山東人類精子庫自精保存的現(xiàn)狀分析及對策*

宋曉輝 王 麗劉詩輝 肖艷紅 仝海云 韓文凱

山東大學(xué)生殖醫(yī)學(xué)研究中心；國家輔助生殖與優(yōu)生工程技術(shù)研究中心；生殖內(nèi)分泌教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（山東濟(jì)南 250001）

山東人類精子庫自精保存的現(xiàn)狀分析及對策*

宋曉輝 王 麗**劉詩輝 肖艷紅 仝海云 韓文凱

山東大學(xué)生殖醫(yī)學(xué)研究中心；國家輔助生殖與優(yōu)生工程技術(shù)研究中心；生殖內(nèi)分泌教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室（山東濟(jì)南 250001）

目的 回顧分析山東大學(xué)附屬生殖醫(yī)院人類精子庫（以下簡稱山東人類精子庫）從2009年1月到2015年12月共317名自精保存患者的情況，總結(jié)工作中已取得的經(jīng)驗(yàn)及存在的不足，探索未來的發(fā)展方向。方法 從每年自精保存的人數(shù)變化、保存原因、年齡、學(xué)歷和職業(yè)等方面回顧性分析山東人類精子庫自精保存的情況。結(jié)果 山東人類精子庫每年自精保存人數(shù)總體呈上升趨勢，在自精保存原因中，因來我院輔助生殖取精困難或少弱精子癥患者保存?zhèn)溆镁铀急壤罡撸s為47.6%；其次為保存精子以備未來生育使用，所占比例約為34.7%。自精保存者以中青年為主，人員組成多樣化，以具有大專以上學(xué)歷的知識分子、白領(lǐng)、公務(wù)員所占比例最高，且各類人員自精保存原因不同。結(jié)論 越來越多的人開始接受自精保存。人類精子庫應(yīng)加大對醫(yī)務(wù)工作者及社會人員的宣傳，讓更多的人了解自精保存的現(xiàn)實(shí)作用，使更多的人在需要時能夠到人類精子庫進(jìn)行自精保存，延續(xù)自己生育的能力。

精液保存; 精子庫; 生殖技術(shù), 輔助

Key woorrddss semen preservation; sperm bank; reproductive techniques, assisted

自精保存又稱生殖保險或男性生育力保存，是人類精子庫的工作內(nèi)容之一，它是指以生殖保險為目的，預(yù)先將精液保存于人類精子庫，待需要時再進(jìn)行解凍使用[1]。隨著輔助生殖技術(shù)和人類精子庫的發(fā)展，精液冷凍技術(shù)結(jié)合輔助生殖技術(shù)更進(jìn)一步拓寬了不孕不育的治療范圍[2]，冷凍精液在臨床被廣泛使用，自精保存也越來越受到大眾的了解和接受。自精保存可適用于廣泛的人群，特別是接受放化療或接觸有害有毒物質(zhì)的患者、接受輔助生殖時取精困難或少弱精子癥患者、保存精子以備未來生育的患者、夫妻長期兩地分居接受輔助生殖時男方無法到場等情況。本文主要統(tǒng)計(jì)2009年1月到2015年12月7年間到山東人類精子庫自精保存患者的情況，總結(jié)自精保存工作中的經(jīng)驗(yàn)與不足并探索其未來的發(fā)展方向。

資料與方法

一、資料

選取2009年1月到2015年12月在山東人類精子庫進(jìn)行自精保存的患者共317 人（401人次，其中58人保存兩次或兩次以上）。自精保存者需攜帶有效證件來我?guī)焯岢錾暾?，在詳?xì)了解自精保存流程和冷凍風(fēng)險后簽訂自精保存知情同意書。自精保存者須進(jìn)行必要的實(shí)驗(yàn)室檢查，包括乙肝五項(xiàng)、丙肝、梅毒、艾滋病毒、優(yōu)生五項(xiàng)（TORCH）等。按照第五版《世界衛(wèi)生組織人類精液檢查與處理實(shí)驗(yàn)室手冊》標(biāo)準(zhǔn)對精液的質(zhì)量進(jìn)行檢查，包括精液量、液化時間、pH值、濃度、存活率、總活力等，并對冷凍的精液做冷凍復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)，自精保存者根據(jù)實(shí)際情況自主決定是否冷凍所留取的精液。

