探析病毒感染免疫檢驗研究

摘要：病毒感染是臨床疾病形成的重要因素，多種疾病的發(fā)生都是由于病毒感染造成的，由于病毒在細(xì)胞內(nèi)的繁殖速度非常快，并且在發(fā)展的過程中還可能會出現(xiàn)變異，造成患者病癥的進一步發(fā)展或是更加嚴(yán)重。臨床上病毒感染免疫檢驗非常重要，也是判定患者病癥的重要手段，而免疫檢驗不僅需要對患者的病毒做出準(zhǔn)確的診斷，還需要對患者的病癥可能出現(xiàn)的進展提供數(shù)據(jù)支持，最后，免疫檢驗在預(yù)防接種、發(fā)病機理、免疫性治療等方面也有重要意義。研究病毒感染免疫檢驗的進展，回顧性分析免疫檢驗法的應(yīng)用進展，可以在很大程度促進病毒感染免疫檢驗技術(shù)的發(fā)展。

關(guān)鍵詞：病毒感染免疫；檢驗

醫(yī)療事業(yè)在不斷的發(fā)展，醫(yī)療水平和醫(yī)療設(shè)備也在不斷的完善進步，與此同時，在病毒感染的免疫檢驗方法也在不斷的更新?lián)Q代，各種不同的免疫檢驗方法也隨之變化，在免疫檢驗當(dāng)中，機體感染病毒后引起的免疫應(yīng)答機理也是免疫檢驗的主要方法，針對免疫細(xì)胞的數(shù)量和功能對患者的病癥進行診斷，同時，免疫檢驗的快速檢測病毒效果，根據(jù)抗體產(chǎn)生的速度及類型等對患者早期診斷也提供了數(shù)據(jù)支持，因此，免疫檢驗已經(jīng)成為了醫(yī)院對患者病癥治療和確診的重要依據(jù)，涵蓋了患者治療的所有方面，實際應(yīng)用意義重大。

1病毒感染引起的免疫性損害及機制

病毒是一種比較微小的生物，主要依靠宿主細(xì)胞而生存，其對宿主細(xì)胞的功能有一定損害作用，因此，會對機體的免疫功能產(chǎn)生抑制作用，從而會使機體的免疫病理發(fā)生改變。免疫抑制指的是通過感染免疫細(xì)胞而使免疫分子的表達下調(diào)，從而使免疫分子在血清中的有效濃度得到一定降低，進而使機體的免疫應(yīng)答反應(yīng)有所減緩。免疫損害指機體因病毒感染而出現(xiàn)病理性免疫應(yīng)答，從而使非免疫應(yīng)答組織或器官出現(xiàn)免疫損傷，進而對組織或器官受損。

2早期病毒感染的免疫檢驗方法

2.1酶聯(lián)免疫吸附試驗 酶聯(lián)免疫吸附試驗又叫ELISA試驗，它能將免疫反應(yīng)的特異性和催化作用相結(jié)合進行分析，并將已知的抗體或抗原吸附在反應(yīng)平板上，再進行酶標(biāo)抗原抗體反應(yīng)的一種試驗?zāi)Ｊ絒1]。在病毒檢驗方面，酶聯(lián)免疫吸附試驗是檢驗藍(lán)舌病、豬偽狂犬病等病癥的標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法。酶聯(lián)免疫吸附試驗的常用方法是雙抗夾心法和間接吸附試驗，其中，雙抗夾心法是早期病毒感染抗原抗體檢驗中最常用的方法。酶聯(lián)免疫吸附試驗將酶的化學(xué)反應(yīng)與抗原的抗體反應(yīng)相關(guān)特異性結(jié)合，進而促使ELISA試驗變成一種敏感且特異的免疫檢測方法。

2.2免疫熒光試驗 免疫熒光試驗是一項由熒光抗原法和熒光抗體法組成的免疫標(biāo)記技術(shù)。由于熒光素能與已知抗體結(jié)合形成熒光抗體，并將反應(yīng)后的熒光抗體置于熒光顯微鏡下觀察，根據(jù)散發(fā)出的熒光，對待檢標(biāo)本中的抗原進行鑒定和判斷[2]。還可以采用免疫熒光試驗將熒光素與蛋白質(zhì)結(jié)合，對抗體進行檢測和定位。免疫熒光試驗具有特異性、高效性和靈敏性，但檢測結(jié)果不夠客觀，檢驗流程也過于復(fù)雜。

