白及不同收獲時期的研究

摘要：白及是我縣的地道藥材，具有收斂止血，消腫生肌的功能。通過近年來的努力，有效解決了野生白及變家種的技術(shù)難題。為了確保人工栽培白及與野生白及的產(chǎn)品質(zhì)量一致，實(shí)現(xiàn)適時采收，本課題試圖通過對不同采收年限的人工白及質(zhì)量進(jìn)行比較試驗(yàn)，以尋求人工栽培白及的最佳采收時期。為制定合理的采收期提供試驗(yàn)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：白及；栽培；采收時期；研究

1 資料與方法

1.1一般資料 本次試驗(yàn)所采用的白及種類為紫紅花白及。試驗(yàn)地選擇桴焉鄉(xiāng)燕巖村燕巖組秦祖興的責(zé)任地中進(jìn)行，海拔1350 m，該地的上料作物為玉米，土壤疏松、耕層深厚、肥力中等、排灌方便。該地區(qū)冬天不會出現(xiàn)過冷情況，夏天溫度適宜，無酷暑現(xiàn)象，年均溫14.3℃年，降雨量1100 mm左右，無霜期280 d左右，綜合各種情況后可確定該地區(qū)適合中藥材白及生長。

供試土壤的基本理化性狀：有機(jī)質(zhì)32.6 g/Kg，全氮2.15 g/Kg，全磷0.675 g/Kg，全鉀10.20 g/Kg，速效氮66.325 mg/Kg，速效磷15.40 mg/Kg，速效鉀18.30 mg/Kg，pH 6.3，鋅0.827 μg/ml，硼2.316 μg/ml。

儀器及試藥UV-2401PC紫外-可見光分光光度計(jì)（日本島津），METTLER AE240電子天平（梅特勒-脫利多儀器[上海]有限公司）；D-無水葡萄糖對照品（中國藥品生物制品檢定所，含量測定用，批號：110833-200302），蒽酮、硫酸、無水乙醇等為分析純。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1本試驗(yàn)于2003年1月～2006年10月在海拔1350米的正安縣桴焉鄉(xiāng)燕巖村燕巖組秦祖興家責(zé)任地內(nèi)進(jìn)行。本試驗(yàn)共設(shè)4個處理（①一年收獲，②二年收獲，③三年收獲，④四年收獲），隨機(jī)區(qū)組排列，重復(fù)3次。試驗(yàn)地總面積0.17畝（11 m×10.5 m，不含保護(hù)區(qū)），試驗(yàn)地四周保護(hù)區(qū)寬度均不少于1 m。小區(qū)面積為0.009畝（3 m×2 m），各小區(qū)共植10行，每行12窩，密度為10寸×5寸，小區(qū)與小區(qū)、小區(qū)與保護(hù)行間距50 cm。田間管理與大田生產(chǎn)相同。

1.2.2選擇指標(biāo)性成分白及多糖含量作為白及質(zhì)量控制指標(biāo)。分別在采收年的9月25～30日期間按照栽培1年、2年、3年、4年的白及進(jìn)行采收，并在開水中煮5 min后晾干，然后置于55℃的恒溫干燥箱中烘干稱重送檢測定指標(biāo)性成分白及多糖。其測定方法為：取白及粉末（過三號篩）0.2 g（同時測定水分），精密稱定，置園底燒瓶中，精密加水50 ml，稱定重量，電加熱器直接加熱回流1 h（保持微沸），放冷，用水補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液5 ml，加無水乙醇35 ml，搖勻，放置1 h，離心（3000轉(zhuǎn)/min）5 min，傾去上清液，沉淀用熱水溶解，置100 ml量瓶中，放冷，用水稀釋至刻度，精密量取1 ml，照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備項(xiàng)下，稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的D-無水葡萄糖對照品17.80 mg，置100 ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，制得對照品儲備液。精密量取對照品儲備液0.2 ml、0.4 ml、0.6 ml、0.8 ml、1 ml，分別置10 ml刻度試管中，各加水至2.0 ml，搖勻，精密加入0.2%蒽酮-硫酸溶液6 ml，混勻，置水浴中保溫10 min，取出，立即置冰浴中冷卻10 min，取出，以相應(yīng)試劑為空白。照紫外-可見分光光度法，在625 nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制工作曲線]的方法，自“精密加入0.2%蒽酮-硫酸溶液6 ml”起，依法測定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出供試品溶液中含無水葡萄糖的重量（mg），計(jì)算，即得。

1.3測定方法 中國藥典對藥材中多糖測定的方法有苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法，參考有關(guān)文獻(xiàn)[1-5]及試驗(yàn)，苯酚-硫酸法測定本品時顯色后的溶液穩(wěn)定性較差，而采用蒽酮-硫酸測定本品時，結(jié)果穩(wěn)定、重現(xiàn)性好，因此本試驗(yàn)采用蒽酮-硫酸法。