二、方法

對自精保存者每年人數(shù)變化、保存原因以及年齡和學(xué)歷職業(yè)等情況進(jìn)行回顧性分析。

結(jié) 果

一、自精保存者每年的人數(shù)變化

山東人類精子庫每年自精保存人數(shù)、人次總體呈上升趨勢，2015年自精保存人數(shù)已經(jīng)由2009年的28人升至71人，人次由39次升至89次，見表1。

二、自精保存的原因

自精保存者申請自精保存的原因主要分為以下幾個方面：接受輔助生殖技術(shù)時取精困難或少弱精子癥患者、保存精子以備將來生育、因病接受放化療和手術(shù)、高危職業(yè)等。2009年至2015年自精保存的總?cè)藬?shù)為317人，因來我院接受輔助生殖取精困難或少弱精子癥患者而保存?zhèn)溆镁铀急壤罡呒s為47.6%（151/317），其次為保存精子以備將來生育所占比例約為34.7%（110/317），因病接受放化療和手術(shù)所占比例為14.8%(47/317)，因高危職業(yè)保存精子所占比例為1.89%（6/317）。另外保存自己精液供科研用1例，因超齡拒絕捐精后自精保存1例，因接觸了致病菌的防疫站工作人員來保存精液1例。2009年至2015年的自精保存原因年度分布情況見表2。

表1 2009年至2015年自精保存人數(shù)和人次變化

表2 自精保存的原因年度分布

三、自精保存者的年齡分布

317名自精保存者中年齡最小的為17歲，最大的為68歲，中位年齡為33歲，多數(shù)患者年齡為21～40歲，見表3。

四、自精保存者的人員組成

317名自精保存者中，具有大專以上學(xué)歷的知識分子、白領(lǐng)、公務(wù)員等所占比例最高，其次為具有高中以下學(xué)歷的人員，各人群自精保存的主要原因并不相同，見表4。

表3 自精保存者年齡分布

表4 自精保存者主要人員組成和各類人員自精保存的主要原因

五、特殊病例

317名自精保存者中因取精困難而申請?jiān)和馊【臑?3人；單獨(dú)罐保存1例乙肝大三陽腫瘤患者；保存自己精液供科研用1人；因精液質(zhì)量差或冷凍復(fù)蘇結(jié)果差放棄冷凍保存的有35人；3人因精液量太少而未能冷凍保存。

討 論

1953年世界上首次運(yùn)用人類冷凍精液成功受孕，此后精子液氮冷凍技術(shù)日益成熟，相關(guān)法律與行業(yè)規(guī)范體系逐漸完善，人類精子庫得以蓬勃發(fā)展[3]。人類精子庫的主要任務(wù)之一是對供精者的精液進(jìn)行冷凍保存用于治療不育癥和提供生殖保險服務(wù)[4]。全國人類精子庫面臨的共同問題是大部分精力用在供精者的冷凍保存，而自精保存宣傳力度薄弱影響力小，本文則對山東人類精子庫自精保存的情況進(jìn)行了回顧性分析。

自精保存伴隨著人類精子庫的出現(xiàn)一直作為新鮮的事物而未被廣泛接受[5]，2009年全年山東人類精子庫僅28人前來保存精子。隨著來本院做輔助生殖人數(shù)的增多，每年因到我院接受輔助生殖時取精困難或少弱精子癥而保存?zhèn)溆镁拥娜藬?shù)也有遞增趨勢，而且在近7年自精保存原因中所占比例也最高。分析顯示，2011年后人數(shù)增長比較快，主要是因?yàn)殡S著輔助生殖技術(shù)的開展且醫(yī)護(hù)人員主動對患者進(jìn)行宣傳后保存精子以備將來使用的人數(shù)有所增多。所以，在今后的工作中應(yīng)加大正面宣傳力度，完善合理的宣傳方式和宣傳渠道，讓更多的人了解精子庫，了解自精保存。

