中藥檢驗中色譜技術(shù)的應(yīng)用實踐及研究進展探析

摘要：在新醫(yī)改形勢下，如何保證中藥材安全有效應(yīng)用值得藥學(xué)工作者和臨床醫(yī)師共同關(guān)注。為了推進現(xiàn)代技術(shù)在中藥檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用，綜述近年來現(xiàn)代技術(shù)在中藥檢驗領(lǐng)域的運用及發(fā)展，分析常見現(xiàn)代色譜技術(shù)在中藥檢驗、質(zhì)量控制領(lǐng)域的應(yīng)用優(yōu)勢。

關(guān)鍵詞：中藥檢驗；色譜技術(shù)；應(yīng)用前景；研究進展

隨著現(xiàn)代檢驗技術(shù)的逐步發(fā)展，各種先進儀器和技術(shù)不斷引進并應(yīng)用于中藥檢驗、中藥質(zhì)量監(jiān)控等領(lǐng)域，現(xiàn)代技術(shù)在中藥檢驗技術(shù)的應(yīng)用已取得一些進展。在藥學(xué)工作者的不斷努力下，現(xiàn)在儀器分析技術(shù)廣泛應(yīng)用于中藥檢驗中，對中藥質(zhì)量控制起到至關(guān)重要的作用。由于新儀器、新技術(shù)的引入，拓寬了中藥檢驗的范圍與深度，在檢測手段及分離模式方面均表現(xiàn)出一定的優(yōu)越性，在一定程度上提升了中藥檢驗的準(zhǔn)確性、靈敏度與選擇性[1]。

1薄層色譜法

2000年版中國藥典中收載記錄的中藥材、中藥成方制劑共計992種，其中采用色譜方法檢驗的制劑品種占收載品種總數(shù)的49%，表明色譜技術(shù)在中藥檢驗中的重要地位[2]。在中藥檢驗鑒定中，色譜法已經(jīng)成為不可缺少的常規(guī)有效方法，對于一些成分復(fù)雜的中藥、天然藥物等，存在分離與分析鑒定的雙重優(yōu)勢。例如對熊膽和其他膽汁混合偽造的偽品、西洋參與生曬參偽造的偽品，應(yīng)用傳統(tǒng)理化方法鑒別難度較大，應(yīng)用薄層色譜法可以快速簡單進行鑒別，其分離快、靈敏度高、分辨率高、專屬性好等優(yōu)勢決定了未來在中藥檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用前景[3]。張麗艷等[4]采用薄層色譜法12批余慶吳茱萸藥材及9批其他不同產(chǎn)地的吳茱萸和2種偽品進行薄層色譜比較，分析了不同產(chǎn)地吳茱萸所含化學(xué)成分在含量的差別，為評價吳茱萸品質(zhì)優(yōu)劣、GAP規(guī)范化種植及質(zhì)量監(jiān)控提供了有力的依據(jù)。

2氣相色譜法

氣相色譜法適用于揮發(fā)性成分或通過衍生化后能夠氣化的成分的定性與定量分析，靈敏度較高且分離效率高。在含揮發(fā)油成分中藥材鑒定分析中，氣相色譜法已經(jīng)成為一種首選的色譜技術(shù)。對于不揮發(fā)成分的定量與定性，可以應(yīng)用裂解氣相色譜法進行鑒定。如龍腦、檸檬烯、芳樟醇的測定，以及經(jīng)衍生化反應(yīng)后用于分析生物堿類、內(nèi)酯類、脂肪類、酚類、糖類等其他成分，也可用于中藥殘留溶劑的檢驗。陸繼偉等[5]應(yīng)用固相萃取-氣象色譜雙塔雙柱法測定白果、肉桂、人參、紅花、廣藿香、銀杏葉等中藥樣品的有機磷類農(nóng)藥殘留量，在中藥樣品基質(zhì)、三水平添加條件下，農(nóng)藥回收率多在70.0%～120.0%，檢測限大多地域0.01 mg/kg，符合農(nóng)藥多殘留檢測要求。進一步證實氣相色譜法在中藥材樣品有機磷類農(nóng)藥殘留檢測中的應(yīng)用，具有基質(zhì)干擾小、靈敏度高、重現(xiàn)性好等多重優(yōu)勢。

3高效液相色譜法

高效液相色譜法在中藥檢驗中的應(yīng)用，具有柱效高、分離度好、重現(xiàn)性好等優(yōu)點，可以對中藥材成分進行分析。高效液相色譜法適用于具有紫外吸收的化合物的分析，可進行含量測定或定性分析。伴隨樣品純化技術(shù)的提高，采用液液萃取、超臨界萃取、液固萃取，使分離效率高的HPLC法能夠?qū)χ兴幊煞诌M行準(zhǔn)確定量。李文博等[6]采用變換波長檢測法建立了養(yǎng)血清腦顆粒HPLC指紋圖譜，確定了35個共有色譜峰在藥材中的歸屬。應(yīng)用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法鑒定部分化學(xué)成分，并對制劑中的4種指標(biāo)性成分進行定量檢測。研究解決表明制劑與藥材具有良好的色譜峰相關(guān)性，且指標(biāo)性成分在各自濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

