宮頸癌組織中COX2、P21、MMP-9的蛋白表達(dá)及臨床意義

(四川省廣元市中心醫(yī)院， 四川 廣元 628000)

·臨床醫(yī)學(xué)·

宮頸癌組織中COX2、P21、MMP-9的蛋白表達(dá)及臨床意義

侯宇

(四川省廣元市中心醫(yī)院， 四川 廣元 628000)

目的探討宮頸癌組織中環(huán)氧化酶-2(COX-2)、P21、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)的表達(dá)及意義。方法回顧性分析行外科手術(shù)治療的48例確診宮頸癌患者臨床資料(觀察組)，將同期因其他原因入院行子宮切除術(shù)的50例患者納入對照組。免疫組化法分析兩組受試者宮頸組織中COX2、P21、MMP-9的表達(dá)情況。結(jié)果觀察組宮頸組織中MMP-9及COX-2陽性率均顯著高于對照組(P<0.05)；其中臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期的患者M(jìn)MP-9、COX-2陽性率顯著低于Ⅲ～Ⅳ期患者(P<0.05)。觀察組腺癌患者及對照組患者宮頸組織中P21表達(dá)均為陰性，陽性率為0.0%；觀察組鱗癌患者陰性率為30.6%，陽性率為69.4%，顯著高于同組的腺癌患者及對照組患者(P<0.05)。結(jié)論宮頸癌患者宮頸病變組織中COX-2、MMP-9和P21均為高表達(dá)，且COX-2、MMP-9表達(dá)水平同臨床分期關(guān)系密切，P21表達(dá)水平同病理類型關(guān)系密切。

宮頸癌；環(huán)氧化酶-2;P21；基質(zhì)金屬蛋白酶-9

宮頸癌(cervical cancer)是一種婦科常見惡性腫瘤，對女性健康安全威脅極大。隨著臨床研究的深入，越來越多學(xué)者發(fā)現(xiàn)病灶組織中環(huán)氧化酶-2(COX-2)、P21、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)的表達(dá)情況同患者病情發(fā)展程度關(guān)系密切[1]。本研究以此為方向，通過比較48例確診宮頸癌患者及50例非宮頸癌因素行子宮切除術(shù)患者宮頸組織內(nèi)COX2、P21、MMP-9表達(dá)情況差異，分析上述指標(biāo)在宮頸癌臨床診斷及病情評估中的價值，為診療工作的順利開展提供依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料回顧性分析2013年2月～2015年7月于我院行外科手術(shù)治療的48例確診宮頸癌患者及因其他原因入院行子宮切除術(shù)的50例宮頸組織正常患者臨床資料，分別將其納入觀察組(n=48)和對照組(n=50)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①相關(guān)治療禁忌癥的患者；②年齡不足35歲或超過80歲的患者；③孕期或哺乳期婦女；④合并嚴(yán)重器質(zhì)性病變、自身免疫性疾病、嚴(yán)重臟器功能障礙、凝血功能障礙、精神疾病、意識障礙或其他原發(fā)性惡性腫瘤者；⑤中途更改術(shù)式、轉(zhuǎn)院、死亡或隨訪期失聯(lián)的患者；⑥臨床資料不全者；⑦入組前接受化療、放療等其他治療措施者。此次入組受試者均經(jīng)病理檢查確診，對照組符合《婦科學(xué)(第14版)》[2]中相關(guān)疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)，患者年齡為38～69歲，平均(54.8±7.2)歲。觀察組受試者則符合《常見婦科惡性腫瘤診治指南(第4版)》[3]中宮頸癌相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，患者年齡為36～67歲，平均(54.5±7.4)歲；腫瘤最大直徑(4.8±1.0)cm：國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)臨床分期情況：Ⅰ期18例，Ⅱ期16例，Ⅲ期10例，Ⅳ期4例；分化程度：高分化22例，中分化16例，低分化10例；病理分型：腺癌12例，鱗癌36例。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法兩組受試者均參考《婦科腫瘤手術(shù)學(xué)》[4]中相關(guān)要求及操作規(guī)范完成手術(shù)治療，手術(shù)采集的宮頸組織樣本則參考《病理學(xué)(第8版)》[5]中相關(guān)要求完成病理檢查。經(jīng)10%甲醛固定后石蠟包埋病理組織，做5μm連續(xù)切片；參考免疫組化(SP)試劑盒(由上海研卉生物科技有限公司提供)使用說明書行常規(guī)SP染色，鼠抗人MMP-9單克隆抗體及鼠抗人COX-2單克隆抗體均由上海酶聯(lián)生物研究所提供，P21蛋白抗體由英國Abcam公司提供。

