肝病患者血清谷氨酸脫氫酶的檢測及其預(yù)后變化規(guī)律

摘要：目的 通過觀察患者血清中谷氨酸脫氫酶（GLDH）的變化情況，以及該酶在肝細胞損害性疾病中的活性，結(jié)合谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）等指標(biāo)鑒別診斷肝病的基本類型和預(yù)后的判斷。方法 采用德意志臨床化學(xué)協(xié)會（DGKC法）檢測GLDH，同時檢測AST、ALT、TB及GGT等常規(guī)生化項目，并作相關(guān)性分析，統(tǒng)計有關(guān)指標(biāo)。結(jié)果 對于肝細胞損傷性疾病患者，血清中GLDH的活性明顯高于健康者和其他疾病患者（P<0.05）。其中急性肝病患者GLDH陽性率可達76.0%，慢性乙型肝炎為57.5%，原發(fā)性肝癌為46.2%，肝硬化為25.6%，急性脂肪肝為71.4%。結(jié)論 谷氨酸脫氫酶作為肝細胞病變，特別是急性乙型肝炎和急性脂肪肝的診斷指標(biāo)具有重要臨床價值，并對指導(dǎo)臨床治療和預(yù)后判定具有重要意義。

關(guān)鍵詞：谷氨酸脫氫酶；肝損傷；臨床應(yīng)用

谷氨酸脫氫酶（GLDH）為一種含鋅線粒體酶，主要分布于肝臟、心肌和腎細胞線粒體的基質(zhì)及內(nèi)膜中，而以肝組織活性最高。GLDH為肝線粒體特異性酶，健康人正常情況下血中含量很低，但在肝細胞損傷或壞死時可進入血流，使血清中GLDH活性明顯增高。它催化谷氨酸脫氫、脫氨最終生成α-酮戊二酸之間的可逆反應(yīng)[1]。此反應(yīng)是體內(nèi)大多數(shù)氨基酸經(jīng)脫氫聯(lián)脫氨基的關(guān)鍵步驟，也是體內(nèi)非必需氨基酸由聯(lián)合脫氨逆向反應(yīng)生成的重要反應(yīng)，還是連接氨基酸代謝，三羧酸循環(huán)的中心環(huán)節(jié)，故主要分布于肝細胞線粒體內(nèi)的GLDH只有在肝細胞受損害時才明顯升高[2]。本文利用全自動生化分析儀AU5800系列測定各種肝病患者的血清GLDH水平，并與常規(guī)肝功能指標(biāo)對比，以分析評價其臨床應(yīng)用意義。

1 資料與方法

1.1一般資料 分肝病組和正常對照值，肝病組近一年來本院就診患者共236例，男120例，女116例，年齡12～68歲。其中慢性肝炎80例，急性肝炎25例，原發(fā)性肝癌26例，肝硬化82例，其他肝炎23例，其中慢性肝炎的診斷及國家肝病臨床分型按標(biāo)準(zhǔn)劃分。正常對照組選自近6個月本院健康體檢者，共80例，其中男48例，女32例，年齡16～65歲。

1.2試劑 谷氨酸脫氫酶（GLDH）試劑批號：321505為英國RANDOX公司提供。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）試劑盒批號：AUZ2224，門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）試劑盒批號：AUZ1831，均為貝克曼庫爾特實驗系統(tǒng)（蘇州）有限公司提供。γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（GGT）試劑批號：ZCMARO009，總膽紅素（TB）試劑批號：ZCJANO020，均為上海執(zhí)誠生物科技股份有限公司提供。標(biāo)準(zhǔn)品均為英國RANDOX公司提供。

1.3儀器 Bekmancoulter AU5800全自動生化分析儀。

1.4方法

1.4.1實驗方法 嚴(yán)格按試劑盒說明書操作和結(jié)果判斷：本法是德意志臨床化學(xué)協(xié)會（DGKG）所推薦的優(yōu)化標(biāo)準(zhǔn)方法。ALT、AST為（IFCC）推薦的方法、TB為釩酸鹽氧化法、GGT為IFCC速率法，參考范圍按照檢測正常人95%水平確定參考范圍為：ALT：男性<42U/L，女性<32 U/L；AST：男性<38 U/L，女性<32 U/L；TB：5.1～28.0 umol/L，GGT：11～50 U/L；GLDH 0.7 U/L。

1.4.2統(tǒng)計學(xué)方法 兩組間均值比較采用t檢驗。陽性判斷界限采用正常對照組的（x±s）。所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計用SPSS軟件進行。

