剪刀股總酚酸提取條件的優(yōu)化及對小鼠缺血心肌的保護(hù)作用*

王 威， 許麗娟

(1.張家口市第三醫(yī)院， 河北 張家口 075000； 2.張家口市第四醫(yī)院， 河北 張家口 075000)

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剪刀股總酚酸提取條件的優(yōu)化及對小鼠缺血心肌的保護(hù)作用*

王 威1， 許麗娟2*

(1.張家口市第三醫(yī)院， 河北 張家口 075000； 2.張家口市第四醫(yī)院， 河北 張家口 075000)

目的： 優(yōu)化剪刀股總酚酸的提取方法，觀察剪刀股總酚酸對小鼠缺血心肌的保護(hù)作用。方法：通過正交試驗(yàn)優(yōu)化剪刀股總酚酸的提取條件，并采用高效液相色譜法測定沒食子酸、原兒茶酸、綠原酸的含量；選取昆明種小鼠60只，隨機(jī)分為正常對照組，模型對照組，陽性對照組，剪刀股總酚酸高、中、低劑量給藥組共6組，采用異丙腎上腺素法制備心肌缺血小鼠模型，測定血清中乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶MB(CK-MB)的活性及心肌中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量，并通過Nagar-Olsen染色觀察小鼠心肌缺血損傷程度。結(jié)果：剪刀股總酚酸最佳提取條件為提取溫度為70 ℃，液料比為10∶1，醇濃度為15%，提取90 min(30 min×3)；剪刀股總酚酸平均提取率為4.85%，RSD為1.988%；剪刀股中沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸分別在0.60～9.60、0.90～14.40、1.00～16.00 mg/L，與峰面積呈良好線性關(guān)系，平均回收率分別為97.27%、98.15%、97.17%(n=9)；與模型組相比，陽性對照組和剪刀股總酚酸(高、中劑量)組心肌缺血小鼠血清中LDH、CK-MB活性顯著降低，心肌中SOD的活性升高，心肌MDA的含量降低(P<0.05)；Nagar-Olsen染色顯示，高、中劑量的剪刀股總酚酸組及陽性對照組小鼠心肌缺血損傷紅染面積明顯減少。結(jié)論：剪刀股中總酚酸含量較高，剪刀股總酚酸對心肌缺血小鼠的心肌有一定保護(hù)作用。

心肌缺血； 異丙腎上腺素； 小鼠； 剪刀股； 總酚酸

剪刀股(IxerisdebilisA.Gray)是菊科苦荬菜屬植物剪刀股全草，可全草入藥，鮮用或曬干，具有清熱涼血，利尿消腫的功效，內(nèi)用于肺熱咳嗽、喉痛、口腔潰瘍、急性結(jié)膜炎、闌尾炎、水腫和小便不利，外用治乳腺炎、瘡癤腫毒和皮膚瘙癢[1]。蒲明秋等[2]報(bào)道剪刀股提取物可對抗煙堿引起的致癌作用，馬金萍等[3]報(bào)道其醇提物可顯著提高腦缺血再灌注損傷后小鼠心肌組織中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性。對剪刀股活性成分的研究僅見剪刀股總黃酮的提取及含量測定[4]，對剪刀股總酚酸提取工藝的研究尚未見報(bào)道。本研究采用超聲輔助法提取剪刀股總酚酸，并采用異丙腎上腺素復(fù)制心肌缺血模型小鼠，觀察剪刀股總酚酸對心肌缺血模型小鼠血清中肌酸激酶(CK-MB)和乳酸脫氫酶(LDH)及心肌組織中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)，為剪刀股的開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器

UV2800雙光束紫外可見分光光度計(jì)(上海恒平科學(xué)儀器有限公司)，KQ-500B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)，F(xiàn)A1204B電子分析天平(上海精科天美貿(mào)易有限公司)，H-20R高速冷凍離心機(jī)(北京安必升科技發(fā)展有限公司)