4毛細管電泳法

毛細管電泳（CE）是近年來迅速發(fā)展的新技術(shù)，在藥物分析尤其是中藥檢驗領(lǐng)域均有研究報道。例如阿魏酸的測定通常采用薄層色譜法和高效液相色譜法，應(yīng)用毛細管區(qū)帶電泳法相較于上述兩種色譜技術(shù)，表現(xiàn)出高效、經(jīng)濟、回收率好、重現(xiàn)性好等明顯優(yōu)勢。高效毛細管電泳（HPCE）將電泳技術(shù)與色譜技術(shù)相結(jié)合，具有分離效率高、樣品用量少、靈敏度高等特點，顯露出電泳與色譜技術(shù)的雙重優(yōu)勢，是目前中藥檢驗領(lǐng)域十分重要分離、分析技術(shù)。

李紹平等[7]應(yīng)用高效毛細管電泳法測定天然與人工冬蟲夏草和苷類成分含量，得出濕熱能增加天然冬蟲夏草核苷類物質(zhì)含量這一結(jié)論。陳志良等[8]應(yīng)用高效毛細管電泳法對寧夏枸杞和枸杞果實蛋白多肽進行測定，結(jié)果兩者高效毛細管電泳圖譜差異明顯。此法在三七及菊葉三七、紫蘇子及其混淆品的鑒別中均收到良好鑒別效果，結(jié)果滿意。車?yán)诘萚9]建立了桂附地黃丸毛細管區(qū)帶電泳指紋圖譜，對12批桂附地黃丸的質(zhì)量進行鑒別，此法具有較好的精密度與重現(xiàn)性，為全面控制和評價桂附地黃丸提供了新的方法。

5超臨界流體萃取及色譜

超臨界流體萃取技術(shù)是在超臨界流體基礎(chǔ)上產(chǎn)生的色譜技術(shù)，利用超臨界流體的低粘度性質(zhì)，運用二氧化碳作為流動相，分離色譜柱一般采用固定相填充柱，對中藥材樣品或固體中藥制劑中的化學(xué)成分進行分析，質(zhì)量好、速度快、分析效率快，適用于酚類、有機酸、揮發(fā)油等中藥復(fù)雜成分的分析。超臨界流體萃取技術(shù)可在低溫下操作，兼具HPLC和GC的優(yōu)點，適合對不穩(wěn)定、揮發(fā)性強、易氧化成分進行提取，在中藥檢測與提取中具有獨特的優(yōu)勢。常憶凌等[10]應(yīng)用夾帶甲醇（流速0.4 mL·min-1）的超臨界CO2萃取六味地黃丸中的丹皮酚，此法操作簡便快速，準(zhǔn)確性好，適用于中藥復(fù)方制劑中有效成分的提取分離。

中藥作為復(fù)雜的化學(xué)物質(zhì)體系，僅僅將中藥的1～2種有效成分作為定量和定性的檢測指標(biāo)，不足以體現(xiàn)中藥材的品質(zhì)。中藥材及其制劑品種不斷推陳出新，質(zhì)量還沒有科學(xué)量化，如何應(yīng)用獨特分離模式與檢測技術(shù)建立科學(xué)的含量測定方法有待于進一步研究。在中藥檢驗中應(yīng)用現(xiàn)代色譜技術(shù)鑒別分析真?zhèn)闻c質(zhì)量，需要創(chuàng)建更為實用和先進的質(zhì)量評價體系，發(fā)展中藥質(zhì)量控制技術(shù)，引入更為先進的儀器與技術(shù)，如LC-NMR、CE-MS、CE-HPLC等高效率、高質(zhì)量的聯(lián)用技術(shù)，才能夠更為有效地保證中藥材的安全性、有效性與可控性，實現(xiàn)中藥的現(xiàn)代化管理。

參考文獻：

[1]鄭清瑗，陳煒璇，錢浩泉.中藥栓劑中有機氯農(nóng)藥殘留量測定方法的探索（Ⅰ）[J].中藥新藥與臨床藥理，2008，14（02）：224.

[2]朱妙琴.天麻等中藥材的裂解-氣相色譜指紋鑒別[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2005，14（04）：191.

[3]唐濤，張維冰，李彤，等.六味地黃丸組分的二維液相色譜分離[J].分析化學(xué)，2007，22（12）：47.

[4]張麗艷，羅君，李健，等.吳茱萸藥材薄層色譜指紋圖譜研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2011，12（12）：176.

[5]陸繼偉，苗水，毛秀紅，等.固相萃取-氣相色譜雙塔雙柱法同時測定中藥材中53種有機磷類農(nóng)藥殘留量[J].中成藥，2010，09（01）：149.

[6]李文博，韓建平，高鈞，等.養(yǎng)血清腦顆粒的高效液相色譜指紋圖譜研究[J].分析化學(xué)，2011（03）：122.

[7]李紹平，李萍，季暉，等.天然與發(fā)酵培養(yǎng)冬蟲夏草中核苷類成分的含量及其變化[J].藥學(xué)學(xué)報，2001，36（6）：436.

[8]陳志良，陳振德，侯連兵，等.枸杞子蛋白多肽的高效毛細管電泳法鑒別[J].中國藥學(xué)雜志，2001，36（3）：79-81.

[9]車?yán)冢瑢O國祥，李閆飛.桂附地黃丸的毛細管電泳指紋圖譜研究[J].中南藥學(xué)，2011（06）.

[10]常憶凌，劉本.超臨界流體萃取六味地黃丸中的丹皮酚[J].中國中藥雜志，2006，31（8）：172.

編輯/丁一