本文分析顯示，自精保存者以中青年為主，原因?yàn)檫@部分人群本身相對有更強(qiáng)烈的生育愿望，對自精保存易于接受。有報道指出大約15%新發(fā)男性癌癥患者是55歲前被診斷出來的，這其中大約26%的人年齡低于20歲[6]，本文分析發(fā)現(xiàn)17名學(xué)生自精保存里有16人是因重病接受放化療的患者，重病或癌癥成為年輕未婚人群保存精液的主要原因。腫瘤本身可對精子的生成產(chǎn)生影響，研究表明在未做放化療前無精子癥要多于正常人[7]。化療、放療、手術(shù)或聯(lián)合治療更會導(dǎo)致精子質(zhì)量顯著降低，引起患者暫時或永久的不育癥[8]，在接受放療時因人體中睪丸是對輻射最為敏感的組織之一，直接輻射劑量低至2Gy（200rad）就足以損傷生精功能[9]，甚至造成無精子癥即使恢復(fù)后也可能改變精子的受精能力，改變胚胎階段的基因表達(dá)[10]，給患者和家庭帶來了極大痛苦。隨著先進(jìn)的醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展，腫瘤的生存時間大大的延長，使得治療后的重心轉(zhuǎn)移到生活質(zhì)量上，對于未婚未育的患者來說生育力保存顯得越來越重要。雖然我們的數(shù)據(jù)顯示因病接受放化療和手術(shù)自精保存患者比例在逐年升高，但是也僅占到總?cè)藬?shù)的14.8%，出現(xiàn)這樣低比例的結(jié)果我們分析可能存在如下兩方面原因：一是我們精子庫依托于年周期數(shù)巨大的生殖醫(yī)院，輔助生殖中取精困難、少弱精子癥的患者會被推薦做自精保存以備取卵時使用，這部分人占的比例很大，相對而言因病接受放化療和手術(shù)的人群占的比例就顯得小了。二是精子庫和自精保存對于社會大眾甚至腫瘤科醫(yī)生相對陌生，很多有需要的腫瘤患者并不知曉可以在放化療前保存生育力。欣喜的是因病接受放化療和手術(shù)的自精保存患者所占的比例正在逐年上升，但保存生育力的腫瘤病人中相當(dāng)一部分是接受放化療后才來保存的，這部分人往往因精液質(zhì)量差導(dǎo)致保存失敗，留下終身遺憾。所以人類精子庫以后應(yīng)加大與醫(yī)院腫瘤相關(guān)科室的聯(lián)系，一方面，共同探討合適的精液冷凍時機(jī)；另一方面，讓更多的醫(yī)務(wù)人員和患者了解自精保存的價值，可以牢牢把握自己未來生育的主動權(quán)。

目前，從事高危職業(yè)者（如軍人、運(yùn)動員、礦工等）對于自精保存的了解還很少，但這部分人較其他人更需要提早保存。有報道指出高原缺氧、高溫、寒冷、電磁輻射、高強(qiáng)度作業(yè)、大運(yùn)動量訓(xùn)練、艱苦環(huán)境、過度疲勞、精神緊張和壓力等都會對軍人的精液質(zhì)量產(chǎn)生影響[11]，特別是高原低氧環(huán)境存在多種對人體生殖功能不利的因素[12]。本文分析發(fā)現(xiàn)12名軍人自精保存中有5人是因少弱精子癥患者輔助生殖而做自精保存，這與相關(guān)報道相符合，所以在加強(qiáng)生殖健康教育和保健意識的同時應(yīng)建議有條件的入伍軍人提早做生育力保存。