1.2 試劑與藥品

剪刀股采自河北省張家口市赤城縣，由河北北方學(xué)院趙恒誠教授鑒定為正品?？Х人針?biāo)準(zhǔn)品購于中國食品藥品檢定研究院(批號110885-200102)，復(fù)方丹參片(蕪湖張恒春藥業(yè)有限公司，批號14081115)，鹽酸異丙腎上腺素注射液(西南藥業(yè)股份有限公司，批號20140812)，LDH、CK-MB、SOD及MDA測定試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供。其他試劑均為國產(chǎn)分析純，實(shí)驗(yàn)用水為三重蒸餾水。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

健康的成年昆明種小鼠(雌雄各半)，體質(zhì)量22～30 g，購于河北北方學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，分籠飼養(yǎng)，室溫18～25 ℃，自由攝食、飲水。

1.4 剪刀股總酚酸的提取

1.4.1 咖啡酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 稱取60 ℃干燥至恒重的咖啡酸對照品1.45 mg于10 mL容量瓶，乙醇溶解、定容，即得咖啡酸對照品溶液(0.145 g/L)。分別移取 0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL于25 mL容量瓶中，加乙醇至5 mL，依照文獻(xiàn)方法顯色，用0.1 mol/L鹽酸溶液定容，避光放置20 min。以相應(yīng)試劑為空白，于736 nm 波長處測定吸光度[5]。

1.4.2 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì) 在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選取提取溫度、液料比、乙醇濃度、提取時(shí)間4個(gè)因素，并各設(shè)置3個(gè)水平，以總酚酸提取率為測定指標(biāo)，采用L9(34)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，進(jìn)行超聲(40 kHz)輔助提取，優(yōu)化總酚酸提取工藝。試驗(yàn)因素和水平見表1。

1.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 精密吸取相同供試品溶液5份，每份1 mL，分別于室溫放置0、2、4、6、8和10 h后，依“1.4.1”項(xiàng)下方法測定吸光度。

1.4.4 重現(xiàn)性試驗(yàn) 同一批樣品5份，每份1 g，精密稱定，加10倍量濃度為15%的乙醇，于70 ℃超聲輔助提取90 min(每次30 min，共3次)，濾過并合并濾液，加熱除去有機(jī)溶劑，加水定容至25 mL。精密吸取0.2 mL，依“1.4.1”項(xiàng)下方法測定吸光度。

表1 正交試驗(yàn)影響因素與水平

Tab.1 Factors and levels of the orthogonal design

因素水平123提取溫度(℃)607080液料比(mL/g)10∶120∶130∶1乙醇濃度(%)152535提取時(shí)間(min)90(30×3)120(40×3)150(50×3)

1.4.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取同一對照品溶液，按“1.4.1”項(xiàng)下方法，連續(xù)5次測定吸光度。

1.4.6 加樣回收試驗(yàn) 取重現(xiàn)性試驗(yàn)所用的同批樣品(已知含量6.14%)5份，每份1 g，精密稱定，加入適量的咖啡酸對照品，按供試溶液制備方法制備溶液，依“1.4.1”項(xiàng)下方法測定吸光度。

1.4.7 含量測定 準(zhǔn)確稱取剪刀股藥材3份，各1.0 g，按照選定的最優(yōu)條件進(jìn)行超聲輔助提取，濾過并合并濾液，加熱除去有機(jī)溶劑，加水定容至25 mL。取2 mL于25 mL容量瓶中，加水定容后，按照“1.4.1”項(xiàng)下方法計(jì)算總酚酸濃度，并計(jì)算提取率。

1.5 剪刀股中沒食子酸、原兒茶酸、綠原酸含量

1.5.1 溶液制備 精密稱取沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸對照品適量，分別加10%甲醇配成各單一對照品儲備溶液。精密吸取各單一對照品儲備液適量于量瓶中，加10%甲醇定容，得沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸混合對照品溶液，濃度分別為9.60、14.40、16.00 mg/L。精密稱定剪刀股藥材粉末1.000 g，按照“1.4.7 含量測定”項(xiàng)方法提取，濾過，合并濾液，定容至100.00 mL，搖勻，0. 45 μm 微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即得剪刀股總酚酸供試品溶液。

