血涂片復檢在血常規(guī)檢測中的重要性

張小芳，尹 蕾，張運剛，梁 淳，孫彩霞，李 佳

(河北省邯鄲市中心醫(yī)院檢驗科 056001)

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·臨床研究·

血涂片復檢在血常規(guī)檢測中的重要性

張小芳，尹 蕾，張運剛，梁 淳，孫彩霞，李 佳

(河北省邯鄲市中心醫(yī)院檢驗科 056001)

目的 對血液分析儀檢測血常規(guī)時細胞分類及警示標志的準確性加以評價，探討血細胞涂片復檢在血細胞分析中的意義，強調(diào)手工涂片復檢的重要性，提高血常規(guī)的檢驗質(zhì)量。方法 選擇2015年10～12月來邯鄲市中心醫(yī)院門診首診患者8 996例，采用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝真空靜脈管采集標本，在貝克曼750全血細胞分析儀上檢測，檢測時出現(xiàn)的警示標志與手工分類對比分析。結(jié)果 血常規(guī)檢查中出現(xiàn)異常提示的1 760例標本進行血涂片染色復查(復片率為19.6%)并進行統(tǒng)計分析，真陽性率為78.4%，假陽性率為21.6%，假陰性率為5.0%。結(jié)論 血細胞分析儀檢測血常規(guī)具有其局限性，對報警異常血象只能起到初篩的目的，對于形態(tài)、結(jié)構(gòu)異常的細胞不能作出準確判斷和定位。因此，運用血細胞分析儀時，應進行必要的血涂片復檢，只有二者結(jié)合，優(yōu)勢互補，才能減少漏診和誤診，確保檢驗結(jié)果的準確性和可靠性。

血細胞分析儀； 血細胞形態(tài)學； 鏡檢； 復查

隨著醫(yī)學的發(fā)展,全自動血細胞分析儀被廣泛的推廣和使用，它具有快速、簡便、精密度高、重復性好、工作效率高等優(yōu)點，但是任何一款的血液分析儀都不能精準地識別血液當中的各個細胞，特別是異形細胞和幼稚細胞。因此，其只能作為血細胞計數(shù)分析的一種過篩措施。當遇到可疑情況，尤其是在病理條件下，需要人工進行形態(tài)學檢查，即可驗證儀器結(jié)果，又及時發(fā)現(xiàn)一些假性結(jié)果，避免漏檢。本研究利用貝克曼750全血細胞分析儀的IP信息報警系統(tǒng)對白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血小板計數(shù)的數(shù)值異常和形態(tài)學異常的提示，進行了l 760例血涂片細胞形態(tài)學復檢，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2015年10～12月來邯鄲市中心醫(yī)院門診首診患者8 996例，年齡1個月至80歲。

1.2 儀器與試劑 儀器采用貝克曼750全血細胞分析儀，試劑為貝克曼750全血細胞分析儀配套試劑；顯微鏡均為OlympusCX31型。

1.3 方法

1.3.1 標本采集 清晨空腹置于乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝管(避免溶血)各抽取其外周靜脈血2～3 mL；年齡小不宜采血的取其指尖末梢血、用預稀模式；應用貝克曼750全血細胞分析儀進行分析，按該項SOP文件操作。

1.3.2 制備血涂片 參照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版和《血細胞形態(tài)學分析中國專家共識》中制定的血涂片檢測操作程序SOP文件操作[1-2]；對貝克曼750全血細胞分析儀報警異常的血常規(guī)，每份標本推血片2張，經(jīng)瑞氏染色后，細胞形態(tài)學復檢的人員在油鏡下計數(shù)200個白細胞分類結(jié)果，得出各類細胞所占比例。

2 結(jié) 果

按照國際血液學復檢專家組制定的41條血細胞復檢規(guī)則[3]，對1 760例報警異常的血象標本用儀器法與血涂片鏡檢結(jié)果差異性進行比較(表1)。若出現(xiàn)至少1條復檢規(guī)則且鏡檢后陽性為真陽性即為儀器檢出；若出現(xiàn)至少1條復檢規(guī)則，但鏡檢后陰性為假陽性即為誤檢者；若未出現(xiàn)復檢規(guī)則中的任何一條，但鏡檢后陽性為假陰性即為漏檢者。

表1 1 760例報警異常的血象標本細胞形態(tài)學分析(n)

由表1計算可知，真陽性率為78.4%(1 448/1 847)，假陽性率為21.6%(399/1 847)，假陰性率為5.0%(92/1 847)，復檢率19.6%(1 760/8 996)。

3 討 論

外周血細胞形態(tài)學檢驗在臨床診療方面依然占據(jù)重要地位,尤其是血液病患者或可疑血液病者,血細胞分析儀對形態(tài)異常的細胞只有篩查功能，不能代替人工鏡檢。另注明本研究人工鏡檢的報告只有異常形態(tài)達到一定比例時才報告臨床，這樣即有助于實驗室內(nèi)部和實驗室間在形態(tài)學上報告的統(tǒng)一性和可比性又有助于臨床醫(yī)生對患者病情診療[4-5]。