分析顯示具有大專學(xué)歷以上的知識分子或白領(lǐng)等高收入人群是保存精子以備未來使用的主要人群，占到56.2%。該類人群知識水平高，經(jīng)濟(jì)條件較好，年齡多為中青年，生育愿望較強(qiáng)烈，對自精保存容易理解與接受，所以人類精子庫可以多采用青年人喜好的新媒體方式進(jìn)行宣傳，比如通過微信、QQ、微博、網(wǎng)站等方式進(jìn)行宣傳，讓更多的該類人群及早了解并及早選擇自精保存。

隨著山東人類精子庫多年的發(fā)展，我們對自精保存的流程也進(jìn)行了改革和創(chuàng)新。在接受輔助生殖的患者中，有很多因怕取卵的當(dāng)天男方無法取出精液，所以先到精子庫取精冷凍備用。而取精困難的患者中有一部分因心理等因素在精子庫仍然無法取出精液，本著為病人服務(wù)的原則我們制定院外取精的條款，嚴(yán)格執(zhí)行倫理原則并送交醫(yī)院倫理委員會審核通過[13]對這部分保存者的精液留取DNA樣本，患者本人及妻子（已婚者）簽字按手印確認(rèn)。317名自精保存者中有33人申請?jiān)和馊【⑶掖蠖鄶?shù)取得成功。

Tedder等[14]發(fā)現(xiàn)同一液氮罐中有病毒陽性的標(biāo)本可以引起交叉污染，樣本包裝存在縫隙時液氮就會成為病毒相互污染的媒介，雖然尚無生殖中心使用精子庫冷凍精液發(fā)生交叉污染事例發(fā)生，但是不能就此忽視交叉污染的風(fēng)險，它只是難以被估計(jì)的，很難確定發(fā)生可能性大小[15]，所以我們精子庫建立了嚴(yán)格的規(guī)范和標(biāo)準(zhǔn)操作程序文件，患者在申請自精保存時必須提供完整有效的實(shí)驗(yàn)室檢查報告單，分裝冷凍過程與捐精志愿者分開，并且用自精保存專用液氮罐儲存。因現(xiàn)階段申請自精保存的患者實(shí)驗(yàn)室檢查報告單必須為陰性而像乙肝等傳染病患者就失去了生育力保存的機(jī)會，給患者留下了一輩子的遺憾。本精子庫本著服務(wù)病人的原則，對1例乙肝大三陽的腫瘤待化療患者采用單獨(dú)罐進(jìn)行自精保存。未來我們計(jì)劃使用密封冷凍管取代傳統(tǒng)的螺紋冷凍管對自精保存精液分罐儲存，使這部分病人同樣享有保存自身生育力的權(quán)利。

總之，自精保存具有廣泛的適應(yīng)人群，為這些人群保存生育能力帶來了可能，自精保存人數(shù)呈逐年上升趨勢，但目前仍明顯偏少，這就使得很多患者失去了保存生育能力的機(jī)會，留下終生的遺憾，未來人類精子庫應(yīng)在提高冷凍保存技術(shù)的基礎(chǔ)上加大宣傳力度，讓更多的人了解自精保存，更好地發(fā)揮生殖保險的作用，為更多的患者保留生育的希望。

1 張軍榮, 姚康壽. 自精保存在生殖保險中的應(yīng)用及研究進(jìn)展. 國際生殖健康/計(jì)劃生育雜志 2011; 30(4): 309-313

2 Kyono K,Nakajo Y,Doshida M, et al. Birth of a healthy male infant after transfer of vitrifi ed-warmed blastocysts derived from intracytoplasmic sperm injection with vitrifi ed-warmed oocytes and frozen-thawed spermatozoa. J Assist Reprod Genet 2009; 26(8): 451-453

3 平萍, 曹小蓉, 閆峰, 等.上海市人類精子庫捐精現(xiàn)狀及臨床應(yīng)用回顧性分析.中國男科學(xué)雜志 2011; 25(10): 47-50

4 衛(wèi)生部關(guān)于修訂人類輔助生殖技術(shù)與人類精子庫相關(guān)技術(shù)規(guī)范、基本標(biāo)準(zhǔn)和倫理原則的通知. 中華人民共和國衛(wèi)生部公報 2003; (3): 1-10