1.5.2 色譜條件 色譜柱為Thermo ODS-2 Hypersil(250 mm×4.6 mm，5 μm)，檢測波長286 nm，流速1 mL/min，柱溫30 ℃，進(jìn)樣量10 μL；流動(dòng)相為乙腈-水(0.1%乙酸水溶液)，梯度洗脫條件：0～9 min，5%乙腈；9～16 min，5%～19%乙腈；16～24 min，25%乙腈；24～30 min，40%乙腈，維持3 min。

1.5.3 專屬性試驗(yàn) 在“1.5.2”項(xiàng)色譜條件下，取沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸混合對照品溶液、剪刀股總酚酸供試品溶液及沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸陰性對照溶液10 μL進(jìn)樣。

1.5.4 線性范圍考察 將上述混合對照品溶液適當(dāng)稀釋配制混合標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，其中含沒食子酸系列質(zhì)量濃度分別為0.60、1.20、2.40、4.80、9.60 mg/L；原兒茶酸系列質(zhì)量濃度分別為0.90、1.80、3.60、7.20、14.40 mg/L；綠原酸系列質(zhì)量濃度分別為1.00、2.00、4.00、8.00、16.00 mg/L。在上述色譜條件下分別進(jìn)樣進(jìn)行測定。

1.5.5 精密度考察 精密吸取剪刀股總酚酸供試品溶液10 μL，按上述色譜條件連續(xù)進(jìn)樣5次，測定沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸峰的面積。

1.5.6 穩(wěn)定性考察 精密吸取供試品溶液在室溫下放置，分別在 0、2、4、8、10 h進(jìn)樣10 μL，測定沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸峰面積。

1.5.7 重復(fù)性考察 精密稱取樣品粉末5份，每份1.000 g，按“1.5.1”項(xiàng)下方法平行制備成供試品溶液，分別進(jìn)樣10 μL進(jìn)行測定。

1.5.8 加樣回收率考察 取已知沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸含量的剪刀股樣品9份，精密稱定，精密加入沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸適量，按“1. 5. 1”項(xiàng)下方法操作，制備供試溶液，在上述色譜條件下分別進(jìn)樣進(jìn)行測定，計(jì)算回收率。

1.5.9 樣品測定 取剪刀股供試品溶液，在上述色譜條件下進(jìn)樣10 μL，記錄色譜圖，代入回歸方程計(jì)算剪刀股供試品溶液中沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸的含量。

1.6 剪刀股總酚酸對心肌缺血小鼠血清CK-MB、LDH或心肌組織中MDA、SOD的影響

1.6.1 剪刀股總酚酸供試液的制備 采用正交設(shè)計(jì)確定的最佳提取條件，提取剪刀股總酚酸。取剪刀股總酚酸適量，加水溶解，配制為濃度為1 g/L的溶液，即為剪刀股總酚酸供試液。復(fù)方丹參片供試液(陽性對照)的制備 取復(fù)方丹參片若干片，加蒸餾水適量，室溫超聲助溶，制備為7 g/L(相當(dāng)于飲片)的混懸液。

1.6.2 分組與給藥 昆明種小鼠60只，隨機(jī)分為正常對照組、模型對照組、陽性對照組、剪刀股總酚酸高、中、低劑量給藥組共6組，每組10只；3個(gè)剪刀股總酚酸組給藥劑量分別為20、10以及5 mg/(kg·d)，陽性對照組腹腔注射復(fù)方丹參片混懸液7 mg/(kg·d)，正常對照組和模型對照組給予生理鹽水10 mL/(kg·d)腹腔注射，每日下午4時(shí)注射，每日1次，連續(xù)注射11 d；注射第7 天開始，模型對照組、陽性對照組、剪刀股總酚酸高、中、低劑量給藥組小鼠腹腔注射異丙腎上腺素0.02 g/(kg·d)，每日上午10時(shí)給藥，每日1次，制備心肌缺血模型[6]。

