泳分析，操作也較為繁瑣，同時存在假陰性、早期患者陽性率低以及無法對多種病毒聯(lián)合檢測等不足。

2.3.3實(shí)時熒光PCR（Real-time RT-PCR） 實(shí)時熒光PCR應(yīng)用與靶序列直接結(jié)合的熒光探針可將生產(chǎn)的RNA 加以定量，其特點(diǎn)為檢測快速、敏感性強(qiáng)、擴(kuò)增產(chǎn)物可直接定量、密閉系統(tǒng)防止交叉污染等。實(shí)時熒光RT-PCR 擴(kuò)增技術(shù)越來越多的用于腸道病毒的檢測，是目前檢測EV、EV71 和CA16 的首選方法。

2.3.4基因芯片技術(shù) 該技術(shù)可以同時檢測多段基因，因此具有較高的靈敏度。也可以有效地降低檢測的假陽性率。此外，可以將多種與EV71 早期癥狀類似的病毒點(diǎn)樣到芯片上進(jìn)行聯(lián)合診斷，對于確診患者、排除疑似患者具有重要意義。

近年來HFMD發(fā)病率增高，其并發(fā)癥的發(fā)生率與病死率也有增高趨勢，目前尚無針對該病的疫苗和特效治療藥物，對癥和支持治療是主要的治療措施。普通病例選擇抗病毒藥物、干擾素及中成藥等治療效果滿意，通過實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)及早發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重并發(fā)癥的可能線索，應(yīng)用大劑量甲潑尼龍聯(lián)合免疫球蛋白治療效果顯著，積極早期應(yīng)用機(jī)械通氣，能夠提高救治成功率。

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