5 平萍, 朱曉斌, 劉勇, 等. 上海地區(qū)男性生殖保險6年回顧性分析. 中國男科學(xué)雜志 2009; 23(8): 41-44

6 Steliarova-Foucher E, Stiller C, Kaatsch P, et al. Lancet 2004; 364(9451): 2097-2105

7 盛慧強(qiáng), 張欣宗, 洪艷. 男性腫瘤患者精液冷凍保存后常規(guī)參數(shù)分析. 中華男科學(xué)雜志 2015; 21(1): 44-47

8 奚穎霞, 張欣宗. 惡性腫瘤及其治療對男性生育力的影響研究進(jìn)展. 中國男科學(xué)雜志 2013; 27(5): 70-72

9 馬永江. 工作環(huán)境對男性生殖健康的影響. 中國男科學(xué)雜志 2000; 14(3): 203-205

10 Maselli J, Hsles BF, Robaire B. Paternal exposure to testis cancer chemotherapeutics alters sperm fertilizing capacity and affects gene expression in eight-cell stage rat embryo.Andrology 2014; 2(2): 259-266

11 傅正英. 特殊環(huán)境與軍人生殖健康. 解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志2009; 27(4): 309-311

12 何江, 崔建華, 王瑞, 等. 高原低氧環(huán)境對成年男性精液質(zhì)量及血清生殖激素的影響. 中國男科學(xué)雜志 2013; 27(2): 21-24

13 朱文兵, 范立青, 涂玲, 等. 人類精子庫倫理管理的困惑與對策.醫(yī)學(xué)與哲學(xué), 人文社會醫(yī)學(xué)版 2007; 28(9A): 26-28

14 TedderRS, ZuckermanMA, GoldstoneAH, et al. Hepatitis B transmission from contaminated cryopreservation tank. Lancet 1995; 346(8968): 137-140

15 Mazzilli F, Delfino M, Imbrogno N, et al. Survival of microorganisms in cryostorage of human sperm. Cell Tissue Bank 2006; 7(2): 75-79

（2016-07-15收稿）

Current situation analysis and countermeasures on autologous sperm preservation in Shandong human sperm bank*

Song Xiaohui, Wang Li**, Liu Shihui, Xiao Yanhong, Tong Haiyun, Han Wenkai Center for Reproductive Medicine, Shandong University; National Research Center for Assisted Reproductive Technology and Reproductive Genetics, China; The Key laboratory for Reproductive Endocrinology of Ministry of Education, Jinan 250001, Shandong, China

Objectivee To retrospectively analyze the situation of autologous sperm preservation of 317 patients from January 2009 to December 2015 in Shandong human sperm bank, and summarize work experience and defi ciency for discovering the future development direction. Metthhooddss Based on the aspects of the annual changes in the number of autologous sperm preservation, the reasons of preservation, age, education and occupation, the situation of autologous sperm preservation in the human sperm bank of Shandong was retrospectively evaluated. Ressuullttss The number of autologous sperm preservation patients in Shandong human sperm bank gradually increased every year. The proportion of the patients with difficulty of assisted reproduction and spare sperm accounted for 47.6%. The proportion of patients with sperm preservation for future use accounted for 34.7%. The most of people for autologous sperm preservation was young men. Most of them were intellectuals, white-collar workers, civil servants with college education background. They had different reasons for autologous sperm preservation. Concluussiioonn More and more people begin to accept the autologous sperm preservation; Human sperm bank should spread the propaganda in medical staff and society, and let more people understand the value of autologous sperm preservation, and reduce the occurrence of infertility.

doi:10.3969/j.issn.1008-0848.2016.08.004

R 321-33

資助：人類輔助生殖技術(shù)質(zhì)量控制體系建立的相關(guān)研究，衛(wèi)生公益性行業(yè)科研專項(xiàng)（201402004）

**通訊作者，Email: wangli_0531@163.com