1.6.3 觀察指標(biāo) 取材參考文獻(xiàn)[7-8]。末次給藥15 min后，斷頭處死小鼠并取血，迅速取心臟組織。每組8只小鼠心臟用生理鹽水洗凈，濾紙吸干，按試劑盒說明，分別測定心肌中SOD活性和MDA的含量。每組2只小鼠心臟置于4%多聚甲醛內(nèi)固定，制心肌石蠟切片，Nagar-Olsen染色觀察小鼠心肌缺血損傷程度。血液置于肝素化的塑料離心管中，3 500 r /min 離心15 min，分離血清，分別測定血清中LDH、CK-MB活性。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 剪刀股總酚酸的提取

2.1.1 咖啡酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 以咖啡酸濃度為橫坐標(biāo)、吸光度為縱坐標(biāo)，得回歸方程A=0.689 6C+0.045 1(r=0.999 6)。表明咖啡酸標(biāo)準(zhǔn)溶液在0.58～2.9 mg/L范圍內(nèi)與吸光度值呈良好的線性關(guān)系。

2.1.2 總酚酸提取率及其影響因素 由表2、表3可知，影響超聲輔助提取剪刀股總酚酸得率的因素的主次順序?yàn)樘崛囟?乙醇濃度>液料比>提取時(shí)間，其中提取溫度和乙醇濃度對提取率的影響有顯著性。最佳工藝條件為A2B1C1D1，即提取溫度為70 ℃，液料比為10∶1，乙醇濃度15%，提取90 min。

2.1.3 穩(wěn)定性 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果吸光度RSD=3.23%(n=5)，表明供試品溶液在10 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.1.4 重現(xiàn)性 重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果吸光度RSD=2.64%(n=5)，表明方法重現(xiàn)性好。

2.1.5 精密度 精密度試驗(yàn)結(jié)果吸光度RSD=0.15%(n=5)，表明儀器精密度良好。

2.1.6 加樣回收率 平均加樣回收率為97.5%，RSD為3.97%，表明方法具有良好的加樣回收率。

2.1.7 剪刀股總酚酸含量 測定結(jié)果見表4。

表2 總酚酸提取率(正交試驗(yàn))

Tab.2 Results of total phenolic acid extraction rate (orthogonal design)

注：A為提取溫度，B為液料比，C為乙醇濃度，D為提取時(shí)間

表3 各因素對總酚酸提取率的影響

Tab.3 The effect of various factors on the extraction rate of total phenolic acid

因素偏差平方和自由度F比F臨界值提取溫度5.7932275.85719.000料液比0.05722.71419.000乙醇濃度1.651278.61919.000提取時(shí)間0.02121.00019.000誤差0.022

表4 剪刀股總酚酸含量

Tab.4 Determination of content of total phenolic acid fromIxerisdebilisA.Gray

試驗(yàn)號總酚酸提取率(%)平均提取率(%)RSD(%)14.7424.894.851.98834.92

2.2 剪刀股中沒食子酸、原兒茶酸、綠原酸的含量

2.2.1 專屬性試驗(yàn) 在“1.5.2”項(xiàng)色譜條件下，沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸混合對照品溶液及剪刀股總酚酸供試品溶液中 3種酚酸成分達(dá)到基線分離。沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸混合對照品、剪刀股總酚酸供試品及沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸陰性高效液相色譜法(HPLC)色譜圖見圖1。

2.2.2 線性范圍 沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸在0.60～9.60、0.90～14.40、1.00～16.00 mg/L濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，回歸方程分別為：沒食子酸Y=40.21X+3.121，r=0.999 6；原兒茶酸Y=30.09X+12.663，r=0.999 8；綠原酸Y=22.16X+8.344，r=0.999 2。

注：1為沒食子酸，2為原兒茶酸，3為綠原酸；A為混合對照品溶液，B為剪刀股總酚酸供試品溶液，C～E為陰性對照品 (C缺沒食子酸，D缺原兒茶酸，E缺綠原酸)