1.4對產(chǎn)量結(jié)果進(jìn)行分析

2 結(jié)果與分析

2.1葡萄糖對照品工作曲線的繪制

2.1.1測定波長選擇 分別精密量取D-無水葡萄糖對照品溶液和供試品溶液適量，分別置10 ml刻度試管中，加水稀釋至2.0 ml，加0.2%蒽酮-硫酸溶液6 ml，混勻，置水浴中保溫10 min，取出，立即置冰浴中冷卻10 min，取出，以相應(yīng)試劑為空白，置分光光度計(jì)上繪制光譜圖，見圖1，從圖中可見，葡萄糖對照品與白及供試品均在625 nm處有最大吸收。

2.1.2對照品溶液和供試品溶液顯色后穩(wěn)定性考察 用0.2%蒽酮-硫酸溶液對葡萄糖對照品和白及供試品溶液進(jìn)行適量顯色，以相應(yīng)的試劑作空白，將其分別置比色皿中，應(yīng)用分光光度計(jì)進(jìn)行吸光度測量，將數(shù)值規(guī)定為625 nm，讀數(shù)頻率為10 min/次，實(shí)驗(yàn)時間為60 min，由表1可看出結(jié)果對照品溶液和供試品溶液顯色后在1 h穩(wěn)定。

1.3線性關(guān)系考察 稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的D-無水葡萄糖對照品17.80 mg，置100 ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，制得對照品儲備液。

精密量取對照品儲備液0.2 ml、0.4 ml、0.6 ml、0.8 ml、1ml，分別置10 ml刻度試管中，各加水至2.0 ml，搖勻，精密加入0.2%蒽酮-硫酸溶液6 ml，混勻，置水浴中保溫10 min，取出，立即置冰浴中冷卻10 min，取出，以相應(yīng)試劑為空白。照紫外-可見分光光度法，在625 nm波長處測定吸光度，見表2。以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制工作曲線。

以葡萄糖質(zhì)量數(shù)（mg）為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制工作曲線，見圖2，線性回歸方程為：A=6.0646X+0.0099，r=0.9997，試驗(yàn)結(jié)果表明，葡萄糖質(zhì)量數(shù)在0.036～0.18 mg范圍內(nèi)，用0.2%蒽酮-硫酸溶液顯色后的線性關(guān)系良好。

2.2不同收獲年限對白及多糖的影響 經(jīng)化驗(yàn)分析，白及多糖含量有隨種植年限增加而增加的趨勢，但增加幅度小，效果不明顯。因而，種植年限的長短對白及指標(biāo)性成分白及多糖的影響不明顯，見表3。

2.3不同收獲年限對白及產(chǎn)量的影響 白及產(chǎn)量隨生長年限的增加而增加，第二年增長的比例較大，平均畝產(chǎn)白及205.13 kg，比第一年增長113.54%；第三年次之，平均畝產(chǎn)白及268.62 kg，比第二年的205.13 kg增長30.95%；第四年最小，平均畝產(chǎn)白及292.37，見表4，比第3年的平均畝產(chǎn)268.62千克增長8.84%。經(jīng)田間觀察并分析其原因，隨著白及生長年限的增加，①當(dāng)年栽種的白及原塊莖部分腐爛，即使未爛，也喪失了生活力，在該塊莖上發(fā)生新芽的能力減弱；②隨著時間的增加，新生植株的密度相應(yīng)增多，部分苗勢明顯減弱，影響了整體產(chǎn)量的提高；③隨著生長年限的延長，小個體白及相對增多。因此，以生長2～3年的白及產(chǎn)量較為理想。

3 結(jié)論

在本試驗(yàn)研究中，隨著種植年限的延長，白及質(zhì)量和產(chǎn)量均有不同程度的提高，但對質(zhì)量的影響較小，甚至可忽略不計(jì)。從既考慮白及產(chǎn)量，又考慮白及質(zhì)量和效益的情況下，白及的收獲年限以2～3年為宜。

參考文獻(xiàn)：

[1]中國醫(yī)藥科技出版社.中國藥典[S].2005年版一部，2005：215.

[2]楊莉，王志華，陶健生.黃芪中黃芪多糖含量測定方法的比較[J].中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2005，36（9）：562-563.

[3]徐凌川，許昌盛. 18種不同來源靈芝的多糖含量測定[J].世界科學(xué)技術(shù)，2004，6（4）：57-60.

[4]馬麗耘.蒽酮-硫酸法測定靈芝多糖含量[J].首都醫(yī)藥，2004，（2）：51.

[5]歐陽臻，常鈺，李永輝，等.桑葉多糖的提取純化及其含量測定[J].時珍國醫(yī)國藥，2005，16（10）：961-962.

編輯/張燕