2 結(jié)果

健康組及各疾病組各指標(biāo)檢測值以及相互比較，見表1。健康組與各疾病組GLDH相關(guān)性分析（P值和陽性率），見表2。

3 討論

GLDH主要存在于肝細胞線粒體基質(zhì)內(nèi)，而且其在肝小葉不同區(qū)域的肝細胞分布有所不同，肝小葉中央靜脈周圍肝細胞中GLDH的活性為周邊細胞的1.72[3]。Schmidt E和Schmidt FW認為GLDH的主要臨床意義有3個方面：①梗阻性黃疸及非梗阻性黃疸的鑒別；②高血清轉(zhuǎn)氨酶的鑒別診斷；③評價肝細胞損害的嚴(yán)重程度，包括暴發(fā)性肝炎的預(yù)后、肝移植的排異反應(yīng)、循環(huán)衰竭等[7]。本文主要是圍繞第三個觀點進行進一步論述和驗證。

實驗結(jié)果表明：①各種肝臟疾病患者血清中GLDH的水平都明顯高于健康組，表明GLDH可以初步作為肝炎疾病的診斷指標(biāo)；②通過與健康組的相關(guān)性分析可知，慢性乙型肝炎、急性乙型肝炎、原發(fā)性肝癌和急性脂肪肝的患者組的血清GLDH活性都具有統(tǒng)計學(xué)意義。然而，肝硬化（包括肝衰竭）和重型肝炎患者的血清GLDH活性與健康組對比卻沒有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果表明，GLDH活性是隨肝炎患者病情發(fā)展而變化的，在疾病初期、急性發(fā)作時期和病情相對穩(wěn)定時，GLDH呈現(xiàn)持續(xù)高水平，當(dāng)病情不斷加重時GLDH活性反而迅速下降，特別是重癥肝炎[4]。這種現(xiàn)象的病理學(xué)解釋為：肝臟受損疾病的患者，肝細胞及線粒體受損與修復(fù)過程中，任何一方處于優(yōu)勢，則病情朝該方向發(fā)展。在急性肝炎中由于修復(fù)強于受損，最后病情好轉(zhuǎn)，GLDH活性下降并恢復(fù)正常；在重癥肝炎由于廣泛肝細胞受損或壞死，尤其在后期不可逆轉(zhuǎn)的肝細胞受損或壞死中，導(dǎo)致肝細胞絕對數(shù)下降，肝細胞受損或壞死數(shù)反而相對減少，因此GLDH活性急劇下降，預(yù)后極其復(fù)雜。所以，測定GLDH的活性對肝病早期診斷，掌握病情，判斷預(yù)后具有重要臨床意義[5]；③另外，慢性丙肝與藥物性肝炎的GLDH水平，差別無統(tǒng)計學(xué)意義?？赡苁怯捎诖思膊?biāo)本數(shù)量較少，還沒有足夠證據(jù)表明GLDH能作為慢性丙肝與藥物性肝炎的鑒別指標(biāo)，還需要進一步實驗驗證，但在臨床治療中可以作為一項參考；④本實驗將ALT、AST、TB、GGT與GLDH聯(lián)合檢測表明，GLDH反映肝實質(zhì)損傷的特異性高于另幾種酶。肝損傷性疾病患者GLDH活性增高均伴有不同程度的AST、ALT、TB、GGT活性的增高；而AST、ALT、TB、GGT活性的增高并不都有GLDH活性的增高。在動態(tài)觀察中肝膽疾病明顯升高的GLDH隨病情好轉(zhuǎn)而下降，并且其下降速度明顯快于AST和ALT。近幾年來，隨著GLDH試劑盒日益成熟及自動化分析儀的廣泛應(yīng)用，GLDH已經(jīng)成為常規(guī)肝功能測定項目投入臨床應(yīng)用，取得良好效果[6]。

綜上所述，對疑似肝損傷的病例，要重視是否存在有肝細胞線粒體破壞，以便采取和制定有效治療措施。GLDH持續(xù)高水平，顯示肝細胞線粒體破壞持續(xù)存在，表明預(yù)后不良。動態(tài)觀察GLDH指標(biāo)對慢性乙肝、急性乙肝、原發(fā)性肝癌、脂肪肝、肝硬化等具有一定的鑒別診斷意義，對患者治療及預(yù)后有重要意義。特別是對急性乙型肝炎和急性脂肪肝的診斷具有臨床重要價值，并對指導(dǎo)臨床治療和預(yù)后判斷具有重要意義。

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編輯/翟辰萬