2.2.3 精密度 沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)分別為2.3%、2.5%、2.8%，結(jié)果表明精密度良好。

2.2.4 穩(wěn)定性 沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸峰面積的 RSD 分別為1.9%、2.1%、2.3%，表明供試品溶液中上述成分室溫放置10 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.2.5 重復(fù)性 沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸含量RSD分別為2.1%、2.4%、2.5%，結(jié)果表明重復(fù)性良好。

2.2.6 加樣回收率 加樣回收試驗(yàn)結(jié)果沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸平均回收率(n=9) 分別為96.01%、97.82%、95.33%，RSD 分別為2.1%、2.5%、2.4%。

2.2.7 樣品含量 剪刀股供試品溶液中沒食子酸、原兒茶酸和綠原酸的含量分別為1.140±0.015、 0.922±0.012和 0.467±0.005 mg/g。

2.3 剪刀股總酚酸對心肌缺血小鼠血清CK-MB、LDH或心肌組織MDA、SOD的影響

與正常對照組相比，模型組小鼠血清中CK-MB及LDH水平顯著升高，心肌中MDA含量顯著升高，SOD活性明顯降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與模型對照組相比，陽性對照組及剪刀股總酚酸高、中劑量組血清中CK-MB及LDH 水平降低，心肌中MDA含量降低，SOD活性升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中剪刀股總酚酸高劑量組及陽性對照組MDA含量降低明顯(P<0.01)。見表5。

Tab.5 Effects of total phenolic acids on serum CK-MB, LDH and myocardial MDA, SOD

分組血清CK-MB(U/L)LDH(U/L)心肌SOD(kU/g)MDA(mol/g)正常對照組200±66 352±64 7.52±0.371.34±0.22模型對照組1100±101(3) 1180±76(3) 4.51±0.14(3)5.95±0.27(3)陽性對照組590±89(1)890±56(1)7.52±0.42(1)2.76±0.34(2)剪刀股總酚酸 高劑量組550±76(1)593±65(1)6.10±0.44(1)2.89±0.32(2) 中劑量組600±94(1)710±71(1)6.00±0.35(1)3.33±0.36(1) 低劑量組950±79(1)900±82(1)5.92±0.33(1)4.10±0.21(1)

與模型對照組比較，(1)P<0.05,(2)P<0.01；(3)與正常對照組比較,P<0.05

2.4 小鼠心肌缺血損傷程度

光學(xué)顯微鏡下觀察心肌石蠟切片可見，正常對照組心肌組織呈黃染，模型組缺血心肌呈紅染。與模型組比較，剪刀股總酚酸高、中劑量組及陽性對照組心肌紅染面積明顯減少，黃染面積增多，剪刀股總酚酸低劑量組心肌組織大片紅染，僅見小部分組織黃染。見圖2。

3 討論

CK-MB、LDH大量存在于心肌細(xì)胞的胞漿或線粒體中，是心肌酶學(xué)中的標(biāo)志酶之一；脂質(zhì)過氧化作用是眾多心腦血管疾病的發(fā)病機(jī)制之一，當(dāng)體內(nèi)自由基過多時(shí)，能對細(xì)胞及組織產(chǎn)生傷害，心肌細(xì)胞破裂或細(xì)胞膜通透性增加，使 CK-MB，LDH等酶滲出，從而導(dǎo)致心肌缺血小鼠血清中酶活性升高，血清酶的升高，可作為心肌受損的酶學(xué)標(biāo)志物[9]。在急性心肌缺血時(shí)，除了組織學(xué)上發(fā)生心肌壞死的病理學(xué)變化外，也伴隨著心肌酶的漏出等生理生化方面的變化。