1.3 SP結(jié)果評估標(biāo)準(zhǔn)[1]MMP-9、COX-2均以光學(xué)顯微鏡下可見細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，每張切片在400倍光鏡下觀察10個視野，每視野計(jì)數(shù)100個腫瘤細(xì)胞，共計(jì)數(shù)1000個腫瘤細(xì)胞；陽性表達(dá)率(PI)=(陽性細(xì)胞數(shù)/1000)×100%；陰性(-)：PI≤10%；陽性(+)：PI>10%。P21以光學(xué)顯微鏡下可見細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色均勻顆粒為陽性細(xì)胞，每張切片在400倍光鏡下觀察10個視野，每視野計(jì)數(shù)100個腫瘤細(xì)胞，共計(jì)數(shù)1000個腫瘤細(xì)胞；陰性(-)：PI<6%；弱陽性(+)：PI為6%～25%；中陽性(++)：PI為26%～50%；強(qiáng)陽性(++)：PI>50%。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法將文中相關(guān)數(shù)據(jù)輸入至統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0中進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料采用(%)表示，行χ2檢驗(yàn)，以P<0.05提示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1兩組宮頸組織中MMP-9表達(dá)比較觀察組患者宮頸組織中MMP-9陽性率顯著高于對照組，差異有顯著性(P<0.05)；觀察組48例患者中，臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期的患者M(jìn)MP-9陽性率顯著低于Ⅲ～Ⅳ期患者，差異有顯著性(P<0.05)；見表1。

表1兩組宮頸組織中MMP-9表達(dá)比較(例,%)

組別n臨床分期(-)(+)觀察組48Ⅰ～Ⅱ(n=34)22(64.7)12(35.3)abⅢ～Ⅳ(n=14)5(35.7)9(64.3)a對照組50-47(94.0)3(6.0)

與對照組比較，a：P<0.05；與觀察組Ⅲ～Ⅳ期比較，b：P<0.05

2.2兩組宮頸組織中COX-2表達(dá)比較觀察組患者宮頸組織中COX-2陽性率顯著高于對照組，差異有顯著性(P<0.05)；觀察組48例患者中，臨床分期為Ⅰ～Ⅱ期的患者COX-2陽性率顯著低于Ⅲ～Ⅳ期患者，差異有顯著性(P<0.05)；見表2。

表2兩組宮頸組織中COX-2表達(dá)比較(例,%)

組別n臨床分期(-)(+)觀察組48Ⅰ～Ⅱ(n=34)21(61.8)a13(38.2)abⅢ～Ⅳ(n=14)3(21.4)a11(78.6)a對照組50-50(100.0)b0(0.0)

與對照組比較，a：P<0.05；與觀察組III～I(xiàn)V期比較，b：P<0.05

2.3兩組宮頸組織中P21表達(dá)比較觀察組腺癌患者及對照組患者宮頸組織中P21表達(dá)均為陰性，陽性率為0.0%；觀察組鱗癌患者陰性率為30.6%，陽性率為69.4%，顯著高于同組的腺癌患者及對照組患者，差異有顯著性(P<0.05)；見表3。

表3兩組宮頸組織中P21表達(dá)比較(例,%)

組別n病理分型(-)(+)(++)觀察組48腺癌(n=12)12(100.0)0(0.0)0(0.0)鱗癌(n=36)11(30.6)12(33.3)ac13(36.1)ac對照組50-50(100.0)0(0.0)0(0.0)

與對照組比較，a：P<0.05；與觀察組腺癌比較，c：P<0.05

3 討 論

宮頸癌(cervical cancer)是一種以30～35歲女性為高發(fā)群體的婦科常見惡性腫瘤，具有惡性程度高、5年死亡風(fēng)險(xiǎn)大等特點(diǎn)[6]，現(xiàn)已成為威脅女性健康安全的常見腫瘤受到社會及醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。相關(guān)研究表明，宮頸癌近年來在我國有年輕化發(fā)展趨勢[7]，但受宮頸細(xì)胞學(xué)篩查及人們健康意識的不斷提高，其早期檢出率得到明顯提升，因及早診斷與治療而獲得理想預(yù)后的患者人數(shù)也不斷增多。

P21基因是一種位于p53基因下游的細(xì)胞周期素依賴性激酶抑制因子[8]，能通過同P53相互作用或抑制CDK2/4復(fù)合物達(dá)到調(diào)控細(xì)胞周期的目的[9]。相關(guān)研究證實(shí)，P21同多種腫瘤的分化、增殖、浸潤程度及轉(zhuǎn)移情況等均有密切關(guān)系，非小細(xì)胞肺癌、胃癌、宮頸癌等癌灶組織內(nèi)均可見P21表達(dá)異常情況[10]。李銳等[11]發(fā)現(xiàn)，P21的表達(dá)同原位癌、鱗癌發(fā)生及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況相關(guān)，同組織學(xué)分級情況無關(guān)，宮頸鱗癌患者的癌灶組織P21表達(dá)陽性率可達(dá)到65.7%，同本研究的69.4%類似。提示宮頸癌鱗癌患者?？梢姲┰顑?nèi)P21過度表達(dá)情況，臨床可將該指標(biāo)作為鑒別鱗癌及腺癌的輔助依據(jù)，為診療工作的順利開展提供條件。