2.3放射免疫技術(shù) 反射免疫技術(shù)又叫RIA技術(shù)，最早源自于1960年德國科學(xué)家創(chuàng)造的放射免疫分析技術(shù)，這種技術(shù)能讓抗體與被同位素標(biāo)記和未被標(biāo)記的抗原產(chǎn)生競爭性抑制，是一項體外微量性分析技術(shù)。放射免疫技術(shù)具有特異性、簡便性、靈敏度高、取樣數(shù)量少等特點，現(xiàn)階段主要用于對乙型肝炎病毒的鑒定與判斷。但由于檢測時會產(chǎn)生放射性物質(zhì)，會對研究者身體帶來一定的影，且有可能出現(xiàn)假陽性的檢測結(jié)果，還容易受外界環(huán)境因素影響而使得檢測結(jié)果出現(xiàn)異常。

2.4血細(xì)胞凝集試驗 血細(xì)胞凝集試驗主要針對在當(dāng)機體感染病毒后，會讓病毒表面的抗原與紅細(xì)胞表面的抗原受體結(jié)合，血細(xì)胞沉降率增加，形成血細(xì)胞凝集現(xiàn)象。這種試驗方法能對病毒進行定性定量的檢測，如果機體內(nèi)存在病毒抗體，就會抑制因病毒而引起的血細(xì)胞凝集現(xiàn)象[3]。這種試驗方法通常用于檢測梅毒螺旋體等病毒，這種方法目前只能確診梅毒患者，對其他病毒感染尚無法確診。此外，研究人員還根據(jù)病毒凝集紅細(xì)胞的能力和對相應(yīng)抗體的抑制特性設(shè)計出了血凝抑制試驗。

2.5中和實驗法 又稱標(biāo)準(zhǔn)試驗法，主要包括固定病毒-血清稀釋法和固定血清-稀釋病毒法兩種。這種方法主要檢測病毒的感染力，以病毒受到血清中和后的殘留感染力為依據(jù)，來對該免疫血清抑制病毒擴散的能力進行判斷。臨床上常用它來分析堅定病毒的類型和病毒的抗原性等。

3新型病毒感染免疫檢驗方法

3.1重組免疫試驗 重組免疫試驗主要對HIV抗體和HCV抗體進行檢測。與酶聯(lián)免疫吸附試驗方法相比，重組免疫試驗?zāi)軐⒏鞣N橫線式抗原結(jié)合在硝酸或纖維素膜的橫條上，并置于長條凹槽反應(yīng)盤中，加底物顯色后就能顯示血清中存在的針對性抗原。同時，這種試驗方法也能用于口蹄疫病毒的臨床檢測[4]。

3.2膠體金技術(shù) 以膠體金作為標(biāo)志物，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)中的一種新型免疫檢驗技術(shù)，具有特異性、簡便性、安全性等特點。膠體金是一種能在還原劑作用下聚集形成較小金顆粒，并能與蛋白質(zhì)結(jié)的生物藥性，它還能與其他多種生物分子結(jié)合，因此多用于免疫學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)等領(lǐng)域，以及對HIV的篩查和人體血清甲胎蛋白的檢驗。

3.3發(fā)光免疫試驗 發(fā)光免疫試驗是一種將化學(xué)發(fā)光物質(zhì)與機體免疫反應(yīng)相結(jié)合，并通過光反應(yīng)來表示待測物質(zhì)的免疫成分和濃度的新型檢驗方法。這種方法可以利用放光劑作為標(biāo)記物，保證檢驗在安全可行的環(huán)境中進行，是一種無害無毒的安全檢測方法。同時，發(fā)光免疫試驗?zāi)茉谳^短的時間內(nèi)完成對病毒的檢驗，在一定程度上滿足了臨床檢測的需要，在現(xiàn)代化病毒檢測中有良好的發(fā)展前景。

隨著科技的發(fā)展，傳統(tǒng)的病毒感染檢驗技術(shù)正在被眾多新型檢驗技術(shù)取代，越來越多安全、高效、快捷的檢驗技術(shù)被試驗人員接受。同時，在對病毒感染進行檢驗的過程中，仍存在著如測量方法不當(dāng)、試驗流程混亂、濃度超標(biāo)、標(biāo)本選取時間及方法不當(dāng)?shù)葐栴}，都不同程度地增大了病毒感染檢驗的難度。因此，在病毒檢驗過程中，要采用更高效、更安全、更簡便的新興檢驗方法，以更好地促進病毒檢驗技術(shù)的發(fā)展，也能更好地為病毒感染檢驗工作服務(wù)。

參考文獻：

[1]賈春玲，呂殿紅.酶聯(lián)免疫吸附試驗在幾種犬源人獸共患病檢測中的應(yīng)用[J].廣東畜牧獸醫(yī)科技，2012，19（6）：314-315.

[2]董波，郭家香.芻議病毒感染免疫檢驗的研究進展[J].中外醫(yī)療，2012，31（27）：191-192.

[3]彭宏君，史偉峰.漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞在抗病毒感染中作用研究進展[J].中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志，2012，34（9）：274-275.

[4]彭陸衡.病毒感染免疫檢驗的研究進展[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2012，6（5）：121-122.

編輯/孫杰