超過危急值通過顯微鏡檢查，有以下幾種情況：(1)血液病的患者白細胞、紅細胞、血小板的計數(shù)過高或過低；(2)放化療、肝硬化的患者白細胞、紅細胞、血小板計數(shù)過低；(3)急性感染期的患者白細胞計數(shù)過高。

未成熟稚細胞通過鏡檢，可見不同期的中性粒、淋巴、單核、紅細胞等；復檢中7例將異形淋巴細胞分類至未成熟稚細胞。由于未成熟細胞與血液病的關(guān)聯(lián)較大，建議分類不清的多人鏡檢，以免誤檢。

感染通過血細胞形態(tài)學檢查，可見如退行性變、Pelger-Huet畸形、Jorgan畸形、Chediak-Higashi畸形、May-Hegglin畸形、杜勒小體、核固縮、核分葉過多、中毒顆粒、空泡變性、核左移、異形淋巴細胞及各類幼稚細胞等。其中26例將原始、幼稚細胞分類至異形淋巴細胞、單核細胞；異淋及淋巴細胞增多的血樣中可見不同類型的異形淋巴細胞。另外，對于新生兒、嬰幼兒而言,以控制假陰性率為目標,不能遺漏傳染性單核細胞增多癥和白血病且春夏季為手足口病好發(fā)季節(jié)，復檢時要特別注意淋巴細胞的形態(tài)[6]。

貧血是由于多種原因引起外周血紅細胞容量減少，低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。如果全自動血液分析儀紅細胞的分布、大小、血紅蛋白水平等信息出現(xiàn)異常，應立即涂片鏡檢[7]。本研究報警貧血的通過鏡檢，發(fā)現(xiàn)許多異常的紅細胞形態(tài)：如淡染區(qū)擴大紅細胞、淚滴狀、口形、緡錢狀、棘形、靶形、球形、嗜多色、卡波環(huán)、豪焦小體、嗜堿性點彩紅細胞及幼稚紅細胞等；其中以小紅細胞(淡染區(qū)擴大紅細胞)多見，說明小細胞低色素的貧血是臨床較多出現(xiàn)貧血類型[8]。異形紅細胞形態(tài)以橢圓形紅細胞、紅細胞碎片、紅細胞緡錢狀排列3種最為常見。全自動血液分析儀對于紅細胞異常形態(tài)，紅細胞內(nèi)部的異常結(jié)構(gòu)，如嗜堿性點彩紅細胞、豪焦小體、卡波環(huán)、寄生蟲等更是無法檢出，因此儀器目前仍無法完全替代人工鏡檢。復檢中有5例可見大量晚幼紅細胞導致白細胞計數(shù)偏高；7例可見小紅細胞及碎片致使血小板計數(shù)偏高；再次提示人工鏡檢的重要性。

由于全自動血液分析儀檢測原理的局限性導致血小板檢測結(jié)果與臨床不符,進而血小板準確計數(shù)越來越受到臨床上的關(guān)注[9]。因此，涂片鏡檢就顯得尤為必要；鏡檢可直接觀察血小板分布和體積大小,也可觀察是否有小紅細胞、紅細胞碎片和血小板聚集對血小板計數(shù)的干擾[9-10]。本研究顯微鏡復檢中有9例看到巨大血小板，7例小血小板?？鼓齽〦DTA影響造成：依賴性假性血小板減少癥；冷凝集；EDTA抗凝血有血小板衛(wèi)星現(xiàn)象；更換抗凝劑后顯微鏡復檢正常涂片顯示血小板形態(tài)正常有5例[11]。

通過血細胞形態(tài)學檢查，有以下幾種情況：(1)分類不全：白細胞未分類或分類不完全往往是由淋巴細胞或中性粒細胞比例過高引起的,需手工確認，儀器報警的153例中有92例不分類或分類不完全；(2)分類錯誤：由于出現(xiàn)大量幼稚細胞血細胞導致分析儀分類錯誤，不能準確識別原始細胞致使中性粒、淋巴、單核細胞比例明顯增高，復檢中有10例導致淋巴細胞比例過高、6例致使單核細胞比例過高和5例中性粒細胞比例過高。

本研究表明,儀器法測定的假陽性率較高(21.6%),此結(jié)果較2008年報道的國際復檢規(guī)則假陽性率24.2%略低,而較修改后的中國復檢規(guī)則假陽性率(17.1%) 高。因此,在現(xiàn)階段由于儀器不能對形態(tài)、結(jié)構(gòu)異常的細胞作出準確判斷和定位,一旦儀器信息報警系統(tǒng)提示異常,應及時涂片鏡檢復查,從而避免漏檢及發(fā)出錯誤的檢驗報告,有助于降低血液病的漏診和誤診,提高血液病的診斷水平,為臨床診斷提供更準確更可靠參考依據(jù)[12]。

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10.3969/j.issn.1673-4130.2016.23.043

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