注：A為正常對照，B為模型對照，C為陽性對照組，D為總酚酸低劑量組，E為總酚酸中劑量組，F(xiàn)為總酚酸高劑量組

酚酸是一類含有酚環(huán)結(jié)構(gòu)的有機(jī)酸，具有較強(qiáng)的生物抗氧化作用。因此，酚類物質(zhì)可能是中藥對心肌保護(hù)作用的物質(zhì)基礎(chǔ)之一[10-11]。酚酸的化學(xué)性質(zhì)活潑，在提取過程中可能氧化分解，因此，在剪刀股總酚酸的提取過程中，提取溫度過高，提取時(shí)間過長，均能夠?qū)е路铀犷愇镔|(zhì)的降解，從而減低酚酸類成分的提取率。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，提取溫度和乙酸濃度對總酚酸提取率的影響較大，根據(jù)優(yōu)化的工藝條件總酚酸得率較高。本研究結(jié)果還顯示，剪刀股中酚酸含量較高，其酚酸能顯著降低異丙腎上腺素致心肌缺血模型小鼠血清中LDH、CK-MB活性，提高心肌SOD的活性，并降低心肌MAD的含量，可顯著減少缺血心肌的Nagar-Olsen紅染面積。表明剪刀股總酚酸對異丙腎上腺素致心肌缺血小鼠的心肌具有明顯的保護(hù)作用。

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(2016-07-03收稿，2016-10-21修回)

中文編輯： 文箐潁； 英文編輯： 劉 華

Optimization of Extraction of Total Phenolic Acid fromIxerisDebilisA. Gray and Its Protective Effect on Myocardial Ischemia in Mice

WANG Wei1, XU Lijuan2

(1.The3thHospitalofZhangjiakou,Zhangjiakou075000,Hebei,China; 2.The4thHospitalofZhangjiakou,Zhangjiakou075000,Hebei,China)

Objective: To optimize the extraction of total phenolic acid fromIxerisdebilisA.Grayand to explore its protective effect on myocardial ischemia induced by isoproterenol in mice. Method: The total phenolic acid extraction conditions fromIxerisdebilisA.Graywere optimized by orthogonal test, and HPLC method was adopted for the determination of gallic acid, protocatechuic acid, chlorogenic acid content. 60 Kunming mice were divided into 6 groups: normal control group, model control group, positive control group , low dose group, middle dose group and high dose groups. A mouse model of myocardial ischemia was prepared by the method of isoproterenol. The effect of total phenolic acid inIxerisdebilisA.grayon myocardial ischemia model was studied by measuring the activities of serum lactate dehydrogenase(LDH), serum creatine kinase MB(CK-MB), the activities of the superoxide dismutase(SOD) and the content of malondialdehyde(MDA) in myocardium. The degree of myocardial ischemic injury in mice was observed by Nagar-Olsen staining. Result: The best condition for extracting the total phenolicacid fromIxerisdebilisA.Graywas heating theIxerisdebilisA.Grayin 10 times(Volume/quality) alcohol(15%) at 70℃ for 90 (30×3) minutes. The average extraction yield of the total phenolic acid inIxerisdebilisA.Graywas 4.85% (RSD=1.988%). The contents of gallic acid, protocatechuic acid and chlorogenic acid inIxerisDebilisA.Grayshowed good linear relationships with the peak area in the ranges of 0.60～9.60, 0.90～14.40 and 1.00～16.00 μg/mL, respectively, and the average recoveries (n=9) were 97.27%, 98.15%, and 97.17%, respectively. Compared with the model group, the activities of LDH, CK-MB in serum and the content of myocardial MDA of mice in the positive control group and the total phenolic acid groups(high, middle dose) were decreased and the activities of myocardial SOD were increased. The results of Nagar-Olsen staining showed that the area of cardiac muscles injured by ischemia in the positive control group and the total phenolic acid groups(high, middle dose) were diminished significantly. Conclusion: The content of total phenolic acid inIxerisdebilisA.Grayis at a relatively high level, which has a protective effect on the myocardium of mice with myocardial ischemia.

myocardial ischemic; isoproterenol; mice；IxerisdebilisA.Gray; total phenolic acid

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時(shí)間：2016-11-15 網(wǎng)絡(luò)出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/52.1164.R.20161115.1757.023.html

R285.5

A

1000-2707(2016)11-1301-06

10.19367/j.cnki.1000-2707.2016.11.014