COX是催化花生四烯酸轉(zhuǎn)化為前列腺素的關(guān)鍵酶,COX-2作為其兩種同工酶之一，鮮少存在于正常生理狀態(tài)的組織中。此前有研究指出，COX-2具有抑制細(xì)胞凋亡、刺激癌細(xì)胞增殖、分化及促進(jìn)癌灶內(nèi)心血管生成的作用[12]，能直接參與腫瘤的生成及發(fā)展過程，在宮頸癌、非小細(xì)胞肺癌、甲狀腺乳頭狀癌等多種惡性腫瘤中均存在過度表達(dá)情況[13]，需引起臨床重視。MMP-9是基質(zhì)金屬蛋白酶類的重要組成部分之一,同多種腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切[14]。本研究將COX-2和MMP-9在宮頸癌癌灶組織內(nèi)的表達(dá)情況作為重點(diǎn)研究對象展開分析，發(fā)現(xiàn)正常宮頸組織內(nèi)并未檢測出COX-2陽性細(xì)胞，MMP-9陽性率也僅為6.0%；而分期為I～I(xiàn)I期的宮頸癌患者COX-2陽性率為38.2%，MMP-9陽性率為38.2%，均顯著高于對照組患者，但明顯低于臨床分期為III～I(xiàn)V期的受試者，同多數(shù)學(xué)者報(bào)道結(jié)論基本一致[15]，證實(shí)COX-2及MMP-9均在宮頸癌病灶組織內(nèi)呈高表達(dá)，且陽性率隨病情發(fā)展程度的加深而逐漸提高，猜測造成此結(jié)果的原因同臨床分期較高的患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)較高相關(guān)。提示臨床可將COX-2及MMP-9作為評估預(yù)后及病情發(fā)展程度的有效指標(biāo)用于診療工作中，為針對性治療干預(yù)措施的順利開展提供條件。

本研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌患者的癌變組織中均可見P21基因、COX-2、MMP-9過度表達(dá)情況，猜測其可能在宮頸癌細(xì)胞增殖、浸潤及轉(zhuǎn)移中起到協(xié)同作用，但由于目前臨床缺乏理論支持，該猜測仍存在進(jìn)一步研究空間，可擴(kuò)大樣本量并盡可能排除相關(guān)干擾因素后將其作為后續(xù)研究課題予以深入分析，以此獲得更完善、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膱?bào)道結(jié)果。

綜上所述，宮頸癌患者宮頸病變組織中COX-2、MMP-9和P21均為高表達(dá)，且COX-2、MMP-9表達(dá)水平同臨床分期關(guān)系密切，P21表達(dá)水平同病理類型關(guān)系密切。臨床可將上述指標(biāo)作為診斷及評估宮頸癌病變程度的有效指標(biāo)，為診療工作的順利開展提供條件。

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ImplicationandExpressionofCOX2,P21andMMP-9inCervicalCancerTissues

HOU Yu

(CentralHospitalofGuangyuanCity，Guangyuan，Sichuan628000，China)

ObjectiveTo investigate the expression of cyclooxygenase-2 (COX-22),P21 and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) in cervical cancer tissues and analyse its significance.MethodsThe clinical data of 48 patients with confirmed cervical cancer who underwent surgery (Study group) were analyzed retrospectively. 50 patients who underwent hysterectomy because of other reasons were served as control group.The expression of COX2,P21 and MMP-9 in cervical tissues was tested by immuno histochemistry in the two groups.ResultsThe positive rates of MMP-9 and COX-2 in cervical tissues in the study group were significantly higher than those in control group (P<0.05),and those in patients at clinical stage Ⅰ～Ⅱ were significantly lower than those at stage Ⅲ～Ⅳ (P<0.05).P21 positively expressed in cervical tissues of patients with adenocarcinoma in study group and control group,and the positive rate was 0.0% while the negative rate and positive rate in patients with squamous cell carcinoma in study group (30.6% and 69.4%) were significantly higher than those in patients with adenocarcinoma in the same group and patients in the control group (P<0.05).ConclusionCOX-2,MMP-9 and P21 are highly expressed in cervical cancer tissues,and the expression levels of COX-2 and MMP-9 are closely related to clinical stage while the expression level of P21 is closely related to the pathological type.

cervical cancer;COX2;P21;MMP-9

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2016.06.016

2016-07-05；

2016-10-23

T737.33

A

秦旭平)